激活劑抑制劑

激活劑抑制劑第1頁(yè)/共12頁(yè)實(shí)驗(yàn)十二激活劑和抑制劑對(duì)酶活性的影響

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?1)了解激活劑和抑制劑對(duì)酶活性的影響。(2)學(xué)習(xí)鑒定激活劑和抑制劑影響酶活性的原理和方法。。第2頁(yè)/共12頁(yè)二、

實(shí)驗(yàn)原理在酶促反應(yīng)過(guò)程中，酶的活性常常受某些物質(zhì)的影響，有些物質(zhì)能使酶的活力增加，稱(chēng)為酶的激活劑；有些物質(zhì)它們并不引起酶蛋白變性，但能使酶分子上的某些必需基團(tuán)發(fā)生變化，使酶的活性降低，稱(chēng)這些物質(zhì)為酶的抑制劑。第3頁(yè)/共12頁(yè)酶的激活劑種類(lèi)：一些簡(jiǎn)單的無(wú)機(jī)離子，如Na+、K+

、Ca2+

、Mg2+

、Zn2+

等陽(yáng)離子和Cl－、Br－

、I－

、PO43－

、NO3－等陰離子；一些中等大小的有機(jī)分子，如抗壞血酸、半胱氨酸、谷胱苷肽等；能除去抑制劑的物質(zhì)也稱(chēng)為激活劑，如EDTA能除去重金屬，因而能解除重金屬對(duì)酶的抑制作用。酶的抑制劑種類(lèi)：重金屬離子(Ag+、Hg2+、Pb2+、Cu2+等)、砷化物、氟化物、生物堿、有機(jī)磷農(nóng)藥等都是抑制劑。第4頁(yè)/共12頁(yè)抑制作用的類(lèi)型不可逆性抑制(irreversibleinhibition)可逆性抑制(reversibleinhibition)：競(jìng)爭(zhēng)性抑制(competitiveinhibition)非競(jìng)爭(zhēng)性抑制(non-competitiveinhibition)反競(jìng)爭(zhēng)性抑制(uncompetitiveinhibition)第5頁(yè)/共12頁(yè)

有機(jī)磷化合物對(duì)羥基酶的抑制第6頁(yè)/共12頁(yè)激活劑和抑制劑影響酶活性常具有特異性，如Mg2+對(duì)脫羧酶、烯醇化酶等有提高活力的作用，而對(duì)肌球蛋白ATP酶則有降低活力的作用激活劑和抑制劑影響酶活性的劑量是很少的，并且同一種酶可因激活劑的濃度不同而作用不同，如Cl－在低濃度時(shí)為唾液淀粉酶的激活劑，而在高濃度時(shí)（達(dá)到1／3飽和度）就可抑制唾液淀粉酶的活性。第7頁(yè)/共12頁(yè)唾液由三對(duì)大唾液腺（下頜腺、肋腺和舌下腺）分泌的液體和口腔壁上許多小粘液腺分泌的粘液，里面含有唾液淀粉酶,淀粉酶一般作用于可溶性淀粉、直鏈淀粉、糖元等α－1，4-葡聚糖，水解α－1，4-糖苷鍵的酶。根據(jù)作用的方式可分為α-淀粉酶（EC3．2．1．1）與β-淀粉酶（EC3．2．1．2）?？梢源呋矸鬯纸鉃辂溠刻?。唾液淀粉酶發(fā)揮作用的最適pH值在中性范圍內(nèi)。

第8頁(yè)/共12頁(yè)在本實(shí)驗(yàn)中，以稀釋的唾液作為淀粉酶液。唾液內(nèi)的淀粉酶可將淀粉逐步水解為不同階段的產(chǎn)物，它們遇碘呈不同的顏色，以此來(lái)定性研究激活劑和抑制劑對(duì)淀粉酶活性的作用(Cl－是唾液淀粉酶的激活劑，而Cu2+則是它的抑制劑)。直鏈淀粉(即可溶性淀粉)不同水解階段的產(chǎn)物與碘反應(yīng)的顏色如下：不同水解的產(chǎn)物：淀粉→ 紫色糊精→紅色糊精→ 麥芽糖及少量葡萄糖與碘的顏色：呈藍(lán)色→呈紫色→ 呈紅色→ 不顯色第9頁(yè)/共12頁(yè)三、

實(shí)驗(yàn)儀器與試劑

1．實(shí)驗(yàn)材料新鮮唾液，淀粉。2．實(shí)驗(yàn)器材

普通試管：20mL×4；移液管：lmL×4，2mL×1，5mL×l；100mL容量瓶，150mL三角瓶；恒溫水浴箱；試管架；漏斗。3．實(shí)驗(yàn)試劑：

0.1%淀粉溶液1%NaCI溶液1%CuSO4溶液1%Na2SO4溶液KI-I2溶液：稱(chēng)取碘化鉀3g及碘1g溶于100mL蒸餾水中。0.2mol/LpH6.6的磷酸緩沖液第10頁(yè)/共12頁(yè)四、操作方法

1．唾液淀粉酶液的制備：取唾液lmL放人100mL容量瓶中，用蒸餾水稀釋至100mL，用脫脂棉花過(guò)濾至150mL三角瓶，備用。唾液稀釋倍數(shù)因人而