藥學專業(yè)藥物分析第六章藥物的含量測定詳解演示文稿

藥學專業(yè)藥物分析第六章藥物的含量測定詳解演示文稿目前一頁\總數(shù)三十頁\編于十九點（優(yōu)選）藥學專業(yè)藥物分析第六章藥物的含量測定目前二頁\總數(shù)三十頁\編于十九點第六章藥物含量測定第一節(jié)藥物含量測定方法藥品的含量測定是指準確測定藥品有效成分或指標性成分的含量。含量測定是評價藥品質量、判斷藥物優(yōu)劣和保證藥品療效的重要手段?，F(xiàn)行版藥典收載的3214種藥品中，有1419種涉及到含量測定。常用的含量測定方法有化學分析法、紫外-可見分光光度法、原子吸收分光光度法、氣相色譜法、薄層掃描法、高效液相色譜法等。目前三頁\總數(shù)三十頁\編于十九點一、容量分析法容量分析法即滴定分析法，是根據(jù)一種已知濃度的試劑溶液和被測物質完全作用時所消耗的體積，來計算被測物質含量的方法。容量分析通常用于測定較高含量或中含量組分，即被測組分的含量一般在1%以上，有時也可用于測定微量組分。容量分析比較準確，測定的相對誤差可達0.1%。目前四頁\總數(shù)三十頁\編于十九點

根據(jù)標準溶液和被測物質發(fā)生的反應類型和介質的不同，可將容量分析法分為下列幾類：（一）、酸堿滴定法（二）、沉淀法(三)、絡合滴定法(四)、氧化還原法鈰量法、碘量法、溴酸鉀法、高錳酸鉀法、高碘酸鉀法及亞硝酸鈉法目前五頁\總數(shù)三十頁\編于十九點(五)、非水溶液滴定法1.非水堿量法（1）非水堿量法原理某些藥物由于在水液中顯示的堿性較弱，不能進行酸堿滴定。而在非水介質中，就能顯示出較強的堿性，可以順利地進行。多半在冰醋酸或醋酸中進行滴定，滴定劑多為高氯酸的冰醋酸溶液。一般應用電位法指示終點，2.非水酸量法（1）非水酸量法原理某些藥物如羧酸類、酚類、巴比妥類、磺胺類、烯醇類，由于在水溶液中顯示的酸性較弱，CKa<10-8，不能進行酸堿滴定。而在非水介質中，就能顯示出較強的酸性，用強堿滴定。多半在無水甲醇中進行，滴定劑多為甲醇鈉的苯—甲醇溶液。目前六頁\總數(shù)三十頁\編于十九點二、紫外－可見分光光度法1.測定原理定量分析的理論依據(jù)是朗伯-比耳定律。當一束平行的單色光垂直照射到待測物質的稀溶液時，光中所含有的一部分能量被待測物吸收，其余光則透過溶液，照在檢測器上。在一定濃度范圍內，待測物對這束光的吸收度（A）與該物質的濃度（c）和液層的厚度（L）（光路長度，即光程）成正比，其關系如下：A=EcLE為吸收系數(shù)，其物理意義是當溶液濃度為1%（即1g/100ml），液層厚度為1cm時的吸收度數(shù)值，通常用表示。E是個常數(shù)。因此，當液層厚度固定不變時，物質的吸收度與其濃度成正比。目前七頁\總數(shù)三十頁\編于十九點2、定量分析方法（1）對照品比較法對照品比較法按下式計算供試品中被測溶液的濃度：

cx為供試品溶液的濃度；Ax為供試品溶液的吸收度；cR為對照品溶液的濃度；AR為對照品溶液的吸收度。目前八頁\總數(shù)三十頁\編于十九點（2）吸收系數(shù)法

A為測得的吸收度；為比吸收系數(shù)；W為所稱樣品的重量，g。目前九頁\總數(shù)三十頁\編于十九點三、薄層色譜掃描法薄層色譜掃描法是指用一束一定波長、一定強度的紫外或可見光對薄層板進行掃描，測定薄層板上的樣品斑點對光的吸收強度或斑點經(jīng)激發(fā)后所產(chǎn)生的熒光強度。所得到的圖譜及積分數(shù)據(jù)可用于藥品含量測定。（一）薄層吸收掃描法測定薄層板上的樣品斑點對光的吸收強度的方法（二）薄層熒光掃描法測定樣品斑點經(jīng)激發(fā)后所產(chǎn)生的熒光強度的方法

目前十頁\總數(shù)三十頁\編于十九點其中掃描方式有以下幾種：（1）反射法與透射法反射法是指測定樣品斑點對照射光的反射情況進行測定的方法透射法則是測定照射光穿透樣品斑點后光的吸收情況。（2）單波長和雙波長單波長薄層掃描適合于分離度好，背景干擾小的薄層色譜。雙波長薄層掃描時用測定波長和參比波長分別掃描薄層板，測定樣品斑點在兩波長下的吸收度之差。（3）線性掃描和鋸齒掃描線性掃描一般采用一束比待測斑點略寬的狹窄光帶沿展開方向做單向等速掃描，它適于形狀較規(guī)則斑點的掃描。鋸齒掃描是使用微小正方形光束沿展開方向掃描的同時，在垂直于展開方向進行往復式掃描.目前十一頁\總數(shù)三十頁\編于十九點四、氣相色譜法（一）概述1.載氣鋼瓶（N2）；2.氫氣鋼瓶；3.空氣鋼瓶；4.減壓閥；5.干燥器；6.穩(wěn)壓閥；7.壓力表；8.針形閥；9.轉子流量計；10.進樣器及汽化室；11.色譜柱（虛線表示恒溫室）；12.氫火焰離子化檢測器（虛線表示恒溫室）；13.微電流放大器，14.記錄器目前十二頁\總數(shù)三十頁\編于十九點（二）定量分析方法1.外標法精密稱取對照品和供試品，配制成溶液，分別精密量取一定量，注入儀器，記錄色譜圖，測量對照品和供試品中待測成分的峰面積（或峰高），按下式計算含量：

cx為待測成分的濃度；Ax為待測成分的峰面積（或峰高）；cR為對照品的濃度；AR為對照品的峰面積（或峰高）。目前十三頁\總數(shù)三十頁\編于十九點

2.內標法加校正因子精密稱取對照品和內標物質，分別配成溶液，精密量取各溶液，配成測定校正因子所用的對照溶液，取一定量注入儀器，記錄色譜圖，測量對照品和內標物質的峰面積（或峰高），按下式計算校正因子f：

AS為內標物質的峰面積（或峰高）；AR為對照品的峰面積（或峰高）；cS為內標物質的濃度；cR為對照品的濃度。目前十四頁\總數(shù)三十頁\編于十九點再取含內標物質的供試品溶液，注入儀器，記錄色譜圖，測量供試品中待測成分（或雜質）和內標物質的峰面積（或峰高），按下式計算含量：f為校正因子；Ax為供試品中待測成分的峰面積（或峰高）；AS為內標物質的峰面積（或峰高）；cx為供試品中待測成分的濃度；cS為內標物質的濃度。目前十五頁\總數(shù)三十頁\編于十九點3.面積歸一化法。取一定量注入氣相色譜儀，記錄相當于主成分峰保留時間數(shù)倍的色譜圖，計算各成分峰面積及其總和以及被測組分峰面積總和所占的百分比。用本法測定時，溶劑峰不計算在總面積中。被測組分％＝（∑Ai／∑A）×100％式中，∑Ai為被測組分峰面積之和；∑A為全部峰面積之和。目前十六頁\總數(shù)三十頁\編于十九點五、高效液相色譜法

（一）概述目前十七頁\總數(shù)三十頁\編于十九點HPLC常用的流動相：其主要成分是水、甲醇、乙腈、醋酸銨溶液、磷酸溶液、磷酸二氫銨溶液等。固定相：十八烷基硅烷鍵合硅膠（應用最廣泛），常簡稱為ODS柱或C18柱。除C18外，藥典中還用到了苯基硅烷鍵合硅膠、辛烷基硅烷鍵合硅膠等。目前十八頁\總數(shù)三十頁\編于十九點正相色譜是指以親水性的填料做固定相、以疏水性溶劑或混溶的溶劑做流動相的HPLC類型。反相色譜是指以強疏水性的填料做固定相、以可以和水混溶的有機溶劑做流動相的HPLC類型。反相色譜最常用的固定相是ODS柱，最常用的流動相是水、甲醇、乙腈等。這一模式在HPLC中應用極廣，類似于一種通用型的液相色譜方法。目前十九頁\總數(shù)三十頁\編于十九點（二）定量分析方法高效液相色譜法的定量分析方法同氣相色譜法。目前二十頁\總數(shù)三十頁\編于十九點第二節(jié)藥物含量測定示例一、碘量法《中國藥典》（2005年版）收載的用直接碘量法測定含量的原料藥和制劑有維生素C及其制劑、二巰丙醇、二巰丙磺鈉及其注射劑、安乃近及其制劑等。目前二十一頁\總數(shù)三十頁\編于十九點例6-1《中國藥典》（2005年版）中維生素C的含量測定。1.測定原理：維生素C具有強還原性，在酸性溶液中可被弱氧化劑碘氧化為去氫維生素C，當維生素C被I2氧化后，微過量的I2可使淀粉指示劑變藍色，以溶液顯藍色并持續(xù)30s不褪為終點。

2.測定方法：取本品約0.2g，精密稱定，加新沸過的冷水100ml與稀醋酸10ml使溶解，加淀粉指示液1ml，立即用碘滴定液(0.1mol/L)滴定，至溶液顯藍色在30s內不褪，即得。每1ml碘滴定液(0.1mol/L)相當于8.806mg的C6H8O6。目前二十二頁\總數(shù)三十頁\編于十九點3.數(shù)據(jù)處理：維生素C的百分含量為

c為滴定時碘滴定液的實際濃度，mol/L；V為所消耗碘滴定液的體積，ml；W為樣品的重量，g。若為維生素C片劑時，則維生素C的百分標示含量為為平均片重，g；目前二十三頁\總數(shù)三十頁\編于十九點二、亞硝酸鈉法例6-2《中國藥典》（2005年版）中鹽酸普魯卡因的含量測定。1.測定原理。在鹽酸酸性條件下，亞硝酸鈉液與鹽酸普魯卡因的芳伯氨基定量發(fā)生重氮化反應，反應式為：

用永停滴定法指示終點，由消耗亞硝酸鈉滴定液的用量計算鹽酸普魯卡因的含量。目前二十四頁\總數(shù)三十頁\編于十九點2.測定方法。取本品約0.6g，精密稱定，照永停滴定法（2005年版附錄ⅦA），在15～25℃，用亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)滴定。每1ml的亞硝酸鈉滴定液(0.1mol/L)相當于27.28mg的C13H20N2O2·HCl。3.數(shù)據(jù)處理。

c為亞硝酸鈉滴定液的實際濃度，mol/L；

V為消耗亞硝酸鈉滴定液的體積，ml；

W為所稱樣品的重量，g。目前二十五頁\總數(shù)三十頁\編于十九點三、銀量法例6-3《中國藥典》（2005年版）中氯化鈉的含量測定。1.測定原理以AgNO3為滴定液，用熒光黃作為吸附指示劑，測定NaCl的含量。2．測定方法取本品約0.12g，精密稱定，加水50ml溶解后，加糊精溶液(1→50)5ml與熒光黃指示液5～8滴，用AgNO3液(0.1mol/L)滴定，即得。每1mlAgNO3液(0.1mol/L)相當于5.844mg的NaCl。數(shù)據(jù)處理c為硝酸銀滴定液的濃度，mol/L；V為測定時消耗硝酸銀滴定液的體積，ml；W為所稱樣品的重量，g。目前二十六頁\總數(shù)三十頁\編于十九點四、酸堿滴定法 例6-9《中國獸藥典》（2005年版）中乙酰水楊酸（阿司匹林）的含量測定。1.測定原理。將本品溶于中性乙醇后，以酚酞為指示劑，用0.1mol/L氫氧化鈉液直接滴定。滴定反應式如下：

2.測定方法。取本品約0.4g，精密稱定，加中性乙醇(對酚酞指示液顯中性)20ml溶解后，加酚酞指示液3滴，用氫氧化鈉液(0.1mol/L)滴定。每1ml氫氧化鈉滴定液(0.1mol/L)相當于18.02mg的C9H8O4。目前二十七頁\總數(shù)三十頁\編于十九點3.數(shù)據(jù)處理。c為氫氧化鈉滴定液的實際濃度，mol/L；

V為消耗氫氧化鈉滴定液的體積，ml；

W為所稱供試品的重量，g。目前二十八頁\總數(shù)三十頁\編于十九點五、非水滴定法

《中國藥典》（2005年版）中采用此法測定的藥物有：癸氟奮乃靜及其注射劑、鹽酸乙胺丁醇及其片劑和膠囊劑、鹽酸乙基嗎啡、鹽酸二甲雙胍、鹽酸二氧丙嗪、鹽酸丁卡因、鹽酸三氟拉嗪、鹽酸馬普替林、鹽酸去氯羥嗪、鹽酸可卡因、鹽酸可樂定、鹽酸丙米嗪、鹽酸布比卡因及其注射劑、鹽酸布桂嗪、鹽酸卡替洛爾、鹽酸甲氧明、鹽酸甲氯芬酯、鹽酸尼卡地平、鹽酸地芬尼多等。