當(dāng)前國際水產(chǎn)品藥殘限量與檢測方法

當(dāng)前國際市場水產(chǎn)品藥殘限量標(biāo)準(zhǔn)及檢驗技術(shù)要求精選課件主要內(nèi)容一、國際市場水產(chǎn)品藥殘限量標(biāo)準(zhǔn)二、獸藥殘留檢驗技術(shù)精選課件一、國際市場水產(chǎn)品藥殘限量標(biāo)準(zhǔn)1、日本“肯定列表制度”及其限量標(biāo)準(zhǔn)2、歐盟國家水產(chǎn)品藥殘限量3、美國水產(chǎn)品獸藥殘留限量精選課件日本“肯定列表制度”限量標(biāo)準(zhǔn)日本“肯定列表制度”的分析2003年5月30日，日本修改《食品衛(wèi)生法》。2003年10月，公布了”臨時最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)“第一次草案。2004年8月，公布了“臨時最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)”第二次草案、“統(tǒng)一限量標(biāo)準(zhǔn)”草案和“豁免物質(zhì)”草案。2005年6月21日，日本正式向WTO成員通報了“臨時最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)”、“統(tǒng)一限量標(biāo)準(zhǔn)”草案和“豁免物質(zhì)”最終草案。2005年11月，批準(zhǔn)“臨時最大殘留限量標(biāo)準(zhǔn)”、“統(tǒng)一限量標(biāo)準(zhǔn)”草案和“豁免物質(zhì)”最終草案。2006年5月29日，正式實施“肯定列表制度”。精選課件日本“肯定列表制度”限量標(biāo)準(zhǔn)肯定列表制度”是日本為加強(qiáng)食品中農(nóng)業(yè)化學(xué)品殘留管理而采取的一項新舉措。在該制度下，日本對所有農(nóng)業(yè)化學(xué)品（個別豁免物質(zhì)除外）在所有食品中的殘留均制定了嚴(yán)格的限量要求：對于日本認(rèn)為有科學(xué)依據(jù)的則制定限量要求，對于無科學(xué)依據(jù)的物質(zhì)則采用0.01mg/kg的一律標(biāo)準(zhǔn)。精選課件日本“肯定列表制度”限量標(biāo)準(zhǔn)對于日本認(rèn)為有科學(xué)依據(jù)的具體限量指標(biāo)，共有數(shù)據(jù)67140條。其中現(xiàn)行標(biāo)準(zhǔn)10118條；暫定標(biāo)準(zhǔn)56752條；其他標(biāo)準(zhǔn)為270條。日本已制定“暫行標(biāo)準(zhǔn)”而我國沒有限量標(biāo)準(zhǔn)的農(nóng)業(yè)化學(xué)品492種，33418項，涉及食品626種。精選課件日本“肯定列表制度”限量標(biāo)準(zhǔn)目前，海南出口的水產(chǎn)品主要包括了羅非魚、凍蝦仁、巴町魚、金槍魚等等。所涉及到的檢測項目包括了氯霉素、硝基呋喃類、喹諾酮類、磺胺類、四環(huán)素以及孔雀石綠等。其中，在日本“肯定列表制度”中，氯霉素和硝基呋喃類為不得檢出；恩諾沙星的限量殘留是0.1ppm；磺胺類藥物異惡唑的殘留限量同樣為0.1ppm；四環(huán)素為0.2ppm；孔雀石綠則是1.0ppb。精選課件歐盟國家水產(chǎn)品藥殘限量歐盟發(fā)布《食品法律綠皮書》，于2001年發(fā)布《食品安全白皮書》。歐盟發(fā)布《關(guān)于制定動物源性食品中獸藥最高殘留限量的共同程序》，現(xiàn)行2005年版限量標(biāo)準(zhǔn)有較大修改，指標(biāo)更嚴(yán)格。歐盟理事會令2004/41/EC指令和2004/852EC、2004/8523EC、2004/854EC、

2004/882EC等四個新規(guī)章，強(qiáng)調(diào)了食品安全生產(chǎn)和管理鏈條的全過程管理精選課件歐盟國家水產(chǎn)品藥殘限量由于2000年我國出口至歐盟的凍蝦仁中，多次被查出含有歐盟的禁用藥品氯霉素，歐盟于2001年11月對我國的“動物及動物源性食品殘留監(jiān)控體系”進(jìn)行了考察。并于2002年1月23日發(fā)布了“歐盟動物及動物源性產(chǎn)品殘留監(jiān)控評估團(tuán)赴中國考察報告（草案）”，在此報告中，對我國的“監(jiān)控體系”全盤否定，并于2002年1月31日發(fā)布2001/69/EC決議，全面停止中國動物源性食品進(jìn)口，并對中國已進(jìn)口的產(chǎn)品全面進(jìn)行任意項目的檢驗精選課件歐盟國家水產(chǎn)品藥殘限量2002年6月10日歐盟修訂2002/69/EC決議（2002/441/EC決議），恢復(fù)我國大西洋捕撈的甲殼類、三種進(jìn)口后來料/進(jìn)料加工的魚片、腸衣等進(jìn)口，但要進(jìn)行嚴(yán)格的檢驗，抽檢20%至2002年9月歐盟采取的上述措施已經(jīng)使我國動物源食品面臨著全部退出歐盟市場的危險。此外，韓國、捷克、阿根廷等國也對我國提出了類似的要求精選課件歐盟國家水產(chǎn)品藥殘限量2004年7月15日，歐盟常設(shè)委員會成員國食品和動物衛(wèi)生會議批準(zhǔn)了IP/04/草案，允許歐盟成員國從中國進(jìn)口蝦、養(yǎng)殖魚、蜂蜜、蜂王漿、兔肉以及一系列其他動物源性產(chǎn)品，仍然保留對中國禽產(chǎn)品進(jìn)口禁令2003年歐盟食品獸醫(yī)辦公室專家對中國的殘留監(jiān)控體系進(jìn)行了考察，歐盟專家認(rèn)為中國已經(jīng)采取了一系列食品安全質(zhì)量控制措施，在食品安全質(zhì)量控制方面取得了很大進(jìn)步，獸藥殘留監(jiān)控體系得到了進(jìn)一步完善，食品安全能夠符合歐盟的安全標(biāo)準(zhǔn)精選課件歐盟水產(chǎn)品獸藥殘留限量指標(biāo)

序號獸藥中文名稱最高限量法規(guī)編號/標(biāo)準(zhǔn)動物中文名稱1屬于磺胺類的所有藥物100（μg/kg）（EC）No508-1999所有用于生產(chǎn)食品的動物類2氯霉素0（μg/kg）（EC）No508-1999所有食品動物3硝基呋喃0（μg/kg）（EC）No508-1999所有食品動物4四環(huán)素300（μg/kg）（EC）No508-1999所有用于生產(chǎn)食品的動物類5青霉素50（μg/kg）（EC）No508-1999所有用于生產(chǎn)食品的動物類6恩諾沙星5（μg/kg）（EC）No508-1999所有用于生產(chǎn)食品的動物類7孔雀石綠1（μg/kg）（EC）No508-1999所有用于生產(chǎn)食品的動物類8氟甲喹200（μg/kg）（EC）No1181-2002精選課件美國水產(chǎn)品獸藥殘留限量美國的獸藥殘留管理機(jī)構(gòu)主要由農(nóng)業(yè)部（USDA）、

食品藥品管理局（FDA）國家環(huán)境保護(hù)局（EPA）共同組成。農(nóng)業(yè)部（USDA）負(fù)責(zé)肉、奶、禽、蛋和水產(chǎn)品獸藥殘留的監(jiān)控。食品藥品管理局（FDA）負(fù)責(zé)水果、蔬菜和海產(chǎn)品中獸藥殘留的監(jiān)控國家環(huán)境保護(hù)局（EPA）獸藥殘留監(jiān)控，負(fù)責(zé)獸藥使用的登記、注冊和認(rèn)可。精選課件美國水產(chǎn)品獸藥殘留限量2005年我國對美出口達(dá)28.38億，近年來，因輸美產(chǎn)品屢次出現(xiàn)藥殘超標(biāo)問題，美官方對我國農(nóng)產(chǎn)品采用嚴(yán)格的檢測措施，并數(shù)次考察我國動物疫病及藥物殘留狀況。2006年上半年，我輸美水產(chǎn)品蝦、羅非魚、鰻魚等產(chǎn)品數(shù)次被美方檢出有氯霉素、呋喃唑酮、孔雀石綠等禁用藥物。精選課件二、獸藥殘留技術(shù)分析方法要求靈敏度——檢測低限準(zhǔn)確度精密度回收率抗干擾——避免假陽性和假陰性分析速度精選課件二、獸藥殘留技術(shù)常用分析方法1、試劑盒方法優(yōu)點:分析速度快，靈敏度高缺點:不能準(zhǔn)確定性，常有假陽性干擾，難以排除適用范圍:篩選方法2、液相方法優(yōu)點:分析范圍廣缺點:定性能力還有欠缺適用范圍:確證方法3、液質(zhì)聯(lián)用方法優(yōu)點:分析范圍廣，可同時分析多組分，定性準(zhǔn)確缺點:昂貴適用范圍:確證方法精選課件獸藥殘留技術(shù)1、氯霉素2、硝基呋喃類3、孔雀石綠和結(jié)晶紫4、喹喏酮類抗生素5、四環(huán)素族抗生素重要的獸藥精選課件1、氯霉素作用用途氯霉素Chloramphenicol作用機(jī)理：影響蛋白質(zhì)的合成?？股仡愃?。有廣譜抑菌作用，尤其對傷寒，副傷寒感菌作用更強(qiáng)臨床主要用于傷寒，副傷寒，也用于其它敏感菌的感染。飼料添加劑，動物疾病治療。精選課件1、氯霉素代謝動力學(xué)和毒性代謝動力學(xué)主要在肝臟中降解。主要排泄途徑:在豬和牛為腎。存在在全部可食組織中，以及牛奶和蛋中

，在內(nèi)臟中濃度最高。毒性具胎兒毒性引起粒細(xì)胞缺乏癥及血小板減少。再生障礙性貧血（與濃度無關(guān)，不可逆）精選課件1、氯霉素有關(guān)規(guī)定FAO/WHO在1994年的第四十二屆食品添加劑聯(lián)合專家委員會會議上作出“由氯霉素引起的再生障礙性貧血與劑量無關(guān)，因此不可能通過制定最高殘留限量來加以限制。”因此是“不設(shè)定”美國和加拿大不容許氯霉素用于最終為人類食用的動物身上；僅批準(zhǔn)用于寵養(yǎng)動物疾病的治療，如貓、狗和馬歐盟的96/23(EEC)指令中把氯霉素列入禁用藥日本規(guī)定所有最終為人類所食用的動物源性食品中氯霉素殘留的容許量必須為零。中國在2000版的獸藥典中已將氯霉素撤銷，并于2002年5月15日起全面禁止作為獸藥使用精選課件1、氯霉素分析方法篩選方法

ELISA

GC/MS,LC/MS確證方法

GC/MS

LC/MS-MS測定低限至少要達(dá)到:0.3μg/kgorL精選課件1、氯霉素檢測方法試劑盒方法液質(zhì)聯(lián)用方法稱取5.000克樣品稱取5.000克樣品，加氯霉素d5內(nèi)標(biāo)10mL乙酸乙酯提取10mL乙酸乙酯提取氮氣濃縮氮氣濃縮磷酸鹽緩沖溶液1mL定容，四氯化碳3mL除酯乙酸銨溶液1mL定容，四氯化碳3mL除酯點板過0.2微米水系濾膜酶標(biāo)儀450nm，標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量LC-MS/MS檢測，內(nèi)標(biāo)法定量精選課件1、氯霉素LC-MS/MS標(biāo)準(zhǔn)譜圖精選課件2、硝基呋喃類作用性質(zhì)

硝基呋喃類Nitrofurans合成抗菌藥用于治療沙門氏菌病和大腸（桿）菌的感染可誘導(dǎo)有機(jī)體突變禁止用于食用動物中主要殘留于肌肉中

精選課件2、硝基呋喃類相關(guān)情況2002年3月:泰國、越南、印尼、印度、孟加拉，77個樣品中有16個含量超標(biāo)。荷蘭和英國水產(chǎn)品中檢出。牛、豬和雞飼養(yǎng)中，作為飼料添加劑廣泛使用，用于治療腸和胃的傳染病。歐盟指令96/23/EC:

硝基呋喃類藥物是A類禁用藥。中國:2002.5起禁止使用。海南:呋喃西林和呋喃唑酮常檢出。

精選課件2、硝基呋喃類毒理學(xué)呋喃唑酮、硝呋氨氧腙

-誘導(dǎo)有機(jī)體突變的物質(zhì)

-致癌物質(zhì)代謝物:AOZ致突變其他硝基呋喃類

-缺少數(shù)據(jù)

-被EMEA(歐洲藥品評估局）分類在AnnexIV(Juy1993)

精選課件2、硝基呋喃類藥物(代謝)動力學(xué)迅速代謝,半衰期不超過幾個小時。以母體形式迅速排泄。用14C-標(biāo)記呋喃唑酮研究，殘留物是以同蛋白質(zhì)結(jié)合狀態(tài)存在。精選課件2、硝基呋喃類測定方法飼料測定原藥:HPLCLC-MS/MS組織中測定代謝物L(fēng)C-MS/MS

-呋喃唑酮(AOZ)

-呋喃西林

(SEM)

-呋喃它酮

(AMOZ)

-呋喃妥因

(AHD)

測定低限至少要達(dá)到:0.5μg/kgorL精選課件2、硝基呋喃類測定步驟1、稱樣稱取5.000克樣品2、衍生加水，鹽酸，衍生劑，內(nèi)標(biāo)，37℃反應(yīng)16小時3、提取加K2HPO4和NaOH調(diào)節(jié)至中性，加乙酸乙酯4、濃縮氮氣吹干5、定容流動相定容，過0.2μm濾膜6、檢測LC-MS/MS檢測，內(nèi)標(biāo)法定量精選課件2、硝基呋喃類標(biāo)準(zhǔn)譜圖精選課件3、孔雀石綠和結(jié)晶紫孔雀石綠的基本性質(zhì)

用途預(yù)防魚的水霉病、鰓霉病、小瓜蟲病等為了延長魚生存的時間、魚死亡后顏色較為鮮亮毒性高毒素、高殘留和致癌、致畸、致突變等副作用

法規(guī)許多國家都將孔雀石綠列為水產(chǎn)養(yǎng)殖禁用藥物我國于2002年5月將孔雀石綠列入《食品動物禁用的獸藥及其化合物清單》中，禁止用于所有食品動物精選課件3、孔雀石綠和結(jié)晶紫檢測方法代謝孔雀石綠和結(jié)晶紫在體內(nèi)內(nèi)會代謝成不溶于水的隱性孔雀石綠和隱性結(jié)晶紫，因此，在檢測時要同時檢測母體和代謝產(chǎn)物?？兹甘G和結(jié)晶紫及其代謝產(chǎn)物均容易氧化，在強(qiáng)光環(huán)境中降解很快，因此，檢測時要避光，加入抗氧化劑來防止降解。

分析方法HPLC

LOD0.5~2ppb；母體，紫外；代謝物，熒光。HPLC/MS/MSLOD0.5ppb；試劑盒方法。

精選課件3、孔雀石綠和結(jié)晶紫液相檢測方法/液質(zhì)確證方法

稱樣：稱取5.000g樣品提?。?5mL乙腈提取酸化：加2mL檸檬酸/鹽酸羥胺混合溶液凈化：過MCX小柱，甲醇洗滌定容：乙酸銨甲醇溶液1.5mL洗脫，鹽酸羥胺溶液定容至2.0mL檢測：LC-FLD/UV檢測，外標(biāo)法定量確證：對陽性樣品，以LC-MS/MS確證精選課件3、孔雀石綠和結(jié)晶紫標(biāo)準(zhǔn)譜圖精選課件4、喹諾酮類抗生素性質(zhì)

相對新的合成抗生素

治療尿路感染 廣譜性第一代:萘啶酸,惡喹酸(人口服較多)第二代:氟喹