原發(fā)性肝癌發(fā)病的分子機(jī)制

關(guān)于原發(fā)性肝癌發(fā)病的分子機(jī)制第1頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月2原發(fā)性肝癌primaryhepatocelluarcarcinoma,HCC

是指肝細(xì)胞或肝內(nèi)膽管細(xì)胞發(fā)生的癌，是惡性程度及轉(zhuǎn)移率很高的腫瘤之一。其中來源于肝細(xì)胞的肝細(xì)胞癌最為常見，占肝癌的83%。概念第2頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月3肝癌發(fā)生的“正負(fù)”調(diào)節(jié)原癌基因抑癌基因HBV與肝細(xì)胞癌化學(xué)誘發(fā)及其他致癌因素信號(hào)通路的異常活化發(fā)病機(jī)制第3頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月4從一個(gè)正常細(xì)胞轉(zhuǎn)化成一個(gè)增殖失控并具有侵襲，轉(zhuǎn)移潛能的高度惡性腫瘤細(xì)胞是一個(gè)多基因參與的，多步驟的復(fù)雜而漫長的不斷演進(jìn)過程。其中包括一系列原癌基因的活化和抑癌基因的失活。一、肝癌發(fā)生的“正負(fù)”調(diào)節(jié)第4頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月5

1.原癌基因的激活

調(diào)控細(xì)胞生長和增殖的正常細(xì)胞基因。突變后轉(zhuǎn)化成為致癌的癌基因癌基因的激活機(jī)制①點(diǎn)突變②病毒誘導(dǎo)與啟動(dòng)子插入③基因擴(kuò)增④染色體斷裂與重排第5頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月6點(diǎn)突變—ras基因家族

ras基因被激活最常見的方式就是點(diǎn)突變.以第12密碼子突變最為常見,而且多為GGT突變成GTT.其編碼的蛋白質(zhì)是RAS蛋白。在傳遞細(xì)胞生長分化信號(hào)方面起重要作用第6頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月7Ras蛋白：單鏈多肽，原癌基因ras編碼，作用類似于G蛋白

RasGTP-活性狀態(tài)

RasGDP-無活性狀態(tài)

本身無調(diào)節(jié)活性結(jié)構(gòu)第7頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月8

ras基因突變使得GAP不能作用Ras-GTP，持久處于活化狀態(tài)，從而可不斷傳遞增殖信號(hào)至細(xì)胞核而使細(xì)胞發(fā)生惡性轉(zhuǎn)化。第8頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月92.抑癌基因的功能失活或基因缺失、突變抑癌基因是一類編碼對腫瘤形成起阻抑作用的蛋白質(zhì)的基因。正常情況下抑制細(xì)胞增殖，促進(jìn)細(xì)胞分化，抑制癌細(xì)胞脫落、侵襲、轉(zhuǎn)移。當(dāng)這些基因不能表達(dá)，或者當(dāng)其產(chǎn)物失去活性時(shí)，可導(dǎo)致細(xì)胞癌變。RB、P21、P53等第9頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月10

RB基因位于染色體13q14.3，其編碼產(chǎn)物p105RB為核內(nèi)反式作用因子，RB蛋白的非磷酸化形式通過與轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合而抑制細(xì)胞周期從G1Ｓ的演進(jìn)，而一些癌基因產(chǎn)物與之結(jié)合，使其失去抑制增殖作用。RB第10頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月p21基因是C1P家族中的一員,它是位于p53基因下游的細(xì)胞周期素依賴性激酶抑制因子。P21是細(xì)胞周期抑制蛋白，可以通過抑制細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶（CDK）的活性來控制細(xì)胞由G1期進(jìn)入S期，從而抑制DNA的合成，使細(xì)胞停止分化，出現(xiàn)凋亡P21第11頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月12

P-53

p53基因定位于17p13，由11個(gè)外顯子組成。對于發(fā)生DNA損傷的細(xì)胞可抑制其在修復(fù)之前進(jìn)行增值，并促進(jìn)其發(fā)生凋亡，從而避免癌變。

突變的P53蛋白不僅喪失以上功能，而且可與非突變的P53蛋白結(jié)合，使其失去活性。同時(shí)與Ras基因協(xié)同，促進(jìn)癌變。第12頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月13P53基因編碼P53蛋白，它作為轉(zhuǎn)錄因子可與特異的DNA序列結(jié)合。一些外界刺激如DNA損傷、應(yīng)激等可引起細(xì)胞內(nèi)P53蛋白水平升高，激活一系列下游靶基因的轉(zhuǎn)錄，阻滯細(xì)胞周期，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，保護(hù)基因組的完整性以及抑制腫瘤細(xì)胞的生長等。目前已知的下游靶基因包括P21、GADD45、MDM2、BAX、IGF-BP3和PIG3等。第13頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月14DNA損傷p53活化p21基因轉(zhuǎn)錄細(xì)胞阻滯在G1期

如果DNA損傷不能被修復(fù)，p53持續(xù)增高引起細(xì)胞凋亡。第14頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月151、概念二、HBV與肝細(xì)胞癌

乙肝病毒結(jié)構(gòu)示意圖乙肝病毒結(jié)構(gòu)示意圖乙型肝炎病毒（HBV）：是嗜肝DNA病毒，為球形顆粒里。外層為外殼蛋白，內(nèi)含單股雙鏈DNA及DNA多聚酶。第15頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月16順式激活作用反式激活作用2、致癌機(jī)制第16頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月17順式激活作用

HBV-DNA插入到肝細(xì)胞原癌基因附近，直接啟動(dòng)或增強(qiáng)癌基因的表達(dá)。第17頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月18反式激活作用

即HBV-DNA隨機(jī)整合到肝細(xì)胞基因組DNA上，通過轉(zhuǎn)錄并翻譯成蛋白質(zhì)后，再激活自身基因或肝細(xì)胞的原癌基因。現(xiàn)認(rèn)為反式激活因子(transactivator)可能是HBxAg(乙型肝炎病毒x抗原)第18頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月19HBx基因特有的反式激活功能被認(rèn)為是導(dǎo)致HCC發(fā)生的主要因素。其自身的調(diào)控區(qū)域(1—20氨基酸)能夠抑制HBxAg蛋白的反式激活活性，近羧基端的51～154氨基酸為其反式激活區(qū)域，是HBxAg蛋白發(fā)揮其反式激活作用的基礎(chǔ)。HBVx基因整合后通過反式激活細(xì)胞內(nèi)的原癌基因，并能使抑癌基因p53突變和失活。突變后的HBx基因反式激活功能明顯增強(qiáng)，導(dǎo)致一系列原癌基因激活并且使抑癌基因失活，最終導(dǎo)致肝癌的發(fā)生。反式激活作用第19頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月20黃曲霉毒素B1（AFB1）池塘中藍(lán)綠藻產(chǎn)生的藻類毒素華支睪吸蟲感染亞硝胺類(二乙基亞硝胺)、偶氮芥類、有機(jī)氯農(nóng)藥、雄激素、某些類固醇類藥物以及酒精長期持續(xù)接受輻射三、化學(xué)誘發(fā)及其他致癌因素第20頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月21黃曲霉素

黃曲霉毒素有20多種，其中致癌作用最強(qiáng)的是黃曲霉素B1，其毒性比亞硝胺強(qiáng)75倍，比砒霜強(qiáng)68倍。若低劑量攝入，可造成慢性中毒，它能損害動(dòng)物的肝臟，引起肝細(xì)胞壞死、肝纖維化、肝硬化等病變，可誘發(fā)肝癌。第21頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月22黃曲霉素與P53突變經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，黃曲霉素暴露頻率低的肝癌患者第249號(hào)密碼子突變頻率也低黃曲霉素污染是導(dǎo)致P53的第249號(hào)密碼子突變的一個(gè)重要危險(xiǎn)因素。第22頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月23HBV、AFB1與P53

1、在某些肝癌可因HBV的整合而引起p53基因的一個(gè)等位基因丟失

2、暴露于黃曲霉素B1

（AFB1）可導(dǎo)致p53基因第249密碼子第三個(gè)堿基的突變（G—>T）,從而使編碼的氨基酸由Ser（絲氨酸）變?yōu)锳rg（精氨酸），這種突變在HCC的檢出率為8%。HBV對AFB1所致的突變具有協(xié)同作用。此外，p53基因還可有多密碼（226,243,244,245,248）的突變，內(nèi)含子的突變以及內(nèi)含子與外顯子拼接部位的突變。依突變性質(zhì)的不同可致p53蛋白不能表達(dá)或者不穩(wěn)定。

3、在早期肝癌p53的失活并非由于p53基因的突變，而是HBV的HBx蛋白或HCV的核心蛋白（core

protein）與p53蛋白相結(jié)合所致。

第23頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月24四、信號(hào)通路的異?；罨?/p>

多種信號(hào)通路的異?；罨瘏⑴c了肝癌的發(fā)生與演化,選擇性阻斷腫瘤細(xì)胞信號(hào)傳導(dǎo)通路，破壞其自控性生長調(diào)節(jié)機(jī)制,早已成為腫瘤研究領(lǐng)域的熱點(diǎn),所以確立信號(hào)傳導(dǎo)通路的調(diào)節(jié)機(jī)制至關(guān)重要。RAS-MAPK(絲裂原激活蛋白激酶)通路WNT相關(guān)通路第24頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月25

生長因子是一類在細(xì)胞增殖中起關(guān)鍵作用的信號(hào)分子，主要包括上皮生長因子（EGF），肝細(xì)胞生長因子（HGF），血小板衍化內(nèi)皮細(xì)胞生長因子等。這些生長因子（可稱為配體）與受體結(jié)合后，通過激活受體的酪氨酸激酶活性活化Ras/MAPK信號(hào)通路，最終誘導(dǎo)下游基因的轉(zhuǎn)錄，影響細(xì)胞的生長、分化和增殖。RAS-Raf-MAPK(絲裂原激活蛋白激酶)通路

第25頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月26Raf蛋白：

具有絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶活性

Ras使Raf定位于質(zhì)膜，激活Raf的激酶活性。MAPK系統(tǒng)（mitogen-activatedproteinkinase)：包括MAPK（MEK，細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶）、MAPK激酶（MAPKK）、MAPKK激酶（MAPKKK即Raf蛋白），是一組酶兼底物的蛋白分子。

MAPKK：雙激酶，Ser/Thr及Tyr磷酸化第26頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月27

在ras/MAPK信號(hào)通路中，ras蛋白可以與其下游的絲氨酸/蘇氨酸激酶raf蛋白相互作用，而導(dǎo)致raf蛋白活化。raf蛋白又通過激活MAPK激酶MEK1和MEK2,從而調(diào)控細(xì)胞的增值和凋亡。第27頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月28（細(xì)胞外信號(hào)）EGF、PDF等有TPK活性的受體GRB2

PSOS

Pras-GTP

Praf調(diào)節(jié)其他蛋白活性MAPKKK

PMAPKKMAPK

P

P

P細(xì)胞核反式作用因子調(diào)控基因表達(dá)細(xì)胞膜二聚化（SH2）（SH3）（Pro)第28頁，課件共31頁，創(chuàng)作于2023年2月29

Wnt-β-catenin信號(hào)通路常稱之為Wnt經(jīng)典或正規(guī)途徑。這條通路激活后將募集細(xì)胞內(nèi)β-catenin，后者活化轉(zhuǎn)移入細(xì)胞核，與轉(zhuǎn)錄因子共同作用激活特異基因的轉(zhuǎn)錄。HCC患者顯示有經(jīng)典Wnt信號(hào)通路持續(xù)激活研究發(fā)現(xiàn)H