埃博拉出血熱標本采集包裝運輸與檢測

埃博拉出血熱標本采集包裝運輸與檢測第1頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四埃博拉出血熱(Ebolahemorrhagicfever)是由埃博拉病毒(Ebolavirus)引起的一種急性傳染病。人主要通過接觸病人或感染動物的體液、分泌物和排泄物等而感染。臨床表現(xiàn)主要為突起發(fā)熱、出血和多臟器損害，病死率可高達50%-90%。本病潛伏期為2～21天，通常為8～10天。2014年，在幾內亞、利比里亞和塞拉利昂等西非國家發(fā)生歷史上最嚴重的埃博拉出血熱暴發(fā)疫情。埃博拉病毒簡介第2頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四為指導醫(yī)療機構和疾病預防控制機構工作人員對埃博拉出血熱相關標本的采集、包裝、運輸和檢測工作，保證生物安全。培訓目的第3頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四

埃博拉出血熱留觀、疑似或確診病例：標本采集的個人防護生物安全要求包裝的要求運輸?shù)姆绞綄嶒炇覚z測方法培訓內容第4頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四《中華人民共和國傳染病防治法》《病原微生物實驗室生物安全管理條例》《可感染人類的高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本運輸管理規(guī)定》衛(wèi)生部《人間傳染的病原微生物名錄》

國際民航組織《危險物品航空安全運輸技術細則》《中國疾病預防控制中心關于規(guī)范埃博拉出血熱病例標本接收和檢測結果反饋等工作的通知》中疾控應急發(fā)〔2014〕322號知識要點-國內的法律法規(guī)及管理辦法第5頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四應遵守《醫(yī)院感染管理規(guī)范》和《病原微生物實驗室生物安全管理條例》等相關生物安全規(guī)定。在標準預防的基礎上，應采取避免飛沫和接觸感染的預防措施。標本的采集第6頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四采樣人員應該接受埃博拉病人采血規(guī)程的培訓培訓內容PPE的規(guī)范使用采血要求及注意事項采血時，需2名采血人員同時在場標本的采集-人員要求第7頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四工作服一次性工作帽雙層醫(yī)用手套防滲透防護服(連帽，猴服)醫(yī)用防護口罩(N95及以上)+護目鏡或防護面屏

或普通外科口罩+正壓頭盔工作鞋+一次性防水靴套

或長筒膠靴防滲漏防護服(反穿式)標本的采集-個人防護第8頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四應提前將所有采血物品準備齊全，并配備：洗手的設施備用手套消毒液銳器盒標本的采集-物品準備第9頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四一般發(fā)病后2周內，可在患者血標本中檢測到病毒核酸和抗原，發(fā)病后3～10天的標本核酸和抗原的檢出率高。留觀病例、疑似病例診斷埃博拉病毒感染應采集發(fā)病3天以后的血標本。標本的采集-采集時間第10頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四用分離膠無菌真空促凝管采集靜脈血，每管3ml留觀病例、疑似病例采集4管2管送指定的具有埃博拉出血熱檢測資質的實驗室進行檢測2管保存于樣本采集單位或所在省級疾控中心標本的采集-采血管種類及采血量第11頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四采集后的處理方式應用封口膜封閉管口，消毒后由協(xié)助者將病人信息填寫在采血管上，放入試管架中退入潛在污染區(qū)，將采血管放入50ml離心管內離心管消毒后，放入第二層包裝盡快送檢如不能立即送檢，則置于4℃下保存，填寫標本采集登記表保存方式全血采用冷藏運輸，血清采用冷凍運輸標本的采集第12頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四恢復期標本采集確診病例采集恢復期血標本2份，每份2管采集時間應間隔不少于48小時，送國家疾控中心病毒病所進行埃博拉病毒相關檢測，用于指導病例管理恢復期血標本，并不限定必須于出院前采集可采集發(fā)病2周后或出院(死亡)前標本標本的采集第13頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四采取A類包裝，符合UN2814要求容器或包裝材料應達到國際民航組織《危險物品航空安全運輸技術細則》（Doc9284包裝說明PI602）規(guī)定的A類包裝標準標本的包裝第14頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四三層包裝第一層為自封袋或50ml離心管第二層為防水、防漏的安全殼容器第三層為運輸包裝包裝要求樣本應用吸水紙等包裹，固定在自封袋或離心管內在堅固、防水、防漏的第二層安全殼容器中，用吸水紙等填充物將內有標本的自封袋或離心管固定好，裝入第三層包裝第二層和第三次包裝之間應放置冰排等制冷材料安全殼容器和外包裝須與IATA危險物品條例包裝制度650相符合標本的包裝第15頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四包裝中的注意事項用0.5%有效氯消毒50ml離心管表面，并在潛在污染區(qū)放入第二層包裝第二層包裝用0.5%有效氯浸泡消毒15min后，擦拭干凈帶入清潔區(qū)，放入外層包裝標本的包裝第16頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四樣品清單填寫標本說明兩份，寫明標本的基本信息、運送者及接收者地址等將標本說明密封在塑料袋里，用膠布分別粘貼于最外層包裝的內側和外側標本相關信息需留檔以便查驗，方便實驗室操作人員查對標本數(shù)量標本的包裝第17頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四收取標本由醫(yī)院所在地的疾病預防控制機構到醫(yī)院收取標本。標本運輸之前，應按相關生物安全規(guī)定，與樣本接收單位生物安全管理部門聯(lián)系，辦理相關手續(xù)。運送日期確定后，立即將運送時間和運輸方式通知接收單位，做好接收準備。標本的包裝第18頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四中國疾控中心檢測的標本運輸流程第19頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四省市內運送埃博拉出血熱標本的運輸流程第20頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四生物安全要求

由專人專車運送，運送人員須有相關資質，且不得少于兩人申請單位對與運送人員進行埃博拉病毒相關的生物安全培訓在運送過程中采取相應的防護措施運輸前仔細檢查容器，要符合安全要求按照規(guī)定進行標本運輸前的包裝和送達后的開啟標本運輸?shù)纳锇踩蟮?1頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四省市間標本運輸跨省、自治區(qū)、直轄市運輸疑似病例或留觀病例樣本時，應當將申請材料提交至運輸出發(fā)地省級衛(wèi)生計生行政部門進行初審對符合要求的，省級衛(wèi)生計生行政部門應當在3個工作日內出具初審意見，并將初審意見和申報材料上報衛(wèi)計委審批衛(wèi)計委應當自收到申報材料后3個工作日內做出是否批準的決定符合法定條件的，頒發(fā)準運證書省市間BSL-3實驗室標本運輸流程第22頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四WHO、美國CDC等其他國家及地區(qū)關于標本的采集、包裝和運輸?shù)奈募?/p>

WHO的《LaboratoryGuidancefortheDiagnosisofEbolaVirusDiseaseInterimRecommendations》2014.9.19英國衛(wèi)生署的《PHEMicrobiologyServicesVHFSampleTestingQueries》2014.9美國CDC的《InterimGuidanceforSpecimenCollection,Transport,Testing,andSubmissionforPersonsUnderInvestigationforEbolaVirusDiseaseintheUnitedStates》2014.10.20知識要點-國外的情況第23頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四推薦用EDTA塑料采血管采集全血，最低量4ml保存聚茴香腦硫酸鈉(SPS)或檸檬酸采血管中,或促凝采血管也可以尿液標本也是可以的，但需要盡快檢測。死亡者或無法采血的兒童采集咽拭子知識要點-國外的情況-標本的采集第24頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四WHO和美國CDC包裝形式均與我國一致，運輸高致病性病原微生物菌（毒）種或樣本的容器或包裝材料應當達到國際民航組織《危險物品航空安全運輸技術細則》（Doc9284包裝說明PI602）規(guī)定的A類包裝標準知識要點-國外的情況-標本的包裝第25頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四WHO關于運輸主要依據(jù)《GuidanceonregulationsfortheTransportofInfectiousSubstances》2013.1.1，如果本國沒有實驗室可以做檢測可將標本寄到《LaboratoryGuidancefortheDiagnosisofEbolaVirusDiseaseInterimRecommendations》2014.9.19所寫的實驗室。美國則按照各州的規(guī)定運輸標本知識要點-國外的情況-標本的運輸?shù)?6頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四WHO發(fā)布的安全采集埃博拉出血熱疑似患者血液標本第27頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四第28頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四第29頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四第30頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四WHO發(fā)布的如何安全運輸埃博拉出血熱疑似患者血液標本的流程

（國內運輸）第31頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四第32頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四第33頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四檢測方法1.病毒核酸檢測方法

（1）實時熒光定量RT-PCR法

（2）一步法常規(guī)RT-PCR方法2.埃博拉病毒抗原抗體檢測方法

（1）埃博拉病毒抗原檢測方法（雙抗體夾心法ELISA、膠體金快診）

（2）埃博拉病毒IgM抗體檢測（抗體捕捉法ELISA）

（3）埃博拉病毒IgG抗體檢測方法（間接法ELISA）標本的檢測第34頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四埃博拉病毒的實驗室檢測相關活動嚴格按照《人間傳染的病原微生物名錄》的要求，在相應的生物安全級別實驗室開展。病毒培養(yǎng)在BSL-4實驗室動物感染實驗在ABSL-4實驗室未經(jīng)培養(yǎng)的感染材料的操作在BSL-3實驗室滅活材料的操作在BSL-2實驗室按照《病原微生物實驗室生物安全管理條例》等相關規(guī)定要求，做好生物安全工作。實驗室生物安全要求第35頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四

埃博拉病毒檢測機構應將所有陽性和部分陰性血清標本送中國疾病預防控制中心病毒病所進行復核檢測。

實驗室檢測結果應及時反饋標本送檢單位，并盡快上報上級主管部門。第36頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四

埃博拉病毒相關感染性標本的滅活，應在BSL-3實驗室Ⅱ級生物安全柜內進行。

標本的滅活處理第37頁，共39頁，2023年，2月20日，星期四（1）TRIzol（或TriPure）滅活法

提取病毒RNA時，標本和TRIzol（或T