自身免疫與生殖免疫學(xué)習(xí)班課件 1 43 古潔若-抗核抗體的臨床應(yīng)用專家共識解讀ppt-古潔若

抗核抗體檢測共識解讀古潔若風(fēng)濕免疫科不斷滿足臨床日益增長的需求；抗核抗體極為重要，研究多，更新快；抗核抗體爭議多，和諧一個，更新一個；抗核抗體問題多，解決一個，更新一個。。。。。。。1.2.3.4.抗核抗體檢測的臨床應(yīng)用抗核抗體的檢測方法抗核抗體概況抗核抗體的檢測結(jié)果1.

2.3.4.抗核抗體檢測的臨床應(yīng)用抗核抗體的檢測方法抗核抗體概況抗核抗體的檢測結(jié)果傳統(tǒng)意義上ANA指抗細(xì)胞核抗原成分的細(xì)胞抗體的總稱。隨著檢測技術(shù)的改進，ANA針對的靶抗原成分由細(xì)胞核擴展到整個細(xì)胞成分。目前ANA定義是以真核細(xì)胞的各種成分為靶抗原的自身抗體總稱?？购丝贵w（ANA）越來越多的臨床工作和研究發(fā)現(xiàn)針對細(xì)胞核成分的自身抗體確實重要抗核抗體（ANA）但針對胞漿及其他非細(xì)胞核成分的抗體也很重要抗核抗體（ANA）抗核抗體（ANA）ANA抗核不溶成分抗核可溶成分（抗ENA）抗染色體DNA蛋白抗核仁抗體

抗DNA抗體

抗核小體抗體

抗組蛋白

H1,H2A,H2B,H3,H4

抗Sm,U1RNP,SSA,SSB抗Scl-70,Jo-1,PM-1抗rRNP,PCNA…….dsDNAssDNA抗著絲點抗體（ACA)抗5sRNA抗核抗體（ANA）1.

2.3.4.抗核抗體檢測的臨床應(yīng)用抗核抗體的檢測方法抗核抗體概況抗核抗體的檢測結(jié)果已被納入自身免疫性疾病（AID）診斷指南的抗核抗體：ANAdsDNASSASmgp210sp100著絲點SCL70RNA聚合酶U1RNP肌動蛋白AMASMA抗核抗體檢測的臨床應(yīng)用疾病ANA陽性率（%）疾病ANA陽性率（%）系統(tǒng)性紅斑狼瘡80-100抗磷脂抗體綜合征40-50干燥綜合征60-80特發(fā)性血小板減少性紫癜10-30類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎30-50慢性活動性肝炎30-40混合性結(jié)締組織病95-100甲狀腺疾病30-50多發(fā)性肌炎/皮肌炎40-60雷諾現(xiàn)象20-60系統(tǒng)硬化癥70-90惡性腫瘤差別較大藥物性狼瘡95-100感染性疾病差別較大幼年型類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎20-40正常人5-10ANA檢測是篩查自身免疫性疾病的重要手段抗核抗體檢測的臨床應(yīng)用抗核抗體檢測的臨床應(yīng)用抗核抗體檢測的臨床應(yīng)用很多AID患者在早期沒有癥狀N.Engl.J.Med.,2003；349；1526-33抗核抗體檢測的臨床應(yīng)用-ANA檢測在AID患者早期預(yù)測1.

2.3.4.抗核抗體檢測的臨床應(yīng)用抗核抗體的檢測方法抗核抗體概況抗核抗體的檢測結(jié)果抗核抗體的檢測方法手工檢測自動檢測高通量全自動檢測

IIF

EIA

LIA

EIA

CLIA19701980199020002010如果臨床高度懷疑ANA相關(guān)的AID，但其他方法檢測陰性的，必須采用IIF法重新檢測；IIF自動化、標(biāo)準(zhǔn)化、不同廠家可比性問題等抗核抗體的檢測方法抗核抗體的檢測方法抗核抗體的檢測方法-指南中不同方法學(xué)比較方法學(xué)優(yōu)點問題ELISA高敏感性、定量及易自動化需要對每個自身抗體進行逐項檢測CLIA高敏感性、高特異性、定量及全自動化檢測成本偏高，需要對每個自身抗體進行逐項檢測LIA高敏感性、易操作、易自動化及一次實驗操作可同時檢測多種自身抗體半定量，某些自身抗體的特異性偏低蛋白尿、貧血、關(guān)節(jié)痛、間質(zhì)性肺病等與臨床溝通Hep-2細(xì)胞ANA+ANA-系統(tǒng)性風(fēng)濕病排除PBC抗核抗體的檢測方法-檢測策略抗核抗體的檢測方法-2015年全國多中心自身抗體檢測質(zhì)量調(diào)查評價胡朝軍,張蜀瀾,鄧垂文,etal.2015年全國多中心自身抗體檢測質(zhì)量調(diào)查評價[J].中華臨床免疫和變態(tài)反應(yīng)雜志,2016(2):137-143.抗核抗體的檢測方法-2013年全國229家實驗室抗核抗體譜結(jié)果比對分析宋寧,胡朝軍,張蜀瀾,etal.2013年全國229家實驗室抗核抗體譜結(jié)果比對分析[J].臨床檢驗雜志,2015,33(7):542-546.抗核抗體的檢測方法-江蘇泰州市中醫(yī)院自身抗體室間質(zhì)評結(jié)果分析與體會唐妮娜.自身抗體室間質(zhì)評結(jié)果分析與體會[J].醫(yī)學(xué)檢驗與臨床,2014,25(5):70-71.抗核抗體的檢測方法-2016年美國不同實驗室的抗核抗體檢測結(jié)果AbelesAM,Gomez-RamirezM,AbelesM,etal.Antinuclearantibodytesting:discordancebetweencommerciallaboratories[J].ClinicalRheumatology,2016,35(7):1713-1718.抗核抗體的檢測方法-2018年美國分析SLE患者血清中抗核抗體檢測的方法差異使用ANA分析進行篩查的臨床試驗應(yīng)詳細(xì)說明所用試劑盒及其性能特征，特別是對于已確診疾病的患者。PisetskyDS,SpencerDM,LipskyPE,etal.AssayvariationinthedetectionofantinuclearantibodiesintheseraofpatientswithestablishedSLE[J].AnnalsoftheRheumaticDiseases,2018:annrheumdis-2017-212599.dsDNA抗核抗體的檢測方法-抗dsDNA抗體抗核抗體的檢測方法-抗dsDNA抗體SLE特征性標(biāo)志抗體：特異性95%，敏感性70%與疾病活動度及腎損傷有關(guān)，可以監(jiān)測病情參與疾病的發(fā)病機制可以反映療效可以預(yù)測抗核抗體的檢測方法-抗dsDNA抗體檢測方法：IIF——特異性最好，敏感性差CLIA——高敏感性、高特異性、快速定量及全自動化放免法——敏感性最好，特異性好ELISA——敏感性最好，特異性差免疫印跡——檢測不準(zhǔn)確IIFELISA結(jié)果有時不一致抗核抗體的檢測方法-臨床最常用方法：IIF和ELISA抗原表位差異：核糖磷酸骨架、堿基對、空間構(gòu)象dsDNA來源、提純方法不同（牛胸腺、鮭魚、綠蠅短膜蟲）致病性自身抗體在血循環(huán)中與抗原形成復(fù)合物ssDNA和dsDNA的同時存在DNA的大小反應(yīng)相（液相、固相）抗體亞分類抗體親合（和）力不同右手螺旋左手螺旋抗核抗體的檢測方法-IIF和ELISA檢測結(jié)果不一致的原因抗核抗體的檢測方法-檢測建議健康人群或處于疾病前期——監(jiān)測一段時間高滴度高度提示自身免疫性疾病——安排就診動態(tài)監(jiān)測，定期隨訪，早期干預(yù)措施并存多種自身抗體更具有預(yù)測意義ANA與ANA譜？抗核抗體的檢測方法抗核抗體的檢測方法1.

2.3.4.抗核抗體檢測的臨床應(yīng)用抗核抗體的檢測方法抗核抗體概況抗核抗體的檢測結(jié)果抗核抗體的檢測結(jié)果-ANA核型抗核抗體的檢測結(jié)果-ANA核型核膜型均質(zhì)型PBCSLE抗核抗體的檢測結(jié)果-核膜型Hepatology.2018Aug2.doi:

10.1002/hep.30145.抗核抗體的檢測結(jié)果-原發(fā)性膽汁性肝硬化PBC抗核抗體的檢測結(jié)果-PBCHirschfieldGM,DysonJK,AlexanderGJ,etal.THEBRITISHSOCIETYOFGASTROENTEROLOGY/UK-PBCPRIMARYBILIARYCHOLANGITISTREATMENTANDMANAGEMENTGUIDELINES[J].Gut,2018,67(9):gutjnl-2017-315259.抗核抗體的檢測結(jié)果-PBCHirschfieldGM,BeuersU,CorpechotC,etal.EASLClinicalPracticeGuidelines:Thediagnosisandmanagementofpatientswithprimarybiliarycholangitis[J].JournalofHepatology,2017:S0168827817301861.結(jié)論：PBC的診斷如果抗線粒體抗體（AMA）陰性，則存在AMA或其他PBC特異性自身抗體，包括sp100或gp210AMA（>1/40）或高PBC特異性抗核抗體的存在，在膽汁淤積性肝生化的條件下，足以診斷為PBC建議免疫熒光法檢測AMA和PBC特異性抗核抗體所有不明原因膽汁淤積癥患者抗核抗體的檢測結(jié)果-PBC臨床上的意義

跟SLE有特異性染色按細(xì)胞周期的進展變化抗核抗體的檢測結(jié)果-PCNA型樣AC-13抗PCNA抗體抗核抗體的檢測結(jié)果-細(xì)胞漿型與抗胞漿成分有關(guān)抗核糖體P蛋白（rRNP）：出現(xiàn)在SLE中抗合成酶：Jo-1、PL-12、PL-7、OJ、EJ抗信號識別顆粒（SRP)抗線粒體：出現(xiàn)在PBC中抗高爾基體抗溶酶體線性肌動蛋白型AC-13抗核抗體的檢測結(jié)果抗核抗體的檢測結(jié)果抗核抗體的檢測結(jié)果指南對新技術(shù)、新方法是適合的IIF與定量方法聯(lián)合檢測是實驗室最好的選擇熒光模型與特異性自身抗體的對應(yīng)問題對ANA滴度的解讀抗核抗體的檢測結(jié)果國際標(biāo)準(zhǔn)為1:80列出的HEp-2細(xì)胞免疫熒光模式分配給通常是上圖與之相關(guān)的系統(tǒng)性炎癥疾?。ň哂胁煌拿舾行院吞禺愋裕?。連接線表明，當(dāng)在右側(cè)欄中存在疑似診斷和或在左側(cè)欄中存在熒光模式時，應(yīng)優(yōu)先尋找與其相關(guān)的自身抗體?？购丝贵w的檢測結(jié)果臨床醫(yī)生特別重視ANA的滴度；ANA滴度的高低不能反映病情，但滴度越高疾病的指向性意義越大；不同廠家采用的滴度系統(tǒng)不同，不能直接對等，但有經(jīng)驗的工作者可以初步做出比較判斷；ANA的血清轉(zhuǎn)化問題?？购丝贵w的檢測結(jié)果-對ANA滴度的解讀目前臨床上存在反復(fù)檢測ANA的現(xiàn)象，合理嗎？抗核抗體的檢測結(jié)果ANA檢測是主要的診斷方式，但不是唯一的ANA滴度變化有利于診斷、治療以及預(yù)后2018-抗核抗體檢測臨床應(yīng)用的專家共識1ANA定義：以真核細(xì)胞的各種成分為靶抗原的自身抗體的總稱2推薦臨床疑似AID患者，特別是多器官受累的系統(tǒng)性（非器官特異性）AID患者檢測ANA及其針對靶抗原的特異性抗體3ANA檢測可用于高危人群的健康體檢篩查，如育齡期女性、AID患者的直屬親屬，處于易誘發(fā)AID的環(huán)境及免疫功能異常者4推薦以HEp-2細(xì)胞為實驗基質(zhì)的IIF法是進行ANA檢測的參考方法和首選方法5采用以HEp-2細(xì)胞為實驗基質(zhì)的IIF法進行ANA檢測時，HEp-2細(xì)胞在實驗機制中每顯微鏡視野（放大倍數(shù)為200倍）應(yīng)可見3~5個有絲分裂細(xì)胞，二抗應(yīng)使用熒光素標(biāo)記的抗人IgG抗體，IIF法檢測ANA稀釋方法可根據(jù)不同的檢測試劑進行倍比稀釋系統(tǒng)或√10稀釋系統(tǒng)6ANA特性性自身抗體可采用多種免疫學(xué)方法檢測，不同的方法具有不同的臨床優(yōu)缺點7抗dsDNA抗體檢測使用短膜蟲IIF或放射免疫法（Farr法）或ELISA方法檢測。若其他方法檢測抗dsDNA抗體陽性與臨床表現(xiàn)不符時，建議采用IIF法或放免法進行進一步確認(rèn)，對SLE的疾病活動進行監(jiān)測時，應(yīng)定期使用同種定量檢測方法進行抗dsDNA抗體的檢測8在ANA的臨床應(yīng)用中，可先用IIF進行ANA檢測，若結(jié)果陽性需進一步進行ANA針對靶抗原的特異性自身抗體檢測。當(dāng)臨床高度懷疑時，不論ANA總抗體檢測結(jié)果如何時，都需要針對靶抗原的特異性自身抗體進行檢測。2018-抗核抗體檢測臨床應(yīng)用的專家共識9IIF-ANA熒光模型分為3類：細(xì)胞核熒光模型（14種），細(xì)胞漿熒光模型（9種）和細(xì)胞有絲分裂熒光模型（5種）.必報熒光模型包括：細(xì)胞核均質(zhì)型、細(xì)胞核斑點型、著絲典型、核點型