第三部分除草劑生

第三部分除草劑生第一頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日

除草劑常規(guī)生物測(cè)定特點(diǎn)

一般是利用生物活體作靶標(biāo)，通過觀察除草劑對(duì)靶標(biāo)生物的生長(zhǎng)發(fā)育、形態(tài)特征、生理生化等方面的反應(yīng)來判斷除草劑的生物活性。第二頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日除草劑生物測(cè)定的方法按照評(píng)價(jià)指標(biāo)的不同分為：種子萌發(fā)鑒定法植株生長(zhǎng)量鑒定法生理指標(biāo)鑒定按照供試生物材料不同分為:整株水平測(cè)定、組織或器官水平測(cè)定、細(xì)胞或細(xì)胞器水平測(cè)定酶水平測(cè)定第三頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日1

整株水平測(cè)定是用整株植物來測(cè)定除草劑的活性。一般是在溫室用盆缽、培養(yǎng)皿或小杯如玻璃杯或一次性塑料杯培養(yǎng)供試的指示植物，根據(jù)不同要求用供試除草劑處理，待藥害癥狀明顯后進(jìn)行觀察評(píng)價(jià)。評(píng)價(jià)的指標(biāo)包括出苗率、株高、地上部重量和地下部重量等，還可對(duì)植物受害癥狀進(jìn)行分級(jí)，再計(jì)算綜合藥害指數(shù)。第四頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日2

組織或器官水平測(cè)定組織或器官水平測(cè)定一般在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，常用的有種子。用種子測(cè)定時(shí)培養(yǎng)器皿可以采用培養(yǎng)皿或小杯，培養(yǎng)皿的培養(yǎng)介質(zhì)一般是水（但也可以是石英砂、土、瓊脂、濾紙），即在培養(yǎng)皿內(nèi)墊上濾紙，加入除草劑的水溶液進(jìn)行培養(yǎng)。測(cè)定的指標(biāo)可以是主根長(zhǎng)或地上部鮮重或株高，具體采用哪種指標(biāo)應(yīng)根據(jù)預(yù)備實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定，實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)經(jīng)分析后選擇穩(wěn)定性和相關(guān)性較好，以及容易測(cè)定的指標(biāo)。第五頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日3細(xì)胞或細(xì)胞器水平測(cè)定細(xì)胞或細(xì)胞器水平測(cè)定一般是針對(duì)特定作用機(jī)制的除草劑，常用的細(xì)胞器有葉綠體和線粒體。根據(jù)葉綠體和線粒體中一些特定的生理生化反應(yīng)測(cè)定生理指標(biāo)。對(duì)許多光合作用抑制劑，可以測(cè)定希爾反應(yīng)活性，其希爾反應(yīng)活性的測(cè)定不直接測(cè)定放氧活性，而是測(cè)定鐵氰化鉀光還原能力，再折算成放氧活力。這種方法被證明能很好的測(cè)定除草劑活性。在離體線粒體條件下，用瓦氏呼吸裝置測(cè)定氧的吸收和磷氧比，從而確定呼吸作用抑制劑活性。除光合作用和呼吸作用的指標(biāo)外，還可以選用細(xì)胞器中特定物質(zhì)含量作為指標(biāo)。常用的指標(biāo)是葉綠素含量。第六頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日4酶水平測(cè)定對(duì)那些已知作用靶標(biāo)的除草劑，生物測(cè)定可在酶水平上進(jìn)行。如對(duì)草甘膦的生物活性，可以通過測(cè)定植物體內(nèi)莽草酸的累積量來測(cè)定。因?yàn)椴莞熟⒆饔糜诜枷阕灏被岷铣蛇^程中的一種重要酶—EPSP合成酶，導(dǎo)致莽草酸積累，因此測(cè)定植物體內(nèi)莽草酸的累積量可以得知草甘膦活性的大小?；酋ｋ孱惓輨┮种埔阴Ｈ樗岷铣擅富钚裕虼丝梢杂靡阴Ｈ樗岷铣擅富钚缘淖兓瘻y(cè)定植物對(duì)磺酰脲類除草劑的敏感程度。第七頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日

上述的整株水平測(cè)定主要測(cè)定植株生長(zhǎng)量，組織或器官水平測(cè)定主要是種子萌發(fā)鑒定，而細(xì)胞或細(xì)胞器水平測(cè)定及酶水平測(cè)定則主要是生理指標(biāo)鑒定。第八頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日除草劑生物測(cè)定技術(shù)的應(yīng)用對(duì)大量化合物逐級(jí)過篩，選擇具有使用價(jià)值的除草劑品種。除草劑的篩選程序有兩種：

一是直接采用盆栽法或圃場(chǎng)試驗(yàn)進(jìn)行初篩，然后將初篩入選的化合物進(jìn)行田間試驗(yàn)。這一程序的優(yōu)點(diǎn)是切合生產(chǎn)實(shí)際，可靠性大；缺點(diǎn)是篩選周期長(zhǎng)、工作量很大。

二是先在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行簡(jiǎn)易初篩，將初篩入選的化合物再進(jìn)行盆栽或圃場(chǎng)試驗(yàn)復(fù)篩，最后再進(jìn)入大田試驗(yàn)。這一程序的最大優(yōu)點(diǎn)是大大減少了工作量。這種篩選程序成敗的關(guān)鍵取決于簡(jiǎn)易初篩所采用的生物測(cè)定方法。一、除草劑的活性篩選第九頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日

簡(jiǎn)易初篩的生測(cè)應(yīng)具備下述4個(gè)條件。方法簡(jiǎn)便，快速條件易于控制，結(jié)果可靠，防止誤篩或漏篩；有較廣的測(cè)定范圍；對(duì)同類藥劑或作用方式相同的藥劑，其劑量與除草活性有一定的相關(guān)性。第十頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日二、為某一種或某幾種優(yōu)勢(shì)雜草尋求

最有效的除草劑在人力、物力有限的條件下，從一系列除草劑候選品種，通過生測(cè)，比較這些供試除草劑的活性，從中挑選出10余種進(jìn)行盆栽試驗(yàn)，最后選出3～5種進(jìn)行大田試驗(yàn)。除草劑生物測(cè)定技術(shù)在這個(gè)方面應(yīng)用要注意一個(gè)問題，即生測(cè)中所用的指示生物即為某種或某幾種雜草，這就要求試驗(yàn)者根據(jù)這種雜草的生物學(xué)特性，設(shè)計(jì)出一種合適的生物測(cè)定程序。第十一頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日三、利用生物測(cè)定進(jìn)行除草劑特性的研究1、明確植物對(duì)除草劑的主要吸收和傳導(dǎo)部位

植物的不同部位對(duì)除草劑的吸收能力差異很大，研究植物對(duì)除草劑的主要吸收、傳導(dǎo)部位的實(shí)際意義在于決定正確的施藥方法。2、除草劑在土壤中的動(dòng)態(tài)研究研究除草劑在土壤中的持效、淋溶、吸附、移動(dòng)以及殘留第十二頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日四、利用生物測(cè)定進(jìn)行除草劑

應(yīng)用技術(shù)的研究多用盆栽法進(jìn)行。除草劑應(yīng)用技術(shù)的研究大致包括下列5個(gè)方面：合適劑量合適的處理方法最佳處理時(shí)間除草劑混用混配測(cè)定方法除草劑的選擇性用于除草劑殘留量分析第十三頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日除草劑實(shí)驗(yàn)方法第十四頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日一、種子萌發(fā)鑒定

指示植物的種子（常用黃瓜、高粱）在藥劑處理過的砂土內(nèi)萌發(fā)，一般不以萌發(fā)率作為評(píng)判指標(biāo)，而是在萌發(fā)后一定時(shí)間內(nèi)測(cè)定根和莖的長(zhǎng)度，并以此作評(píng)判標(biāo)準(zhǔn)。

激素型除草劑，如2，4-D類，一般采用這種方法。在一定范圍內(nèi)，根和莖的伸長(zhǎng)和除草劑的濃度呈相關(guān)性，因而可用作除草劑的定量測(cè)定，靈敏度較高。第十五頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日（一）除草劑培養(yǎng)皿法適合于非光合作用抑制劑的生物測(cè)定。它具有操作簡(jiǎn)便、培養(yǎng)期間不用管理、周期短，測(cè)定范圍廣，重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)。第十六頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日（二）黃瓜幼苗形態(tài)法是測(cè)定激素型除草劑和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑活性的經(jīng)典方法。

測(cè)定原理是以不同劑量的藥劑所引起黃瓜幼苗形態(tài)上的不同變化來測(cè)定樣品活性。該法具有操作簡(jiǎn)單，靈敏度高（可測(cè)出0.05ppm）的特點(diǎn)。

第十七頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日（三）小杯法適合測(cè)定二苯醚類、酰胺類和氨基甲酸酯和氯代脂肪酸類除草劑的活性

（四）高粱法（皿內(nèi)法）

高粱法適合于非光合作用抑制劑的生物測(cè)定

（五）瓊脂測(cè)定法

適用于酰胺類、二硝基苯胺類、氨基甲酸脂類、均三氮苯類等多種除草劑的測(cè)定，也可用于農(nóng)藥混用試驗(yàn)第十八頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日二、植株生長(zhǎng)量的測(cè)定

指示植物在藥劑處理過的土壤中或混藥的水溶液中培養(yǎng)一定時(shí)間后，測(cè)定植株的生長(zhǎng)量，抑制光合作用的除草劑常用這類方法。禾本科植物可測(cè)量葉子長(zhǎng)度，闊葉植物可測(cè)量葉面積；或?qū)⒌厣喜糠智邢路Q其鮮重。第十九頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日（一）去胚乳小麥幼苗法

這是一個(gè)測(cè)定抑制光合作用除草劑的專一方法，具有操作簡(jiǎn)便、測(cè)定周期短等優(yōu)點(diǎn)。第二十頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日（二）燕麥葉鞘滴注法圖燕麥葉鞘滴注法第二十一頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日（三）番茄法番茄法適合于脲類及均三氮苯類光合作用抑制劑的生物測(cè)定

(四)再生苗稱重法適合于傳導(dǎo)性除草劑測(cè)定第二十二頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日三、生理指標(biāo)的測(cè)定

在藥劑處理后一定時(shí)間，測(cè)定葉片或整個(gè)植株的光合作用，可以以CO2交換量作評(píng)價(jià)指標(biāo)；也可以通過比色法測(cè)定植物體內(nèi)葉綠素含量，以葉綠素含量作為評(píng)判指標(biāo)。第二十三頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日（一）浮萍法聯(lián)吡啶類除草劑殺草快和百草枯常用的測(cè)定方法

（二）單細(xì)胞藻類法適合于均三氮苯類及取代脲類等除草劑生測(cè)

（三）圓葉片漂浮法

阻礙指數(shù)=處理組圓葉片漂浮所花時(shí)間/對(duì)照組圓葉片漂浮所花時(shí)間（四）希爾反應(yīng)活力測(cè)定

第二十四頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日希爾反應(yīng)活力測(cè)定測(cè)定采用希爾反應(yīng)(HillReaction)活力的分光光度法,測(cè)定光合作用光系統(tǒng)II(PSII)抑制劑的活性。希爾反應(yīng)原理：從綠色植物葉片中提取的葉綠體,加入適當(dāng)?shù)难趸瘎?例如鐵氰化鉀,在光下可以發(fā)生從水中釋放氧氣的反應(yīng),同時(shí)鐵氰化鉀被還原。4Fe(CN)3-6＋2H2O光葉綠體4Fe(CN)4-6+4H＋＋O2上述反應(yīng)中,可從底物4Fe(CN)3-6的減少量或產(chǎn)物4Fe(CN)4-6及O2的形成量來定量測(cè)定希爾反應(yīng)活力。通過用比色法測(cè)定亞鐵氰化鉀的含量來檢測(cè)某種化合物的生物活性。第二十五頁(yè)，共二十八頁(yè)，2022年，8月28日影響除草劑生物測(cè)定結(jié)果的因素

一、生物材料不同植物、同一植物不同品種、品系對(duì)藥劑抵抗能力相差很大。凡是以生長(zhǎng)量作評(píng)價(jià)指標(biāo)的，所用植物種子大小、飽滿度都影響測(cè)定結(jié)果。在去胚乳小麥幼苗法中，幼葉是否露出芽鞘以及露出芽鞘的長(zhǎng)短，所得結(jié)果差異較大，因此必須從大量麥苗中嚴(yán)格挑選幼葉剛露出芽鞘者供試，才能得到準(zhǔn)確的結(jié)果。