氣相色譜法重點(diǎn)

氣色法是以氣體作為流動(dòng)相的柱色譜分析方法。分：、按兩相聚集狀態(tài)（1按流動(dòng)相的狀態(tài)：液相色譜、氣相色譜、超臨界流體色譜（2按固定相的狀態(tài)：液固、液液：氣固、氣液二、按操作方式（1）柱色譜：填充柱、細(xì)柱（2）平面色譜：薄層色、紙色譜法三、按分離原理分吸附色譜，分配色譜，離子交換色譜，尺寸排阻色譜，親和色譜氣色分法特：先分離，后檢氣色應(yīng)范）易揮發(fā)有機(jī)物（2可衍生化成易揮發(fā)物（3）無(wú)機(jī)氣體氣色儀結(jié)及作：、氣路系統(tǒng)：包括載氣氣源，氣體減壓，穩(wěn)壓，穩(wěn)流和凈化裝置、進(jìn)樣系統(tǒng)：包括進(jìn)樣閥，氣化室和控溫部分、分離系統(tǒng)：包括色譜柱，柱室和控溫部分，分離系統(tǒng)是氣相色譜儀的核心部件、檢測(cè)系統(tǒng)：包括檢測(cè)器和控溫部分，、記錄系統(tǒng)：包括放大器，色譜工作站等色圖氣相色譜分析中柱后流出物流經(jīng)檢測(cè)器時(shí)載氣中各組分的量所產(chǎn)生的信號(hào)及時(shí)間的曲線稱為色譜圖流出曲線，又稱為色譜圖。色峰色譜圖中突出部分，是檢器對(duì)組分含量變化所輸出信號(hào)的微分曲線?；河谢€通過(guò)檢測(cè)器時(shí)器記錄的響應(yīng)信曲線稱為基線線的波動(dòng)程度反映儀器檢測(cè)系統(tǒng)噪聲大小。保值是定性析指標(biāo)保時(shí)：是組分從進(jìn)樣到出現(xiàn)信最大值時(shí)的時(shí)間。死間是不被固定相滯留組分的保留時(shí)間，映流動(dòng)通過(guò)色譜柱所需要的時(shí)間。調(diào)保時(shí)：組分的保留時(shí)間與死時(shí)間之差。相保值在相同的操作條件下，組分i調(diào)整保留值與組分s的整保留值之比，稱為組分i對(duì)分的對(duì)保留值ris表只隨柱溫和固定相的改變變化的大小，反映色譜柱對(duì)不同組分的選擇性Ris不等于，說(shuō)明色譜柱對(duì)兩個(gè)組分有選擇性。分度分率，：鄰色峰留之與峰寬均之。如R=1，W稱為σ分，峰分離達(dá)98%

tRR如R=1.5tRR稱為σ分，峰分離達(dá)99.7%，R=1.5是兩相色峰全離標(biāo)。定分的依據(jù)：峰高，峰面積衡量色譜柱效：用峰寬Wb半峰寬W1/2，標(biāo)準(zhǔn)差(0.067高處的峰寬的一)來(lái)衡量ó值的大小表示色譜柱后出組分的分散程度，ó越小，表明流出組分越集中越高。從出線形我可得以信：、用數(shù)：判斷樣品中的最少組分?jǐn)?shù)量2、保留值：進(jìn)行定性分析。3、峰或者峰面積：定量分析4結(jié)合保留值和區(qū)域?qū)挾戎笜?biāo)：

可以評(píng)價(jià)色譜柱對(duì)組分的分離效能5根據(jù)峰間距離：可以評(píng)價(jià)所選擇的固定相，流動(dòng)相是否合理。分系：定溫度、壓力條件下，組分在兩相間達(dá)到分配平衡時(shí)相中組分的濃度與流動(dòng)相中組分的濃度之比K（配系數(shù)的大小組分固相熱力性決定，與兩相體無(wú)關(guān)。分比又稱容量因子表示在一定溫度和壓力下，兩相平衡時(shí)，固定相中組分的質(zhì)量與流動(dòng)相中組分的質(zhì)量之比。K（容因子越大，固定相對(duì)組分的滯留作用越大）氣相色譜的基本理論塔板論速理塔理的個(gè)本設(shè)1、色譜柱由若干小段組成，每段稱為一個(gè)理論塔板，塔板的段長(zhǎng)稱為理論塔板高度，用H表。2、塔板中，下層是固定相，上空間充滿流動(dòng)相，該空間稱為板體積，載氣脈沖式進(jìn)入色譜柱，每次進(jìn)氣一個(gè)板體積。3、組分在各塔板內(nèi)的兩相間迅達(dá)到分配平衡，分配系數(shù)恒定不變，與組分濃度無(wú)關(guān)。4、開始時(shí)，試樣組分全部加在塔板上，試樣沿色譜柱方向的縱向擴(kuò)散忽略不計(jì)。當(dāng)n=5時(shí)即一個(gè)塔板進(jìn)了5個(gè)體的氣后組分A開始流出柱出口進(jìn)入檢測(cè)器產(chǎn)生信號(hào)，但此時(shí)組分A含很小，信號(hào)很弱。當(dāng)n=8，柱出口流出量達(dá)最大值，之后又逐漸減小，應(yīng)產(chǎn)生的電信號(hào)由小到大，再由大到小。當(dāng)n值向無(wú)窮大時(shí)形成的峰形呈正態(tài)分布。柱效能指標(biāo)：理論塔板數(shù)n，理塔板高度H有效塔板數(shù)neff。映色譜柱對(duì)組分的分離效能。理塔數(shù)：主要由操作系數(shù)決定，組分流過(guò)色譜柱時(shí)在兩相是進(jìn)行平衡分配的次數(shù)。n=16（tR/Wb）塔板理論高度H：H=L/n（為譜柱的長(zhǎng)度）計(jì)題比薄那復(fù)本的186頁(yè)色柱L一時(shí)，分H或Heff越小n或neff大表色譜對(duì)組的用越，效直。塔理的獻(xiàn)不：貢獻(xiàn)）好地解釋了色譜峰形的正態(tài)分布規(guī)律（）出了評(píng)價(jià)柱效能指標(biāo)n和不足）有考慮動(dòng)力學(xué)因素對(duì)色譜過(guò)程的影響，不能解釋載氣流速u對(duì)論塔板數(shù)n的影響（）能回答色譜峰為什么發(fā)生變形（）能說(shuō)明塔板高度受什么因素影響速理（VanDeemter方程H有塔板高度A渦擴(kuò)散項(xiàng)B/u分子擴(kuò)散項(xiàng)Cu傳質(zhì)阻力項(xiàng)一渦擴(kuò)項(xiàng)產(chǎn)原：載氣一起流動(dòng)的組分由于固定相的阻而改變運(yùn)動(dòng)方向成渦流”導(dǎo)致不同的組分分子在柱中走過(guò)的路程長(zhǎng)短不一致，引形擴(kuò)。意義：填柱充均規(guī)，體均粒徑越，渦擴(kuò)越，譜擴(kuò)變

形二分?jǐn)U項(xiàng)縱向散)產(chǎn)原分載氣帶入色譜柱后塞”的形式存在于柱內(nèi)很小一段空間中子”的前后（縱向）存在著濃度差而形成濃度梯度，使運(yùn)動(dòng)著的分子產(chǎn)生縱向擴(kuò)散意義：選擇分子量大的組分和載氣，降低色譜柱溫，分子擴(kuò)散項(xiàng)?。簹鈿鈮涸礁撸肿訑U(kuò)散程度越小，結(jié)：小流散分?jǐn)U、質(zhì)力能降塔高，有于高效氣色中定要足下求1、作溫度呈液態(tài)2、穩(wěn)定性好，有較寬的工作溫度范圍，適應(yīng)寬沸程樣品分析3、選擇性好，對(duì)不同組分有不同的溶解能力4、黏度小5、揮發(fā)性小，不易流失。固液選：1、選非極性固定液分離非極性物質(zhì)2、選極性固定液分離極性物質(zhì)3、選極性固定液，分離含有極性組分和非極性組分的混合試樣4、選氫鍵型或極性固定液，分離含有能形成氫鍵組分的試樣5、選兩種或兩種以上的混合固定液，分離復(fù)雜的，難分離的試樣檢測(cè)器分類：濃敏型測(cè)：導(dǎo)檢測(cè)器、電子捕獲檢測(cè)器ECD質(zhì)敏型測(cè)：火焰原子檢測(cè)器FID、焰光度檢測(cè)器FPD靈度稱為響應(yīng)或應(yīng)答值是來(lái)評(píng)價(jià)檢測(cè)器質(zhì)量或較不同類型檢測(cè)器性能的要指標(biāo)。檢限稱敏感度指組分的峰高恰為基線噪聲的倍時(shí)位體積載氣中所含該組分的量。在相同靈敏度條件下，儀器噪聲越小，檢測(cè)限越小，檢測(cè)器的性能越好。線性范圍：線性范圍虎寬越好。利含有物在焰燃產(chǎn)離，外的場(chǎng)用，離形成子，根離流生電號(hào)度檢被譜分出組）一般只能測(cè)定含碳機(jī)化合物多用氮?dú)庾鬏d氣，氫氣作燃?xì)猓諝庾髦細(xì)?。：理）放射源射將氣N2或Ar）電，生次級(jí)電子和正離子，電場(chǎng)作用下，電子向正極移動(dòng)，形恒定基流。（）當(dāng)載氣帶有電負(fù)性組進(jìn)入檢測(cè)器時(shí)性組分就能捕獲這些低能量的自由電子穩(wěn)的負(fù)離子子與載氣正離子復(fù)合成中性化合物，使基流降低而產(chǎn)生負(fù)信號(hào)——倒。信號(hào)的大小與組分的濃度成正比。（常用氣載氣）分度程分度柱能柱擇及容的系1、增k影峰位，使分離度加，保留時(shí)間延長(zhǎng)且峰明顯變寬。

2、增n，通過(guò)改變峰的寬度改善分離度，3、增，善分離度，影響峰間距，但峰的寬度不變。分離效能主要受固定相的性質(zhì)的影響在氣相色譜中擇分離條件基原是在較短的分析時(shí)間內(nèi)將試樣中各組分彼此分離要求分離度足夠大以Van方和分離度方程為指導(dǎo)來(lái)選擇分離條件。一般分離條件主要指載氣、色譜柱、溫以及進(jìn)樣操。載：在低流速時(shí)最）時(shí)，宜選用分子量較大的載氣（氮?dú)?，氬氣）在高流速時(shí)u＞最佳）時(shí)，選用分子量較小的載氣（氫氣，氦氣）溫：1、汽室度一般控制在等于或稍高于試樣組分沸點(diǎn)

iiiiii2、檢室度一般可高于柱溫30~50度或等于汽化室溫度3、柱溫及制式選擇基本原是使難分離的組分在符合分離度要求的前提下，盡可能采用較低柱溫，但以保留時(shí)間適宜及不拖尾為宜。柱溫的控制方式有恒溫與程序升溫兩。恒是指在一恒定溫度下操作，適合于組分少且沸點(diǎn)相近的試樣，而對(duì)于組分較復(fù)雜、沸程寬試樣需采取程序升溫的方法程序溫指在某一初溫維持一定時(shí)間，后按一定速率升溫，升至終溫后再維持一定時(shí)間，每一次升溫稱為一階。進(jìn)：際工作時(shí)在檢測(cè)器靈敏度足夠的前提下，盡量減小進(jìn)樣，并進(jìn)樣速度要快。定分主要依據(jù)每個(gè)組分的保留值來(lái)定性tR,ris定分依：一定操作條件下測(cè)產(chǎn)生的響應(yīng)信峰面積或峰高被測(cè)組分的量呈正比。、歸一法前：樣中所有組分都產(chǎn)生信號(hào)并能流出色譜柱，彼此分離依：分含量與峰面積成正比f(wàn)Af%iiiifAfffii1ii（對(duì)于同系物，f可去）即

AX%i、外標(biāo)

Ai

A1

AiAi

An

用組的品為對(duì)物質(zhì)，以對(duì)照物質(zhì)和試樣中待測(cè)組分的響應(yīng)信號(hào)相比較進(jìn)行定量的方法。外法優(yōu)：簡(jiǎn)便，不用校正因子，不必加內(nèi)標(biāo)物只需待測(cè)組分出峰。外法缺：結(jié)果的準(zhǔn)確度與進(jìn)樣量的重復(fù)性和操作條件的穩(wěn)定性有關(guān)。、內(nèi)標(biāo)以定的物（標(biāo)，加到確定試中進(jìn)分，根試和標(biāo)的質(zhì)及面和對(duì)正子求某分百含。mAfm%i100%iimAfs頁(yè)的計(jì)算題幫助理解）

100%

（可以看看薄的那本復(fù)印本的206優(yōu)：、需內(nèi)標(biāo)物及目標(biāo)組分出;2、操條件變化而引起的誤差小3、適合于復(fù)雜樣品和微量組分定量分析缺：、內(nèi)標(biāo)選擇難2、需要確計(jì)量樣品和內(nèi)標(biāo)的內(nèi)物選：（）樣不在的純物質(zhì)，樣品中的組分完全分離；（）標(biāo)物質(zhì)與待測(cè)組分的結(jié)構(gòu)性相近（）標(biāo)物質(zhì)為純物質(zhì)或含量知（）標(biāo)物與樣品互溶，不發(fā)不可化學(xué)反應(yīng)內(nèi)標(biāo)曲法將測(cè)組分的純物質(zhì)配成不同濃度的系列的系列標(biāo)準(zhǔn)試樣加入等

量的內(nèi)標(biāo)物，進(jìn)樣分析，測(cè)得和以Ai/AsXi作圖得到一直線即內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線法。液質(zhì)聯(lián)用（大壓學(xué)離）和ESI電霧離的同離子生方??

APCI利電暈放電離子化，氣離子化。ESI利用離子蒸發(fā)，液相離子化。能被析化物型同??

APCI定的揮發(fā)性ESI

弱極性，小分子化合物，且具有一極性化合物和生物大分子。流速??

ESIAPCI

0.001到0.25。0.2到2。多電??

APCI不生成一系列多電荷離，所以不適合分析大分子。ESI能生成一系列多電荷離子特別適用于蛋白肽類等生物分子。正色法動(dòng)相極性小于固定相極性的稱為正相色譜法于分離在有機(jī)溶劑中有較高溶解度的化合物，如脂溶性維生素等。反色法動(dòng)相極性大于固定相極性的稱為反相色譜法要用于分離非極性至中等極性的各類分子型化合物。高液色的成（一）高壓輸液系統(tǒng)（二）進(jìn)樣系統(tǒng)（三）分離系統(tǒng)（四）檢測(cè)系統(tǒng)（五）數(shù)據(jù)記錄和處理系統(tǒng)質(zhì)譜法質(zhì)譜圖（大概了解一下，下面的三個(gè)概念應(yīng)該不用記）

Inten.(x1,000)1.00.90.80.70.6

OH0.50.40.3

0.2

0.10.0

12.5

15.017.5

20.022.5