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檢驗儀器分析技術職業(yè)教育醫(yī)學檢驗技術專業(yè)教學資源庫滄州醫(yī)學高等專科學校代榮琴時間分辨熒光免疫分析儀的分類與工作原理時間分辨熒光免疫分析儀的分類與工作原理時間分辨熒光免疫分析儀的分類與工作原理一、時間分辨熒光免疫分析儀的分類非均相時間分辨熒光免疫分析技術均相時間分辨熒光免疫分析技術分類時間分辨熒光免疫分析儀的分類與工作原理優(yōu)點:省去了洗滌、分離和加增強液等煩瑣的步驟,具有快速、方便等。缺點:需要特殊螯合劑。在測量前不必將結合標記物與游離標記物分離,可直接測量液相中的熒光強度。1.均相時間分辨熒光免疫分析儀:時間分辨熒光免疫分析儀的分類與工作原理非均相時間分辨熒光免疫分析技術在測量前需要將結合標記物與游離標記物進行分離,再進行液相熒光強度的測量。優(yōu)點:靈敏度高、特異性強。目前廣泛應用于臨床是非均相免疫分析技術。2.非均相時間分辨熒光免疫分析儀用鑭系三價稀土離子及其螯合物作為示蹤物標記抗原、抗體、核酸探針等物質(zhì),反應后,將結合部分與游離部分分開。時間分辨熒光免疫分析儀的分類與工作原理二、時間分辨熒光免疫分析儀工作原理時間分辨熒光免疫分析儀的分類與工作原理二、時間分辨熒光免疫分析儀工作原理時間分辨熒光免疫分析儀的分類與工作原理不同時段熒光強度時間分辨熒光原理二、時間分辨熒光免疫分析儀工作原理正常情況下,免疫復合物中的稀土離子自身熒光信號很微弱,若加入一種酸性增強液,可使原來微弱的熒光信號增強將近100萬倍。時間分辨熒光免疫分析儀的分類與工作原理二、時間分辨熒光免疫分析儀工作原理時間分辨熒光免疫分析儀的分類與工作原理鑭系元素最大的熒光譜特征是激發(fā)光與發(fā)射光之間的Stokes位移較大。1.鑭系元素熒光的光譜特征三、時間分辨熒光免疫分析儀技術特點時間分辨熒光免疫分析儀的分類與工作原理

2.解離-增強技術鑭系元素離子螯合物本身熒光極弱,但在熒光增強液的作用下,Eu3+從免疫復合物上完全解離(3-10min),游離的Eu3+同增強液中的另一種螯合物形成一種膠態(tài)分子團,這種分子團在激發(fā)光的激發(fā)下能夠發(fā)出強烈熒光,使得Eu3+熒光得以成千上萬倍地放大。三、時間分辨熒光免疫分析儀技術特點鑭系元素不能直接與蛋白質(zhì)連接,需要雙功能基團螯合劑,其一端與鑭系元素離子連接,另一端與蛋白質(zhì)連接,形成鑭系元素離子-螯合劑-蛋白質(zhì)(抗原或抗體)復合物;時間分辨熒光免疫分析儀的分類與工作原理

3.標記方法三、時間分辨熒光免疫分析儀技術特點此種螯合物體積很小,為原子標記,標記后不會影響被標記物空間立體結構,對蛋白質(zhì)活性影響小。保證了被檢測物質(zhì)的穩(wěn)定性,又實現(xiàn)多點標

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