免疫分型教程

40-免疫分型教程(1)正常骨髓免疫分型上圖是正常骨髓經(jīng)CD45CD71CD33染色后組成的CD45/SSCCD71/CD33雙參數(shù)散點圖；況。CD45/SSC圖中可見：1CD45強陽性SSC（褐色細胞群體；2，中等強度的CD45SSC信號最強的細胞群體為粒細胞（藍色及紅色細胞群體；3CD45表達與SSC信號介于淋巴細胞與粒細胞之間的是單核細胞群體（綠色細胞群體；4，CD45陰性，SSC信號最低的有核紅細胞和細胞碎片；CD33/CD71圖中可見：1CD33表達最強的單核細胞群體（綠色；2，粒細胞CD33表達較單核弱，不成熟粒表達CD71，成熟后不表達。3，淋巴細胞、有核細胞和細胞碎片不表達CD33、CD71。CD11B/CD15圖可用來評估髓系細胞向單核、粒分化的程度（得CD11，粒細胞高表達CD1：1，單核細胞（綠色）高表達CD11B，CD15中等到表達；（藍色及橘紅色CD11B幼稚髓細胞僅表達CD15CD11B。3，TBCD15、CD11B，NKCD11B而無CD15（紅色細胞。4，有核紅細胞及碎片不表達CD15和CD11B。根據(jù)骨髓細胞CD45/SSC圖中分布情況設門圈定各類細胞：R1門為成熟淋巴細胞；R2門為正常單核細胞位置；R3門正常粒細胞位置；R4門為幼稚淋巴細胞出現(xiàn)位置；R5門為有核紅細胞或細胞碎片位置；R6門為幼稚髓細胞出現(xiàn)位置；白血病細胞通常會在R4、R6兩門位置處出現(xiàn)。M0免疫分型M0:急性髓細胞白血病微分化型原始細胞在光鏡下類似L2堿性,無嗜天青顆粒及Auer小體,髓過氧化酶(MPOB陽性細胞<3%;或CD13CD7+,TdT+急非淋白血病可表現(xiàn)CD7+,TdT。90AUER，MPO陰性。遺傳學：染色體常有復雜的異常，特別是5和7號染色體。當病例伴T（9；22）時會出現(xiàn)淋系抗原。FSSSCD45/SSCD16。相當一部分病例CD7CD4；HLA-DRCD7CD34MPOCD33/CD13聯(lián)合檢測更為敏感。M0MPO3%，3%M1。M0:HLA-DR+,CD34+,CD13+/-,MPO+,CD14-,CD11b-,TdT-/+to+/-CD45/SSCSSCCD19、CD34CD13CD33。CD13CD3396%。HLA-DR這些幼稚細胞表型的情況是：CD13陽性，CD33陽性，CD34陰性，HLA-DR陰性。這個表型與AML-M3相以。腫瘤細胞不表達CD71、CD117、CD18、CD11b和CD15。CD64是陰性，但CD14表達。CD14表達強度比較弱與CD13相似。TCD2、CD5、CD3CD7T與陰性對照相比，CD4診斷：AML微分化型，CD34和HLA-DR陰性。實驗室進一步診斷：MPO（免疫組化）陽性，NSE陰性，46XY，t(3;5)(q25;q34)重要說明：本例中白血病細胞免型表型為：CD34-、HLA-DR-，CD13+，CD33+AML-M3AML-M3FCM結(jié)如下：（）表達CD1（leu-M3，盡管表達有所降低（SSCAML-M3vSSCM3vCD13（CD13/CD33。有時AML-M3CD13。對于這些疑難病例需要借助分子遺傳學和細胞遺傳學診斷工具來建立正確的診斷。其他標記物如：Bcells(CD19,CD20,Kappa,Lambda),CD10(Calla),CD5(Tcells),CD41(platelet)都是陰性。光散射圖中顯示在前向散射光和表示顆粒度的側(cè)向散射光有一群處于中間位置的細胞。這與組織學檢測結(jié)果相一致。（暫無圖）CD45/CD14CD45CD14（99%）。CD45于成熟淋巴細胞，可能是由髓系細胞和未成熟幼稚細胞組成。（暫無圖）HLADR/CD3DR（81%）CD3（T）TB（CD45）。DRBTCD34/CD38CD34CD38CD38BALLAML（CD45），前B（CD14陰性）。CD13/CD15等高圖中顯示大部分細胞（63%）髓系抗原CD13/CD15陰性。但此處提供了一絲線索，因為有些細胞（30%）表達低水平CD15。絕大部分AMLM1-M6細胞同時表達CD13和CD15。CD33/TdT）。無細胞表達TdTAML-M0/M1。CD11b/GPAGPA髓系干細胞。CD11bNK這些細胞還同時表達CD7。這使人感覺有誤，但現(xiàn)已知早期髓系白血病細胞可偶然同時表達CD7。M0M1M0M1MPOM1M0。M1免疫分型幼稚細胞成群，RALS信號弱。M1與M0很難區(qū)分，但M1細胞大小及顆粒度較M0稍大，與原粒細胞接近。至少伴隨一種髓系抗原：CD13或CD33。高表達HLA-DR，CD34陽性但較M0弱,>3%的幼稚細胞表達MPO，較M0多。不表達CD11B，CD15，CD16等。M1:CD11B-/+,HLA-DR+,CD13+,CD33+,CD34+,CD14+,MPO+,TdT-/+to+/-M2免疫分型CD45/RALSM1M2BLASTWINDOWSM2M1CD33CD71胞強。CD13CD33。M2腫瘤細胞弱表達CD15與CD11B,說明細胞已分化。CD34表達顯著降低。M2CD5,CD7TdTt(8;21),CD19CD56MPOM2t(8;21CD13-，CD33-，CD14MPO+。細胞分布廣泛，幼稚細胞較M1少。CD13和CD33陽性，且CD13表達高于CD33。HLA-DR陽性，CD15弱陽性。M2腫瘤細胞伴t（8，21）CD19陽性。M3免疫分型M3VRALSSS胞。腫瘤細胞大，F(xiàn)SCD45/RALSM3M3VM3SS/FSM3與M3V在免疫表型上無區(qū)別。M3CD34HLA-DRCD9特異。CD2M3M3VHLA-DRt(15,17)異常相關。CD33CD13CD15，CD16CD11B。腫瘤細胞完全不表達CD15，與正常早幼粒細胞表達CD15SMPOMPOLACTOFERINCD2TBM3腫瘤細胞因其胞漿內(nèi)多顆粒，細胞具有很強的自發(fā)熒光。M3:CD33+,CD13+,MPO+,CD34-,HLA-DR-,CD11b-,CD14-,CD15-,TdT-M4免疫分型M4CD45/RALSM0，M1FSSSBLASTWINDOWSM4不同，表型也可能互不相同。本例為M4EO，增多的嗜酸細胞RALSCD45R4門中紫色細胞。幼稚細胞群表達CD34，HLA-DR，而異常單核細胞則CD34陰性，HLA-DR陽性。CD33CD14CD33CD14，CD64CD64中強陽性表達則為單核細胞特異性標志。M4CD11B/CD15CD2M4EO16M4/blastpopulation:CD13+,CD33+,CD34+,HLADR+,CD11b-,CD14-M4/abnomal monocyticcell:CD13+,CD33+,CD34-,HLA-DR+,CD11b+,CD14+/-,CD4+/-M5免疫分型M5CD45M5M5aM5bCD45CD15/CD11BCD15的粒細胞.不成熟的單核細胞CD11B表達弱.如出現(xiàn)CD33陽性，CD13，CD34陰性。M5腫瘤細胞通常高表達CD33，CD13表達多樣。CD4是髓系幼稚細胞向單核系分化的敏感指標。CD14CD14AMMLCD61M5a:HLA-DR+,CD11b+/-,CD34+,CD33+,CD13+,CD14-/+,CD4+/-M5b:HLA-DR+,CD11b+,CD34-,CD13+,CD16+/-,CD14+,CD4+/-M6免疫分型本例中可見兩群幼稚細胞，M650%強，而其他系別的幼稚細胞30M6M6CD71AHLA-DR，CD34CD33CD13很多M6病例中會出現(xiàn)一群髓系幼稚細胞，如本例中的紅色細胞群體。M6;CD71+,GP-A+,CD34+/-,HLA-DR+/-,CD13+/-,CD33+/-,CD34+/-,CD14-,CD11b-M7免疫分型本例中幼稚細胞CD45/RALS信號都不強。與B-ALL，M6的腫瘤細胞相似。M7CD61CD41CD41CD61，CD62CD41CD61本例CD34陽性，CD71弱陽，其他系別抗原不表達。其他系別抗原均為陰性，與M0、M1相似。M7:HLA-DR+,CD34+,CD33+/-,CD14-,MPO-,TdT-TALL免疫分型T-ALLCD45B-ALLCD45/SSCBLASTWINDOWS單核細胞區(qū)或與正常淋巴細場胞相混。CD10T-ALLCD19CD3440T-ALLCD34T-ALLCD3PECD3CD3/CD5TTCD4/CD8TCD4/CD8T-ALL。T-ALLCD730AMLCD7HLA-DRT-ALL，特別是在兒童，CD7HLA-DR，AMLCD7HLA-DRT-ALLTpre-thymic：CD7+，CD1a-，CD4/8-，CD3-；thymic:CD7+，CD4/8+，CD3-；matrue:CD3+,CD1a-;原始T細胞ALL與AML很難區(qū)分，要加測胞漿內(nèi)CD3。T-ALLTdTCD4CD8CD3TdT。T-ALL的共同特征是：下調(diào)表達T系抗原或出現(xiàn)異常抗原的聯(lián)合表達。BALL免疫分型BB-ALL表達及其表達位置。具體情況如下：1,成熟B細胞ALL表達表面免疫球蛋白（sIg）2,前B細胞ALL細胞胞漿內(nèi)表達免疫球蛋白重鍵(cu)而不表達輕鏈3,早前B-ALL則兩者都陰性BcuIgB-ALL。B（B-precursororearly6550FABL1L2BCD34HLA-DRTdTCD10BCD19BBCD9，CD22CD24；這BCD20CD20CD20CD20BBBALLBCD10CD1011q23MLL其他"11q23CD15CD24。白血病細胞通常CD34BCD19t(9;22BCR-ABLALLPh1CD34CD10CD19CD25Bt(12;21)(p21;q22)的病例預后TEL/AML1，B1-10CD19，CD10HLA-DR，CD34，部分細CD20CD10CD9CD20TEL/AML1B-precursor-ALLFS/SS，CD45CD45/SSCFABL1L2B-precursor-ALL的腫瘤細胞CD10/CD19強陽性，CD33弱陽性如使用PE標記的CD33抗體檢測陽性增強但不可據(jù)此判定為混合型白血病。CD10B-precursor-ALLCD10CD10-，CD10+的病人預后較好B-precursor-ALLB-cell-ALLPRE-B-ALLCD19，HLA-DRB-ALLCD22CD20