常見(jiàn)細(xì)菌課件

第六章病原性微生物

第一節(jié)常見(jiàn)病原性細(xì)菌葡萄球菌屬概述生物學(xué)特性致病性免疫性微生物學(xué)檢查防治原則內(nèi)容概述萄球菌屬?gòu)V泛分布于自然界，包括30多個(gè)種，其中金黃色葡萄球菌（S.aureus）是人類最重要的化膿性細(xì)菌，近年來(lái)，由于廣泛應(yīng)用抗生素，耐藥菌株迅速增加，尤其是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（methicillin-resistantS.aureus，MRSA），已成為醫(yī)院感染的最重要的病原菌

生物學(xué)性狀1.形態(tài)和染色球形或橢圓形，典型排列呈葡萄串狀，無(wú)鞭毛，無(wú)芽胞，體外培養(yǎng)時(shí)一般不形成莢膜，革蘭染色為陽(yáng)性。2.培養(yǎng)特性血平板營(yíng)養(yǎng)要求不高形成脂溶性的金黃色、白色或檸檬色等色素血瓊脂平板上，有的菌株菌落周圍出現(xiàn)溶血

普通平板3.生化反應(yīng)(1)觸酶陽(yáng)性。(2)多數(shù)能分解葡萄糖,麥芽糖和蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。(3)致病菌株能分解甘露醇，非致病菌株不分解。5、分類：

（1）根據(jù)凝固酶的有無(wú)來(lái)分類，分為兩大類:凝固酶陽(yáng)性菌株凝固酶陰性菌株（2）根據(jù)色素、生化反應(yīng)等不同，分為三種：性狀金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌色素

金黃色白色白色或檸檬色凝固酶+--甘露醇+--溶血性β--耐熱核酸酶+--SPA+--致病性強(qiáng)弱無(wú)

三種葡萄球菌的主要性狀6、抵抗力（1）強(qiáng)于其它無(wú)芽胞細(xì)菌。在干燥膿汁、痰液中可存活2-3個(gè)月。（2）耐鹽性強(qiáng)在含10%-15%NaCl培養(yǎng)基中仍能生長(zhǎng)。（3）耐藥性嚴(yán)重

耐甲氧西林金黃色葡萄球菌。Pathogenesis㈠致病物質(zhì)1、凝固酶（coagulase)

能使含有枸櫞酸鈉或肝素等抗凝劑的人或兔血漿發(fā)生凝固的酶類物質(zhì)鑒別葡萄球菌有無(wú)致病性的重要指標(biāo)。凝固酶與葡萄球菌的毒力關(guān)系①抗吞噬細(xì)胞的吞噬。②保護(hù)細(xì)菌不受血清中殺菌物質(zhì)的破壞。③易局限化。④形成血栓與此酶生成有關(guān)。2、葡萄球菌溶素

對(duì)人致病的主要是α溶素。蛋白質(zhì)，不耐熱，可溶解紅細(xì)胞，對(duì)多種細(xì)胞如血小板、白細(xì)胞、皮膚細(xì)胞有損傷作用。

4.腸毒素(enterotoxin)

分為A、B…H9個(gè)血清型均能引起食物中毒。蛋白質(zhì)，耐熱，100℃30min不被滅活，抵抗胃液中的蛋白酶的水解作用，引起食物中毒。5、表皮剝脫毒素也稱表皮溶解毒素，引起燙傷樣皮膚綜合征（也稱剝脫性皮炎）。開(kāi)始皮膚有紅斑，1-2天后表皮起皺出現(xiàn)大疤，然后脫落。6、毒性休克綜合征毒素-1

(toxicshocksyndrometoxin,TSST-1)

起機(jī)體發(fā)熱，增加對(duì)內(nèi)毒素的敏感性。亦可引起機(jī)體多個(gè)器官系統(tǒng)的功能紊亂或毒性休克綜合征。㈡所致疾病

1、化膿性疾病

（1)局部感染:如皮膚軟組織感染如膿皰瘡、癤、癰、蜂窩組織炎等，及肺炎、膿胸等器官感染。（2)全身感染:敗血癥、膿毒血癥等2、毒素性疾病（1)食物中毒（2)燙傷樣皮膚綜合征（3)毒性休克綜合征3、葡萄球菌性腸炎

免疫性人類對(duì)葡萄球菌有一定天然免疫力，只有皮膚受傷或機(jī)體免疫力下降時(shí)，才易感染。感染后免疫力不強(qiáng)，下次可以再次感染。(一)標(biāo)本1、化膿感染2、敗血癥3、腦膜炎4、食物中毒Laboratorydiagnosis——膿汁——血液——腦脊液——剩余食物、嘔吐物、糞便。(二)直接涂片染色鏡檢根據(jù)形態(tài)、排列和染色性可作初步診斷。防治原則防

注意個(gè)人衛(wèi)生

防止醫(yī)源性感染

注意消毒隔離

防止耐藥性產(chǎn)生治

抗菌素藥敏試驗(yàn)自身菌苗療法1.致病性與非致病性葡萄球菌的鑒別要點(diǎn)。2.血漿凝固酶定義，類型，使血漿凝固的原理。3.金黃色葡萄球菌所致疾病以及防治原則。

腸道桿菌概述

大多為正常菌群，某些情況下可成為條件致病菌。部分為致病菌。如：傷寒沙門菌，志賀菌、致病性大腸埃希菌。

一大群寄居于人、動(dòng)物腸道內(nèi)的生物學(xué)性狀相似的G－桿菌。共同特性：1、形態(tài)、結(jié)構(gòu)：中等大小、G－桿菌、無(wú)芽胞，多數(shù)有鞭毛（除志賀菌、EIEC）

、菌毛。2、培養(yǎng)特性：

兼性厭氧或需氧。營(yíng)養(yǎng)要求不高。3、生化反應(yīng)：乳糖發(fā)酵試驗(yàn)：在初步鑒別腸道致病菌與非致病菌有重要意義。致病菌：非致病菌：一般不分解乳糖多數(shù)分解乳糖4、Ag結(jié)構(gòu)：(1)菌體(O)Ag：存在于所有G－細(xì)胞壁脂多糖層，耐熱。(2)鞭毛(H)Ag：鞭毛蛋白，不耐熱。(3)莢膜或包膜Ag：Vi抗原，K抗原。(4)腸道桿菌共同抗原(5)菌毛抗原5、變異：耐藥性變異6、傳播途徑專一性7、致病物質(zhì)同一性埃希菌屬E.coliwithfimbriae一、致病性致病物質(zhì)：黏附素：菌毛、定居因子抗原內(nèi)毒素外毒素K抗原一、致病性——所致疾病(一)腸外感染：以化膿性感染和泌尿道感染最常見(jiàn)，如敗血癥，新生兒腦膜炎，泌尿道感染。(二)腸道感染:某些血清型引起，與食入污染的食品和飲水有關(guān)，有六種類型1、腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌

(enterotoxigenicE.coli,ETEC)(1)所致疾病：嬰幼兒,旅游者腹瀉(2)致病物質(zhì)：腸毒素、定植因子(3)致病機(jī)理：

不耐熱腸毒素(heatlabileenterotoxin,LT):（由1個(gè)A亞單位，5個(gè)B亞單位組成）

B亞單位：與腸粘膜上皮細(xì)胞表面GM1

神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合。A亞單位：作用于腺苷環(huán)化酶→ATP轉(zhuǎn)化為cAMP→液體、電解質(zhì)過(guò)度分泌，導(dǎo)致腹瀉。

耐熱腸毒素:

(heatstableenterotoxin,ST)

激活腸粘膜細(xì)胞上鳥苷環(huán)化酶

→胞內(nèi)cGMP↑，腹瀉。2、腸侵襲型大腸埃希菌(enteroinvasiveE.coli,EIEC)(1)疾?。阂疠^大兒童、成人膿血便、類似菌痢，有發(fā)熱，腹痛、腹瀉、里急后重。(2)致病機(jī)理：不產(chǎn)生腸毒素，侵襲結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞。3、腸致病型大腸埃希菌(enteropathogenicE.coli,EPEC)

主要引起嬰幼兒腹瀉。不產(chǎn)生腸毒素，也無(wú)侵襲力，病菌黏附于微絨毛，導(dǎo)致刷狀緣被破壞，微絨毛萎縮、上皮細(xì)胞排列及功能紊亂，造成水樣腹瀉。

4、腸出血型大腸埃希菌（enterohemorrhagic

E.coli,EHEC)引起出血性腸炎和溶血性尿毒綜合征機(jī)制：志賀毒素Ｓtx中斷蛋白質(zhì)合成，引起上皮細(xì)胞微絨毛的破壞。5、腸集聚型大腸桿菌（enteroaggregativeE.coli,EAEC)

引起嬰兒持續(xù)性腹瀉，水樣便。機(jī)理：菌毛黏附于腸上皮細(xì)胞表面并形成磚塊狀排列，產(chǎn)生毒性的物質(zhì)并干擾腸液吸收。引起腹瀉的大腸埃希菌

菌株

作用

部位

疾病與癥狀

致病機(jī)制

ETEC

小腸

旅行者腹瀉，嬰幼兒腹瀉，水樣便，惡心，嘔吐，腹痛，低熱

LT和（或）ST腸毒素，大量分泌液體和電解質(zhì)

EIEC

大腸

水樣便，少量血便，腹痛，發(fā)熱

質(zhì)粒介導(dǎo)侵襲和破壞結(jié)腸粘膜上皮細(xì)胞

EPEC

小腸

嬰兒腹瀉，水樣便，惡心，嘔吐，發(fā)熱

質(zhì)粒介導(dǎo)粘附和破壞上皮細(xì)胞

EHEC

大腸

水樣便，大量出血，劇烈腹痛，低熱或無(wú)，可并發(fā)HUS、血小板減少性紫癜

SLT-I或SLT-II，中斷蛋白質(zhì)合成

EAggEC

小腸

嬰兒持續(xù)性腹瀉，嘔吐，脫水，低熱

集聚性粘附上皮細(xì)胞，阻止液體吸收

(一)標(biāo)本

腸道外感染取中段尿、血液、膿液、腦脊液，腸道內(nèi)感染取糞便。(二)分離培養(yǎng)和鑒定

初步鑒定靠IMViC（++--），最后鑒定靠系列生化試驗(yàn)。二、微生物學(xué)檢查法

水、食品等衛(wèi)生細(xì)菌學(xué)檢查我國(guó)衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)：每升飲水≤3個(gè)大腸菌群每100ml瓶裝汽水、果汁等≤5個(gè)防治原則疫苗母乳中sIgA可中和大腸埃希菌腸毒素，故母乳喂養(yǎng)嬰兒可減少嬰兒腹瀉的發(fā)生。治療選用磺胺、慶大霉素、氟派酸等，但易產(chǎn)生耐藥性。沙門菌屬(Salmonella)寄生于人、動(dòng)物腸道。對(duì)人致病：傷寒、副傷寒的沙門菌。對(duì)動(dòng)物和人致病的有鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌、豬霍亂沙門菌等。一、生物學(xué)性狀1、形態(tài)結(jié)構(gòu)：有周鞭毛、菌毛、無(wú)莢膜。2、生化反應(yīng)：不發(fā)酵乳糖。

3、Ag結(jié)構(gòu)：主要有O、H、ViAgOAg：至少58種,每個(gè)沙門菌的血清型含有一種或多種抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生IgM。HAg：分為第Ⅰ和第Ⅱ相兩種，刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG。ViAg：Ag性弱，不穩(wěn)定,可阻止O抗原與其相應(yīng)的抗體起凝集反應(yīng)。4、抵抗力較差水中能存活2-3W糞便中可活1-2個(gè)月冰凍土壤中可過(guò)冬耐受膽鹽、煌綠及其他染料對(duì)熱耐力差二、致病性：(一)致病物質(zhì)：

1、侵襲力：耐酸應(yīng)答基因、菌毛、Vi抗原菌毛：與M細(xì)胞結(jié)合，SPI-Ⅰ分泌侵襲蛋白通過(guò)M細(xì)胞輸入到巨噬細(xì)胞，引起宿主細(xì)胞內(nèi)肌動(dòng)纖維的重排，誘導(dǎo)細(xì)胞膜內(nèi)陷，導(dǎo)致細(xì)菌內(nèi)吞，并且在吞噬小泡內(nèi)生長(zhǎng)繁殖導(dǎo)致宿主細(xì)胞死亡，并且可擴(kuò)散進(jìn)入鄰近的淋巴細(xì)胞組織。耐酸應(yīng)答基因：使在胃和吞噬體內(nèi)得到保護(hù)。

Vi抗原：(一)致病物質(zhì)：

2內(nèi)毒素：、

3、腸毒素：

宿主體溫↑，WBC↓，腸熱癥主要由內(nèi)毒素引起。引起腹瀉。(二)所致疾病：1、傷寒和副傷寒病菌-→消化道-→穿過(guò)小腸粘膜-→淋巴結(jié)-→大量繁殖-→入血(第一次菌血癥)-→全身多個(gè)器官-→再次入血(第二次菌血癥)1.腸熱癥攝入的細(xì)菌腸系膜淋巴結(jié)胸導(dǎo)管全身疼痛、不適發(fā)熱（前驅(qū)期）菌血癥肝、脾、腎及膽囊等吞噬細(xì)胞吞噬膽囊腎臟持續(xù)高熱、肝脾腫大、全身中毒、玫瑰疹、相對(duì)緩脈菌血癥進(jìn)入腸壁淋巴組織糞便尿并發(fā)癥：腸穿孔、血栓性靜脈炎、膽囊炎典型病例病程為3-4W孤立和集合淋巴結(jié)壞死潰瘍淋巴管(二)所致疾?。旱湫桶Y狀前驅(qū)癥狀：發(fā)熱、不適、全身疼痛等第二次菌血癥：體溫階梯上升（３９-４０℃），保持７-１０天；相對(duì)脈緩；肝脾腫大；玫瑰疹。并發(fā)癥：腸出血和腸穿孔。傷寒瑪麗2、食物中毒(腸炎型)：一次攝入大量病菌。

癥狀:發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、水樣腹瀉，偶有黏液或膿性腹瀉。

3、敗血癥：

多見(jiàn)于兒童或免疫力低下的成人。癥狀：高熱、寒戰(zhàn)、厭食、貧血等，腸道癥狀少，并發(fā)腦膜炎、骨髓炎、膽囊炎、關(guān)節(jié)炎等。４.無(wú)癥狀帶菌者

與年齡、性別關(guān)系密切三、免疫性：細(xì)胞免疫為主病后有較牢固免疫力四、微生物學(xué)檢查傷寒和付傷寒 食物中毒敗血癥第1周取靜脈血 可疑食物 血第1-3周取骨髓液 嘔吐物 第2周起取糞、尿 糞 標(biāo)本SS平板生化反應(yīng)血清學(xué)鑒定雙糖發(fā)酵等玻片凝集試驗(yàn)肥達(dá)反應(yīng)（Widalreaction）用已知傷寒沙門菌O、H和甲型副沙寒沙門菌和肖氏沙門菌H抗原與病人血清做定量凝集試驗(yàn)，用以輔助診斷腸熱癥判定結(jié)果時(shí)，應(yīng)著重考慮：正常凝集價(jià)傷寒沙門菌O抗體的凝集價(jià)1：80以上，H抗體1：160以上甲型副傷寒、肖氏沙門菌H抗體凝集價(jià)在1：80以上動(dòng)態(tài)觀察O與H抗體的診斷意義H與O抗體的性質(zhì)及其消長(zhǎng)意義預(yù)防接種；非特異性回憶反應(yīng)感染早期、其他沙門菌引起的交叉反應(yīng)患腸熱癥可能性大高低高出現(xiàn)較晚，維持時(shí)間長(zhǎng)IgGH抗體低高高出現(xiàn)較早，維持時(shí)間短IgMO抗體體內(nèi)出現(xiàn)情況體內(nèi)出現(xiàn)情況抗體類型防治原則加強(qiáng)水源和食品衛(wèi)生管理疫苗傷寒、甲及乙型副傷寒3聯(lián)菌苗Ty2la傷寒沙門菌口服活菌苗傷寒Vi莢膜多糖疫苗治療以氯霉素效果較好病史：任某，男，21歲，醫(yī)學(xué)院學(xué)生，于三周前進(jìn)行細(xì)菌學(xué)實(shí)驗(yàn)時(shí)，不慎將裝培養(yǎng)物的試管打破，菌液濺到手指和桌面，當(dāng)即用肥皂洗手多次，下課后進(jìn)食堂用餐?；厥疑岷蟀l(fā)現(xiàn)自己的指甲過(guò)長(zhǎng)，便修剪了指甲。于5天前無(wú)明顯誘因出現(xiàn)發(fā)冷發(fā)燒，全身不適，多汗，食欲不振等。體檢：患者呈急性面容、潮紅、神清但略有呆滯，前胸見(jiàn)散在的細(xì)小紅色丘疹。體溫39.4℃，脈緩52次/min，睥可觸及，白細(xì)胞3600/mm3，余均正常。問(wèn)題：該同學(xué)感染了什么細(xì)菌，診斷是什么疾病，如何檢查？Laboratorydiagnosis診斷路線：鏡檢采集標(biāo)本分離培養(yǎng)純培養(yǎng)

鏡檢生化反應(yīng)結(jié)論血清學(xué)試驗(yàn)思考題1.常見(jiàn)的痢疾是由哪些細(xì)菌引起？2.腸產(chǎn)毒型大腸桿菌的致病機(jī)制？3.肥達(dá)氏反應(yīng)的原理以及結(jié)果判斷？一、生物學(xué)性狀形態(tài)染色G+細(xì)桿狀，周毛菌，無(wú)莢膜，芽胞正圓形，位于菌體頂端，大于菌體寬度，呈鼓槌狀。破傷風(fēng)梭菌

培養(yǎng)特性專性厭氧，血平板上呈擴(kuò)散生長(zhǎng)，有β溶血，不發(fā)酵糖類，不分解蛋白質(zhì),肉渣培養(yǎng)基生長(zhǎng)良好（混濁、變黑、有腐臭味）。抵抗力強(qiáng)，芽胞在干燥土壤中可存活數(shù)十年，耐熱100℃1h，對(duì)青霉素敏感致病性與免疫性傳染途徑及傷口條件破傷風(fēng)為創(chuàng)口感染能否發(fā)生感染的條件——傷口的厭氧微環(huán)境傷口窄而深，混有泥土及異物壞死組織多，局部缺血伴有需氧菌或兼性厭氧菌的混合感染

致病物質(zhì)——破傷風(fēng)痙攣毒素（外毒素）為神經(jīng)毒素，毒性強(qiáng)，僅次于肉毒毒素，與脊髓前角運(yùn)動(dòng)細(xì)胞及腦干細(xì)胞有高度的親和力。毒素與中樞神經(jīng)組織結(jié)合非常牢固，一旦結(jié)合即非抗毒素所能中和。破傷風(fēng)痙攣毒素可與中樞神經(jīng)抑制性突觸前膜的神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合，阻斷抑制性介質(zhì)的釋放，導(dǎo)致神經(jīng)持續(xù)興奮，骨骼肌強(qiáng)直性痙攣，肌張力↑

特點(diǎn)為：不耐熱，65℃30min即被破壞；易被蛋白酶分解破壞破傷風(fēng)痙攣毒素破傷風(fēng)痙攣毒素的作用機(jī)制所致疾病——破傷風(fēng)潛伏期：幾天至幾周典型體征：牙關(guān)緊閉、吞咽困難、苦笑面容、角弓反張等，陣發(fā)性抽搐等，嚴(yán)重者因呼吸肌痙攣窒息死亡。微生物學(xué)檢查：臨床診斷防治原則正確處理傷口——防止形成厭氧微環(huán)境人工自動(dòng)免疫——類毒素（百白破三聯(lián)疫苗）人工被動(dòng)免疫——破傷風(fēng)抗毒素緊急預(yù)防特異性治療治療—抗毒素+抗生素+鎮(zhèn)靜解痙藥物微生物學(xué)檢查與防治分枝桿菌屬(Mycobacterium)分枝桿菌屬是一類細(xì)長(zhǎng)略彎曲的桿菌，有時(shí)呈分枝生長(zhǎng)趨勢(shì)，故得名。抗酸染色陽(yáng)性，又呈抗酸桿菌主要包括：結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)分枝桿菌、非結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌

（M.tuberculosis)

結(jié)核病的病原菌世界上1/3人感染，70%在亞洲形態(tài)與染色細(xì)長(zhǎng)略帶彎曲，呈分枝狀抗酸染色陽(yáng)性L型Much顆粒專性需氧生長(zhǎng)緩慢營(yíng)養(yǎng)要求高，在羅氏固體培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好，呈菜花狀培養(yǎng)特性“懶、饞、變”花菜樣菌落生化反應(yīng)

結(jié)核分枝桿菌大多數(shù)觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性，而熱觸酶試驗(yàn)陰性，非結(jié)核分枝桿菌則大多數(shù)兩種試驗(yàn)均陽(yáng)性抵抗力

（四怕）（四不怕）對(duì)乙醇敏感對(duì)濕熱敏感對(duì)紫外線敏感對(duì)抗結(jié)核藥物敏感抗干燥抵酸堿抗堿性染料對(duì)青霉素等抗生素耐藥強(qiáng)變異性可發(fā)生形態(tài)變異、菌落變異、毒力變異、耐藥性變異卡介苗（BCG）：是毒力變異株耐藥變異：多重耐藥結(jié)核?。∕DRTB）（一）致病物質(zhì)無(wú)毒素與侵襲性酶類與菌體成分有關(guān)1、脂質(zhì)索狀因子：為分枝菌酸和海藻糖結(jié)合的糖脂，與結(jié)核桿菌索狀生長(zhǎng)現(xiàn)象有關(guān)；能破壞細(xì)胞線粒體膜，影響細(xì)胞呼吸，抑制白細(xì)胞游走和引起慢性肉芽腫；分枝菌酸與細(xì)菌的抗酸性染色有關(guān)。磷脂：促使單核細(xì)胞增生，與結(jié)核結(jié)節(jié)的形成及干酪樣壞死有關(guān)。蠟質(zhì)D：是肽糖脂和分枝菌酸的復(fù)合物，可激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生遲發(fā)型超敏反應(yīng)。硫酸腦苷脂：抑制吞噬細(xì)胞中吞噬體與溶酶體的結(jié)合，使細(xì)菌能在吞噬細(xì)胞中長(zhǎng)期存活。1、脂質(zhì)2、蛋白質(zhì)是結(jié)合菌素的主要成分，和蠟質(zhì)D結(jié)合后能使機(jī)體發(fā)生超敏反應(yīng)。在形成結(jié)核結(jié)節(jié)中發(fā)揮一定作用。3、多糖與脂質(zhì)成分結(jié)合存在于胞壁中，致病作用尚不清楚（二）所致疾病感染方式呼吸道、消化道或皮膚損傷等多途徑侵入機(jī)體致病機(jī)制：細(xì)菌增殖引起的炎癥反應(yīng)菌體成分的毒性作用機(jī)體產(chǎn)生超敏反應(yīng)1、肺部感染原發(fā)感染多發(fā)生于兒童原發(fā)綜合征繼發(fā)感染多發(fā)生于成人病灶局限，不易擴(kuò)散易發(fā)生干酪樣壞死和空洞2、肺外感染結(jié)核分枝桿菌可進(jìn)入血液循環(huán)引起肺內(nèi)、外播散，如腦、腎結(jié)核、脊柱結(jié)核等。結(jié)核分枝桿菌進(jìn)入消化道可引起腸結(jié)核、結(jié)核性腹膜炎等。（三）免疫性結(jié)核的免疫屬于感染免疫，又稱有菌免疫。即此種免疫力隨結(jié)核分枝桿菌或其成分在體內(nèi)存在而存在。屬胞內(nèi)感染菌，其免疫主要是以