藥學(xué)專業(yè)藥物分析第六章藥物的含量測(cè)定詳解演示文稿

藥學(xué)專業(yè)藥物分析第六章藥物的含量測(cè)定詳解演示文稿目前一頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)（優(yōu)選）藥學(xué)專業(yè)藥物分析第六章藥物的含量測(cè)定目前二頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)第六章藥物含量測(cè)定第一節(jié)藥物含量測(cè)定方法藥品的含量測(cè)定是指準(zhǔn)確測(cè)定藥品有效成分或指標(biāo)性成分的含量。含量測(cè)定是評(píng)價(jià)藥品質(zhì)量、判斷藥物優(yōu)劣和保證藥品療效的重要手段。現(xiàn)行版藥典收載的3214種藥品中，有1419種涉及到含量測(cè)定。常用的含量測(cè)定方法有化學(xué)分析法、紫外-可見分光光度法、原子吸收分光光度法、氣相色譜法、薄層掃描法、高效液相色譜法等。目前三頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)一、容量分析法容量分析法即滴定分析法，是根據(jù)一種已知濃度的試劑溶液和被測(cè)物質(zhì)完全作用時(shí)所消耗的體積，來計(jì)算被測(cè)物質(zhì)含量的方法。容量分析通常用于測(cè)定較高含量或中含量組分，即被測(cè)組分的含量一般在1%以上，有時(shí)也可用于測(cè)定微量組分。容量分析比較準(zhǔn)確，測(cè)定的相對(duì)誤差可達(dá)0.1%。目前四頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)溶液和被測(cè)物質(zhì)發(fā)生的反應(yīng)類型和介質(zhì)的不同，可將容量分析法分為下列幾類：（一）、酸堿滴定法（二）、沉淀法(三)、絡(luò)合滴定法(四)、氧化還原法鈰量法、碘量法、溴酸鉀法、高錳酸鉀法、高碘酸鉀法及亞硝酸鈉法目前五頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)(五)、非水溶液滴定法1.非水堿量法（1）非水堿量法原理某些藥物由于在水液中顯示的堿性較弱，不能進(jìn)行酸堿滴定。而在非水介質(zhì)中，就能顯示出較強(qiáng)的堿性，可以順利地進(jìn)行。多半在冰醋酸或醋酸中進(jìn)行滴定，滴定劑多為高氯酸的冰醋酸溶液。一般應(yīng)用電位法指示終點(diǎn)，2.非水酸量法（1）非水酸量法原理某些藥物如羧酸類、酚類、巴比妥類、磺胺類、烯醇類，由于在水溶液中顯示的酸性較弱，CKa<10-8，不能進(jìn)行酸堿滴定。而在非水介質(zhì)中，就能顯示出較強(qiáng)的酸性，用強(qiáng)堿滴定。多半在無水甲醇中進(jìn)行，滴定劑多為甲醇鈉的苯—甲醇溶液。目前六頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)二、紫外－可見分光光度法1.測(cè)定原理定量分析的理論依據(jù)是朗伯-比耳定律。當(dāng)一束平行的單色光垂直照射到待測(cè)物質(zhì)的稀溶液時(shí)，光中所含有的一部分能量被待測(cè)物吸收，其余光則透過溶液，照在檢測(cè)器上。在一定濃度范圍內(nèi)，待測(cè)物對(duì)這束光的吸收度（A）與該物質(zhì)的濃度（c）和液層的厚度（L）（光路長(zhǎng)度，即光程）成正比，其關(guān)系如下：A=EcLE為吸收系數(shù)，其物理意義是當(dāng)溶液濃度為1%（即1g/100ml），液層厚度為1cm時(shí)的吸收度數(shù)值，通常用表示。E是個(gè)常數(shù)。因此，當(dāng)液層厚度固定不變時(shí)，物質(zhì)的吸收度與其濃度成正比。目前七頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)2、定量分析方法（1）對(duì)照品比較法對(duì)照品比較法按下式計(jì)算供試品中被測(cè)溶液的濃度：

cx為供試品溶液的濃度；Ax為供試品溶液的吸收度；cR為對(duì)照品溶液的濃度；AR為對(duì)照品溶液的吸收度。目前八頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)（2）吸收系數(shù)法

A為測(cè)得的吸收度；為比吸收系數(shù)；W為所稱樣品的重量，g。目前九頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)三、薄層色譜掃描法薄層色譜掃描法是指用一束一定波長(zhǎng)、一定強(qiáng)度的紫外或可見光對(duì)薄層板進(jìn)行掃描，測(cè)定薄層板上的樣品斑點(diǎn)對(duì)光的吸收強(qiáng)度或斑點(diǎn)經(jīng)激發(fā)后所產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度。所得到的圖譜及積分?jǐn)?shù)據(jù)可用于藥品含量測(cè)定。（一）薄層吸收掃描法測(cè)定薄層板上的樣品斑點(diǎn)對(duì)光的吸收強(qiáng)度的方法（二）薄層熒光掃描法測(cè)定樣品斑點(diǎn)經(jīng)激發(fā)后所產(chǎn)生的熒光強(qiáng)度的方法

目前十頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)其中掃描方式有以下幾種：（1）反射法與透射法反射法是指測(cè)定樣品斑點(diǎn)對(duì)照射光的反射情況進(jìn)行測(cè)定的方法透射法則是測(cè)定照射光穿透樣品斑點(diǎn)后光的吸收情況。（2）單波長(zhǎng)和雙波長(zhǎng)單波長(zhǎng)薄層掃描適合于分離度好，背景干擾小的薄層色譜。雙波長(zhǎng)薄層掃描時(shí)用測(cè)定波長(zhǎng)和參比波長(zhǎng)分別掃描薄層板，測(cè)定樣品斑點(diǎn)在兩波長(zhǎng)下的吸收度之差。（3）線性掃描和鋸齒掃描線性掃描一般采用一束比待測(cè)斑點(diǎn)略寬的狹窄光帶沿展開方向做單向等速掃描，它適于形狀較規(guī)則斑點(diǎn)的掃描。鋸齒掃描是使用微小正方形光束沿展開方向掃描的同時(shí)，在垂直于展開方向進(jìn)行往復(fù)式掃描.目前十一頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)四、氣相色譜法（一）概述1.載氣鋼瓶（N2）；2.氫氣鋼瓶；3.空氣鋼瓶；4.減壓閥；5.干燥器；6.穩(wěn)壓閥；7.壓力表；8.針形閥；9.轉(zhuǎn)子流量計(jì)；10.進(jìn)樣器及汽化室；11.色譜柱（虛線表示恒溫室）；12.氫火焰離子化檢測(cè)器（虛線表示恒溫室）；13.微電流放大器，14.記錄器目前十二頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)（二）定量分析方法1.外標(biāo)法精密稱取對(duì)照品和供試品，配制成溶液，分別精密量取一定量，注入儀器，記錄色譜圖，測(cè)量對(duì)照品和供試品中待測(cè)成分的峰面積（或峰高），按下式計(jì)算含量：

cx為待測(cè)成分的濃度；Ax為待測(cè)成分的峰面積（或峰高）；cR為對(duì)照品的濃度；AR為對(duì)照品的峰面積（或峰高）。目前十三頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)

2.內(nèi)標(biāo)法加校正因子精密稱取對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)，分別配成溶液，精密量取各溶液，配成測(cè)定校正因子所用的對(duì)照溶液，取一定量注入儀器，記錄色譜圖，測(cè)量對(duì)照品和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積（或峰高），按下式計(jì)算校正因子f：

AS為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積（或峰高）；AR為對(duì)照品的峰面積（或峰高）；cS為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的濃度；cR為對(duì)照品的濃度。目前十四頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)再取含內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的供試品溶液，注入儀器，記錄色譜圖，測(cè)量供試品中待測(cè)成分（或雜質(zhì)）和內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積（或峰高），按下式計(jì)算含量：f為校正因子；Ax為供試品中待測(cè)成分的峰面積（或峰高）；AS為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的峰面積（或峰高）；cx為供試品中待測(cè)成分的濃度；cS為內(nèi)標(biāo)物質(zhì)的濃度。目前十五頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)3.面積歸一化法。取一定量注入氣相色譜儀，記錄相當(dāng)于主成分峰保留時(shí)間數(shù)倍的色譜圖，計(jì)算各成分峰面積及其總和以及被測(cè)組分峰面積總和所占的百分比。用本法測(cè)定時(shí)，溶劑峰不計(jì)算在總面積中。被測(cè)組分％＝（∑Ai／∑A）×100％式中，∑Ai為被測(cè)組分峰面積之和；∑A為全部峰面積之和。目前十六頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)五、高效液相色譜法

（一）概述目前十七頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)HPLC常用的流動(dòng)相：其主要成分是水、甲醇、乙腈、醋酸銨溶液、磷酸溶液、磷酸二氫銨溶液等。固定相：十八烷基硅烷鍵合硅膠（應(yīng)用最廣泛），常簡(jiǎn)稱為ODS柱或C18柱。除C18外，藥典中還用到了苯基硅烷鍵合硅膠、辛烷基硅烷鍵合硅膠等。目前十八頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)正相色譜是指以親水性的填料做固定相、以疏水性溶劑或混溶的溶劑做流動(dòng)相的HPLC類型。反相色譜是指以強(qiáng)疏水性的填料做固定相、以可以和水混溶的有機(jī)溶劑做流動(dòng)相的HPLC類型。反相色譜最常用的固定相是ODS柱，最常用的流動(dòng)相是水、甲醇、乙腈等。這一模式在HPLC中應(yīng)用極廣，類似于一種通用型的液相色譜方法。目前十九頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)（二）定量分析方法高效液相色譜法的定量分析方法同氣相色譜法。目前二十頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)第二節(jié)藥物含量測(cè)定示例一、碘量法《中國(guó)藥典》（2005年版）收載的用直接碘量法測(cè)定含量的原料藥和制劑有維生素C及其制劑、二巰丙醇、二巰丙磺鈉及其注射劑、安乃近及其制劑等。目前二十一頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)例6-1《中國(guó)藥典》（2005年版）中維生素C的含量測(cè)定。1.測(cè)定原理：維生素C具有強(qiáng)還原性，在酸性溶液中可被弱氧化劑碘氧化為去氫維生素C，當(dāng)維生素C被I2氧化后，微過量的I2可使淀粉指示劑變藍(lán)色，以溶液顯藍(lán)色并持續(xù)30s不褪為終點(diǎn)。

2.測(cè)定方法：取本品約0.2g，精密稱定，加新沸過的冷水100ml與稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液顯藍(lán)色在30s內(nèi)不褪，即得。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于8.806mg的C6H8O6。目前二十二頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)3.數(shù)據(jù)處理：維生素C的百分含量為

c為滴定時(shí)碘滴定液的實(shí)際濃度，mol/L；V為所消耗碘滴定液的體積，ml；W為樣品的重量，g。若為維生素C片劑時(shí)，則維生素C的百分標(biāo)示含量為為平均片重，g；目前二十三頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)二、亞硝酸鈉法例6-2《中國(guó)藥典》（2005年版）中鹽酸普魯卡因的含量測(cè)定。1.測(cè)定原理。在鹽酸酸性條件下，亞硝酸鈉液與鹽酸普魯卡因的芳伯氨基定量發(fā)生重氮化反應(yīng)，反應(yīng)式為：

用永停滴定法指示終點(diǎn)，由消耗亞硝酸鈉滴定液的用量計(jì)算鹽酸普魯卡因的含量。目前二十四頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)2.測(cè)定方法。取本品約0.6g，精密稱定，照永停滴定法（2005年版附錄ⅦA），在15～25℃，用亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml的亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于27.28mg的C13H20N2O2·HCl。3.數(shù)據(jù)處理。

c為亞硝酸鈉滴定液的實(shí)際濃度，mol/L；

V為消耗亞硝酸鈉滴定液的體積，ml；

W為所稱樣品的重量，g。目前二十五頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)三、銀量法例6-3《中國(guó)藥典》（2005年版）中氯化鈉的含量測(cè)定。1.測(cè)定原理以AgNO3為滴定液，用熒光黃作為吸附指示劑，測(cè)定NaCl的含量。2．測(cè)定方法取本品約0.12g，精密稱定，加水50ml溶解后，加糊精溶液(1→50)5ml與熒光黃指示液5～8滴，用AgNO3液(0.1mol/L)滴定，即得。每1mlAgNO3液(0.1mol/L)相當(dāng)于5.844mg的NaCl。數(shù)據(jù)處理c為硝酸銀滴定液的濃度，mol/L；V為測(cè)定時(shí)消耗硝酸銀滴定液的體積，ml；W為所稱樣品的重量，g。目前二十六頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)四、酸堿滴定法 例6-9《中國(guó)獸藥典》（2005年版）中乙酰水楊酸（阿司匹林）的含量測(cè)定。1.測(cè)定原理。將本品溶于中性乙醇后，以酚酞為指示劑，用0.1mol/L氫氧化鈉液直接滴定。滴定反應(yīng)式如下：

2.測(cè)定方法。取本品約0.4g，精密稱定，加中性乙醇(對(duì)酚酞指示液顯中性)20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉液(0.1mol/L)滴定。每1ml氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)相當(dāng)于18.02mg的C9H8O4。目前二十七頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)3.數(shù)據(jù)處理。c為氫氧化鈉滴定液的實(shí)際濃度，mol/L；

V為消耗氫氧化鈉滴定液的體積，ml；

W為所稱供試品的重量，g。目前二十八頁(yè)\總數(shù)三十頁(yè)\編于十九點(diǎn)五、非水滴定法

《中國(guó)藥典》（2005年版）中采用此法測(cè)定的藥物有：癸氟奮乃靜及其注射劑、鹽酸乙胺丁醇及其片劑和膠囊劑、鹽酸乙基嗎啡、鹽酸二甲雙胍、鹽酸二氧丙嗪、鹽酸丁卡因、鹽酸三氟拉嗪、鹽酸馬普替林、鹽酸去氯羥嗪、鹽酸可卡因、鹽酸可樂定、鹽酸丙米嗪、鹽酸布比卡因及其注射劑、鹽酸布桂嗪、鹽酸卡替洛爾、鹽酸甲氧明、鹽酸甲氯芬酯、鹽酸尼卡地平、鹽酸地芬尼多等。