微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)降解尿素和纖維素用課件

專題

微生物專題微生物概念及分類微生物培養(yǎng)微生物分離和計(jì)數(shù)微生物應(yīng)用一、微生物概念及分類1、概念：是指自然界中那些形態(tài)微小、結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，通常要用光學(xué)顯微鏡或電子顯微鏡才能看清楚的生物。第1節(jié)微生物的實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)生物分類動(dòng)物界：植物界：真菌界：原生生物：原核生物：病毒大型真菌、霉菌酵母菌細(xì)菌、放線菌、支原體、藍(lán)藻、衣原體變形蟲、草履蟲DNA型病毒、RNA型病毒真核生物原核生物非細(xì)胞生物細(xì)胞生物二、微生物培養(yǎng)：1）概念：按照微生物對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的不同需要，配制出供其生長(zhǎng)繁殖的營(yíng)養(yǎng)基質(zhì)。1、培養(yǎng)基：2）營(yíng)養(yǎng)成分：概念分類作用為微生物的生長(zhǎng)和繁殖提供所需碳元素的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)無(wú)機(jī)碳源：二氧化碳、碳酸氫鈉；有機(jī)碳源：葡萄糖、脂肪酸、石油等葡萄糖是最主要的碳源合成微生物的細(xì)胞物質(zhì)和代謝產(chǎn)物，有些碳源是異養(yǎng)微生物主要能源碳源：概念分類作用為微生物的生長(zhǎng)和繁殖提供所需氮元素的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)無(wú)機(jī)氮源：N2、NH3銨鹽、硝酸鹽；有機(jī)氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨等銨鹽、硝酸鹽是最主要的氮源。合成蛋白質(zhì)、核酸和含氮代謝產(chǎn)物氮源：溫度、PH、滲透壓、O2及特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)等。微生物所需的營(yíng)養(yǎng)要素碳源氮源水無(wú)機(jī)鹽無(wú)機(jī)碳源：CO2等—自養(yǎng)型有機(jī)碳源：葡萄糖等—異養(yǎng)型N2：固氮菌（根瘤菌等）NH3：硝化細(xì)菌其他：銨鹽、硝酸鹽、尿素、蛋白胨特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)（維生素、氨基酸和堿基等）、PH、溫度、氧氣等3）培養(yǎng)基的種類物理性質(zhì)培養(yǎng)基特點(diǎn)作用固體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基加大量瓊脂加少量瓊脂不加瓊脂用于微生物的分離和計(jì)數(shù)觀察微生物的運(yùn)動(dòng)和鑒定菌種用于工業(yè)生產(chǎn)3）培養(yǎng)基的種類化學(xué)成分培養(yǎng)基特點(diǎn)作用合成培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基化學(xué)成分、含量已知含有天然物質(zhì)，化學(xué)成分、含量未知用于微生物的分類和鑒定用于工業(yè)生產(chǎn)選擇培養(yǎng)基1）不加碳源的培養(yǎng)基

分離自養(yǎng)型微生物2）不加氮源的培養(yǎng)基

分離固氮菌3）加入青霉素的培養(yǎng)基

分離酵母菌、霉菌等真菌4）加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基

分離金黃色葡萄球菌練習(xí)：（10全國(guó)）某細(xì)菌固體培養(yǎng)基的組成成分是KH2PO4、Na2HPO4、MgSO4、葡萄糖、尿素、瓊脂和蒸餾水，其中凝固劑是＿＿＿＿＿，碳源是＿＿＿＿＿＿，氮源是＿＿＿＿＿。已知只有能合成脲酶的細(xì)菌才能在該培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，故該培養(yǎng)基屬于＿＿＿＿培養(yǎng)基。按照化學(xué)成分分類，該培養(yǎng)基屬于＿＿＿培養(yǎng)基。從同化作用類型上看，用該培養(yǎng)基培養(yǎng)的細(xì)菌屬于＿＿＿＿。葡萄糖尿素瓊脂選擇合成異養(yǎng)型思考：自然界中微生物是混雜的生活在一起的，如何分離出某種微生物（如純化大腸桿菌）？2、實(shí)驗(yàn)操作——大腸桿菌的純化培養(yǎng)1）制備培養(yǎng)基：計(jì)算稱量溶化調(diào)PH值滅菌倒平板？1)概念：用溫和的物理方法和化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分對(duì)人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）消毒與滅菌消毒：2)常用消毒方法：

煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min；巴氏消毒法:70-75℃下煮30min或80℃下煮15min；化學(xué)藥劑消毒法:用75%酒精等進(jìn)行皮膚消毒;氯氣消毒水源；紫外線消毒等滅菌1)概念：用強(qiáng)烈的物理方法和化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部所有的微生物（包括芽孢和孢子）灼燒滅菌干熱滅菌：160-170℃下加熱1-2h。高壓蒸汽滅菌：100kPa、121℃下維持15-30min.2)滅菌方法：

倒平板：待培養(yǎng)基冷卻到50OC左右時(shí)倒平板。平板倒置原因：防止培養(yǎng)基冷卻產(chǎn)生水滴滴落培養(yǎng)基上，造成污染。2、實(shí)驗(yàn)操作——大腸桿菌的純化培養(yǎng)1）制備培養(yǎng)基：計(jì)算稱量溶化調(diào)PH值滅菌倒平板原則：目的明確、營(yíng)養(yǎng)協(xié)調(diào)、PH值適宜2）純化大腸桿菌：微生物接種方法平板劃線法稀釋涂布平板法平板劃線法10-110-410-510-6平板劃線法稀釋涂布平板法相同點(diǎn)：分散出單細(xì)菌形成單菌落來(lái)分離菌種不同點(diǎn)：分別通過劃線和稀釋分散出單細(xì)菌，稀釋涂布平板法除分離菌種外還可以對(duì)微生物計(jì)數(shù)三、微生物的分離和計(jì)數(shù)思考：如何尋找和分離某種微生物？實(shí)例1：?jiǎn)⑹荆簩ふ夷康木N時(shí)要根據(jù)它對(duì)生存環(huán)境的要求，到相應(yīng)的環(huán)境中去尋找。多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)是一種在體外將少量DNA大量復(fù)制的技術(shù)，此項(xiàng)技術(shù)要求使用耐高溫（930C）的DNA聚合酶。如果讓你尋找這種耐高溫的酶，你會(huì)去哪找？啟示：分離菌種要人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等)，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)，即用選擇培養(yǎng)基來(lái)分離菌種。原因：因?yàn)闊崛獪囟?0～800C，淘汰了絕大多數(shù)微生物，只有耐熱菌被篩選出來(lái)。思考：為什么耐熱菌能從熱泉中被篩選出來(lái)？（一）分離微生物原理：選擇培養(yǎng)基分離1、活菌計(jì)數(shù)法（通過統(tǒng)計(jì)菌落估算活菌數(shù)）原理：在稀釋度足夠高時(shí)，微生物在固體培養(yǎng)基上所形成的一個(gè)菌落是由一個(gè)單細(xì)胞繁殖而成的，即一個(gè)菌落代表原先的一個(gè)單細(xì)胞。常用方法：稀釋涂布平板法。每克樣品中的菌落數(shù)＝(C÷V)×M其中，C代表某一稀釋度下平板上生長(zhǎng)的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時(shí)所用的稀釋液的體積(ml)，M代表稀釋倍數(shù)。（二）微生物計(jì)數(shù)方法：注意事項(xiàng)①統(tǒng)計(jì)的菌落往往比活菌的實(shí)際數(shù)目低。原因是___________________________________________________________________________。②為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30——300的平板上進(jìn)行計(jì)數(shù)。(細(xì)菌：稀釋度104-106；放線菌：稀釋度103-105；霉菌：稀釋度102-104)③為使結(jié)果接近真實(shí)值可將同一稀釋度加到三個(gè)或三個(gè)以上的平皿中，經(jīng)涂布，培養(yǎng)計(jì)算出菌落平均數(shù)。當(dāng)兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞連著一起時(shí)，平板上觀察到的菌落只有一個(gè)。2、顯微鏡直接計(jì)數(shù)法：利用特定細(xì)菌計(jì)數(shù)板或血細(xì)胞計(jì)數(shù)板，在顯微鏡下計(jì)算一定容積里樣品中微生物的數(shù)量。不能區(qū)分死菌與活菌；不適于對(duì)運(yùn)動(dòng)細(xì)菌的計(jì)數(shù)；需要相對(duì)高的細(xì)菌濃度；個(gè)體小的細(xì)菌在顯微鏡下難以觀察缺點(diǎn)1、土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)（三）實(shí)例：課題背景1）尿素的利用尿素是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥。尿素不能直接被農(nóng)作物吸收。土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后才能被植物利用。2）細(xì)菌利用尿素的原因土壤中的細(xì)菌分解尿素是因?yàn)樗鼈兡芎铣呻迕窩O(NH2)脲酶+H2O+CO2NH33）常見的分解尿素的微生物芽孢桿菌、小球菌、假單胞桿菌、克氏桿菌、棒狀桿菌、梭狀芽孢桿菌，某些真菌和放線菌也能分解尿素。4）課題目的①?gòu)耐寥乐蟹蛛x出能夠分解尿素的細(xì)菌②統(tǒng)計(jì)每克土壤樣品中究竟含有多少這樣的細(xì)菌15.0g瓊脂1.0g尿素10.0g葡萄糖0.2gMgSO4`7H2O2.1gNaH2PO41.4gKH2PO4土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計(jì)數(shù)所需培養(yǎng)基：①?gòu)奈锢硇再|(zhì)看此培養(yǎng)基屬于哪類？固體培養(yǎng)基②在此培養(yǎng)基中哪些作為碳源、氮源？碳源：葡萄糖氮源：尿素培養(yǎng)基的唯一氮源為尿素，只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，以尿素作為氮源。缺乏脲酶的微生物由于不能分解尿素，缺乏氮源而不能生長(zhǎng)發(fā)育繁殖，而受到抑制，所以用此培養(yǎng)基就能夠選擇出分解尿素的微生物。4)培養(yǎng)基選擇分解尿素的微生物的原理實(shí)驗(yàn)的具體操作

㈠.土壤取樣

從肥沃、濕潤(rùn)的土壤中取樣。先鏟去表層土3cm左右，再取樣，將樣品裝入事先準(zhǔn)備好的信封中?！羧⊥翗佑玫男¤F鏟和盛土樣的的信封在使用前都要滅菌。㈡.制備培養(yǎng)基：制備以尿素為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。◆應(yīng)在火焰旁稱取土壤10g?！粼谙♂屚寥廊芤旱倪^程中，每一步都要在火焰旁進(jìn)行◆分離不同的微生物采用不同的稀釋度原因：不同微生物在土壤中含量不同目的：保證獲得菌落數(shù)在30～300之間、適于計(jì)數(shù)的平板[三]樣品的稀釋㈣.取樣涂布◆如果得到了2個(gè)或2個(gè)以上菌落數(shù)目在30——300的平板，則說明稀釋操作比較成功，并能夠進(jìn)行菌落的計(jì)數(shù)，如果同一稀釋倍數(shù)的三個(gè)重復(fù)的菌落數(shù)相差較大，表明試驗(yàn)不精確，需要重新實(shí)驗(yàn)。實(shí)例2：在做分解尿素的細(xì)菌的篩選與統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)目的實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)從對(duì)應(yīng)的106倍稀釋的培養(yǎng)基中篩選出大約150個(gè)菌落，但是其他同學(xué)在同樣的稀釋度下只選擇出大約50個(gè)菌落。分析其原因。原因：⑴土樣不同⑵培養(yǎng)基污染或操作失誤(或者是混入了其他的含氮物質(zhì))小結(jié)：通過這個(gè)事例可以看出，實(shí)驗(yàn)結(jié)果要有說服力，對(duì)照的設(shè)置是必不可少的。方案一：由其他同學(xué)用與A同學(xué)相同土樣進(jìn)行實(shí)驗(yàn)方案二：將A同學(xué)配制的培養(yǎng)基在不加土樣(或加等量無(wú)菌水)的情況下進(jìn)行培養(yǎng)，作為空白對(duì)照，以證明培養(yǎng)基是否受到污染。結(jié)果預(yù)測(cè)：如果結(jié)果與A同學(xué)一致，則證明A無(wú)誤；如果結(jié)果不同，則證明A同學(xué)存在操作失誤或培養(yǎng)基的配制有問題。設(shè)置對(duì)照：設(shè)置對(duì)照的主要目的是排除實(shí)驗(yàn)組中非測(cè)試因素對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，提高實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度。

纖維素分解菌的篩選（教材P28）選擇___________的環(huán)境，采集土樣制成樣品。將樣品接種在以_________為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基上培養(yǎng)，目的是增加纖維素分解菌的濃度。采用___________________法,將樣品接種到含有剛果紅的固體的培養(yǎng)基上，挑選產(chǎn)生_______的菌落來(lái)篩選纖維素分解菌。纖維素豐富纖維素稀釋涂布平板透明圈2、分解纖維素微生物的分離：實(shí)驗(yàn)操作土壤取樣梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上（含剛果紅）挑選產(chǎn)生透明圈的菌落選擇培養(yǎng)(液體培養(yǎng)基)篩選并增大菌種濃度稀釋菌種㈤.微生物的培養(yǎng)與觀察在菌落計(jì)數(shù)時(shí)，每隔24h統(tǒng)計(jì)一次菌落數(shù)目。選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時(shí)的記錄作為結(jié)果，以防止因培養(yǎng)時(shí)間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。培養(yǎng)不同微生物往往需要不同培養(yǎng)溫度。細(xì)菌：30～37℃培養(yǎng)1～2d放線菌：25～28℃培養(yǎng)5～7d霉菌：25～28℃的溫度下培養(yǎng)3～4d。微生物的培養(yǎng)與觀察三.結(jié)果分析與評(píng)價(jià)1.通過對(duì)照實(shí)驗(yàn)，若培養(yǎng)物有雜菌污染，菌落數(shù)偏高；若培養(yǎng)物混入其他氮源，則菌落形態(tài)多樣，菌落數(shù)偏高，難以選擇出分解尿素的微生物。2.提示：選擇每個(gè)平板上長(zhǎng)有30—300個(gè)菌落的稀釋倍計(jì)算每克樣品的菌數(shù)最合適。同一稀釋倍數(shù)的三個(gè)重復(fù)的菌落數(shù)不能相差懸殊，如相差較大，表示實(shí)驗(yàn)不精確。2、微生物分離原理：人為提供有利于目的菌株生長(zhǎng)的條件(包括營(yíng)養(yǎng)、溫度、pH等)，同時(shí)抑制或阻止其他微生物生長(zhǎng)。（用選擇培養(yǎng)基）（二）純化大腸桿菌1、將準(zhǔn)備培養(yǎng)的菌種放到培養(yǎng)基中的過程叫做__________。2、微生物接種的最常用方法是____________和_________________3、能夠獲得單一菌落的接種方法有____________和_________________4、能夠測(cè)定樣品中活菌數(shù)的接種方法是_______________平板劃線法稀釋涂布平板法接種平板劃線法稀釋涂布平板法稀釋涂布平板法生物細(xì)胞生物動(dòng)物植物真菌原生生物非細(xì)胞生物真核生物原核生物細(xì)菌放線菌支原體衣原體藍(lán)藻病毒微生物————酵母菌、霉菌、蘑菇微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)

一、基礎(chǔ)知識(shí)（一）培養(yǎng)基1、配制培養(yǎng)基的基本原則（確定培養(yǎng)基配方的依據(jù)）__________________________2、多數(shù)培養(yǎng)基都含有_____________________等四類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，少數(shù)微生物還需要加入特殊的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)即—_________.3、最常用的碳源是____________；蛋白胨或牛肉膏可以為細(xì)菌提供___________類營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)4、微生物的培養(yǎng)條件主要包括

_____________________________根據(jù)微生物的營(yíng)養(yǎng)需要配制水、無(wú)機(jī)鹽、碳源、氮源生長(zhǎng)因子葡萄糖氮源和碳源溫度、PH、滲透壓、O2等筆記

例題：下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的實(shí)驗(yàn)方案B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC

1、該實(shí)驗(yàn)方案的目的是

__________________________2、A是從小鼠的脾臟中取得

_______,該細(xì)胞能夠產(chǎn)生______3、取A細(xì)胞前，必須給小鼠

______________4、圖中B為_________過程，常用____________作為誘導(dǎo)劑，制備單克隆抗體B細(xì)胞抗體注射抗原

細(xì)胞融合滅活的病毒

例題：下圖為某同學(xué)根據(jù)雜交瘤技術(shù)的方法，設(shè)計(jì)的生產(chǎn)破傷風(fēng)桿菌的實(shí)驗(yàn)方案B體外培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞雜交瘤細(xì)胞足夠數(shù)量的細(xì)胞群注射到小鼠腹腔AC

5、雜交瘤細(xì)胞繼承___________的遺傳特性，既能__________,又能

_____________。6、C過程指細(xì)胞培養(yǎng)，該過程包括_____培養(yǎng)和_____培養(yǎng)兩個(gè)階段。7、單克隆抗體的特點(diǎn)是

__________________________8、將單克隆抗體與抗癌藥物相結(jié)合，制成___________

雙親細(xì)胞無(wú)限增殖分泌特異性抗體原代傳代特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可大量制備生物導(dǎo)彈5、選擇培養(yǎng)基（筆記）選擇培養(yǎng)基篩選、分離的細(xì)胞加入青霉素酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽金黃色葡萄球菌無(wú)氮培養(yǎng)基固氮菌無(wú)碳培養(yǎng)基自養(yǎng)型細(xì)菌依標(biāo)記基因，加入某種等抗生素導(dǎo)入了重組DNA的受體細(xì)胞加入次黃嘌呤、氨基嘌呤等雜交瘤細(xì)胞培養(yǎng)基成分含量NH4Cl4.6gK2HPO42.0gMgSO41.6g瓊脂15g蒸餾水1000ml乳糖5.0g培養(yǎng)基成分含量K2HPO42.0gMgSO41.6g瓊脂15g蒸餾水1000ml乳糖5.0gNH4Cl4.6g蛋白胨10.0g培養(yǎng)基成分含量K2HPO42.0gMgSO41.6g瓊脂15g蒸餾水1000ml乳糖5.0gNH4Cl4.6g培養(yǎng)基成分含量K2HPO42.0gMgSO41.6g瓊脂15g蒸餾水1000ml乳糖5.0gNH4Cl4.6g蛋白胨10.0g培養(yǎng)基成分含量K2HPO42.0gMgSO41.6g瓊脂15g蒸餾水1000ml乳糖5.0gNH4Cl4.6g微生物的分離：科赫的平板劃線法自然界中的微生物都是混雜生活在一起的，給研究和應(yīng)用帶來(lái)了很大困難。19世紀(jì)后期，德國(guó)細(xì)菌學(xué)家科赫發(fā)明了固體培養(yǎng)基，尤其是用瓊脂做凝固劑的固體培養(yǎng)基，成功解決這一問題，科赫將微生物樣品稀釋后，用針尖沾取少量稀釋菌液在固體培養(yǎng)基上連續(xù)劃線，由于微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)部位固定，不久就會(huì)在培養(yǎng)基表面長(zhǎng)出多種菌落，科赫推斷相同的菌落來(lái)自同一個(gè)種，于是挑選某一種菌落的微生物，經(jīng)過幾次相同的培養(yǎng)過程后，就得到了純種。應(yīng)用固體培養(yǎng)基，科赫分離出了炭疽芽孢桿菌、霍亂弧菌、結(jié)核桿菌等。1905年科赫因結(jié)核桿菌的研究成果而獲諾貝爾生理學(xué)獎(jiǎng)。單個(gè)或少數(shù)細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上大量繁殖時(shí)，就會(huì)形成一個(gè)肉眼可見、具有一定形態(tài)結(jié)構(gòu)子細(xì)胞群體，叫做菌落。菌落是鑒定菌種的重要依據(jù)。摸底考試復(fù)習(xí)安排閱讀筆記復(fù)習(xí)學(xué)案（重點(diǎn)是自己不會(huì)的、做錯(cuò)的習(xí)題）作業(yè)《2011高考總復(fù)習(xí)-學(xué)生用書-生物》P151—161

要求：填寫基礎(chǔ)知識(shí)、例題、考點(diǎn)訓(xùn)練《2011高考總復(fù)習(xí)-學(xué)生卷-生物》P107—112；P114—116（去掉12、13、19、23、25、30）1）制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基物質(zhì)牛肉膏蛋白胨NaCl瓊脂水重量5g10g5g20g定溶至100mL

稱量

按比例稱取各種物質(zhì)，注意事項(xiàng)：牛肉膏要放在稱量紙上稱量，牛肉膏、蛋白胨都易吸潮，稱取時(shí)動(dòng)作要迅速，稱后及時(shí)蓋上瓶蓋。計(jì)算溶化：先將牛肉膏連同稱量紙一起放入燒杯，加少量水，加熱至牛肉膏溶化并與稱量紙分離后，用玻璃棒取出稱量紙。加入蛋白胨和氯化鈉，用玻璃棒攪拌使之溶解，再加入瓊脂，攪拌，待溶解后，加自來(lái)水定溶至100mL。滅菌：將配制好的培養(yǎng)基放到錐形瓶中（瓶口加棉塞，包上牛皮紙），連同培養(yǎng)皿（3～5套，用幾層報(bào)紙包好）一起放到高壓鍋內(nèi)滅菌。2、制備培養(yǎng)基的操作排序①溶化（使各種原料、瓊脂等加熱溶化）②滅菌③調(diào)PH值④計(jì)算（各成分用量）⑤稱量⑥倒平板(培養(yǎng)基冷卻至50℃,倒入培養(yǎng)皿)

正確的操作順序：___________________④⑤①③②⑥為什么分離不同的微生物要采用不同的稀釋度？測(cè)定土壤中細(xì)菌的總量和測(cè)定土壤中能分解尿素的細(xì)菌的數(shù)量，選用的稀釋范圍相同嗎？原因：土壤中各類微生物的數(shù)量（單位：株/kg）是不同的。例如在干旱土壤中的上層樣本中：好氧及兼性厭氧細(xì)菌數(shù)約為2185萬(wàn)，放線菌數(shù)約為477萬(wàn)，霉菌數(shù)約為23.1萬(wàn)。結(jié)論：為獲得不同類型的微生物，就需要按不同的稀釋度進(jìn)行分離，同時(shí)還應(yīng)當(dāng)有針對(duì)性地提供選擇培養(yǎng)的條件。接種環(huán)接種針結(jié)果：培養(yǎng)一定時(shí)間后，該菌數(shù)量上升，再通過平板稀釋等方法對(duì)它進(jìn)