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文檔簡介

第第頁MTT法觀察細(xì)胞生長曲線

MTT法繪制生長曲線

一細(xì)胞生長曲線：

A、目的：學(xué)習(xí)細(xì)胞生長曲線的測定方法，觀察細(xì)胞生長基本規(guī)律。

B、背景知識

細(xì)胞生長曲線是觀察細(xì)胞生長基本規(guī)律的重要方法。只有具備自身穩(wěn)定生長特性的細(xì)胞才適合在觀察細(xì)胞生長變化的實驗中應(yīng)用。因而在細(xì)胞系細(xì)胞和非建系細(xì)胞生長特性觀察中，生長曲線的測定是最為基本的指標(biāo)。

原理（選填項目）：

細(xì)胞生長曲線的測定一般可利用細(xì)胞計數(shù)法進(jìn)行。

C、材料

（一）儀器

1.凈化工作臺

2.離心機(jī)

3.恒溫水浴箱

4.冰箱（4℃、-20℃）

5.倒置相差顯微鏡

6.培養(yǎng)箱（37℃、5%CO2、飽和濕度）

（二）玻璃器皿

1.吸管（彎頭）

2.培養(yǎng)瓶

3.玻璃瓶（250ml、100ml）

4.廢液缸

（三）塑料器皿

1.吸頭

2.槍頭

3.24培養(yǎng)板

4.膠塞

（四）其他物品

1.微量加樣槍

2.紅血球計數(shù)板

（五）試劑

1.D-Hanks液

2.小牛血清

3.RPMI1640

4.雙抗（青霉素、鏈霉素）

5.0.08%胰酶

（四）、操作步驟

1.取生長狀態(tài)良好的細(xì)胞，采用一般傳代方法進(jìn)行消化，制成細(xì)胞懸液；

2.計數(shù)，精確地將細(xì)胞分別接種于21～30個大小一致的培養(yǎng)瓶內(nèi)或培養(yǎng)孔（以24孔培養(yǎng)板為宜），每瓶或孔細(xì)胞總數(shù)要求一致，加入培養(yǎng)液的量也要一致。

3.每天或

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