生藥學(xué)5章12藥學(xué)班課件

第五章生藥的鑒定1、生藥鑒定的目的和意義2、生藥鑒定的依據(jù)3、生藥鑒定的一般程序4、性狀鑒定5、顯微鑒定6、理化鑒定7、DNA分子標(biāo)記鑒定主要內(nèi)容：第一節(jié)生藥鑒定的意義生藥鑒定：

就是依據(jù)國家藥典，部頒和地方藥品標(biāo)準(zhǔn)以及有關(guān)資料規(guī)定或記載的生藥標(biāo)準(zhǔn)，對(duì)商品生藥或檢品進(jìn)行真實(shí)性、純度、品質(zhì)優(yōu)良度的檢定。1、發(fā)掘中醫(yī)藥學(xué)遺產(chǎn)，整理中藥品種

2、制訂生藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，促進(jìn)生藥標(biāo)準(zhǔn)化3、尋找和利用新藥資源，發(fā)展中藥事業(yè)第二節(jié)生藥鑒定的依據(jù)

《中華人民共和國藥典》

《中華人民共和國藥典》，簡(jiǎn)稱《中國藥典》，是國家藥品的法典。它規(guī)定了藥品的來源、質(zhì)量要求和檢驗(yàn)方法。全國的藥品生產(chǎn)、供應(yīng)、使用、檢驗(yàn)和管理部門等單位都必須遵照?qǐng)?zhí)行。從1963年版起，開始分一、二部，一部收載藥材和成方制劑，二部收載化學(xué)藥品、抗生素、生物制品和各類制劑。國家藥典對(duì)藥品的品種和質(zhì)量均有明確的規(guī)定，其鑒別和檢查手段不斷提高。

常用的鑒定方法有：來源（原植物、原動(dòng)物和礦物）鑒定、性狀鑒定、顯微鑒定及理化鑒定等方法。各種方法有其特點(diǎn)和適用對(duì)象，有時(shí)還需要幾種方法配合進(jìn)行工作，這要根據(jù)檢品的具體條件和要求靈活掌握。

第三節(jié)生藥鑒定的一般程序與方法一、生藥的取樣

1、取樣前詳細(xì)記錄品名、產(chǎn)地、規(guī)格、等級(jí)，檢查包裝的完整性、清潔程度及有無水跡、霉變或污染等情況。

2、取樣原則：總包件少于5件，逐包取樣；總包件5~99件，取樣5件；總包件100~1000件，按5%取樣。貴重藥無論多少件，要逐包取樣。

3、破碎的、粉末狀的或大小在1厘米以下的生藥，用采樣器取樣，每包至少在不同部位取2~3份樣品。

4、將抽取的樣品混勻，依對(duì)角線劃×，分為四等份，取對(duì)角兩份。1/3實(shí)驗(yàn)分析，1/3供復(fù)核，1/3留樣保存。二、生藥的常規(guī)檢查1、雜質(zhì)檢查包括非藥用部位、沙石、泥塊、塵土等，算重量百分比。2、水分測(cè)定烘干法、甲苯法、減壓干燥法3、灰分測(cè)定總灰分測(cè)定酸不溶性灰分4、浸出物測(cè)定水溶性浸出物醇溶性浸出物醚溶性浸出物5、揮發(fā)油測(cè)定甲法——適用于比重小于1.0的揮發(fā)油測(cè)定；乙法——適用于比重大于1.0的揮發(fā)油測(cè)定。大黃

RadixetRhizomaRhei兩千多年前，大黃就作為我國特產(chǎn)的藥材而聞名于中外，成為國際性生藥。據(jù)記載：我國在公元前2700年已有大黃應(yīng)用。公元前114年已經(jīng)陜西運(yùn)往歐洲。馬可波羅（1250~1323年）旅游東方時(shí)記載：“中國涼州（今甘肅）產(chǎn)大黃甚豐”。17世紀(jì)英國所用大黃為中國經(jīng)印度運(yùn)往英國。1687~1762年間，俄國政府以中國大黃為專賣品，鑒別甚嚴(yán)，并以本品為主制訂了“莫斯科標(biāo)準(zhǔn)”，凡不適于該標(biāo)準(zhǔn)的盡行剔去。由上可見，大黃在歷史上就在歐洲享有盛譽(yù)。歷史1、大黃始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，列為下品。因根大而色黃而故名。以后歷代本草均有記載。2、吳普謂：“生蜀郡（今四川）北部或隴西（今甘肅）。八月采根，根有黃汁?！?、蘇頌謂：“以蜀川錦紋者佳?！缬?，大者如碗，長一二尺?！脑麻_黃花（與今藥用大黃相符）亦有青紅似蕎麥者（與今掌葉大黃和唐古特大黃相符）。綜上所述：在植物來源方面：歷代本草所載的大黃主要是掌葉組的大黃,結(jié)合本草附圖，可認(rèn)為與現(xiàn)今藥用的正品大黃相符。在質(zhì)量方面：古本草認(rèn)為以四川北部和甘肅的大黃為好。關(guān)于混淆品：在唐代已發(fā)現(xiàn)河北產(chǎn)大黃與正品大黃不同，與現(xiàn)在河北產(chǎn)商品“山大黃”（原植物為華北大黃RheumfranzanbachiiMunt.）相當(dāng)。來源為蓼科（Polygonaceae）植物

掌葉大黃RheumpalmatumL.

唐古特大黃RheumtanguticumMaxim.exBalf.

藥用大黃RheumofficinaleBail1.的干燥根及根莖。注：Rheum（大黃屬）由Reuma“河”而來，示在伏爾加河的Rha地方有產(chǎn)。唐古特大黃藥用大黃三種大黃的不同點(diǎn)：主要是葉片和花的區(qū)別掌葉大黃——葉片掌狀半裂，每裂片具粗齒，圓錐花序頂生，分枝帖于莖，花小，紫紅色或帶紫紅色。唐古特大黃——極似掌葉大黃，但其葉片掌狀深裂，裂片再分裂，裂片通常窄長，呈三角狀披針形或窄線形（呈雞爪狀，故名雞爪大黃）。藥用大黃——與掌葉大黃相近，但本種葉片淺裂，（一般僅達(dá)1/4）淺裂片大齒形或?qū)捜切?，花較大，黃白色。產(chǎn)地掌葉大黃主產(chǎn)于甘、青、藏、川等地，多為栽培。唐古特大黃主產(chǎn)于青、甘、藏、川等地，野生或栽培。藥用大黃主產(chǎn)于川、貴、云、鄂、陜等省，栽培或野生。前2種習(xí)稱“北大黃”，后者習(xí)稱“南大黃”。商品中以掌葉大黃產(chǎn)量大，唐古特大黃次之，藥用大黃較少。

圓柱形、圓錐形、塊片狀、馬蹄形。表面黃棕色（未去粗皮者表面棕褐色，有橫皺紋及縱溝）蛋結(jié)表面光滑，有類白色網(wǎng)狀紋理（有的形容為檳榔花紋，又稱錦紋大黃）。斷面黃棕色；根莖髓部有星點(diǎn)（異型維管束），根無星點(diǎn)，有放射狀紋理。氣清香，味苦澀，嚼之粘牙，有砂粒感，唾液染成黃色。以質(zhì)堅(jiān)實(shí)、氣清香、味苦而微澀者為佳。性狀鑒定掌葉大黃橫向切斷面

星點(diǎn)皮部名詞術(shù)語：錦紋：指藥材表面或橫切面上類白色薄壁組織與紅棕色射線及星點(diǎn)交互排列形成的織錦狀紋理，習(xí)稱錦紋，如大黃。星點(diǎn)：指大黃根莖橫切面上髓部的異形維管束呈暗紅色的星芒狀小點(diǎn)，習(xí)稱星點(diǎn)。顯微鑒別根莖及橫切面：偶有殘存的木栓層皮層窄韌皮部寬廣，粘液腔外大內(nèi)小木質(zhì)部導(dǎo)管非木化髓部寬廣，有內(nèi)韌式的異型維管束；根無髓部，無異型維管束薄壁組織中含淀粉粒及草酸鈣簇晶粉末特征：大型的草酸鈣簇晶，直徑可達(dá)190um,棱角大多短鈍。大型的網(wǎng)紋導(dǎo)管多，非木化，亦有具緣紋孔及螺紋導(dǎo)管。淀粉粒眾多，單粒圓球形、長圓形，臍點(diǎn)大多成分蒽醌衍生物

游離型：為抗菌成分。大黃酸(rhein)、大黃素(emodin)、大黃酚(chrysophanol)、蘆薈大黃素、大黃素甲醚等。

結(jié)合型：為主要瀉下成分。雙蒽酮甙：番瀉甙(sennoside)A、B、C、D。瀉下作用最強(qiáng)。游離蒽醌類的葡萄糖甙。具一定的瀉下作用。鞣質(zhì)類有沒食子酰葡萄糖、沒食子酸、d-兒茶素等。為收斂成分，具收斂止血的作用。尚含四種大黃酸甙(rheinosides)A、B、C、D。亦為瀉下成分。

返回薄層鑒別對(duì)照品：大黃酸、大黃藥材吸附劑：硅膠H薄層板展開劑：石油醚-甲酸乙酯-甲酸（15：5：1）1、在與大黃酸對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的橙黃色熒光斑點(diǎn)。（置氨氣中熏后，日光下檢視，斑點(diǎn)變?yōu)榧t色。）2、在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的五個(gè)橙黃色熒光斑點(diǎn)。供試品色譜中5、質(zhì)地(texture)：生藥的質(zhì)地特征可分軟硬、堅(jiān)韌、疏松、致密、黏性或粉性等。6、斷面(fracture)：一是指生藥的自然斷面，二是指用刀橫切（或削）成的斷面。易折性、粉塵性、響聲、斷面特征。7、氣(odour)：揮發(fā)性物質(zhì)。8、味(taste)：口嘗的實(shí)際滋味。9、水試法：是利用生藥在水中發(fā)生沉浮溶解、顏色變化、透明度、膨脹性、旋轉(zhuǎn)性、粘性、酸堿變化等現(xiàn)象進(jìn)行鑒別。如紅花浸水中，水變金黃色不褪色。蘇木投熱水中，水顯鮮艷的桃紅色。秦皮浸水中，水浸液顯藍(lán)色熒光等作為鑒別依據(jù)。10、火試法：是利用生藥受火燃燒后產(chǎn)生的顏色，煙霧、響聲、膨脹、熔融聚散等變化現(xiàn)象進(jìn)行鑒別。第五節(jié)顯微鑒定

顯微鑒定是利用顯微鏡對(duì)生藥及成方制劑中藥味的組織、細(xì)胞或內(nèi)含物等特征進(jìn)行鑒別的一種方法。是生藥鑒別的重要手段之一。一、顯微鑒定常用的方法橫切片或縱切片：選取生藥適當(dāng)部位，用徒手或滑走切片法制作切片，用甘油醋酸試液、水合氯醛試液或其它試液處理后觀察。必要時(shí)可選用石蠟切片法制片觀察。對(duì)于根、根莖、莖藤、皮類等，一般制作橫切片觀察，必要時(shí)制縱切片。表面制片：鑒定葉、花、果實(shí)、種子、全草等類生藥，可取葉片、萼片、花冠、果皮、種皮制表面片，加適宜試液，觀察各部位的表面（皮）特征。方法為水合氯醛液，在小火焰上微微加熱透化。

粉末制片粉末生藥可選用甘油醋酸試液，水合氯醛試液或其他適當(dāng)試液處理后觀察。為了使細(xì)胞、組織能觀察清楚，需用水合氯醛液裝片透化。二、顯微鑒定要點(diǎn)

1.根類生藥

2.根莖類生藥

3.皮類生藥組織

4.葉類生藥細(xì)胞

5.花類生藥內(nèi)含物

6.果實(shí)類生藥

7.種子類生藥（一）根類生藥組織構(gòu)造：各種類型根類的區(qū)別：觀察根類藥材的組織構(gòu)造，可根據(jù)維管系統(tǒng)，區(qū)別其為雙子葉植物的初生構(gòu)造、次生構(gòu)造或單子葉植物根。粉末鑒定：以具有鑒別特征的細(xì)胞后含物、厚壁組織、分泌組織為重點(diǎn)，其次是表皮、下皮、根被或木栓組織、內(nèi)皮層、導(dǎo)管及管胞。包括：淀粉粒、結(jié)晶、分泌組織、纖維、石細(xì)胞、導(dǎo)管、木栓組織薄壁細(xì)胞（二）根莖類生藥組織構(gòu)造：觀察根莖類生藥的組織構(gòu)造，首先根據(jù)中柱、維管束的類型，區(qū)別其為蕨類植物、雙子葉植物或單子葉植物的根莖。粉末特征：根莖類粉末生藥的觀察，與根類相似。注意鱗莖、塊莖、球莖常含多量較大的淀粉粒，其形狀、大小、臍點(diǎn)、層紋以及復(fù)粒、半復(fù)粒、多臍點(diǎn)單粒(如貝母類)等特征是鑒別的重要依據(jù)。鱗莖的鱗葉表皮常可察見氣孔。單子葉植物根莖較易見到環(huán)紋導(dǎo)管。蕨類植物根莖只有管胞。（三）莖藤類生藥：

組織特征：雙子葉植物草本莖：表皮、皮層、中柱鞘、形成層、韌皮部、髓單子葉植物莖：最外層為表皮，其內(nèi)基本組織中散生許多有限外韌型維管束，無髓。裸子植物莖的構(gòu)造與雙子葉植物木本莖類似，但木質(zhì)部多為管胞，無導(dǎo)管（麻黃除外），韌皮部為篩胞、韌皮薄壁細(xì)胞。

粉末特征：莖藤類藥材組織構(gòu)造及粉末的顯微觀察注意點(diǎn)基本同根、根莖類。主要不同點(diǎn)：

(1)表皮細(xì)胞角質(zhì)層一般較厚。(2)纖維普遍存在。(3)石細(xì)胞常見。(4)草酸鈣結(jié)晶易見。(5)淀粉粒較少見。（四）皮類生藥：組織構(gòu)造：皮類生藥的組織構(gòu)造主要為周皮、中柱鞘及韌皮部。粉末鑒定：

皮類粉末生藥的觀察，一般不應(yīng)有木質(zhì)部的組織，如導(dǎo)管、管胞等。注意木栓細(xì)胞、纖維、石細(xì)胞、分泌組織及草酸鈣結(jié)晶。（五）木類生藥：組織構(gòu)造：橫切面：木射線寬度(細(xì)胞列數(shù))、密度，導(dǎo)管與木薄壁細(xì)胞的比例及分布型式，導(dǎo)管、木纖維的形狀、直徑等。徑向縱切面：木射線的高度及細(xì)胞類型、導(dǎo)管的類型，導(dǎo)管分子的長短、直徑及有無侵填體，木纖維的類型及大小、壁厚度、紋孔等。切向縱切面：木射線的寬度、高度及類型、導(dǎo)管、木纖維等。粉末特征：木類粉末藥材的觀察，以導(dǎo)管、韌型纖維、纖維管胞的形態(tài)特征，以及細(xì)胞后含物為主要鑒別點(diǎn)。（六）葉類生藥：葉類生藥的顯微鑒定，通常觀察橫切片(觀察表皮、葉肉及葉脈的組織構(gòu)造)、表面片(觀察表皮細(xì)胞、氣孔及各種毛茸的全形，以及葉肉組織的某些鑒別點(diǎn)，如草酸鈣結(jié)晶及其分布等)和粉末片。（七）花類生藥組織構(gòu)造：根據(jù)不同的目的物，將苞片、花萼、花冠、雄蕊或雌蕊等分別作表面制片，或?qū)⑼暾幕ㄗ鞅砻嬷破^察，也有將萼筒作橫切面觀察(如丁香)。粉末特征：以花粉粒、花粉囊內(nèi)壁細(xì)胞、非腺毛、腺毛為主要點(diǎn)，并注意草酸鈣結(jié)晶、分泌組織及色素細(xì)胞等。（八）果實(shí)類生藥：組織構(gòu)造：一般觀察果皮的組織特征。粉末特征：注意外果皮細(xì)胞的形狀、垂周壁的增厚狀況、角質(zhì)層紋理以及非腺毛、腺毛的有無及其特征；中果皮中分泌組織、厚壁組織及草酸鈣結(jié)晶的有無；內(nèi)果皮細(xì)胞的形態(tài)。果實(shí)類如包含有種子，其鑒別點(diǎn)參見種子類生藥。（九）種子類生藥：

種子類生藥的顯微鑒定，著重觀察種皮的構(gòu)造。種子類粉末生藥的觀察，注意種皮的表面觀及斷面觀形態(tài)特征。第六節(jié)理化鑒定

生藥的理化鑒定是利用物理的或化學(xué)的方法，對(duì)生藥及其制劑中所含主要化學(xué)成分或有效成分進(jìn)行定性和定量分析，來鑒定生藥品質(zhì)優(yōu)劣程度的一種方法。一般應(yīng)用于含不同化學(xué)成分生藥的鑒定，及生藥同名異物，或性狀相似又無明顯顯微特征的生藥鑒別。一、顯微化學(xué)反應(yīng)顯微化化學(xué)反應(yīng)是將生藥的干粉、手切片或浸出液少量，置于載玻片上，滴加某些化學(xué)試劑使產(chǎn)生沉淀或結(jié)晶，在顯微鏡下觀察反應(yīng)結(jié)果；或產(chǎn)生特殊的顏色，從而進(jìn)行鑒定。二、物理常數(shù)物理常數(shù)包括相對(duì)密度、旋光度、折光率、凝點(diǎn)、熔點(diǎn)等。對(duì)于油脂類、揮發(fā)油及樹脂類藥材的真實(shí)性和純度的鑒別具有特別重要的意義。三、微量升華利用生藥中所含的某些化學(xué)成分，在一定溫度下能升華的性質(zhì)，獲得升華物，在顯微鏡下觀察其形狀、顏色以及化學(xué)反應(yīng)作為鑒別特征。例如：茶葉的升華物，為白色針狀結(jié)晶（咖啡堿）。大黃的升華物為黃色針狀或羽狀結(jié)晶（蒽醌化合物），加堿液溶解并顯紅色。四、熒光分析熒光分析是利用生物中的某些化學(xué)成分，接受自然光或紫外光照射時(shí)，能發(fā)生熒光，其特性和強(qiáng)度可以進(jìn)行定性或定量分析。五、分光光度法分光光度法是通過測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在某些特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析的方法。1、紫外分光光度法2、可見分光光度法3、紅外分光光度法4、原子吸收分光光度法六、色譜法色譜法又稱層析法，是一種對(duì)混合物進(jìn)行分離和分析的物理化學(xué)方法，也是生藥化學(xué)成分分離和鑒別的重要方法之一。根據(jù)色譜分離原理分類可分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜與排阻色譜等。根據(jù)色譜分離方法分類可分為紙色譜法、薄層色譜法、柱色譜法、氣相色譜法、高效液相色譜法等。第七節(jié)DNA分子標(biāo)記鑒定DNA分子標(biāo)記的特點(diǎn)遺傳穩(wěn)定性：每一個(gè)體的任一體細(xì)胞均含有相同的遺傳信息。遺傳多樣性：不同物種已穿上的差異表現(xiàn)為四種堿基排列順序的變化?；瘜W(xué)穩(wěn)定性：在陳舊標(biāo)本中所保存