藥物分析甾體激素類藥物的分析

基本結(jié)構(gòu)：環(huán)戊烷并多氫菲ABCD12345678910111213141516171819當(dāng)前1頁，總共87頁。分類：甾體激素腎上腺皮質(zhì)激素性激素雄性激素及蛋白同化激素孕激素雌激素當(dāng)前2頁，總共87頁。1．腎上腺皮質(zhì)激素皮質(zhì)酮的衍生物當(dāng)前3頁，總共87頁。代表藥物有：

可的松氫化可的松當(dāng)前4頁，總共87頁。人工合成藥物：

地塞米松氫化可的松結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上1，2位間引入一個雙鍵，9位上引入-F，16位上引入-CH3

氫化潑尼松在氫化可的松結(jié)構(gòu)的基礎(chǔ)上1，2位間引入一個雙鍵當(dāng)前5頁，總共87頁。結(jié)構(gòu)特點：?。?1個Cⅱ．A環(huán)：4-3-酮結(jié)構(gòu)（,-不飽和酮）ⅲ．17位：-醇酮基，有還原性。ⅳ．其它：10位、13位-甲基，11位羥基、羰基等人工合成品：1、2位間有雙鍵，6位，9位引入鹵素，16位或16位引入甲基，16位引入羥基等。當(dāng)前6頁，總共87頁。2．雄性激素及蛋白同化激素睪丸素的衍生物

當(dāng)前7頁，總共87頁。代表藥物：甲基睪丸素

丙酸睪丸素當(dāng)前8頁，總共87頁。

蛋白同化激素在睪丸素基礎(chǔ)上結(jié)構(gòu)修飾得到，如苯丙酸諾龍當(dāng)前9頁，總共87頁。結(jié)構(gòu)特點：?。?9個Cⅱ．A環(huán)的4-3-酮ⅲ．17位羥基、甲基、酯

供分析官能團：A環(huán)4-3-酮當(dāng)前10頁，總共87頁。3．孕激素黃體酮當(dāng)前11頁，總共87頁。結(jié)構(gòu)特點：?。?1個Cⅱ．A環(huán)的4-3-酮ⅲ．17位甲酮基供分析官能團：?。瓵環(huán)的4-3-酮ⅱ．17位上的甲酮基。當(dāng)前12頁，總共87頁。4．雌激素

雌二醇、炔雌醇及衍生物

雌酮當(dāng)前13頁，總共87頁。結(jié)構(gòu)特點：?。?8個Cⅱ．A環(huán)：苯環(huán)，3位上有酚羥基，10位無甲基ⅲ．17位：羥基、乙炔基供分析官能團：A環(huán)的酚羥基及17位的羥基當(dāng)前14頁，總共87頁。口服避孕藥，如炔諾酮、異炔諾酮、安宮黃體酮等A環(huán)有4-3-酮結(jié)構(gòu)；有的第17位有羥基和乙炔基；第10位無甲基。當(dāng)前15頁，總共87頁。小結(jié)甾體激素碳原子數(shù)A環(huán)17位取代基腎上腺皮質(zhì)激素214-3-酮-醇酮基雄性激素194-3-酮-OH-CH3孕激素214-3-酮甲酮基雌激素18苯環(huán)C3-酚OH-OH-C≡CH當(dāng)前16頁，總共87頁。二、鑒別試驗（一）與強酸的呈色反應(yīng)甾體激素類藥物呈色H2SO4H3PO4HClO4HCl（母核）當(dāng)前17頁，總共87頁。與硫酸顯色反應(yīng)

顯色熒光加水稀釋潑尼松龍深紅

絮狀↓灰潑尼松橙

黃→藍綠炔雌醚橙紅

黃綠

↓紅色

炔雌醇橙紅

黃綠

絮狀↓玫紅醋酸可的松黃或微褪色并澄

帶橙清當(dāng)前18頁，總共87頁。(二)官能團的反應(yīng)腎上腺皮質(zhì)激素藥物呈色四氮唑鹽OHˉ1C17

–

α–醇酮基還原性A.呈色反應(yīng)當(dāng)前19頁，總共87頁。腎上腺皮質(zhì)激素藥物Cu2O↓橙紅色堿性酒石酸銅B.沉淀反應(yīng)Ag↓黑色氨制硝酸銀當(dāng)前20頁，總共87頁。甾酮類激素藥物呈色羰基試劑2.C3–酮基和C20–酮基＃常用的羰基試劑：2,4-二硝基苯肼、異煙肼、硫酸苯肼當(dāng)前21頁，總共87頁。異煙腙（黃色）睪酮當(dāng)前22頁，總共87頁。黃體酮異煙雙腙（黃色）當(dāng)前23頁，總共87頁。具有甲酮基或活潑亞甲基的甾體激素類藥物呈色亞硝基鐵氰化鈉間二硝基酚芳香醛3.甲酮基當(dāng)前24頁，總共87頁。黃體酮藍紫色亞硝基鐵氰化鈉其他甾體淡橙色不顯色當(dāng)前25頁，總共87頁。黃體酮當(dāng)前26頁，總共87頁。藍紫色當(dāng)前27頁，總共87頁。有機氟Fˉ有機破壞有機氯Clˉ4.有機鹵素茜素氟藍硝酸亞鈰硝酸—硝酸銀AgCl↓呈色當(dāng)前28頁，總共87頁。茜素氟藍藍紫色F-當(dāng)前29頁，總共87頁。雌激素類藥物紅色偶氮染料重氮苯磺酸5.酚羥基當(dāng)前30頁，總共87頁。含炔基的甾體激素銀鹽沉淀硝酸銀6.乙炔基↓當(dāng)前31頁，總共87頁。炔雌醇白當(dāng)前32頁，總共87頁?！鱇OH(三)制備衍生物測定m.p.當(dāng)前33頁，總共87頁。△△當(dāng)前34頁，總共87頁。香（四）水解產(chǎn)物的反應(yīng)當(dāng)前35頁，總共87頁。特臭特臭當(dāng)前36頁，總共87頁?！鳎?3-酮240nm苯環(huán)280nm（五）UV法當(dāng)前37頁，總共87頁。當(dāng)前38頁，總共87頁。當(dāng)前39頁，總共87頁。3300～3000cm-13000～2700cm-11900～1650cm-11650～1450cm-11000～650cm-1（六）IR法3750～3300cm-1ν當(dāng)前40頁，總共87頁。醋酸可的松結(jié)構(gòu)特征：△4–3–酮、C17–OHC20–酮基、C11–酮基、醋酸酯當(dāng)前41頁，總共87頁。1630cm-1ν3420cm-亞甲基、角甲基吸收帶1750cm-11232cm-11052cm-1當(dāng)前42頁，總共87頁。結(jié)構(gòu)特征：△4–3–酮、C17–OHC17–乙炔基炔諾酮當(dāng)前43頁，總共87頁。1650cm-1ν3300cm-3270cm-1ν1615cm-1當(dāng)前44頁，總共87頁。結(jié)構(gòu)特征：酚羥基、C17–OHC17–乙炔基炔雌醇當(dāng)前45頁，總共87頁。1505cm-1ν3505cm-3300cm-1ν1590cm-13610cm-ν酚羥基醇羥基1615cm-1苯環(huán)的骨架振動當(dāng)前46頁，總共87頁。（七）TLC法主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別方法：對照品法要求供試品溶液所顯主斑點的顏色和位置與對照品溶液的主斑點相同。當(dāng)前47頁，總共87頁。炔諾酮TLC圖當(dāng)前48頁，總共87頁。（八）HPLC法主要用于甾體激素類藥物制劑的鑒別（如：醋酸曲安奈德軟膏、醋酸氟輕松軟膏）方法：對照品法要求在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品峰的tR與對照品峰的tR一致。當(dāng)前49頁，總共87頁。三、雜質(zhì)檢查（一）其他甾體定義與標(biāo)示藥物結(jié)構(gòu)不同的甾體化合物都稱為“其他甾體”當(dāng)前50頁，總共87頁。特點（1）可能存在多個甾體雜質(zhì)（2）結(jié)構(gòu)類似2.來源原料、中間體、異構(gòu)體、降解產(chǎn)物當(dāng)前51頁，總共87頁。4.方法（具有一定分離能力）TLC法（高低濃度對比法）HPLC法（類似高低濃度對比法）當(dāng)前52頁，總共87頁。（1）TLC法（高低濃度對比法）判定方法：規(guī)定雜質(zhì)斑點數(shù)目規(guī)定雜質(zhì)斑點顏色當(dāng)前53頁，總共87頁。特點：（1）簡便易行，不需特殊的儀器；（2）不需對照品；（3）只能控制單個雜質(zhì)的限量；（4）要求雜質(zhì)與主成分的顯色靈敏度接近。當(dāng)前54頁，總共87頁。（2）HPLC法（高低濃度對比法）判定方法：規(guī)定雜質(zhì)峰數(shù)目規(guī)定雜質(zhì)峰面積當(dāng)前55頁，總共87頁。特點：（1）需特殊的儀器；（2）不需對照品；（3）可以控制雜質(zhì)的總量；

當(dāng)前56頁，總共87頁。（二）游離磷酸地塞米松磷酸鈉氫化可的松磷酸鈉倍他米松磷酸鈉氫化潑尼松磷酸鈉（三）甲醇和丙酮當(dāng)前57頁，總共87頁。（四）雌酮原理Zimmermann反應(yīng)堿性KOH乙醇高純度當(dāng)前58頁，總共87頁。硒四、來源合成中用二氧化硒(SeO2)脫氫劇毒原理方法當(dāng)前59頁，總共87頁。四、含量測定（一）UV法△４-3-酮240nm（±）腎上腺皮質(zhì)激素雄性激素和蛋白同化激素孕激素苯環(huán)280nm（±）雌激素當(dāng)前60頁，總共87頁。（二）反應(yīng)分光光度法1.適用于非分光光度活性藥物2.使待測組分光譜位移，避免干擾3.增加測定靈敏度4.增加選擇性弱、非分光光度活性藥物強分光光度活性藥物化學(xué)反應(yīng)當(dāng)前61頁，總共87頁。

腎上腺皮質(zhì)激素類C17-α－醇酮基強還原性1.原理OH-[還原]四氮唑比色法當(dāng)前62頁，總共87頁。[O]OH-分子重排當(dāng)前63頁，總共87頁。三苯甲瓚↓深紅氯化三苯四氮唑（TTC）紅四氮唑（RT）當(dāng)前64頁，總共87頁。藍四氮唑（BT）當(dāng)前65頁，總共87頁。雙甲瓚（暗藍）當(dāng)前66頁，總共87頁。2.方法ChPTTC（RT）BPTTC（RT）USPBT對照品法40～45′暗當(dāng)前67頁，總共87頁。3.討論（1）基團對反應(yīng)速度的影響C11=O＞C11－OHC21－OH＞C21-酯C16無論何種取代基ν↓當(dāng)前68頁，總共87頁。（2）溶劑、水分的影響含水量＞5%→ν↓含水10%→A↓10%含水30%→幾無反應(yīng)—無醛無水乙醇醛→A↑—無水乙醇當(dāng)前69頁，總共87頁。（3）O2與光線的影響反應(yīng)過程反應(yīng)產(chǎn)物怕光→避光、快速O2影響顏色強度和穩(wěn)定性→隔絕空氣、快速、充N2當(dāng)前70頁，總共87頁。（4）堿的種類及加入順序反應(yīng)應(yīng)在強堿性（pH13.75）條件下進行以氫氧化四甲基銨的結(jié)果最佳加入順序：當(dāng)前71頁，總共87頁。（5）溫度與時間t℃↑→ν↑→甲瓚分解↑→%↓ChP25℃40～45′BP30℃1h當(dāng)前72頁，總共87頁。4.特點：缺點影響因素太多優(yōu)點測定結(jié)果能指示藥品的穩(wěn)定性（氧化及降解產(chǎn)物無此反應(yīng)）當(dāng)前73頁，總共87頁。腎上腺皮質(zhì)激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素C3－酮基1.原理HCl（縮合）異煙肼比色法當(dāng)前74頁，總共87頁。異煙腙（黃色）當(dāng)前75頁，總共87頁。2.方法暗45′對照品法當(dāng)前76頁，總共87頁。3.討論反應(yīng)速度（1）C3=O＞C17=O、C20=OC11=O不反應(yīng)反應(yīng)專屬性C3－酮基當(dāng)前77頁，總共87頁。（2）溶劑的選擇異煙肼鹽酸鹽→甲醇、乙醇無水甲醇無水乙醇當(dāng)前78頁，總共87頁。（3）水分、O2與光線的影響含水量↑→腙水解↑→A↓→%↓不揮發(fā)溶劑、不吸收水分時→O2與光線無影響當(dāng)前79頁，總共87頁。酸、異煙肼的量(3)鹽酸:異煙肼=2:1樣品:異煙肼=1:8→ν↑酸度↑→異煙肼鹽↓酸度↓→A↓溫度(4)t℃↑→ν↑當(dāng)前80頁，總共87頁。1.原理λmax=465λmax=515雌激素Kober反應(yīng)比色法△△當(dāng)前81頁，總共87頁。當(dāng)前82頁，總共87頁。雌二醇-3-甲醚λmax=465λmax=515當(dāng)前83頁，總共87頁。（三）HPLC法USP、BP、JP均采用RP－HPLC（大多內(nèi)標(biāo)法）特點用樣量少，靈敏度高，分離效果好，測定速度快（甾體激素類藥物常含有結(jié)構(gòu)相似的其他甾體雜質(zhì)，對利用結(jié)構(gòu)特征設(shè)計的比色法有干擾）當(dāng)前84頁，總共87頁。112．甾體激素類藥物的結(jié)構(gòu)中能和四氮唑鹽發(fā)生顯色反應(yīng)的基團()A.酚羥基B.活潑次甲基C.甲酮基D.C17-α-醇酮基E.酮基用異煙肼比色法測定甾體激素藥物含量