遺傳實(shí)驗(yàn)復(fù)習(xí)(詳)

顯微攝影技術(shù)孔徑(NA)放大倍數(shù)(4x10x20x100x)鏡筒長(zhǎng)度160mm蓋玻片厚度(0.17mm)油浸標(biāo)志HIoiloel數(shù)值孔徑(N.A.)=nsin()n為介質(zhì)折射率=/2，為開(kāi)口角，即物鏡前面的發(fā)光點(diǎn)進(jìn)入物鏡的角度。M=Mo×Me（×Mi）M：總放大倍數(shù)；Mo：物鏡放大倍數(shù)；Me：目鏡放大倍數(shù)；Mi：中間放大倍數(shù)。文件名稱到秒2010.7.5.11:10:00就是“05111000”以物鏡上的數(shù)值孔徑乘以0.7求得孔徑光圈的大小，將孔徑光圈的數(shù)值調(diào)至所需位置。（分辨率下降3成，亮度減半，但對(duì)比度提高，在高倍條件下景深也加深。實(shí)驗(yàn)一(蝗蟲精巢--減數(shù)分裂與配子發(fā)生)在解剖蝗蟲時(shí)，先將翅膀剪去，在翅基部的后方，相當(dāng)于腹部背側(cè)的前段，用解剖剪將其體壁剪開(kāi)，即可以看到在上方兩側(cè)各有一塊黃色的團(tuán)塊，這便是精巢。用改良苯酚品紅染液油鏡看不到？1.沒(méi)滴油2.片子放反了…前期I：細(xì)線期—偶線期---粗線期---雙線期---終變期細(xì)線期：染色質(zhì)濃縮、凝聚成染色絲?？床怀鲭p線結(jié)構(gòu)偶線期：聯(lián)會(huì)，染色體仍然是細(xì)長(zhǎng)，仍然不能辨別數(shù)目粗線期：染色體明顯變粗，有非姐妹染色單體的節(jié)段交換雙線期：染色體進(jìn)一步縮短，交叉點(diǎn)開(kāi)始向兩端移動(dòng)終變期：染色體最短，核仁核膜消失中期I：從極面觀察，同源染色體排列成環(huán)形。后期I：雄性，可以看到一條不配對(duì)的性染色體在分裂過(guò)程中的滯后現(xiàn)象。末期I：逐步解旋恢復(fù)到染色質(zhì)的狀態(tài)，重建核膜核仁。染色體數(shù)目減半發(fā)生在第一次減數(shù)分裂的末期?；认xXO性別決定，雄性23條染色體，一條不配對(duì)的滯后！實(shí)驗(yàn)二（果蠅唾腺染色體）多線染色體。它是果蠅唾腺細(xì)胞核內(nèi)有絲分裂所致，有絲分裂停止在分裂間期，即核內(nèi)染色體中的染色線連續(xù)復(fù)制而染色體并不分裂，同時(shí)唾腺細(xì)胞中的同源染色體總是處在配對(duì)狀態(tài)即體細(xì)胞聯(lián)會(huì)，重復(fù)復(fù)制后的染色體聚集在一起，復(fù)制次數(shù)212-15。巨大染色體是遺傳學(xué)上研究染色體形態(tài)結(jié)構(gòu)及染色體畸變的好材料。每條染色體的染色線在不同的區(qū)段螺旋化程度不一，出現(xiàn)一系列寬窄不同、染色深淺不一、明暗相間的橫紋。不同染色體的橫紋數(shù)量、形狀和排列順序是恒定的。判斷唾腺的原則：茄子---半透明---有脂肪體低溫下生長(zhǎng)的果蠅個(gè)體較大，三齡幼蟲爬到瓶壁上化蛹。去除脂肪體，否則形成脂肪滴用改良苯酚品紅染液果蠅體細(xì)胞有八條染色體，但是由于配對(duì)，只能看到4條（4對(duì)）。第二對(duì)與第三對(duì)染色體都以各自的著絲粒部位相聚集，形成一個(gè)深染中心。果蠅唾腺染色體形成時(shí)，染色體著絲粒和近著絲粒的異染色質(zhì)聚集在一起。實(shí)驗(yàn)三（果蠅生活史觀察）受精卵—幼蟲—蛹—成蟲溫度適宜：400個(gè)卵，2星期25度，成體壽命37d,30度以上不育2-3d產(chǎn)卵1d變幼蟲4-5d開(kāi)始化蛹，蛹變深褐色以后羽化，大約3-4d。卵：觸絲附著在培養(yǎng)基表層翅膀與身體呈現(xiàn)約45度角可以判斷果蠅已死亡性梳位置：第一對(duì)前足第一跗節(jié)配制培養(yǎng)基的時(shí)候，酵母粉和丙酸是后加入的。然后一起高溫滅菌。剛配制完的培養(yǎng)基放涼后在瓶壁上有許多水滴，這時(shí)應(yīng)該放進(jìn)溫箱里2-3d，蒸發(fā)水。配制好的培養(yǎng)基：注明雜交內(nèi)容、日期、組號(hào)正交、反交在以下兩種情況中可能結(jié)果不同：1，基因位于細(xì)胞質(zhì)中，只受到母體遺傳的影響。2，基因位于X,Y染色體的非同源區(qū)段上。實(shí)驗(yàn)四（人類染色質(zhì)觀察）Q：看到Barr就是女生？未必（XXY）失活發(fā)生在胚胎早期，失活是隨機(jī)的。失活的染色體上存在失活區(qū)與非失活區(qū)。劑量補(bǔ)償效應(yīng)固定液（甲醇：冰醋酸=3：1），殺死細(xì)胞，沉淀蛋白，使其保持原有狀態(tài)HCL酸解：使得口腔黏膜細(xì)胞互相分散不重疊，這樣分散的細(xì)胞有利于充分地進(jìn)行細(xì)胞染色和清晰地進(jìn)行鏡檢觀察。甲苯胺藍(lán)的優(yōu)點(diǎn)是對(duì)細(xì)胞核染色清晰，即整個(gè)細(xì)胞核染色都較深，但其缺點(diǎn)是對(duì)胞、質(zhì)分離不太好。而改良苯酚品紅相比起來(lái)，染色效果相當(dāng)淺，染色體著色也較淺，但仍然相當(dāng)清晰。Q：為什么Barr小體一般出現(xiàn)在核膜邊緣？主要是因?yàn)樵摋l染色體處于失活狀態(tài)，其上基因大多數(shù)不被表達(dá)，故和大多數(shù)具有活性的染色體彼此分開(kāi)；在DNA復(fù)制時(shí)總是落后于其他染色質(zhì)所致。油鏡使用：“半滴油”，可以不加蓋片！實(shí)驗(yàn)五（小鼠骨髓）固定液（甲醇：醋酸=3：1）酸——脹醇——脫水過(guò)火？吹干？？？Q：固定液的作用形態(tài)和成分使細(xì)胞固定在當(dāng)前所處的時(shí)期，便于觀察。實(shí)質(zhì)就是把細(xì)胞殺死，使細(xì)胞的新陳代謝終止，使其無(wú)法繼續(xù)進(jìn)行有絲分裂。低滲預(yù)冷滴片低滲液的作用是使細(xì)胞充分吸水膨脹而不破裂，從而一直保持在脹得很大而又沒(méi)有破裂的狀態(tài)。進(jìn)而使得細(xì)胞內(nèi)的中期染色體就能夠足夠分散開(kāi)來(lái)，從而使得經(jīng)固定等步驟后仍然處于膨脹狀態(tài)。之后經(jīng)過(guò)滴片時(shí)的摔打和驟降溫過(guò)程，使細(xì)胞很快破碎，染色體進(jìn)一步分散開(kāi)。在滴片的時(shí)候就能夠獲得一團(tuán)僅屬于一個(gè)細(xì)胞的分散的中期染色體的片子，易于在顯微鏡下觀察和對(duì)染色體進(jìn)行計(jì)數(shù)。而如果開(kāi)始時(shí)就直接用蒸餾水使細(xì)胞破裂，這樣雖然染色體更分散，但是為數(shù)很少的染色體都分散到大量的溶液中去，視野里就沒(méi)幾條染色體了；就無(wú)法對(duì)染色體數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)。為了保持細(xì)胞的活性，所以需要對(duì)低滲液保溫。低滲時(shí)間上應(yīng)該也是長(zhǎng)點(diǎn)較好，使細(xì)胞充分膨脹。低滲液的時(shí)間，溫度和滲透壓要適中。低滲處理的時(shí)間均應(yīng)該根據(jù)細(xì)胞的數(shù)量和細(xì)胞本身對(duì)低滲環(huán)境的耐受程度調(diào)節(jié)到一個(gè)較為合適的數(shù)值。低滲液濃度過(guò)低，處理時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，很可能使得細(xì)胞破裂；反之，則會(huì)使染色體聚集在一起，分散不開(kāi)從而影響觀察效果。滴片距離要高，才能保證細(xì)胞充分破裂。為了防止后期干燥滴片耗費(fèi)大量時(shí)間，最好在滴片時(shí)將落點(diǎn)分散開(kāi)，否則如果所有液體都滴在同一區(qū)域會(huì)使得滴片長(zhǎng)時(shí)間無(wú)法干燥。同時(shí)，冰片一定要“冰”。水的表面張力隨著溫度降低而上升，玻璃又是其浸潤(rùn)表面，低溫的玻璃大概有利于水層擴(kuò)展，形成更薄的水層。20對(duì)同源染色體，即2n=40實(shí)驗(yàn)六（大腸桿菌非中斷雜交）無(wú)菌條件：什么級(jí)別？有菌不碰無(wú)菌，無(wú)菌盡量不碰無(wú)菌一個(gè)菌，六個(gè)點(diǎn)，輕輕點(diǎn)大腸桿菌帶有F因子的菌株能夠與不帶F因子的菌株（F-菌株）進(jìn)行雜交進(jìn)而發(fā)生基因重組。帶有F因子的細(xì)菌，細(xì)胞表面會(huì)形成一種與細(xì)胞接合作用相關(guān)的毛狀突起，被稱為性纖毛，長(zhǎng)約1-20μm。性纖毛促使供體和受體細(xì)胞特異地配對(duì)，在受體細(xì)胞上有纖毛的特異結(jié)合位點(diǎn)，當(dāng)性纖毛結(jié)合到這些特異性位點(diǎn)之后，開(kāi)始收縮并將2個(gè)細(xì)菌拉攏形成作為遺傳物質(zhì)轉(zhuǎn)移通道的接合管，遺傳物質(zhì)的轉(zhuǎn)移就開(kāi)始了。F’因子含有供體細(xì)胞的特定基因而在和F-菌株雜交中期高頻傳遞作用形成部分二倍體，這種通過(guò)F’因子介導(dǎo)的供體菌向受體菌特定基因的轉(zhuǎn)移被稱為性導(dǎo)（sexduction）。非中斷雜交：不同的高頻重組品系（Hfr）中F因子與主染色體的整合位置是不同的。Hfr菌株與F-菌株進(jìn)行結(jié)合，染色體由Hfr向F-轉(zhuǎn)移，由于染色體的轉(zhuǎn)移是單方向性的，染色體上的基因都是連鎖的，所以，位于Hfr染色體上前面的基因（接近O點(diǎn)）將有更多的機(jī)會(huì)出現(xiàn)在F-中，越是后端的基因出現(xiàn)的機(jī)會(huì)就越少。非中斷雜交的實(shí)驗(yàn)原理是給足夠長(zhǎng)的時(shí)間，讓能轉(zhuǎn)入的片段都轉(zhuǎn)入進(jìn)去，決定基因會(huì)不會(huì)重組的不是時(shí)間而是到這個(gè)長(zhǎng)度的時(shí)候是不是斷裂了。中斷雜交是依靠時(shí)間上來(lái)判段，離ori越遠(yuǎn)的越晚轉(zhuǎn)入，所以以轉(zhuǎn)入的時(shí)間來(lái)標(biāo)志該基因的圖距。非中斷雜交是離ori越遠(yuǎn)的轉(zhuǎn)入的頻率越低，所以以重組率來(lái)與基因距離相關(guān)。線蟲特點(diǎn)：成體長(zhǎng)僅1mm，全身透明，以細(xì)菌為食，1034（959）cell活多少天明顯的性狀,2n=12（有一對(duì)性染色體和5對(duì)常染色體），其基因組也很小，僅有8×107bp，約為人類基因組的3%，約有13,500個(gè)基因研究方向：RNAi(干擾）衰老細(xì)胞凋亡現(xiàn)代發(fā)育生物學(xué)、遺傳學(xué)和基因組學(xué)研究的重要模式材料2002年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予悉尼·布雷內(nèi)等三人，他們獲獎(jiǎng)的原因是在20世紀(jì)60年代初期正確選擇線蟲作為模式生物，發(fā)現(xiàn)器官發(fā)育和“程序性細(xì)胞死亡”過(guò)程中的基因規(guī)則。2006年諾貝爾生理學(xué)或醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)授予兩名美國(guó)科學(xué)家安德魯·菲爾和克雷格·梅洛，以表彰他們?cè)诜肿由飳W(xué)和遺傳信息方面的開(kāi)創(chuàng)性工作。AndrewZ.Fire和CraigC.Mello發(fā)現(xiàn)了RNA干擾機(jī)制，論文發(fā)表在1998年。這一發(fā)現(xiàn)對(duì)于防御病毒及尋找疾病的治療方法極為重要自體受精，0.2%雄蟲200~300個(gè)精子和大量卵母250個(gè)后代Mating，1000個(gè)后代20度，3.5d生活史，群體發(fā)育最快Dauer不經(jīng)過(guò)L3，直接L4dpyDumpy(Dpy);shortandfatphenotype.Differentdpymutantscanrangefromsevere(smallfootballs)tomoderate(slightlypudgy)incharacter.ThemoresevereoneswilloftendisplayavariableUncphenotypeaswell.uncUncoordinated(Unc).Therearemanydifferentsubclassesofuncmutants.TheseincludecoilerUncs,kinkerUncs,paralyzedUncs,shrinkerUncs,Uncsthatfailtomovebackwardswhentouchedwithapickontheirheads,Uncsthatdisplaypoorforwardmovementbutbackwell,etc.RecognizingcertaintypesofUncscaninitiallybechallenging,althoughitusuallygetseasierovertime.OftenUncsaresomewhatmisshapenandaretypicallysmallerorthinnerthanwild-typeanimals.實(shí)驗(yàn)七（人體指紋分析）人體皮膚由表皮和真皮構(gòu)成。真皮乳頭向表皮突出，形成許多整齊的乳頭線，成為一條條突起的條紋，其上有汗腺開(kāi)口，這些條紋稱嵴紋。在突起的嵴紋之間形成凹凸的紋理，這就構(gòu)成人體的皮紋。屬多基因遺傳，具有個(gè)體特異性，有