清華大學(xué)生物醫(yī)學(xué)測(cè)試質(zhì)譜中心概況及ETD離子源介紹

清華大學(xué)生物醫(yī)學(xué)測(cè)試質(zhì)譜中心概況及ETD離子源介紹第1頁(yè)/共17頁(yè)主要組成部分一.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物平臺(tái)二.細(xì)胞生物學(xué)平臺(tái)三.蛋白質(zhì)化學(xué)平臺(tái)四.同位素實(shí)驗(yàn)室第2頁(yè)/共17頁(yè)一、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物平臺(tái)超過(guò)2000m2的SPF級(jí)動(dòng)物房，配備有病理切片系統(tǒng)和顯微操作系統(tǒng)。第3頁(yè)/共17頁(yè)二、細(xì)胞生物學(xué)平臺(tái)萬(wàn)級(jí)凈化實(shí)驗(yàn)室布置圖(80m2)第4頁(yè)/共17頁(yè)三、蛋白質(zhì)平臺(tái)

1、MALDI-TOF-TOF串聯(lián)質(zhì)譜儀

MatrixAssistedLaserDesorptionIonization

TimeOfFlightMassSpectrometryABI,4800plus第5頁(yè)/共17頁(yè)2、2DChipLCIonTrap質(zhì)譜儀

Electro-Spray

Ionization(ESI)ElectronTransferDissociation(ETD)

Agilent6340

第6頁(yè)/共17頁(yè)3、1200分析兼半制備液相色譜儀

主要用于多肽及蛋白質(zhì)的純度分析，濃縮制備等第7頁(yè)/共17頁(yè)四、同位素實(shí)驗(yàn)室液體閃爍計(jì)數(shù)儀伽馬射線計(jì)數(shù)儀第8頁(yè)/共17頁(yè)ETDsourceintroduction第9頁(yè)/共17頁(yè)WhatisETD?

ElectronTransferDissociation–Singly-chargedradicalanionstransferanelectrontomultiply-protonatedpeptidesintheiontrapandinducefragmentationofthepeptidebackbonealongpathwaysthatareanalogoustothoseobservedinelectroncapturedissociation(ECD)第10頁(yè)/共17頁(yè)ETDReagentETDreagentusedtotransportelectronsintothetrapwheretheyreactwithpeptidecationsFluoranthene202.0202.9204.0205.0012346x10198200202204206208210212214m/z第11頁(yè)/共17頁(yè)ETDFragmentationProducescandzfragmentions,whileCIDproducesbandyfragmentions第12頁(yè)/共17頁(yè)NCISourceFluorantheneSolidESIPositivePeptideIonsfromLCChipNegativeIonPacketPositiveIonPacketIonTrapWithIons++InstrumentSchematicforETD第13頁(yè)/共17頁(yè)ETD的應(yīng)用主要用于蛋白質(zhì)翻譯后修飾的分析，可以提供更多的裂解碎片，提高對(duì)蛋白質(zhì)序列分析的覆蓋率，同時(shí)保護(hù)不穩(wěn)定的翻譯后修飾基團(tuán)，有助于發(fā)現(xiàn)更多的修飾位點(diǎn)。第14頁(yè)/共17頁(yè)Angiotensin1Dataan