(4.6)-第五篇第二十章中成藥類(lèi)

第五篇中成藥類(lèi)

第二十章中成藥的鑒定

第一節(jié)中成藥鑒定概述中成藥鑒定(Chinesepatentmedicinesauthentication)就是通過(guò)一定的檢測(cè)手段和方法對(duì)其組成進(jìn)行品種和質(zhì)量把關(guān)，控制中成藥的質(zhì)量。一、古代的中成藥鑒定：自古以來(lái)，流傳著“丸散膏丹，神仙難辨”的說(shuō)法。許多本草著作都不同程度地反映了中藥制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。1、《五十二病方》其成書(shū)早于《黃帝內(nèi)經(jīng)》，該書(shū)中已記載了一些制劑的劑型。2、漢代《傷寒論》、《金匱要略》已較系統(tǒng)地記述了制劑的工藝和標(biāo)準(zhǔn)。3、宋代公元1107年頒布《太平惠民和劑局方》時(shí)，中藥制劑已經(jīng)有比較統(tǒng)一的制劑規(guī)范。此后，明清的重要著作都不同程度地反映了中藥制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。二、近現(xiàn)代中成藥鑒定：由于大多數(shù)中藥的有效成分尚不十分清楚，致使中成藥鑒別與質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究工作發(fā)展緩慢，隨著科學(xué)儀器的進(jìn)步，多學(xué)科的協(xié)作，中成藥鑒別和質(zhì)量控制也逐漸發(fā)展和成熟起來(lái)。1、《中國(guó)藥典》從1977年版開(kāi)始收載顯微鑒別法，對(duì)含有原藥材粉末的中成藥進(jìn)行定性鑒別，少數(shù)品種增加了理化分析，對(duì)個(gè)別品種按制劑通則要求進(jìn)行水分、灰分測(cè)定，醇溶性提取物的測(cè)定及重金屬檢查等的測(cè)定。2、《中國(guó)藥典》1985年版對(duì)中成藥鑒別采用了薄層色譜法。3、《中國(guó)藥典》1990年版中薄層色譜法得到了廣泛的應(yīng)用，并開(kāi)始應(yīng)用薄層掃描法和分光光度法對(duì)中成藥進(jìn)行含量測(cè)定。二、近現(xiàn)代中成藥鑒定：

4.《中國(guó)藥典》1995年版應(yīng)用薄層掃描法、光譜法進(jìn)行含量測(cè)定的中成藥數(shù)量增加到9種和18種，并開(kāi)始應(yīng)用高效液相色譜法(3種)進(jìn)行含量測(cè)定。5.《中國(guó)藥典》2000年版用高效液相色譜法進(jìn)行含量測(cè)定的中成藥數(shù)目達(dá)50種，薄層掃描法達(dá)30種，分光光度法達(dá)25種，并開(kāi)始應(yīng)用氣相色譜法對(duì)4種中成藥進(jìn)行含量測(cè)定，使控制中成藥質(zhì)量水平進(jìn)一步提高。6.《中國(guó)藥典》2005年版新增中成藥116種，并且在上一版藥典的基礎(chǔ)上增加了中藥注射劑安全性檢查法應(yīng)用指導(dǎo)原則。7.《中國(guó)藥典》2010年版新增中成藥499種，大量采用高效液相色譜法進(jìn)行含量測(cè)定，薄層色譜（TLC）鑒別技術(shù)，所有含生藥粉的中成藥都增加了專(zhuān)屬性很強(qiáng)的粉末顯微鑒別。

8.《中國(guó)藥典》2015年版新增中成藥437種，進(jìn)一步擴(kuò)大了對(duì)新技術(shù)、新方法的應(yīng)用，以提高檢測(cè)的靈敏度、專(zhuān)屬性和穩(wěn)定性。三、中成藥鑒定（質(zhì)量控制）的研究與探討1、中成藥原料的鑒定：中成藥的原料（中藥材）是保證中成藥質(zhì)量的基礎(chǔ)，在進(jìn)行中成藥制劑加工前，應(yīng)首先進(jìn)行原料藥材的鑒定，保證品種準(zhǔn)確，質(zhì)量合格。2、制劑工藝生產(chǎn)過(guò)程的質(zhì)量監(jiān)控：在中成藥生產(chǎn)過(guò)程中，要加強(qiáng)中間環(huán)節(jié)、半成品的質(zhì)量監(jiān)控，如提取后進(jìn)行含量測(cè)定，保證提取環(huán)節(jié)的合格等。3、中成藥產(chǎn)品的質(zhì)量監(jiān)控：中成藥生產(chǎn)完成后，應(yīng)嚴(yán)格按照其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)（國(guó)標(biāo)或廠標(biāo)）進(jìn)行質(zhì)量檢驗(yàn)和鑒定。其內(nèi)容包括：（1）中成藥外觀鑒定：按照《藥典》制劑通則項(xiàng)下之規(guī)定，對(duì)不同的制劑有不同的鑒定內(nèi)容。主要有形狀、顏色、重量（裝量）差異、氣味；溶解（崩解）時(shí)限等。（2）中成藥顯微鑒定：僅適用于以中藥材粉碎后直接制劑的品種；對(duì)提取、過(guò)濾制劑的品種不適宜。（3）中成藥理化鑒定：對(duì)已知中成藥主要成分的可進(jìn)行定性定量鑒定；對(duì)由于中成藥成分復(fù)雜，目前的科學(xué)技術(shù)尚不能完全分析清楚的，現(xiàn)在多應(yīng)用色譜技術(shù)（TLC、HPLC、GC）等進(jìn)行理化鑒別；對(duì)其成分不詳或現(xiàn)有方法不能較好鑒定的，可應(yīng)用浸出物（醇、水、醚）含量測(cè)定方法進(jìn)行鑒定。（4）中成藥生物鑒定：僅限于某些動(dòng)物藥材來(lái)源的中成藥。（5）中成藥安全性鑒定：灰份、水分、重金屬含量等第二節(jié)中成藥的劑型

劑型是指根據(jù)臨床要求與藥物性質(zhì)，將原料藥加工制成便于生產(chǎn)、運(yùn)輸、貯藏與應(yīng)用的具有一定質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的制劑形式。一、固體劑型1、丸劑2、散劑3、顆粒劑蜜丸水蜜丸水丸糊丸蠟丸微丸濃縮丸內(nèi)服散劑外用散劑硬膠囊劑軟膠囊劑腸溶膠囊劑一、固體劑型5、片劑6、微囊劑7、栓劑8、滴丸劑9、膏藥10、膜劑（薄膜劑）11、橡膠膏劑12、丹劑13、膠劑14、錠劑全粉末片半浸膏片浸膏片提純片素片包衣片糖衣片薄膜衣片半薄膜衣片腸溶衣片肛門(mén)栓陰道栓黑膏藥白膏藥二、半固體劑型三、液體制劑四、氣體制劑煎膏劑軟膏劑合劑口服液酒劑糖漿劑注射劑溶劑型注射劑混懸型注射劑乳濁型注射劑注射用粉針劑氣霧劑噴霧劑第三節(jié)中成藥鑒定常用方法一、定性鑒別中成藥的定性鑒別是利用其各單味藥的形態(tài)、組織粉末特征及所含有的化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)特性、主要化學(xué)反應(yīng)、光譜特性、色譜特性及某些物理化學(xué)常數(shù)來(lái)鑒別各組成藥材的有無(wú)及真?zhèn)吻闆r。中藥復(fù)方制劑一般藥味較多，逐一鑒別尚有困難，應(yīng)注意鑒別對(duì)象的選擇，君藥、臣藥為主要對(duì)象，其次是劇毒藥及貴重藥。常用的方法主要有顯微鑒別法、一般化學(xué)反應(yīng)法、升華法、熒光法、光譜法、色譜法、以及X射線(xiàn)衍射法等。二、含量測(cè)定中成藥含量測(cè)定的原則：對(duì)有效成分明確的中成藥要進(jìn)行有效成分的含量測(cè)定。2.中成藥中某些藥材，有效成分大致明確，如生物堿、黃酮、揮發(fā)油等，要測(cè)定這些成分的總含量。3.對(duì)有效成分已知但尚無(wú)理想的測(cè)定方法的中成藥，可以通過(guò)對(duì)代表性或指標(biāo)性成分的測(cè)定來(lái)間接地反映有效成分的含量。如板藍(lán)根顆粒劑以總氮量來(lái)控制有效成分氨基酸、靛玉紅、吲哚苷的含量。4.對(duì)有效成分不明確的中成藥，可采用選擇一個(gè)或幾個(gè)認(rèn)為可能的有效成分或主要成分進(jìn)行浸出物含量測(cè)定；測(cè)定藥物的浸出物量，如水浸出物量、醇浸出物量、乙醚浸出物量等；二、含量測(cè)定中成藥含量測(cè)定的原則：5.選擇在加工炮制時(shí)或制備、貯藏過(guò)程中易損失、破壞的成分進(jìn)行含量或限度測(cè)定，如在含有冰片的制劑中必定要測(cè)其含量。6.中成藥中若含有劇毒藥或藥理作用毒性較大的動(dòng)物藥時(shí)，要測(cè)定其毒性成分的含量。如川烏、馬錢(qián)子、斑蝥等。7.含人參、麝香、牛黃等貴重藥材的中成藥應(yīng)測(cè)定貴重藥材的含量，以確定貴重藥材的投料量。用于中成藥含量測(cè)定的方法主要有可見(jiàn)－紫外分光光度法、薄層色譜法、高效液相色譜法、氣相色譜法、熒光分光光度法、原子吸收分光光度法、庫(kù)侖滴定法等。三、檢查中成藥的檢查主要包括以下三個(gè)方面：一般雜質(zhì)的檢查所謂一般雜質(zhì)是指在自然界中廣泛存在，在多種藥材的采集、收購(gòu)、加工以及中成藥的生產(chǎn)、貯存過(guò)程中容易引入的雜質(zhì)，如酸、堿、水分、氯化物、硫酸鹽、鐵鹽、重金屬、砷鹽、灰分、微生物及殘留農(nóng)藥等。它們的檢查方法均在藥典附錄中加以規(guī)定。2.特殊雜質(zhì)的檢查特殊雜質(zhì)是指某些中成藥中單獨(dú)存在的雜質(zhì)，因其特殊組成而在中成藥的制備或貯存時(shí)可能產(chǎn)生，其他中成藥并非都能產(chǎn)生此種雜質(zhì)。一般包括對(duì)摻假、毒性成分的限量及貯存過(guò)程中因理化性質(zhì)改變而產(chǎn)生的異物的檢查等。3.劑型的規(guī)定檢查在藥典的制劑通則中，各種劑型都規(guī)定有相應(yīng)的檢查項(xiàng)目。比如丸劑要求測(cè)定水分、重量差異、裝量差異、溶散時(shí)限等，片劑、膠囊劑都要測(cè)定崩解時(shí)限，注射劑要檢查澄明度和不溶性微粒。第四節(jié)中成藥顯微鑒定流程：分析處方工藝取樣裝片鏡檢觀察分析結(jié)果未知顯微特征藥材單味藥材顯微鑒定鑒定結(jié)論第四節(jié)中成藥顯微鑒定以中藥材原粉入藥的中成藥制劑，如丸、散、膏、丹、片、錠、膠囊等劑型，都可以應(yīng)用顯微鑒別法進(jìn)行定性分析。一、材料處理

(1)散劑、膠囊劑用刀尖或牙簽挑取少量粉末，根據(jù)要求裝片觀察。

(2)片劑刮取全切面或用乳缽研碎取樣裝片。

(3)水丸用乳缽研成粉末后取少量樣品直接透化裝片。

(4)蜜丸將藥丸切開(kāi)，從切面中央挑取少量裝片，或按四分法刮取不同部位裝片。必要時(shí)還可配合用水溶解蜜丸，過(guò)濾干燥后裝片或?qū)⒚弁枨兴椋铀當(dāng)嚢柘礈旌?，置離心管中離心分離沉淀，如此反復(fù)處理除去蜂蜜后透化裝片。二、制片方法一般采用斯氏液或蒸餾水裝片觀察淀粉粒；用水合氯醛液加熱透化后觀察細(xì)胞組織特征；用70%乙醇裝片或水合氯醛裝片不加熱觀察菊糖。觀察時(shí)依據(jù)所查疑似藥的具體情況進(jìn)行必要的顯微化學(xué)反應(yīng)。三、中成藥顯微鑒別要點(diǎn)(1)了解劑型制法，熟悉組方藥材首先要盡可能地了解該藥的劑型和制法，分析可能檢出的藥物有多少。例如牛黃解毒丸中的8味藥都是原粉入藥，均可檢出。故應(yīng)視具體情況做具體分析，不可一概而論。中成藥常含有多種稀釋劑、崩解劑、黏合劑、包衣劑、著色劑等輔料，因此也會(huì)對(duì)顯微鑒別產(chǎn)生一定的影響，但只要熟悉它們的顯微特征，即可排除干擾。如中成藥中常用的蜂蜜均含有花粉粒，應(yīng)排除其對(duì)花類(lèi)中藥的干擾。對(duì)于組成藥物的顯微特征，可分出熟悉的、基本熟悉的和不熟悉的3類(lèi)，只有熟悉之后，方可靈活應(yīng)用。對(duì)于不熟悉的特征，必須先對(duì)照原藥材粉末進(jìn)行研究，尋找、確定主要鑒別特征以便鑒定。(2)排除交叉干擾，明確專(zhuān)屬性特征在對(duì)各組成藥物粉末分析比較時(shí)，應(yīng)分析處方，選取各藥在中成藥中的專(zhuān)屬性特征，作為鑒別依據(jù)。因此，單一藥材粉末的主要特征在成藥中有時(shí)不一定能作為鑒別依據(jù)，而某些較次要的特征有時(shí)則可起到鑒別作用。選取各組成藥物顯微特征時(shí)要考慮到兩點(diǎn)：一是所選特征在該處方中的專(zhuān)屬性；二是該特征盡可能在處方外的中成藥中也要有專(zhuān)屬性。一般地說(shuō)，每味組成藥選取1個(gè)能代表該藥的專(zhuān)屬特征即可，如果該特征與其它組成藥有類(lèi)似組織、細(xì)胞，內(nèi)含物或賦形劑有交叉，則應(yīng)選取其他特征。如果改換其他特征亦較難時(shí)，可考慮增加1～2個(gè)輔助性特征，但要本著少而精的原則，避免繁亂。(3)熟練正規(guī)操作，確保結(jié)果準(zhǔn)確顯微鑒別受主觀因素影響較大，要求操作者不僅要有扎實(shí)的中藥鑒定學(xué)理論基礎(chǔ)，還要有嫻熟的顯微觀察技能及攝影技術(shù)。實(shí)驗(yàn)時(shí)，每個(gè)樣品應(yīng)制備5枚標(biāo)準(zhǔn)片，先重點(diǎn)觀察后，再縱向掃描觀察30行，每次觀察幅寬約0.5mm(有的顯微鏡可通過(guò)自動(dòng)移動(dòng)裝置控制)。一般可在400倍下照相記錄。含細(xì)胞后含物較多者，制片靜置一周后應(yīng)復(fù)查制片的穩(wěn)定性。各種顯微特征的測(cè)定，一般應(yīng)取20個(gè)測(cè)量平均值，力求客觀。中成藥的顯微鑒別，分為已知組成樣品和未知組成樣品兩類(lèi)，以上所述僅為已知處方的樣品。至于未知組成樣品的鑒別，難度相應(yīng)增大，但只要掌握大量的單味粉末顯微特征，積累豐富的鑒別經(jīng)驗(yàn)，同樣可以逐步解決。鑒別時(shí)，為方便觀察，還應(yīng)考慮多種手段的應(yīng)用。如冰片等粉末顯微特征不易確定的組成藥材，可用微量升華的方法來(lái)解決等。二妙丸ErmiaoWan二妙丸ErmiaoWan【處方】蒼術(shù)（炒）500g黃柏（炒）500g【制法】以上二味，粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻，用水泛丸，干燥，即得?！拘誀铊b別】本品為黃棕色的水丸；氣微香，味苦澀?！撅@微鑒別】取本品，置顯微鏡下觀察：草酸鈣針晶細(xì)小，長(zhǎng)10μm-32μm，不規(guī)則地充塞于薄壁細(xì)胞中。（蒼術(shù)）纖維束鮮黃色，周?chē)?xì)胞含草酸鈣方晶，形成晶纖維，含晶細(xì)胞壁木化增厚。（黃柏）【功能主治】燥濕清熱。用于濕熱下注，足膝紅腫熱痛，下肢丹毒，白帶，陰囊濕癢。【用法用量】口服，一次6-9g，一日2次?！纠砘b別】

(1)取本品粉末2g，置具塞試管中，加乙醚10ml，振搖10分鐘，分取上清液2ml置具塞試管中，加高錳酸鉀試液2滴，振搖1分鐘，紅色即消失。

(2)取本品0.1g，研碎，加甲醇提取，濾過(guò)，作為供試品溶液。另取黃柏對(duì)照藥材0.1g，鹽酸小檗堿對(duì)照品，制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，硅膠Ｇ薄層板上，以苯－醋酸乙酯－甲醇－異丙醇－濃氨試液(12:6:3:3:1)為展開(kāi)劑，置氨蒸氣預(yù)飽和的展開(kāi)缸內(nèi)，展開(kāi)，置紫外光燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色熒光斑點(diǎn)；在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的黃色熒光斑點(diǎn)。

[檢查]應(yīng)符合丸劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定（附錄ⅠA）。

[含量測(cè)定]取本品適量，研細(xì)，取約1g，置索氏提取，作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對(duì)照品適量，加甲醇制成對(duì)照品溶液。照薄層色譜法試驗(yàn)，點(diǎn)于同一硅膠Ｇ薄層板上，以苯－醋酸乙酯－甲醇－異丙醇－濃氨試液(12:6:3:3:1)為展開(kāi)劑，置用氨蒸氣與展開(kāi)劑同時(shí)預(yù)飽和15分鐘的雙槽展開(kāi)缸內(nèi)，展開(kāi)，取出，晾干，照薄層色譜薄層掃描法，進(jìn)行熒光掃描，激發(fā)波長(zhǎng)λ=365nm，測(cè)量供試品吸收度積分值與對(duì)照品吸收度積分值，計(jì)算，即得。本品按干燥品計(jì)算，每1g含黃柏以鹽酸小檗堿(C20H17NO4?HCl)計(jì)，不得少于3.0mg。

六味地黃丸LiuweiDihuangWan【處方】熟地黃160g山茱萸（制）80g牡丹皮60g山藥80g茯苓60g澤瀉60g【制法】以上六味藥，粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻。每100g粉末加煉蜜35～50g與適量的水，泛丸，干燥，制成水蜜丸；或加煉蜜80～110g制成小蜜丸或大蜜丸，即得?！拘誀铊b別】本品為棕黑色的水蜜丸、黑褐色的小蜜丸或大蜜丸；味甜而酸?！撅@微鑒別】取本品，置顯微鏡下觀察：1、淀粉粒三角狀卵形或矩圓形，直徑24μm～40μm，臍點(diǎn)短縫狀或人字狀。（山藥）2、不規(guī)則分枝狀團(tuán)塊無(wú)色，遇水合氯醛試液溶化；菌絲無(wú)色，直徑4μm～6μm。（茯苓）3、薄壁組織灰棕色至深棕色，細(xì)胞多皺縮，內(nèi)含棕色核狀物。（地黃）4、草酸鈣簇晶存在于無(wú)色薄壁細(xì)胞中，有時(shí)數(shù)個(gè)排列成行。（丹皮）5、果皮表皮細(xì)胞橙黃色，表面觀類(lèi)多角形，垂周壁連珠狀增厚。（山萸肉）6、薄壁細(xì)胞類(lèi)圓形，有橢圓形紋孔，集成紋孔群；內(nèi)皮層細(xì)胞垂周壁波狀彎曲，較厚，木化，有稀疏細(xì)孔溝。（澤瀉）【理化鑒別】TLC:

取本品水蜜丸6g，研碎，或取小蜜丸或大蜜丸9g，切碎，加硅藻土4g，研勻。加乙醚40ml，低溫回流1小時(shí)，濾過(guò)，濾液揮去乙醚，殘?jiān)颖?ml使溶解，作為供試品溶液。另取丹皮酚對(duì)照品，加丙酮制成每1ml含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(附錄ⅥB)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μl,分別點(diǎn)于同一硅膠Ｇ薄層板上，以環(huán)己烷－醋酸乙酯(3:1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以鹽酸酸性5％三氯化鐵乙醇溶液，加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同的藍(lán)褐色斑點(diǎn)?！緳z查】應(yīng)符合丸劑項(xiàng)下有關(guān)的各項(xiàng)規(guī)定（附錄ⅠA）。

【含量測(cè)定】1.牡丹皮取水蜜丸、小蜜丸5g，精密稱(chēng)定，或取重量差異項(xiàng)下的大蜜丸2g，精密稱(chēng)定。用水蒸氣蒸鎦，收集餾出液約450ml，置500ml量瓶中，加水稀釋至刻度。照分光光度法（附錄ⅤA），在274nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，按丹皮酚(C9H10O3)的吸收系數(shù)（Ｅ1%1cm）為862計(jì)