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血脂及脂蛋白測(cè)定

血脂測(cè)定方法很多,目前臨床實(shí)驗(yàn)室基本檢驗(yàn)項(xiàng)目有:血清外觀分析,TC,TG,HDL-C,LDL-C測(cè)定。進(jìn)一步可做HDL亞組分,IDL,Apo(如ApoAⅠ、ApoB100),Lp(a)及脂蛋白電泳,LPL,LCAT測(cè)定,為保證分析結(jié)果的可靠性,標(biāo)本的采集應(yīng)在餐后12h以上。

血脂及脂蛋白測(cè)定①甘油三酯測(cè)定②總膽固醇測(cè)定③高密度脂蛋白膽固醇測(cè)定④低密度脂蛋白膽固醇測(cè)定⑤載脂蛋白測(cè)定等血脂的測(cè)定項(xiàng)目:血脂測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)化:血脂分析前變異來源于:①生物因素,如年齡、性別、種族等因素的個(gè)體差異。②生活方式,包括飲食習(xí)慣、吸煙、運(yùn)動(dòng)及應(yīng)激等。③臨床方面包括疾病或藥物引起的脂代謝改變。④血標(biāo)本采集與處理方面準(zhǔn)確測(cè)定應(yīng)從分析前的準(zhǔn)備開始,包括受試者的準(zhǔn)備,標(biāo)本采集,合格的試劑、校準(zhǔn)物的選用,檢測(cè)方法選擇。方法學(xué)上應(yīng)該采用美國(guó)疾病控制中心(CDC)或中華醫(yī)學(xué)會(huì)檢驗(yàn)分會(huì)推薦的操作方法。(1)血清外觀分析(血清冷置試驗(yàn))

混濁(TG增高)下層濁(VLDL增高)Ⅴ型下層清(VLDL正常)Ⅰ型均勻混濁(VLDL↑)TC正常Ⅳ型上層奶油樣(CM↑)TC增高Ⅱa型TC正常正常人清亮(TG正常)TC↑Ⅱb,Ⅲ型空腹血清

測(cè)TC

4℃過夜

測(cè)TC(2)血清甘油三酯測(cè)定

化學(xué)測(cè)定法:(2)血清甘油三酯測(cè)定酶測(cè)定法磷酸甘油氧化酶法(GPO-PAP法)原理

TG+3H2OLPL

甘油+脂肪酸甘油+ATPGK+Mg2+G-3-P+ADPG-3-P+O2

GPO

磷酸二羥丙酮+H2O2

2

H2O2+氯酚+4-AAPPOD

苯醌亞胺非那腙+4H2O計(jì)算

TG(mmol/L)=A500nm測(cè)定/A500nm校準(zhǔn)校準(zhǔn)血清TG濃度(mmol/L)(2)血清甘油三酯測(cè)定參考值:血清甘油三酯一般隨年齡增加而升高,體重超過標(biāo)準(zhǔn)者往往偏高。

合適范圍:≤1.70mmol/L(150mg/dl),

升高:>1.70mmol/L(150mg/dl)(2)血清甘油三酯測(cè)定

臨床意義:原發(fā)性高TG血癥多有遺傳因素,包括家族性高TG血癥與家族性型高脂(蛋白)血癥等。繼發(fā)性高TG血癥見于糖尿病、糖原累積病、甲狀腺機(jī)能減退、腎病綜合征、妊娠、口服避孕藥、酗酒等。大量前瞻性的研究證實(shí),富含TG的脂蛋白是CHD的獨(dú)立的危險(xiǎn)因子,TG增加表明患者存在代謝綜合癥,需進(jìn)行治療。甘油三酯降低比較少見,甲狀腺功能亢進(jìn)、腎上腺皮質(zhì)功能減退和肝功能嚴(yán)重?fù)p傷時(shí)可以見到甘油三酯降低(3)血清總膽固醇測(cè)定血清TC測(cè)定:決定方法為同位素稀釋—質(zhì)譜法參考方法為正己烷抽提L-B反應(yīng)顯色法(AL-BK法)常規(guī)方法為酶法膽固醇氧化酶法(COD-PAP)酶(COD-PAP)測(cè)定法:(3)血清總膽固醇測(cè)定

膽固醇酯膽固醇+脂肪酸膽固醇+O2膽烷-4-烯-3酮+H2O2H2O2

+4AAP+酚紅色亞胺醌+H2O亞胺醌在下500nm左右有最大吸收峰,吸光度與標(biāo)本中TC含量成正比。CEHChODPOD測(cè)定原理:

(3)血清總膽固醇測(cè)定方法學(xué)評(píng)價(jià)(1)某些膽固醇酯酶對(duì)膽固醇酯的水解不完全,造成結(jié)果偏低(2)黃疸血清中過高的膽紅素能還原H2O2,使結(jié)果偏低。VitC和抗壞血酸也可使結(jié)果偏低。(3)嚴(yán)重溶血標(biāo)本可使結(jié)果偏高。(4)該法是推薦方法,快速準(zhǔn)確,標(biāo)本用量少,適于自動(dòng)生化分析儀。參考值:血清總膽固醇≤5.20mmol/L(200mg/dl)(3)血清總膽固醇測(cè)定臨床意義:TC除了作為高膽固醇血癥的診斷指標(biāo)之外,不能作為其它任何疾病的診斷指標(biāo),對(duì)于動(dòng)脈粥樣硬化和冠心病而言,TC是一個(gè)明確的危險(xiǎn)因子,與冠心病的發(fā)病率呈正相關(guān)。(4)高密度脂蛋白膽固醇測(cè)定方法:化學(xué)沉淀法/均相測(cè)定法/免疫抗體法化學(xué)沉淀法:原理:磷鎢酸-鎂沉淀法磷鎢酸-鎂可沉淀血清中的LDL和VLDL,上清中只含HDL,其膽固醇含量的測(cè)定同TC的測(cè)定。參考值:HDL-C≥1.04mmol/L(40mg/dl),<0.91mmol/L(35mg/dl)為減低(4)高密度脂蛋白膽固醇測(cè)定臨床意義:流行病學(xué)與臨床研究證明,HDL-C與冠心病發(fā)病呈負(fù)相關(guān),HDL-C低于0.9mmol/L是冠心病危險(xiǎn)因素。HDL-C大于1.55mmol/L被認(rèn)為是冠心病的“負(fù)”危險(xiǎn)因素。HDL-C下降還多見于腦血管病、糖尿病、肝炎、肝硬化病人。高TG血癥往往伴以低HDL-C,肥胖者的HDL-C也多偏低。吸煙可使HDL-C下降,適量飲酒、長(zhǎng)期體力勞動(dòng)和運(yùn)動(dòng)會(huì)使HDL-C升高。(5)低密度脂蛋白膽固醇測(cè)定方法:Friedewald公式法/聚乙烯硫酸鹽沉淀法/直接測(cè)定法聚乙烯硫酸鹽沉淀法原理:本法并非對(duì)LDL-C作直接測(cè)定,而是用聚乙烯硫酸(PVS)選擇性沉淀血清中LDL,再以血清TC減去上清液(含HDL與VLDL)膽固醇即得LDL-C值。參考值:

LDL-C合適范圍:≤3.12mmol/L(120mg/dl),(5)低密度脂蛋白膽固醇測(cè)定臨床意義:LDL-C增高是動(dòng)脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的主要脂類危險(xiǎn)因素。由于TC水平同時(shí)也受HDL-C水平的影響,所以最好以LDL-C代替TC作為冠心病危險(xiǎn)因素指標(biāo)。美國(guó)國(guó)家膽固醇教育計(jì)劃成人治療專業(yè)組規(guī)定以LDL-C水平作高脂蛋白血癥的治療決策及其需要達(dá)到的治療目標(biāo)。(6)載脂蛋白測(cè)定Apo的測(cè)定方法主要有三類:①層析分離,然后再按一般蛋白質(zhì)定量;②電泳分離后經(jīng)染色光密度掃描定量;③各種免疫分析法。層析法操作麻煩,一般只用于研究;電泳法簡(jiǎn)便靈敏,但各類Apo染色性能不一致,重復(fù)性不好;免疫法特異性好,靈敏度高,不需預(yù)先分離脂蛋白,適合臨床實(shí)驗(yàn)室的應(yīng)用,但需特異抗血清。參考值:

ApoAⅠ1.00~1.50g/LApoB0.80~1.00g/L(6)載脂蛋白測(cè)定臨床意義:ApoAⅠ是HDL的主要結(jié)構(gòu)蛋白,ApoB是LDL的主要結(jié)構(gòu)蛋白,因此,ApoAⅠ和ApoB可直接反映HDL和LDL的含量。但在某些病理情況下,ApoAⅠ與HDL和ApoB與LDL并非成正相關(guān),臨床上常將ApoAⅠ和ApoB比值作為冠心病的危險(xiǎn)指標(biāo)。高脂蛋白血癥的預(yù)防和治療高脂血癥或高脂蛋白血癥是致AS(動(dòng)脈粥樣硬化)的主要危險(xiǎn)因素,AS是一多危險(xiǎn)因素所致的慢性疾病。其中最主要的致病性危險(xiǎn)因素有高LDL-C、低HDL-C、高血壓、吸煙和糖尿病等。為此降低TC、TG、LDL和升高HDL是防治As心腦血管疾病的主要措施。

1997年中華心血管病學(xué)會(huì)組織國(guó)內(nèi)專家制訂了我國(guó)血脂危險(xiǎn)水平劃分標(biāo)準(zhǔn)(mmol/L)

TC

TGLDL-CHDL-C合適范圍<5.2≤1.7≥3.1≥1.03臨界值邊緣5.2∽5.73.1∽3.6危險(xiǎn)閾值≥5.70>1.70≥3.60≤0.90病例討論:30歲男性患者外周水腫

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