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文檔簡介
獸醫(yī)臨床病理學(xué)概述課程名稱獸醫(yī)臨床病理學(xué)是獸醫(yī)臨床診斷學(xué)的一個重要分支。它主要是運(yùn)用病理學(xué)的研究方法,從實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)的角度,來診斷和分析動物疾病的一門科學(xué)。實(shí)際上可稱之為“獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)”或“獸醫(yī)臨床檢驗(yàn)”。發(fā)展歷程從主觀f客觀;從手動f自動;從復(fù)雜f簡單。最早的臨床檢驗(yàn)始于醫(yī)生對病人尿液的肉眼觀察,經(jīng)歷漫長的發(fā)展,以后逐漸演變成目前的全自動化超微量的臨床檢驗(yàn)。二十世紀(jì)以來,醫(yī)學(xué)領(lǐng)域大量地引進(jìn)現(xiàn)代科學(xué)技術(shù),加快了實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展步伐。特別是近20年來,電子技術(shù)、計(jì)算機(jī)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物醫(yī)學(xué)工程等多學(xué)科的發(fā)展促進(jìn)了實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)科的飛速發(fā)展?,F(xiàn)在已達(dá)到了一個較高的水平現(xiàn)有的參考資料①VeterinaryClinicalPathology美國肯色斯洲立大學(xué)獸醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)主任EmbertH.Coles(科爾斯)教授所著。綜合了動物病理生理學(xué)、實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)等資料;介紹了獸醫(yī)臨診實(shí)驗(yàn)室檢查技術(shù);分析和解釋了各種檢測數(shù)據(jù)和檢驗(yàn)結(jié)果;對獸醫(yī)教學(xué)、科研和臨床實(shí)踐都有應(yīng)用和參考價值?!东F醫(yī)臨床病理學(xué)》王小龍主編,中國農(nóng)業(yè)出版社出版,國內(nèi)唯一的教材;《獸醫(yī)臨床檢驗(yàn)技術(shù)》郭定宗主編,中國農(nóng)業(yè)大學(xué)出版社;獸醫(yī)臨床病理學(xué),湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)自編教材。二、臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展趨勢1.檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的現(xiàn)狀檢驗(yàn)人員結(jié)構(gòu)和素質(zhì)逐步提高全國現(xiàn)有27所院校設(shè)有醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè),有3個博士點(diǎn)和17個碩士點(diǎn),每年畢業(yè)的學(xué)生上千人。在崗的檢驗(yàn)人員素質(zhì)得到了普遍提高。質(zhì)量控制管理體系逐步趨于完善保證了結(jié)果的準(zhǔn)確性和可比性。設(shè)備和技術(shù)得到發(fā)展檢驗(yàn)儀器的大量引進(jìn)和運(yùn)用,使醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)現(xiàn)了自動化、微量化、標(biāo)準(zhǔn)化,原來無法測定的項(xiàng)目現(xiàn)在能得到了準(zhǔn)確測定,而且檢驗(yàn)結(jié)果更加快速、客觀、準(zhǔn)確。醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)存在的問題檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)體系不完整對檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的理論研究重視不夠,醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)?zāi)壳霸谝欢ǔ潭壬线€只能稱之為“實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)”,尚未形成具有自己特色的新的理論體系,與其他學(xué)科的交流融合也不夠,阻礙了檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)獲得更大的發(fā)展。資源沒有合理利用機(jī)構(gòu)設(shè)置重復(fù),人員臃腫,力量分散,資源浪費(fèi)。質(zhì)量控制不到位質(zhì)控的意識逐步淡化,認(rèn)為有了自動化儀器和進(jìn)口試劑盒,儀器做出的結(jié)果是“準(zhǔn)確”的,無需質(zhì)量控制。人員素質(zhì)存在問題由于醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)高等教育起步晚,現(xiàn)在我國從事醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)工作的主體相當(dāng)一部分人甚至未受過任何專門教育,整體素質(zhì)差;高級醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)人才嚴(yán)重缺乏,制約著醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展和應(yīng)用,影響臨床醫(yī)療工作的質(zhì)量。醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)的發(fā)展趨勢向信息化發(fā)展在臨床檢驗(yàn)領(lǐng)域,建立以收集加工信息,實(shí)現(xiàn)信息共享為目的的信息系統(tǒng)已是必然趨勢。建立檢驗(yàn)信息系統(tǒng),將對推動我國檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)的發(fā)展有著重大的意義。向自動化發(fā)展目前一般都是單機(jī)的自動化f聯(lián)機(jī)自動化f構(gòu)成流水作業(yè)形成大規(guī)模的全實(shí)驗(yàn)室自動化f進(jìn)入電腦網(wǎng)絡(luò)f提供給臨床科室。三、獸醫(yī)臨床病理學(xué)的現(xiàn)狀及發(fā)展趨勢臨床檢驗(yàn)的現(xiàn)狀新方法和自動化儀器得到廣泛應(yīng)用如:WBC自動分類儀:計(jì)數(shù)1000個WBC,且得出百分比;如:紙片法檢測尿液、糞便,檢查項(xiàng)目多、很方便;如:離子的測定最初用滴定法f火焰光度計(jì)法f離子選擇電極法f原子吸收分光光度法檢驗(yàn)質(zhì)量逐步提高自動化檢驗(yàn),減輕了勞動強(qiáng)度,減少了檢驗(yàn)誤差,從而保證了檢驗(yàn)質(zhì)量。生化檢驗(yàn)趨向用酶做為檢驗(yàn)試劑如:酶法測定Glu,已在全國范圍內(nèi)廣泛采用;。酶法測定已延伸到了免疫學(xué)領(lǐng)域如:ELLSA檢測多種病毒性疾??;放射免疫法測定激素等。免疫學(xué)檢測發(fā)展迅速如:檢測體液和血液中的IgG,已成為檢驗(yàn)的常規(guī)項(xiàng)目;如:用血凝、對流電泳、免疫電泳等檢測抗原抗體,特異性高、靈敏度好。酶學(xué)檢驗(yàn)測定項(xiàng)目不斷增加;檢測的樣本由體液向細(xì)胞方面擴(kuò)展。獸醫(yī)臨床檢驗(yàn)的發(fā)展趨勢項(xiàng)目多檢驗(yàn)的項(xiàng)目將會越來越多;要求高對檢驗(yàn)工作的要求將會越來越高;如:心血管疾病、骨科疾病、胚胎移植、癌癥等的診斷與治療,都有求于實(shí)驗(yàn)室的檢驗(yàn);如:藥物的監(jiān)測、監(jiān)控;B-興奮劑的檢測等。結(jié)論快報告檢驗(yàn)結(jié)果要快。也就是說檢驗(yàn)方法不但要求操作簡單、結(jié)果準(zhǔn)確,而且報告檢驗(yàn)結(jié)果要快。獸醫(yī)臨床檢驗(yàn)的研究方向改進(jìn)檢驗(yàn)方法,提高檢驗(yàn)的準(zhǔn)確性;建立新的檢驗(yàn)項(xiàng)目;協(xié)助臨床對疾病作深層次的研究;對治療進(jìn)行監(jiān)測、監(jiān)控;對預(yù)后進(jìn)行監(jiān)測等。第二節(jié)血液學(xué)檢驗(yàn)一、造血器官與造血1.造血器官及功能1.1骨髓幼畜骨髓均呈紅色,說明造血功能旺盛,胞生成多;高齡畜只有肋骨、顱骨、盆骨才有紅骨髓其他部位則為黃骨髓,表明造血功能已下降。
功能:骨髓制造RBC、WBC、M、Pt。1.2淋巴結(jié)功能:制造L&組織細(xì)胞;吞噬細(xì)胞和異物;破壞衰老的RBC;產(chǎn)生抗體等。1.3脾臟功能:制造L&M;粒巨噬祖細(xì)胞淋巴系祖細(xì)胞多能造血干細(xì)胞貯藏血液:收縮f使血中RBC增多;處理衰老的RBC和異物;由Hbf膽紅素;貯存Fe,并參與Fe的代謝;產(chǎn)生抗體等。粒巨噬祖細(xì)胞淋巴系祖細(xì)胞多能造血干細(xì)胞不經(jīng)過胸腺經(jīng)過胸腺’在胸腺素的刺激下胸腺依賴l(T細(xì)胞)細(xì)胞免疫骨髓來原性L(B細(xì)胞)體液免疫(Lymphocyte)f原粒f單幼f中幼粒f晚幼f粒細(xì)胞(granuloyte)f原單核f幼單核f單核C(Monooyte)不經(jīng)過胸腺巨核系祖Cf原巨核f幼巨核f顆粒型f產(chǎn)板型f血小板(Platelets)'■■■紅系祖Cf原紅f原幼f中幼f晚幼f網(wǎng)質(zhì)紅f紅細(xì)胞(Erythrocyte)、血細(xì)胞發(fā)育演變規(guī)律1.細(xì)胞體 由大變??;2.細(xì)胞漿數(shù)量由少變多;顏色由深變淺:RBC深蘭f蘭紅f桔紅;L 深蘭f天蘭;M 深蘭f煙灰色。胞漿顆粒從無到有3.細(xì)胞核大?。河纱蟮叫?RBC核最終消失形狀:圓形橢圓f凹陷、分葉(粒細(xì)胞)f折疊(M)f破裂消失(RBC)核仁:從有到無原始細(xì)胞均有核仁,隨著細(xì)胞的成熟,核仁逐漸模糊,最終消失。三、血細(xì)胞的代謝與破壞1.RBC1.1成熟紅細(xì)胞代謝的特點(diǎn)1.1.1糖原無氧酵解經(jīng)路成熟RBC的主要能量來源是血漿葡萄糖。由于RBC內(nèi)沒有線粒體有氧氧化徑路,酵解是RBC獲得能量的基本過程°lmol的Glu通過酵解產(chǎn)生乳酸的過程可獲得2mol的ATP。酵解過程中某些酶的缺乏,可引起貧血。磷酸己糖通路通過這條代謝路徑,RBC中的谷胱甘肽維持在還原狀態(tài),能防止氧化劑對巰基的破壞作用,從而保護(hù)細(xì)胞膜中含巰基蛋白和含巰基的酶不被氧化。磷酸己糖通路產(chǎn)物還原型輔II(NADPH)能使紅細(xì)胞中氧化型谷胱甘肽(GSSG)還原成還原型谷胱甘肽(GSH)。這條路徑功能低下,可因RBC還原型輔II(NADPH)含量減少而產(chǎn)生溶血而導(dǎo)致貧血,RBC中便出現(xiàn)海恩茨小體。1.1.3高鐵血紅蛋白(MHb)還原徑路:通過這條徑路使血紅蛋白變成還原狀態(tài),而還原型Hb對于氧的運(yùn)輸則是不可缺少的。由于某種酶的缺乏,形成高鐵Hb,使RBC失去攜帶氧的能力,引起動物呼吸困難(發(fā)紺)2,3—二磷酸甘油酸支路(2,3—DPG)RBC糖酵解與其他細(xì)胞不同,RBC糖酵解能生成2,3—二磷酸甘油酸。2,3—DPG具有調(diào)節(jié)RBC運(yùn)輸氧的功能。當(dāng)2,3—DPG升高時,Hb對氧的親和力降低,促進(jìn)氧由RBC向組織細(xì)胞釋放。此乃是一種代償機(jī)制,有利于業(yè)已降低了的Hb運(yùn)送更多的氧給組織器官。維生素對RBC成熟的影響RBC是體內(nèi)更新較快的細(xì)胞,各種動物RBC的壽命從45?160天不等。RBC分裂增殖的基本條件是DNA的合成,而葉酸、VB12對其合成均具有重要的影響。當(dāng)葉酸缺乏時,核苷酸特別是胸腺嘧啶脫氧核糖核苷酸減少,致使RBC中DNA合成受阻,細(xì)胞分裂增殖速度下降,細(xì)胞體積增大,核內(nèi)染色質(zhì)疏松,引起巨紅細(xì)胞性貧血。當(dāng)VB12缺乏時,轉(zhuǎn)甲基反應(yīng)受阻,從而影響胸腺嘧啶脫氧核糖核酸的合成,同樣可引起巨紅細(xì)胞性貧血。其他某些營養(yǎng)物質(zhì),如銅、VB6、VE等缺乏,均會對RBC的正常代謝產(chǎn)生影響。RBC的破壞RBC在動物體內(nèi)是擔(dān)負(fù)著一定生理功能的生命體,它不停地進(jìn)行新陳代謝,因此不斷地產(chǎn)生、衰老乃至破壞。隨著RBC日齡的增加,其酶的含量與膜的結(jié)構(gòu)相應(yīng)地發(fā)生著變化,使其變形能力降低,脆性增加,易于在脾肝中被破壞和清除。清除途徑主要是通過巨噬細(xì)胞吞噬徑路被清除;其次是通過血管內(nèi)溶血而清除:
RBC-Hb(游離膽紅素、球蛋白、Fe);溶血性貧血的患病動物主要是取第二條路徑。1.3RBC的平均壽命:畜種紅細(xì)胞平均壽命(d)牛160綿羊(成年)70-153綿羊(3月)45山羊125馬140-150豬62狗107貓68人類120兔57-59大鼠55小鼠20-302.白細(xì)胞2.1白細(xì)胞分類B—BasophilLeukocyteE—EsinophilLeukocyteLeukocyte N—Neutrophil LeukocyteM—MonocyteL—Lymphocyte2.2各類白細(xì)胞的功能及動力學(xué)B—Basophil Leukocyte功能:目前尚不十分清楚。一般認(rèn)為嗜堿粒細(xì)胞和肥大細(xì)胞是誘生炎癥介導(dǎo)物的源泉,是產(chǎn)生肝素和血漿脂蛋白激活劑的唯一場所。動力學(xué):B在大多數(shù)動物體內(nèi)是稀少的,而某些幾乎沒有組織肥大細(xì)胞的動物則具有較多的B。肥大細(xì)胞并非從B衍生而來,而是來源于骨髓中的所謂“持續(xù)細(xì)胞”B在骨髓中總是和N同時相伴產(chǎn)生,然而B在骨髓中的貯存卻是很少見的。E—EsinophilLeukocyte功能:①解毒E它能抑制一些諸如組織胺之類的化學(xué)介導(dǎo)物.這些化學(xué)介導(dǎo)物通常是由速發(fā)型過敏反應(yīng)或遲發(fā)型過敏性疾病中的肥大細(xì)胞所釋放,因此E常常會出現(xiàn)在抗原一抗體反應(yīng)的部位而起解毒作用。具有殺死某些寄生蟲的特性E含有血纖維蛋白溶酶原激活物,它的吞噬和殺菌特性與N相似,但對細(xì)菌則不具有保護(hù)性抗感染的能力。動力學(xué):在骨髓中E的產(chǎn)生過程和N相類似,酸性定向細(xì)胞能促進(jìn)E生成素的產(chǎn)生;此外,敏感化了的淋巴細(xì)胞對此也有作用。在骨髓中貯存的E是很少的,E隨干細(xì)胞數(shù)量的增加而增加,在骨髓中存在的時間比N短,在血液中保留的時間也很短,一般為數(shù)分鐘至數(shù)小時。E主要存在于邊緣池中,只有極少的再循環(huán)現(xiàn)象。N—NeutrophilLeukocyte功能:①具有吞噬和殺滅微生物的作用對二個過程起作用:一是對纖維蛋白原和補(bǔ)體、復(fù)合物的細(xì)胞外消化過程;二是刺激產(chǎn)生炎癥介質(zhì)過程。②在某些病理發(fā)生過程中起作用如風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎,腎小球性腎炎等。動力學(xué):在毛細(xì)血管后小靜脈里,N的移動速度比RBC和血漿要慢,因此N在血管內(nèi)分布是極不均勻,毛細(xì)血管后小靜脈內(nèi)N的數(shù)量較血管內(nèi)N多。N粘附在血管內(nèi)皮細(xì)胞并構(gòu)成邊緣N池;通常白細(xì)胞總數(shù)計(jì)數(shù)不包括邊緣N池中的白細(xì)胞。在動脈和靜脈管內(nèi),N的移動速度與血漿和RBC的移動速度相同,這部分N構(gòu)成了循環(huán)N池,因此,常規(guī)的白細(xì)胞計(jì)數(shù)與分類計(jì)數(shù)之結(jié)果大致代表了循環(huán)N庫的狀態(tài)。在健康動物,衰老的N被肝、脾、骨髓和巨噬細(xì)胞所破壞,其中有些通過粘膜的分泌和排泄而被排出體外。M—Monocyte功能:M由骨髓而來,它們在循環(huán)血中逗留,運(yùn)抵組織時能變成巨噬細(xì)胞。吞噬和消化外源性的顆粒物質(zhì)和衰老、死亡的細(xì)胞;合成某些補(bǔ)體、轉(zhuǎn)鐵蛋白、白細(xì)胞介素、溶酶等所以人們認(rèn)為M是干擾素的主要來源,在免疫反應(yīng)的許多環(huán)節(jié)中起作用.如誘導(dǎo)免疫反應(yīng)、刺激B淋細(xì)胞等。單核巨噬細(xì)胞還具有抗腫瘤的作用。動力學(xué):M在血液中的分布和N—樣,是不均勻的,亦有循環(huán)M池和邊緣M池之分。人的比率為1:3.5;M在血液中的平均停留時間:人約為12h,??赡軙蚤L些。多數(shù)動物尚無上述數(shù)據(jù),尚待測定。L—Lymphocyte分布:L通常分布在淋巴結(jié)、脾臟、胸腺、扁桃體、胃腸道的淋巴組織,支氣管的淋巴組織、骨髓和血液中。循環(huán):在各類白細(xì)胞中,L是唯一能反復(fù)循環(huán)的一種白細(xì)胞。絕大多數(shù)T淋細(xì)胞是反復(fù)循環(huán)的,反復(fù)循環(huán)的基本路徑是:淋巴結(jié)的傳出管一胸導(dǎo)管一右側(cè)淋巴管一血液一經(jīng)淋巴皮質(zhì)的小靜脈移行一再回到傳出管。而血液中大部B淋巴細(xì)胞只是循環(huán)淋巴細(xì)胞群體中的暫時組成成員,因?yàn)橹饕糠值腂淋巴細(xì)胞存在于淋巴組織中。功能:T淋巴細(xì)胞一細(xì)胞介導(dǎo)免疫B淋巴細(xì)胞一體液免疫四、血液學(xué)檢驗(yàn)1.血常規(guī)ESR—ErythrocyteSedimetationRateHb—HemoglobinRBC—RedBloodCellsWBC—WhiteBloodCellsDC—DifferentialCounteRBC+Hb:了解機(jī)體貧血的嚴(yán)重程度;判斷貧血的性質(zhì)。RBC.Hbf臨床少見(屬于相對性)見于各種原因引起的脫水;RBC.Hb;見于各種貧血。下降的程度與貧血成正比。RBC計(jì)數(shù)結(jié)合Hb含量的測定求出其血色指數(shù),診斷意義更大。被檢動物Hb克數(shù)/健康動物Hb數(shù)血色指數(shù)=——————————————被檢動物RBC數(shù)/健康動物RBC數(shù)正常值為1.0(0.8~1.2)若>1.2,即為高色素性貧性,說明每個RBC攜帶Hb多;<0.8,即為低色素性貧性,說明每個RBC攜帶Hb少;高色素性貧血——溶血性貧血;低色素性貧血——出血性貧血。貧血的分類按細(xì)胞大小分:巨細(xì)胞性、正細(xì)胞性、小細(xì)胞性貧血按Hb濃度分:高色素性貧血、低色素性貧血。按骨髓反應(yīng)分:再生性、再生障礙性貧血:按病原、機(jī)理分:失血性、溶血性、細(xì)胞再生減少或再生缺陷性、營養(yǎng)性貧血等。貧血的診斷病史調(diào)查:有否用過某些藥物(馬用過硫化二苯胺)或采食某些植物(牛食用過多十字花科植物)和有毒化學(xué)物質(zhì)等。體征檢查:可視粘膜蒼白、衰老,雄性動物功能喪失、運(yùn)動耐力下降,心跳加快,呼吸迫促,對寒冷刺激特別敏感等。實(shí)驗(yàn)室檢查:PCV最為簡易;Hb+RBC可鑒別貧血的種類;紅細(xì)胞指數(shù),紅細(xì)胞形態(tài)乃至骨髓檢驗(yàn)等。貧血的特征失血性貧血急性有出血灶或隱性出血或多部位出血,指示血液凝固異常;動物可能發(fā)生低血容量性休克;PCV、RBC、Hb等均下降。慢性緩慢發(fā)生,不會出現(xiàn)低血容量血癥;PCV值小于正常值的低限;再先性反應(yīng)與低血漿蛋白血癥的強(qiáng)度不如急性失血明顯,可能出現(xiàn)持續(xù)性血小板增多癥。溶血性貧血血液寄生蟲無漿體?。憾R游锏尿纭⑾?、虱子等;梨形蟲病:巴貝斯原蟲;附紅細(xì)胞體:多發(fā)于綿羊、牛、豬細(xì)菌感染鉤端螺旋體病和溶血性梭菌感染;病毒感染馬傳貧間歇熱、黃疸、水腫和粘膜出血。化學(xué)藥品過量使用銅、鉛、硫化二苯胺、皂角苷、萘和某些藥物。如:乙酰、苯胺、硝基呋喃妥因、914及磺胺等。某些植物如蓖麻籽、櫟樹葉、毛莨屬植物、旋花植物、秋水仙等。代謝性疾病高產(chǎn)奶牛的產(chǎn)后Hb尿癥;免疫介導(dǎo)反應(yīng)如新生幼畜的免疫溶血性疾病,不相容性的輸血反應(yīng)和自身免疫溶血性貧血等。紅細(xì)胞生成減少或缺陷所致的貧血屬非再生性貧血,是因骨髓異常而不能有效地進(jìn)行紅細(xì)胞的生成作用,一般其病程較長,隱匿地發(fā)生。特點(diǎn)血細(xì)胞前體缺乏:多能干細(xì)胞、定向干細(xì)胞、促紅細(xì)胞生成素等營養(yǎng)物質(zhì)缺乏:如鐵、鉆、VB6、VB12等;骨髓功能不全。營養(yǎng)性貧血:并非獨(dú)立性疾病,而是某些疾病的并發(fā)癥。特點(diǎn)主要礦物質(zhì)缺乏如鐵、銅、鉆等;維生素缺乏如VB6、VB12等;主要營養(yǎng)物質(zhì)缺乏如蛋白質(zhì)。WBC+DC了解機(jī)體的感染情況,了解機(jī)體造血功能及抵抗力。WBCf各種感染: 防御機(jī)能f,造血f;注射異種Pro:刺激過度,造血f;急性出血: 刺激一造血f;白血病、敗血癥:RBC破壞f—WBC相對fWBC;病毒性傳染病 WBC生成(;慢性中毒(氯霉素)WBC生成(;瀕死期 機(jī)體功能低下。核指數(shù):系指未成熟的嗜中性粒細(xì)胞與成熟N之比。正常值為:0.1。如果核指數(shù)>0.1,稱核左移,表明未成熟的Nf;核指數(shù)<0.1,稱核右移,表明成熟的Nf。如果WBCf核左移:造血f,抵抗力強(qiáng);WBC(核左移:造血(,抵抗力/核右移:嚴(yán)重的化膿性感染、嚴(yán)重的貧血。2.血液其他檢驗(yàn)紅細(xì)胞壓積容量的測定(PCV-PackedCellVolume)PCVf脫水。PCVV40%,輕度脫水;PCV40-45%,中度脫水;PCV> 50%,高度脫水。PCV;貧血。血小板計(jì)數(shù)(Pt-Platelets)了解機(jī)體凝血的情況網(wǎng)絡(luò)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)(Rct-Reticulocytecount)了解機(jī)體的造血功能,推斷貧血的治療效果Rctf造血f缺Fe性貧血用Fe治療有效;造血凝血時間(CT-Clottingtime)CT延長:凝血因子缺乏CT縮短:有血栓形成的可能。出血時間(BT-Bleedingtime)了解血管壁的完整性、收縮功能、血小板數(shù)目等。紅細(xì)胞平均值的計(jì)算;用于貧血的形態(tài)學(xué)分類。2.6.1平均紅細(xì)胞體積(MCV-MeanCorpuscularVolume)表示每個RBC的平均體積,以飛升(fL)為單位,1ml=1012fLMCV=每升血中RBC體積(L/L)X1015每升血中的RBC數(shù) 例如:PCV=33%,而330(ml/L)=0.33X103(L/L)RBC=7.5X1012/LMCV=0.33X1015/7.5X1012=44(fL)若MCVf:骨髓增生性疾?。荒承└闻K疾?。籚缺乏病等。MCV;:Cu、Fe缺乏癥。2.6.2平均RBC紅血蛋白含量(MCH-MeanCorpuscularHemoglobin)表示每個RBC平均含有的Hb量,以皮克(pg)為單位。1g=1012pgMCH=每升血液的Hb量(g/L)X1012/每升血液的RBC數(shù)例如:Hb=120g/LRBC=7.5X1012/LMCH=120X1012/7.5X1012=16(pg)若MCHf說明每個RBC平均含有的Hb量f,屬于溶血性貧血說明每個RBC平均含有的Hb量(,屬于缺Fe性貧血2.6.3平均RBC.Hb濃度(MCHC-MeanCorpuscularHemoglobinConcentration)表示每升紅細(xì)胞中Hb濃度,以克/升(g/L)為單位MCHC=每升血中Hb量(g/L)/每升血中RBC體積(L/L)例如:Hb=120g/LPCV=0.33(L/L)MCHC=120/0.33=363.6(g/L)若MCHCf見于溶血性貧性;MCHC;見于缺Fe性貧血、網(wǎng)織RBC增多癥。第三節(jié)臨床化學(xué)檢驗(yàn)一、臨床化學(xué)自動分析儀世界上第一臺用于臨床生化檢驗(yàn)的自動分儀,是美國泰克尼康公司TECHNICON),于1957年生產(chǎn)的,儀器名為AutoAnalyzer。是一臺單通道、連續(xù)、流動式自動分析儀。最初只用于Glu.BUN測定。報告結(jié)果是光密度值。1964年,泰克民康公司又生產(chǎn)出連續(xù)多道自動分析儀SMA(SequentialmultipleAutoanalyzer),該儀器由電子計(jì)算機(jī)控制,每小時測150個樣本,每個樣本同時測定20個項(xiàng)目,使連續(xù)流動分析達(dá)到了一個新的水平。65年以后,各種自動分析儀器應(yīng)運(yùn)而生。1.目前臨床常用的自動分析儀器有:生化分析儀:有全自動、半自動之分國產(chǎn):上海、北京等,4萬元以上;進(jìn)口:美國、日本、法國、意大利、瑞士等,10-15萬元;(2)血?dú)馑釅A分析儀;(3)血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀;(4)5020型血紅蛋白儀:(5)全自動電位滴定儀:DL58 15萬元/臺(6)全自動血液細(xì)胞分析儀:BC-2000,15萬元/臺2.評價自動分析儀器的原則:(1)方法先進(jìn)(2)重復(fù)性好;(3)要有準(zhǔn)確重復(fù)的分析系統(tǒng);(4)能自動定時;(5)結(jié)果報告醒目、直觀;(6)適應(yīng)范圍廣,一機(jī)多用(7)靈敏性好;(8)處理能力強(qiáng);(9)實(shí)用。二、質(zhì)量控制1.質(zhì)量控制的目的保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確可靠,同時起到:(1)了解試驗(yàn)結(jié)果精密度的動態(tài)情況;(2)觀察試驗(yàn)結(jié)果漂移及增降趨勢;從而采取措施預(yù)防嚴(yán)重誤差的出現(xiàn)。(3)與國家規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)物進(jìn)行比較,以了解和校正其準(zhǔn)確度;(4)為不同測定方法的比較及選擇提供參考;(5)監(jiān)測儀器的工作狀態(tài);(6)了解操作者的操作水平;(7)作實(shí)驗(yàn)室間的比較,以利相互交流和提高。2.與質(zhì)量控制有關(guān)的概念【誤差】指的是實(shí)驗(yàn)結(jié)果與真實(shí)數(shù)值之間的差異。系統(tǒng)誤差(恒定誤差)分析過程中一些經(jīng)常性出現(xiàn)的原因所成。儀器使用不當(dāng)分析方法不完善試劑不純環(huán)境改變操作失誤隨機(jī)誤差(偶然誤差)事先無法預(yù)料,出現(xiàn)誤差的大小沒有規(guī)律,完全符合概率論定律。這種誤差通過嚴(yán)格操作規(guī)程,認(rèn)真細(xì)致的工作是可以減少。當(dāng)測定次數(shù)增多時,此時誤差可相應(yīng)抵消。過失誤差由工作不慎或操作不當(dāng)而引起。如配錯試劑,搞錯樣本,操作不正確,讀數(shù)、記錄或計(jì)算有誤等。絕對誤差即測定值與真值之差。如:稱量為1.655g,實(shí)重1.654g,絕對誤差為O.OOlg。相對誤差:絕對誤差在真實(shí)數(shù)值中所占的百分率如上例:相對誤差=0.001/1.654X100%=0.06%準(zhǔn)確度】測定值與真值之間的符合程度。誤差愈小,準(zhǔn)確度越大?!揪芏取棵看螠y定值與算術(shù)平均值之間的符合程度。通常把測定值與算術(shù)平均值之間的差異稱之為偏差偏差愈小,精確度愈高。3.減少誤差的措施糾正系統(tǒng)誤差校準(zhǔn)儀器和量具:作陰性、陽性對照;c用多種方法相互比較:d用參照標(biāo)準(zhǔn)樣本檢驗(yàn)。減少偶然誤差精心操作,嚴(yán)格執(zhí)行操作規(guī)程;固定使用已校正的儀器;重復(fù)測定取均值等。消除過失誤差作好原始記錄;建立核對檢查制度;制訂統(tǒng)一的操作規(guī)程,人人遵守。三、臨床化學(xué)檢驗(yàn)(一) .常用的檢驗(yàn)項(xiàng)目蛋白質(zhì); ②葡萄糖;③脂類; ④無機(jī)離子有機(jī)物:BUN,尿酸,肌肝、肌酸;微量元素:Cu、Fe、Mn、Zn、Se、Co、Mo;血?dú)夥治雠c酸堿平衡等。(二) 各項(xiàng)檢驗(yàn)【蛋白質(zhì)】研究進(jìn)展迅速蛋白質(zhì)的合成、降解、轉(zhuǎn)換更新和代謝調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)生理功能的進(jìn)一步研究。蛋白質(zhì)的遺傳變異,通過它了解遺傳特征。以新技術(shù)對血漿蛋白質(zhì)進(jìn)行微量和特異檢測分析。在進(jìn)化與個體發(fā)育的研究中,發(fā)現(xiàn)不少正常胎兒期蛋白可以在惡性腫瘤患者重新出現(xiàn)。蛋白質(zhì)實(shí)際用于組織與細(xì)胞培養(yǎng)。在腫瘤的發(fā)病學(xué)研究中廣泛涉及血漿蛋白質(zhì)蛋白質(zhì)的功能可概括為:營養(yǎng)作用維持血漿膠體滲透壓維持血漿正常pH值運(yùn)輸作用免疫與防御功能催化作用代謝調(diào)控凝血、抗凝血及纖溶作用等。3?蛋白質(zhì)的分類鹽析法:白蛋白和球蛋白電泳法:白蛋白、al、a2、B、Y球蛋白Alb.也誼R/4?測定方法凱氏定氮法(參考標(biāo)準(zhǔn)方法)消化用濃硫酸將蛋白質(zhì)消化為硫酸銨;(耗時)蒸餾用堿性溶液堿化消化液并蒸餾揮發(fā);吸收用酸性溶液(硼酸)吸收氣態(tài)氨(使[H+H)滴定用已標(biāo)定的無機(jī)酸滴定,計(jì)算總氮量定蛋白(總氮量-非蛋白氮)X6.25=蛋白含量雙縮脲比色法(血漿總蛋白測定推薦方法)原理蛋白質(zhì)中的肽鍵(-CONH-)在堿性條件下與Cu2+絡(luò)合成紫紅色化合物,產(chǎn)生的顏色在一定范圍內(nèi)與蛋白質(zhì)含量成正比。此反應(yīng)和二分子尿素縮合后的產(chǎn)物雙縮脲(H2N-CO-NH-CO-NH2)與堿性銅溶液作用形成紫紅色化合物的反應(yīng)相似,故稱為雙縮脲反應(yīng)。此方法簡便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好,但靈敏度較其它方法稍差,是目前臨床上最常規(guī)的方法。紫外分光光度法原理蛋白質(zhì)分子中的酪氨酸和色氨酸等芳香族氨基酸可使蛋白質(zhì)溶液在280nm處有一吸收峰??捎糜跍y定蛋白質(zhì)但需避免核酸干擾。優(yōu)點(diǎn)敏感而簡便,可保留蛋白生物活性。需紫外分光光度計(jì)及石英比色皿。缺點(diǎn)各種蛋白質(zhì)中芳香族氨基酸含量和比例不同;在280nm測定易受游離色aa和酪aa以及尿酸和膽紅素的干擾;導(dǎo)致準(zhǔn)確性和特異性受影響。折光測定法原理溶解在溶液中的固體可增加溶液的光折射率,在固定波長和溫度下,光折射率和血清中蛋白質(zhì)含量成正比。優(yōu)點(diǎn)簡便、快速,易掌握,重復(fù)性較好,適合臨床;缺點(diǎn)準(zhǔn)確性較差。自動生化分析儀測定5.臨床應(yīng)用TPf:少見,屬相對性;常見于脫水、休克、某些腫瘤等;TP「肝臟疾病、腎臟疾病、腸道吸收不良Af:少見屬相對性,。常見于脫水、休克。A「肝炎、肝硬化、慢性胃腸疾?。荒承┘纳x感染、長期饑餓或營養(yǎng)不良Gf:慢性肝炎、肝硬化;G(:飼喂初乳不足、免疫缺陷?。籄/G倒置
是肝功能損害的一個重要指標(biāo)?!酒咸烟恰浚˙G—BloodGlucos)一、血糖的來源、去路和調(diào)節(jié)概念血糖:指血液中的葡萄糖血糖水平:即血糖濃度參考值:3.9?6.7mmol/L(人)糖的來源與去路來源 去路食物中的糖類肝糖原分解糖異生作用其他單糖轉(zhuǎn)化血糖3.9-6.7》食物中的糖類肝糖原分解糖異生作用其他單糖轉(zhuǎn)化血糖3.9-6.7》mmol/L>》有氧氧化?無氧酵解》合成糖原》轉(zhuǎn)化為甘油氨基酸和其,圖9-1血糖的來源與去路III3?糖的生理功能(能量資源和結(jié)構(gòu)材料)氧化供能:分解代謝提供機(jī)體75%能量;機(jī)體組成成分之一糖占機(jī)體干重的2%;形成糖原儲存在肝臟與肌肉中;形成糖蛋白和蛋白多糖(激素、酶、受體等)、糖脂(神經(jīng)組織和細(xì)胞膜重要組分);轉(zhuǎn)變作用其它糖及糖衍生物(核糖、脫氧核糖、氨基多糖)等;非糖物質(zhì)(脂肪、氨基酸核酸)。糖代謝紊亂-供能障礙-一系列代謝變化。血糖水平恒定的生理意義保證重要組織器官的能量供應(yīng),特別是某些依賴葡萄糖供能的組織器官腦組織不能利用脂酸,正常情況下主要依賴葡萄糖供能;紅細(xì)胞沒有線粒體,完全通過糖酵解獲能;骨髓和神經(jīng)組織代謝活躍,經(jīng)常利用葡萄糖供能。血糖濃度的調(diào)節(jié)肝臟調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)運(yùn)調(diào)控:肝細(xì)胞膜G載體可允許G快速轉(zhuǎn)運(yùn),達(dá)到平衡時,肝內(nèi)外G濃度幾乎相等。酶的雙向調(diào)控:通過神經(jīng)-激素的作用,使肝細(xì)胞內(nèi)各種糖代謝的酶活性改變。葡萄糖-6-磷酸酶,可促進(jìn)肝糖原水解,補(bǔ)充和升高血糖。促進(jìn)組織攝取葡萄糖,促進(jìn)肝糖原合成、抑制肝糖原分解、抑制糖異生而降糖。神經(jīng)調(diào)節(jié)主要通過下丘腦和自主神經(jīng)(交感和副交感)直接作用于肝臟獲調(diào)節(jié)激素的分泌而影響血糖。激素調(diào)節(jié)降糖激素:胰島素胰島素樣生長因子升糖激素:胰高血糖素腎上腺素生長激素皮質(zhì)醇甲狀腺激素糖代謝紊亂高血糖癥與糖尿病高血糖癥:空腹血漿血糖(FPG)>7.3mmol/L(130mg/dl)高糖飲食;見于糖尿病內(nèi)分泌腺生理性:情緒緊張;病理性:功能亢進(jìn);顱內(nèi)壓升高腎上腺分泌f刺激血糖中樞脫水。尿糖:若血糖濃度高于腎糖閾值9.0mmol/L,即超過了腎小球?yàn)V過率,出現(xiàn)尿糖。糖尿?。╠iabetesmellitus,DM)定義:是一種慢性、復(fù)雜的代謝紊亂性疾病,系胰島素相對或絕對不足,或利用缺陷引起。臨床特征:血糖持續(xù)升高,甚至出現(xiàn)糖尿?!叭嘁簧佟保憾嗄?、多飲、多食、體重減輕。發(fā)病機(jī)制胰腺B細(xì)胞的自身免疫性損傷機(jī)體對胰島素的作用產(chǎn)生抵抗低血糖癥低血糖癥是指血糖濃度低于2.2mmol/L時臨床出現(xiàn)一系列因血糖濃度過低引起的癥候群。發(fā)病原因來源V去路激素效應(yīng):升血糖激素缺乏,降血糖激素過剩。肝臟疾?。焊喂?yán)重?fù)p傷致肝糖原減少和糖異生嚴(yán)重障礙長期饑餓或劇烈運(yùn)動時代謝率增加,血糖消耗過多。酮血癥:酮體形成過多引起血中含量增高,稱為酮血癥。酮體:乙酰乙酸(20%)、B-羥丁酸(78%)、丙酮(2%)三者統(tǒng)稱為酮體原因:
糖尿病糖攝入不足: 脂肪動員糖原儲存過多:脂肪動員堿中毒:代償酮體的生成糖代謝障礙脂肪酸分解0 0NADH+H+NAD+OH0CH3(!CH丙胡CH35CH2(!!OH亠厶CH36HCH2COOH
乙酰乙酸 \ D卜)書氓丁酸0CH3(!CH丙胡I脫氫酶I脫氫酶丿_辺叵回如有酮體存在,需確定酮酸中毒狀態(tài);酮血癥的診斷對指導(dǎo)胰島素治療最有價值。體液葡萄糖的測定方法無機(jī)化學(xué)法Folin-Wu法,基于葡萄糖醛基的還原性Cu2+-Cu+;特異性差。2?有機(jī)化學(xué)法:鄰甲苯胺法、聯(lián)苯胺法、氨基聯(lián)苯法等鄰甲苯胺+Glu—葡萄糖基胺—希夫氏堿(藍(lán)綠色)影響因素多。酶法測定己糖激酶法(HK法)葡萄糖+ATPHK葡萄糖-6-磷酸+ADP葡萄糖-6-磷酸+NADP+G-6-PD6-磷酸葡萄糖內(nèi)酯+NADPHNADPH在340nm有吸收峰,其吸光度增加與標(biāo)本中的葡萄糖濃度成正比。本法特異性高,靈敏度高,干擾因素少,適用于自動化
分析,為葡萄糖測定的參考方法,但是試劑較貴。葡萄糖氧化酶法(GOD)葡萄糖+O2+H2OGOD葡萄糖酸內(nèi)酯+H2O22H2O2+4-氨基安替比林+酚一紅色醌類化合物+H2O+O2操作簡單,特異性較高,是血糖測定的首選方法.但溶血、G
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