硫氰酸汞比色法測定血清氯課件

實(shí)驗(yàn)九硫氰酸汞比色法測定血清氯

亞鐵嗪比色法測定血清鐵和總鐵結(jié)合力【目的要求】1、

掌握硫氰酸汞比色法測定血清氯化物的原理。2、掌握亞鐵嗪比色法測定血清鐵和總鐵結(jié)合力原理?！緦?shí)驗(yàn)原理】血清氯化物的氯離子與未解離的硫氰酸汞溶液混合時，氯離子首先與汞結(jié)合形成難以解離的氯化汞，并釋放相應(yīng)的硫氰酸離子，此離子與試劑中的鐵離子結(jié)合，生成紅色的硫氰酸鐵，其色澤與氯的含量呈正比。【計(jì)算】氯化物（mmol/L）=（A測-A測定空白）/A標(biāo)*100【參考范圍】血清氯化物96-108mmol/L腦脊液氯化物120-132mmol/L尿液氯化物170-250mmol/L【注意事項(xiàng)】1、此法對其他鹵族元素也防身同樣的呈色反應(yīng)。但在正常人血液中上述元素含量低，可忽略不計(jì)。2、顯色液的呈色強(qiáng)度與硫氰酸汞和硝酸汞的含量有關(guān)。如呈色過強(qiáng)，線性范圍在125mmol/L以下，增加硝酸汞的用量；呈色太弱，增加硫氰酸汞的用量，使用前二者進(jìn)行調(diào)整，使其色澤在460nm波長，10cm光徑比色杯測定，吸光度在0.4左右為宜。3、本法校正曲線不經(jīng)過原點(diǎn)，但汞離子調(diào)控適當(dāng)，在70-140mmol/L范圍線性良好。4、本法呈色溫度應(yīng)不低于20度，室溫過低易產(chǎn)生渾濁，影響比色。5、可用于自動生化分析儀。6、每批標(biāo)本測定，應(yīng)同時測定正常和異常值得質(zhì)控血清，所得值應(yīng)該在允許誤差范圍內(nèi)，否則應(yīng)查找原因?！驹u價】線性范圍75-125mmol/L顯色穩(wěn)定性2h內(nèi)呈色穩(wěn)定干擾試驗(yàn)?zāi)懠t素達(dá)到225.7umol/L，結(jié)果增加2.9%，Hb達(dá)到5g/L，結(jié)果增加3.3%，β-脂蛋白達(dá)到15.94g/L和17.0g/L時，結(jié)果分別增加4.3%和7.8%?！緦?shí)驗(yàn)操作】1、血清鐵測定取試管3支加入物空白管標(biāo)準(zhǔn)管測定管血清0.2鐵標(biāo)準(zhǔn)液0.2去離子水0.2甘氨酸-鹽酸緩沖液1.01.01.0混勻，37度5min,于562nm波長處，以空白管調(diào)零，讀取A測（血清空白）亞鐵嗪顯色液(B)0.20.20.2混勻，37度5min,再次讀取各管吸光度。2、血清總鐵結(jié)合力測定

在試管中加入血清0.45ml，179umol/LTIBC鐵標(biāo)準(zhǔn)液0.25ml及去離子水0.2ml，充分混勻，放置室溫10min,加入碳酸鎂粉末20mg,在10min內(nèi)振搖數(shù)次，3000r/min離心10min,取上清液操作。取試管3支加入物空白管標(biāo)準(zhǔn)管測定管血清0.45鐵標(biāo)準(zhǔn)液0.45去離子水0.45甘氨酸-鹽酸緩沖液1.21.21.2混勻，于562nm波長處，以空白管調(diào)零，讀取A測（血清空白）亞鐵嗪顯色液0.050.050.05混勻，放置室溫15min,再次讀取各管吸光度?！居?jì)算】血清鐵（umol/L）=（A測-A測空白*0.86）/A標(biāo)*17.9TIBC（umol/L）=（A測-A測空白*0.97）/A標(biāo)*71.6【參考范圍】血清鐵成年男性：11-30umol/L成年女性：9-27umol/L