制種技術 液體菌種生產

制種技術——液體菌種生產固體菌種與液體菌種的特點固體菌種：1，棉籽殼木屑菌種；2，麥粒菌種傳統(tǒng)的較常用的菌種，培養(yǎng)時間1-2個月液體菌種：母種培養(yǎng)基不加凝固劑——瓊脂而制成可以大規(guī)模工廠化生產的菌種，培養(yǎng)時間5-7天可以生產一批。但不便運輸和長期保存。（一）、液體菌種制作的原理食用菌液體菌種制作是在發(fā)酵罐中，采用液體培養(yǎng)基通入無菌空氣并加以攪拌，增加培養(yǎng)基中溶氧含量，提供食用菌菌體呼吸代謝所需要的氧氣，并控制適宜的外界條件，獲得大量的菌絲體或代謝產物。

（二）、液體菌種的特點1.原料來源廣泛原料主要是一些農副產品，土豆、麩皮、玉米粉、可溶性淀粉、黃豆粉、蛋白胨粉等。2.菌絲體生長快速菌絲體在適宜溫度下，代謝旺盛，生長快速。3.生產周期短食用菌深層發(fā)酵一般僅需2-7d就可獲得大量的菌絲體，而固體培養(yǎng)則需30-60d。4.工廠化生產、無季節(jié)性食用菌深層發(fā)酵是在發(fā)酵罐內、控制最佳條件來培養(yǎng)菌體的，不受季節(jié)性限制。（三）、液體菌種制作的用途1.生產液體菌種食用菌經深層發(fā)酵2-7d的幼嫩菌絲體，可以用來作為食用菌栽培用的原種和栽培種，具有生長壯，萌發(fā)快，萌發(fā)點多的特點，分別稱為二級種子液或三級種子液。2.制備藥物或提取生化制品許多食用菌種類，其深層發(fā)酵培養(yǎng)的菌絲體可作為提取藥物成分或生化制品的材料。

3.制作飲料、保健品食用菌液體培養(yǎng)物經過粉碎→研磨打漿→熱水浴浸提→過濾→稀釋或濃縮→調配，可研制成功能飲料、保健品。4.制作畜禽飼料食用菌液體培養(yǎng)物，經過浸提或提取有用成分后的廢棄物，還可制作畜禽飼料。（四）、液體菌種制作的主要工藝

1.液體菌種制備液體菌種制備的目的是大量繁殖足夠數(shù)量的、健壯的、高純度的菌絲體。⑴斜面菌種制備制備方法（培養(yǎng)基配方和操作步驟）同試管斜面母種的制備，在此不再多講了。⑵搖瓶種子制備

液體菌種培養(yǎng)基如同母種培養(yǎng)基

主要工藝流程：稱量→煮制→分裝→滅菌→無菌檢驗→接種→振蕩或攪拌培養(yǎng)管理思考題：液體菌種培養(yǎng)基如同母種培養(yǎng)基的配制，二者的區(qū)別在哪里？1.是否加凝固劑（常用的凝固劑是什么？）培養(yǎng)與固體顆粒菌種不同⑵搖瓶菌種的制備

主要操作步驟：稱量→煮制→分裝→滅菌→無菌檢驗→接種→振蕩或攪拌培養(yǎng)管理生長快，周期短，每批只需5-7天及可終止培養(yǎng)使用。（五）、液體菌種制作的主要設備1.搖床食用菌為需氧菌，液體菌種培養(yǎng)需要增加氧氣的供應，因此，不斷振蕩有利于菌絲體的快速生長。搖床是液體菌種生產常用的設備，通常培養(yǎng)10-50L以下用搖床。又稱淺層培養(yǎng)。振蕩培養(yǎng)的作用分散菌絲體形成菌絲球狀有利于氧氣供應攪拌型發(fā)酵罐2.種子罐和發(fā)酵罐一級種子罐通常為50-100L，二級種子罐為500-1000L。

又稱深層發(fā)酵。分散菌絲體形成菌絲片段狀有利于氧氣供應適宜大規(guī)模供氧培養(yǎng)，不同于厭氧發(fā)酵，為有氧發(fā)酵。兩種攪拌方式葉片攪拌或渦輪攪拌---培養(yǎng)吹入無菌空氣----氣體吹入沸騰式---攪拌培養(yǎng)無菌空氣的過濾形成一級、二級過濾器--濾芯濾膜的級別空氣過濾

技術的關鍵就是保證進入的空氣無菌度高，因此必須選擇孔徑小、材料先進的過濾膜。一般細菌直徑在0.5-5um,酵母菌在1-10um，病毒一般在20-400nm，所以選擇過濾膜時應綜合考慮以上因素。當然如果選的太小，成本將大幅度提高。規(guī)?；囵B(yǎng)的發(fā)酵罐液體菌種發(fā)酵設備包括四大系統(tǒng)：溫控系統(tǒng)由控制器、電熱管等組成；供氣系統(tǒng)由空氣壓縮機、輸送管道、空氣過濾器等組成；冷卻系統(tǒng)由熱交換器、進出水管道組成；物料系統(tǒng)由加料管、出料管等組成。工廠化栽培蛹蟲草、金針菇、黑木耳、杏鮑菇

都是液體菌種無菌氣體吹入沸騰式---攪拌培養(yǎng)創(chuàng)新模式規(guī)?；囵B(yǎng)的發(fā)酵罐---四大系統(tǒng)協(xié)調液體菌種的發(fā)酵罐是先滅菌后接種再培養(yǎng)滅菌——接種——培養(yǎng)，三合一功能技術含量高，效益高，技術人員薪酬高（六）、液體菌種深層發(fā)酵培養(yǎng)生產量較大時，一般用自動控制發(fā)酵罐培養(yǎng)，即深層發(fā)酵培養(yǎng)。儀表控制的主要參數(shù)：1.液體培養(yǎng)基2.菌齡3.接種量4.溫度5.通氣量6.攪拌速度7.酸堿度8.罐壓9.泡沫控制10.培養(yǎng)時間11.產物分離（七）、液體菌種制作的技術關鍵液體菌種的制備液體菌種制備的目的是大量繁殖足夠數(shù)量的、健壯的、高純度的菌絲體。1.斜面菌種制備制備方法（培養(yǎng)基配方和操作步驟）同試管斜面母種的制備，在此不再多講了。健壯的試管斜面母種是基礎2.搖瓶種子液制備

主要操作步驟：稱量→煮制→分裝→滅菌→無菌檢驗→接種→振蕩或攪拌培養(yǎng)→發(fā)酵罐培養(yǎng)管理種子液制備分為二級、三級---逐級擴大把握菌種質量（純度、活力）是關鍵3.發(fā)酵罐的使用----制備液體菌種培養(yǎng)期間應注意觀察，并做好記錄。包括溫度、壓力、氣流量、排出氣體的氣味等。如遇到停電，排氣閥自動關閉或人工關閉來保持罐中處于正壓狀態(tài)。來電后重新啟動，并打開排氣閥繼續(xù)培養(yǎng)。培養(yǎng)過程中，可隨時無菌操作采樣分析，幾天后待菌球密度合適（從視鏡觀察）即可終止培養(yǎng)。智能調控發(fā)酵罐規(guī)?；⒐S化栽培---液體