人教教學(xué)課件高考生物總復(fù)習(xí)課件：專題《基因工程》知識研習(xí)新人教選修張

知識結(jié)構(gòu)(對應(yīng)學(xué)生用書P154)選修３現(xiàn)代生物科技專題知識研讀(對應(yīng)學(xué)生用書P154)專題１基因工程(一)1．基因工程的誕生。2．基因工程的原理及技術(shù)。3．DNA的粗提取與鑒定。課程標(biāo)準(zhǔn)(即時鞏固解析為教師用書獨有)考點一基因工程的基本工具一、與DNA分子相關(guān)的酶

種類項目限制酶DNA連接酶DNA聚合酶解旋酶作用底物DNA分子DNA分子片段脫氧核苷酸DNA分子作用部位磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵磷酸二酯鍵堿基對間的氫鍵作用結(jié)果形成黏性末端或平末端形成重組DNA分子形成新的DNA分子形成單鏈DNA分子考點整合二、載體1．作用(1)作為運載工具，將目的基因轉(zhuǎn)移到宿主細(xì)胞內(nèi)。(2)利用它在宿主細(xì)胞內(nèi)對目的基因進(jìn)行大量復(fù)制。2．具備的條件(1)能在宿主細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定保存并大量復(fù)制。(2)有多個限制酶切割位點，以便與外源基因連接。(3)具有某些遺傳標(biāo)記基因，以便進(jìn)行篩選。3．種類(1)質(zhì)粒：一種裸露的、結(jié)構(gòu)簡單、獨立于細(xì)菌擬核DNA之外，能夠自我復(fù)制的很小的雙鏈環(huán)狀DNA分子。(2)λ噬菌體的衍生物。(3)動植物病毒。【歸納總結(jié)】①一般來說，天然載體往往不能滿足人類的所有要求，因此人們根據(jù)不同的目的和需要，對某些天然的載體進(jìn)行人工改造。②限制酶切割位點所處的位置必須是在所需的標(biāo)記基因之外，這樣才能保證標(biāo)記基因的完整性，有利于對目的基因的檢測?！景咐?】

(2009·福建理綜)轉(zhuǎn)基因抗病香蕉的培育過程如圖所示。質(zhì)粒上有PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等四種限制酶切割位點。請回答：(1)構(gòu)建含抗病基因的表達(dá)載體A時，應(yīng)選用限制酶_____，對____________進(jìn)行切割。(2)培養(yǎng)基中的卡那霉素會抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長，欲利用該培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗病基因的香蕉細(xì)胞，應(yīng)使基因表達(dá)載體A中含有____________，作為標(biāo)記基因。(3)香蕉組織細(xì)胞具有________，因此，可以利用組織培養(yǎng)技術(shù)將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株。圖中①②依次表示組織培養(yǎng)過程中香蕉組織細(xì)胞的_________________?！窘馕觥勘绢}主要考查基因工程的相關(guān)知識。(1)由于限制酶SmaⅠ的切割位點在抗病基因中間，因此不能用限制酶SmaⅠ來進(jìn)行切割目的基因。要將目的基因從含抗病基因的DNA分子中切割下來，從圖中看需要用限制酶PstⅠ和EcoRⅠ同時進(jìn)行切割。而運載體要和目的基因含有相同的黏性末端才能進(jìn)行連接，所以質(zhì)粒也要用限制酶PstⅠ和EcoRⅠ同時進(jìn)行切割。(2)由于卡那霉素能抑制香蕉愈傷組織細(xì)胞的生長，所以構(gòu)建的基因表達(dá)載體A中應(yīng)含抗卡那霉素基因，作為標(biāo)記基因。(3)由于香蕉組織細(xì)胞具有全能性，因此利用植物組織培養(yǎng)技術(shù)可將導(dǎo)入抗病基因的香蕉組織細(xì)胞培育成植株?！敬鸢浮?/p>

(1)PstⅠ、EcoRⅠ含抗病基因的DNA、質(zhì)粒

(2)抗卡那霉素基因

(3)全能性脫分化、再分化【即時鞏固1】

(2010·江蘇)下表中列出了幾種限制酶識別序列及其切割位點，圖1、圖2中箭頭表示相關(guān)限制酶的酶切位點。請回答下列問題：限制酶BamHⅠHindⅢEcoRⅠSmaⅠ識別序列及切割位點G↓GATCCCCTAG↑GA↓AGCTTTTCGA↑AG↓AATTCCTTAA↑GCCC↓GGGGGG↑CCC(1)一個圖1所示的質(zhì)粒分子經(jīng)SmaⅠ切割前后，分別含有________個游離的磷酸基團(tuán)。(2)若對圖中質(zhì)粒進(jìn)行改造，插入的SmaⅠ酶切位點越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越________。(3)用圖中的質(zhì)粒和外源DNA構(gòu)建重組質(zhì)粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是______________________________________。(4)與只使用EcoRⅠ相比較，使用BamHⅠ和HindⅢ兩種限制酶同時處理質(zhì)粒、外源DNA的優(yōu)點在于可以防止______________。(5)為了獲取重組質(zhì)粒，將切割后的質(zhì)粒與目的基因片段混合，并加入________酶。(6)重組質(zhì)粒中抗生素抗性基因的作用是為了__________。(7)為了從cDNA文庫中分離獲取蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因，將重組質(zhì)粒導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體，然后在______的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，以完成目的基因表達(dá)的初步檢測。【解析】本題綜合考查基因工程的過程及應(yīng)用。(1)質(zhì)粒是雙鏈環(huán)狀DNA分子，在SmaⅠ切割前沒有游離的磷酸基團(tuán)，SmaⅠ作用于兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵，切割產(chǎn)生的DNA片段末端是平末端，因而質(zhì)粒經(jīng)切割后含有2個游離的磷酸基團(tuán)。(2)質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性主要由氫鍵的數(shù)量決定，氫鍵數(shù)量越多，質(zhì)粒的熱穩(wěn)定性越高，反之則低，DNA分子中A與T之間存在2個氫鍵，C與G之間存在3個氫鍵，因此DNA分子中G—C堿基對越多，熱穩(wěn)定性就越高，SmaⅠ識別CCCGGG序列，并在C和G之間將這段序列切開，也就是質(zhì)粒中SmaⅠ酶切位點越多，G—C堿基對越多，熱穩(wěn)定性越高。(3)據(jù)圖1可知，SmaⅠ切割的位點在抗生素抗性基因之中，抗生素抗性基因是標(biāo)記基因，應(yīng)盡量避免破壞，據(jù)圖2可知SmaⅠ切割的位點在目的基因之中,破壞了目的基因,所以不能使用SmaⅠ切割。(4)用同種限制酶切割后的質(zhì)粒和目的基因,在基因表達(dá)載體構(gòu)建時，常形成三種直接方式，其中目的基因與目的基因的連接、質(zhì)粒與質(zhì)粒的連接是無效的連接，用兩種限制酶可避免此類現(xiàn)象。(5)基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程中需加DNA連接酶，連接脫氧核糖和磷酸。(6)抗生素抗性基因?qū)儆跇?biāo)記基因，供重組DNA的鑒定和選擇。(7)目的基因是蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白基因，將其導(dǎo)入喪失吸收蔗糖能力的大腸桿菌突變體后，應(yīng)進(jìn)行目的基因的檢測與鑒定，可根據(jù)受體細(xì)胞是否含有蔗糖轉(zhuǎn)運蛋白，即是否具備吸收蔗糖的能力判斷基因工程是否成功，因而可在含有蔗糖(唯一碳源)的培養(yǎng)基中培養(yǎng)。【答案】

(1)0、2

(2)高

(3)SmaⅠ會破壞質(zhì)粒的抗性基因、外源DNA中的目的基因

(4)質(zhì)粒和含目的基因的外源DNA片段自身環(huán)化

(5)DNA連接(6)鑒別和篩選含有目的基因的細(xì)胞(7)蔗糖為唯一含碳營養(yǎng)物質(zhì)考點膜二基因倡工程陳基本好操作擋程序漏分析一、宣目的月基因識的獲丈取途跌徑1．直吃接分致離：拆從自撿然界祥已有任的物軋種中悶分離墓，如撲從基缸因組團(tuán)文庫垃中獲尿取。2．人院工合在成目礦的基棗因常用懼的方碎法有養(yǎng)：(1孝)已知邊核苷域酸序壺列的鍋較小全基因掃，直嗓接利同用DN竟A合成唇儀用測化學(xué)叫方法格合成犯，不掠需要宿模板窗。(2財)以RN槳A為模貿(mào)板，味在逆雜轉(zhuǎn)錄箭酶作儀用下爐人工野合成即。3．PC架R技術(shù)休與DN柔A復(fù)制竊的比錘較PCR技術(shù)DNA復(fù)制相同點原理DNA雙鏈復(fù)制(堿基互補配對)原料四種游離的脫氧核苷酸條件模板、ATP、酶等不同點解旋方式DNA在高溫下變性解旋解旋酶催化場所體外復(fù)制主要在細(xì)胞核內(nèi)酶熱穩(wěn)定的DNA聚合酶(Taq酶)細(xì)胞內(nèi)含有的DNA聚合酶結(jié)果在短時間內(nèi)形成大量的DNA片段形成整個DNA分子二、寺基因綿表達(dá)忙載體白的構(gòu)蘆建1．基晉因表航達(dá)載臘體的勉組成脹：啟遺動子歷、目漠的基推因、哀終止慨子以掌及標(biāo)嶼記基券因等片。2．基砌因表敬達(dá)載吳體的顆構(gòu)建獻(xiàn)方法三、鳳將目舒的基麻因?qū)U入受框體細(xì)腰胞生物種類植物細(xì)胞動物細(xì)胞微生物細(xì)胞常用方法農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法顯微注射技術(shù)Ca2＋處理法受體細(xì)胞體細(xì)胞受精卵原核細(xì)胞轉(zhuǎn)化過程將目的基因插入Ti質(zhì)粒的T-DNA上→農(nóng)桿菌→導(dǎo)入植物細(xì)胞→整合到受體細(xì)胞的DNA→表達(dá)將含有目的基因的表達(dá)載體提純→取卵(受精卵)→顯微注射→受精卵發(fā)育→獲得具有新性狀的動物Ca2＋處理細(xì)胞→感受態(tài)細(xì)胞→重組表達(dá)載體與感受態(tài)細(xì)胞混合→感受態(tài)細(xì)胞吸收DNA分子四、鍬目的折基因脆的檢扔測與惱鑒定1．分蕉子水生平檢嘴測(1寇)導(dǎo)入舒檢測座：DN碰A分子煩雜交那技術(shù)休，即盤使用綠放射犁性同槳位素岔標(biāo)記艦的含肥目的債基因療的DN翁A片段紡作探餅針檢罵測。2．個到體生堤物學(xué)兄水平矛鑒定脊：對質(zhì)轉(zhuǎn)基觸因生耀物進(jìn)礦行抗支蟲或基抗病辯的接歌種實眉驗?！景咐?】(2求00膜8·海南)如圖錄為某鑰種質(zhì)嗎粒表慎達(dá)載揮體簡佳圖，小箭燃頭所酬指分緞別為設(shè)限制坡性內(nèi)壟切酶Ec低oRI、Ba城mHI的酶泥切位陣點，am系pR為青俯霉素瞧抗性朵基因逼，tc笨tR為四撞環(huán)素釀抗性獸基因去，P為啟程動子臉，T為終立止子器，or遵i為復(fù)貍制原董點。承已知頃目的賢基因礦的兩橫端分爛別有春包括Ec殿oRI、Ba扎mHI在內(nèi)蟲的多肚種酶煌的酶練切位灑點。據(jù)圖蜓回答模：(1謊)將含胃有目額的基汽因的DN促A與質(zhì)今粒表尸達(dá)載撓體分亂別用Ec絕oR文I酶切,酶切衫產(chǎn)物她用DN慕A連接拼酶進(jìn)班行連遼接后肌，其銜中由索兩個DN踢A片段坡之間僻連接盾形成僅的產(chǎn)銹物有__羨__稅__、__妻__雹__、__冰__插__三種多。若擔(dān)要從鄰這些腔連接市物中加分離騎出重么組質(zhì)啟粒，豎需要春對這善些連敢接產(chǎn)植物進(jìn)矩行__化__犁__。(2悟)用上香述3種連臂接產(chǎn)攪物與籌無任赴何抗夜藥性獨的原只核宿通主細(xì)岔胞進(jìn)貍行轉(zhuǎn)陰化實纏驗。殊之后白將這樂些宿給主細(xì)活胞接有種到據(jù)含四盛環(huán)素礙的培噸養(yǎng)基雖中，青能生慮長的遍原核默宿主丙細(xì)胞朋所含烤有的傾連接粥產(chǎn)物題是__施__噸__謝__；若正接種槍到含波青霉所素的嘆培養(yǎng)溪基中是，能血生長傘的原她核宿兆主細(xì)杯胞所紗含有遭的連忙接產(chǎn)差物是__餓__役__六__喊__飛__威__栗__果__墻__渾__緩__纖__挨__插__美__。(3經(jīng))目的班基因秀表達(dá)跳時，RN模A聚合術(shù)酶識必別和顫結(jié)合設(shè)的位聯(lián)點是__棋__，其仍合成約的產(chǎn)萌物是__軟__痕__升__。(4耍)在上某述實微驗中埋，為橋了防脂止目柿的基浙因和來質(zhì)粒茄表達(dá)財載體耀在酶刷切后還產(chǎn)生矮的末俱端發(fā)犬生任勾意連雅接，偽酶切粉時應(yīng)班選用妖的酶焦是__島__愛__鼓__。【解析】目的乖基因也的DN葉A與質(zhì)碰粒表亮達(dá)載慎體分蘋別用Ec然oR循I酶切司后黏菠性末圖端相棵同，惹可以名連接緒成目凝的基腎因與內(nèi)目的砍基因匠、目叫的基器因與載體抽、載肝體與始載體申，需莊要分條離純替化才陜能得狼到重斷組質(zhì)粥粒。Ec閃oRI酶切拆破壞育了載遞體中螺的四束環(huán)素沸抗性爬基因歲，只澆有載臭體與密載體殘轉(zhuǎn)化涼的原騰核宿掩主細(xì)能胞在舌含四戰(zhàn)環(huán)素貿(mào)的培菠養(yǎng)基作中能幫生長朗。因渣為青爹霉素墾基因冷沒有模被破謠壞，瞇所以作目的壓基因歡與載襲體、那載體臣與載疾體轉(zhuǎn)亦化的蠶原核劍宿主千細(xì)胞越在含努青霉螞素的渡培養(yǎng)惱基中除能生娘長。Ec造oRI和Ba圍mHI酶切尤后有2種黏尚性末乘端，眉不能褲任意大連接扁?！敬鸢浮?1愧)目的宜基因—載體潑連接寒物掙載體—載體版連接鼻物側(cè)目的羨基因—目的打基因葉連接店物槽分離盯純化(其他遲合理口答案鑰也可宿以)(2紅)載體—載體維連接覺物計目的宿基因—載體勒連接為物、烈載體—載體賺連接陳物(3建)啟動溫子mR殺NA(4滲)Ec漠oRI和Ba些mHI【即時椅鞏固2】(2廈00相8·廣東)天然銳釀酒谷酵母貸菌通魔常缺勻乏分傭解淀透粉的聯(lián)酶類,用作垮發(fā)酵眉原料沃的淀盾粉需贈經(jīng)一幕系列蘇復(fù)雜定的轉(zhuǎn)左化過評程才究能被柳利用見。研賭究者遠(yuǎn)從某悼絲狀浸真菌約中獲圖取淀左粉酶旱基因放并轉(zhuǎn)桿入釀捏酒酵頁母菌盞，獲肚得的瓣釀酒崖酵母猴工程角菌可索直接咬利用仁淀粉御產(chǎn)生未酒精牲。請勾回答桶下列渣問題原：(1期)將淀逗粉酶霸基因肥切割穩(wěn)下來曲所用膏的工逃具是__隱__，用__老_將淀耀粉酶繳基因城與載董體拼階接成友新的DN公A分子跌，下扒一步悉將該DN莖A分子__科_，以跡完成方工程茫菌的視構(gòu)建辨。(2堂)若要側(cè)鑒定杏淀粉綿酶基嫁因是皆否插培入釀按酒酵悶?zāi)妇?，可育采用罪的檢溪測方霜法是__棄__蕉__叉__；若趣要鑒蜜定淀裝粉酶頭基因泳是否怎翻譯版成淀聰粉酶離，可采伯用__岔__扶__語__檢測四；將匹該工眠程菌燥接種龍在含抗淀粉蹦的固療體平簡板培烘養(yǎng)基餅上，打培養(yǎng)嚴(yán)一定年時間拴后，貝加入加碘液葛，工鞋程菌咸周圍睛出現(xiàn)斑透明喚圈,請解限釋該唱現(xiàn)象寺發(fā)生芹的原灶因。__遍__描__品__為__褲__娃__賴__夸__腳__洪__。(3皇)如何換進(jìn)一飾步鑒梢定不協(xié)同的拐轉(zhuǎn)基幅因工辟程菌安菌株厲利用游淀粉歪能力獸的大警??？__鍵__期__槽__起__彈__冰__心__緊__駱__荷__垮__吐__柳__共__慣__溫__扁__。(4群)微生贊物在滅基因脆工程摘領(lǐng)域喊中有陜哪些校重要候作用化？__姜__罪__?！窘馕觥勘绢}塘考查漢了與少基因稅工程秋相關(guān)王的知帆識。體將基靜因切遣割下栗來的敗工具趣是限解制酶徑，將濟(jì)基因庸與運汽載體屢結(jié)合勇在一圣起的停是DN寺A連接團(tuán)酶，宗基因揀工程曾的基撿本流忽程是協(xié)：獲鴉取目稠的基鄙因，俱基因英表達(dá)勤載體本的構(gòu)夫建，潑將目起的基攻因?qū)N入受修體細(xì)死胞，龜目的熊基因季的檢松測與均鑒定弦。目川的基突因的釀檢測腎與鑒蜘定包渠括分煌子水向平的務(wù)檢測山，如錦用DN伐A分子漠雜交憂技術(shù)愛來檢辦測基朋因或救對應(yīng)波的mR臭NA，用勝抗原鋒－抗拒體雜鑒交來既檢測擔(dān)蛋白質(zhì)，趙也包踐括個痕體生摩物學(xué)鴨水平折的鑒龜定。山淀粉歌在工錫程菌遲分泌器的淀求粉酶軍的作哨用下喬被分擁解，沉加入黎碘液凡后，農(nóng)因工軟程菌清周圍罩無淀粘粉而將不變迷藍(lán)，息故出售現(xiàn)透休明圈散?！敬鸢浮?1醉)限制徑性核胳酸內(nèi)休切酶DN絡(luò)A連接春酶肅導(dǎo)入方釀酒必酵母調(diào)菌(2察)D盲NA分子崖雜交失抗殿原－漲抗體禽雜交嚴(yán)或淀籃粉酶砍活性零該角工程黎菌產(chǎn)路生的咽淀粉食酶可耀分泌舟至培敢養(yǎng)基軟中，前培養(yǎng)慮基中膛淀粉盛被水巴解的誰區(qū)域否，遇誓碘不殲再變抬藍(lán)色魔，產(chǎn)臟生透恰明圈(3渣)測定搶相同剪培養(yǎng)艘條件擔(dān)下不其同工隔程菌烏菌株艇的淀岡粉酶科活性邀或酒才精產(chǎn)體量(4假)①工具煤酶主演要來受自微終生物夫；②最重拆要的胞目的食基因嫩供體竊庫之秘一；③目的強基因始的載脹體之盆一；④作為模受體志細(xì)胞置；⑤提供宴用于旦發(fā)酵勇的工見程菌知識如研讀(對應(yīng)肉學(xué)生夠用書P15鑒7)基因集工程(二)1．基架因工聾程的留應(yīng)用膊。2．蛋進(jìn)白質(zhì)壘工程裝。課程標(biāo)準(zhǔn)(即時倉鞏固陶解析籃為教催師用雪書獨余有)考點肝一基因嫌工程勇的應(yīng)活用成惡果一、雄植物掙基因績工程灰的成扮果1．抗險蟲轉(zhuǎn)改基因憶植物折：主已要抗唯蟲基鉆因有Bt毒蛋紅白基由因、笛蛋白裳酶抑混制劑及基因兇、淀爹粉酶涂抑制求劑基檔因、暮植物景凝集乘素基質(zhì)因等貓。抗已蟲棉碑、抗石蟲番劑茄、參抗蟲應(yīng)煙草醫(yī)都已利獲得塘成功萌，既針減少妙了殺襪蟲劑脾的使植用，評又保灑護(hù)了弊環(huán)境亡。2．抗暖病毒福轉(zhuǎn)基議因植優(yōu)物：均主要仗抗病失毒的洞病毒俯外殼取基因輪、病臣毒的臂復(fù)制扇酶基班因、腿抗真狐菌的尤幾丁順質(zhì)酶物基因牙和抗俱毒素京合成墳基因粥。考點整合多種臂抗病撤毒植威株已嚇培育疾成功以并開婆始進(jìn)罩行田管間實唯驗、王栽培崇。3．抗厲逆轉(zhuǎn)印基因雹植物獎：主壘要有泡抗鹽戀堿、臨抗干總旱的肥滲透陶壓調(diào)孕節(jié)基幣因、壟耐寒卵的抗沒凍蛋蓬白基吹因、管抗除拜草劑旗基因軟等，誦減輕銹了不彈利環(huán)麻境條夕件對螺農(nóng)業(yè)詳生產(chǎn)聽造成輛的影姑響。4．利穿用轉(zhuǎn)惜基因晉改良漲植物嚴(yán)品質(zhì)寶：主迅要成灶果有賞培育啄賴氨旁酸含圣量較桌高的冤玉米莊、耐咐儲存攻的番萌茄、勒花色咳變異項的矮叉牽牛川花等跳。二、晨動物智基因緊工程摩的成正果1．提賞高動視物生中長速邪度：爆導(dǎo)入谷外源惱生長膊激素街基因被、培鄉(xiāng)豐育轉(zhuǎn)覽基因默綿羊割和轉(zhuǎn)摘基因怪鯉魚辦。2．改喊善畜文產(chǎn)品逐的品圓質(zhì)：膛如導(dǎo)取入腸安乳糖升酶基時因，葉生產(chǎn)撿低乳拍糖乳你汁。3．用團(tuán)轉(zhuǎn)基臺因動害物生順產(chǎn)藥潮物：在利用樸乳腺介反應(yīng)脹器生盟產(chǎn)抗萄凝血笛酶、起血清責(zé)白蛋旱白、刑生長午激素急等醫(yī)碗藥產(chǎn)滾品。4．用秧轉(zhuǎn)基杰因動括物作捕器官誤移植躍的供島體：革利用緊基因趙工程魯抑制絕抗原掛決定移簇基鹿因的煮表達(dá)處或除庭去抗炒原決身定基毅因，袋培育筐出沒闖有免逢疫排恒斥反亮應(yīng)的患轉(zhuǎn)基松因克預(yù)隆豬混器官意。三、于基因鮮工程罵藥物利用乳轉(zhuǎn)基頃因工第程菌琴生產(chǎn)將出人僵類蛋擾白質(zhì)超藥物憑。四、雀基因徹治療項目類型外源基因類型及舉例過程特點成果舉例體外基因治療腺苷酸脫氨酶基因①從病人體內(nèi)獲得某種細(xì)胞②細(xì)胞培養(yǎng)③體外完成基因轉(zhuǎn)移④篩選并擴增培養(yǎng)⑤重新輸入患者體內(nèi)操作復(fù)雜，但成功率高治療復(fù)合型免疫缺陷癥體內(nèi)基因治療治療遺傳性囊性纖維化病的基因外源基因→載體攜帶體內(nèi)相應(yīng)組織細(xì)胞操作簡單，成功率低治療遺傳性囊性纖維化病【案例1】翠(2辯00管9·江蘇)蘇云愉金桿醬菌(B獸t)能產(chǎn)狗生具姻有殺銷蟲能唐力的攔毒素黎蛋白篩。下?lián)鋱D是棄轉(zhuǎn)Bt毒素困蛋白旋基因俯植物般的培嘉育過親程示驕意圖(am靈pr為抗升氨芐榮青霉獨素基漲因)，據(jù)黨圖回嘴答下冒列問辨題。(1壟)將圖批中①的DN冤A用Hi罩ndⅢ、Ba可mHⅠ限制翠酶切摧后，肥反應(yīng)瘡管中早有__默__底__宣__種DN叢A片段算。(2梳)圖中②表示Hi仔ndⅢ與Ba籃mHⅠ酶切麻、DN無A連接謀酶連停接的茅過程峰，此丘過程對可獲瓣得__拉__薯__沒__種重托組質(zhì)拍粒；虹如果羊換用Bs答tⅠ與Ba延mHⅠ酶切醫(yī)，目銳的基永因與安質(zhì)粒夜連接勤后可凍獲得__昂__耐__伴__種重丸組質(zhì)唯粒。(3怖)目的緣瑞基因爆插入漢質(zhì)粒薯后，傳不能醒影響嘆質(zhì)粒娃的__爆__征__雀__。(4汗)圖中③的Ti質(zhì)粒德調(diào)控早合成浪的vi唐r蛋白俯，可此以協(xié)泡助帶劫有目放的基麥因的T-司DN如A導(dǎo)入墾植物懶細(xì)胞鏟，并過防止符植物洗細(xì)胞京中__墻__勤__復(fù)__對T-喚DN夏A的降爭解。(5斗)已知盤轉(zhuǎn)基桑因植笛物中奶毒素妥蛋白窄只結(jié)雅合某甩些昆煮蟲腸質(zhì)上皮棕細(xì)胞漲表面發(fā)的特棄異性山受體仍，使甘細(xì)胞款膜穿橋孔，槳腸細(xì)燙胞裂錦解，安昆蟲痕死亡滅。而胸該毒航素蛋唉白對舉人類扣的風(fēng)胖險相書對較腫小，津原因搏是人短類腸任上皮示細(xì)胞__草__柔__庭__第__商__跟__雹_。(6抬)生產(chǎn)胳上常午將上瘦述轉(zhuǎn)壓基因強作物鄭與非剖轉(zhuǎn)基怕因作跨物混睜合播辨種，沒其目攻的是障降低挪害蟲絡(luò)種群喉中的__獸__狹__基因置頻率錦的增擴長速積率。【解析】本題拜考查立基因彩工程培的相角關(guān)知累識。(1選)圖中①的DN屑A有1個Hi爽nd揮Ⅲ酶切行位點杯和2個Ba圍mHⅠ酶切遙位點藥，故良用Hi蛙nd射Ⅲ、Ba競mHⅠ完全乳酶切穴后，贈反應(yīng)妖管中艙有4種DN晉A片段循。(2怖)從圖勤中①可知蛛，Hi絹nd址Ⅲ、Ba炮mHⅠ酶切嶄后有2種片聲段有肺相應(yīng)灘的末遺端,可與軍質(zhì)粒雖重組雕；而Bs杠tⅠ和Ba概mHⅠ酶切懸后只禍有1種片流段有猶相應(yīng)鑒的末訴端，淹可與質(zhì)粒鞭重組興。(3垮)質(zhì)粒尾要進(jìn)憂行復(fù)犧制才煌能更基多的得表達(dá)宋出產(chǎn)腦物，求所以槍重組怪之后夠要能族復(fù)制紗。(4刪)酶具數(shù)有專帳一性，T-警DN殘A的降探解酶趣為DN東A水解出酶。(5肢)生物腫的細(xì)附胞表檔面的男受體獎具有踏特異寺性，勵人類貸腸上于皮細(xì)練胞沒凱有昆賊蟲腸腔上皮恨細(xì)胞新表面冒的特渣異性膜受體塞，所劫以該道毒素俱蛋白查對人獲類的娃風(fēng)險棟相對隔較小沾。(6駁)自然誰選擇她是普袋遍存件在的疏，純虎種種錯植自迎然選車擇會瘋使害木蟲抗暫性基士因頻香率快爸速增膚長，屑所以螺混合盜種植奪能降谷低害市蟲的鉗抗性丟基因肚頻率棚的增斤長速資率?！敬鸢浮?1哀)4(2紐奉)21(3存)復(fù)制(4捕)D綠NA水解陵酶(5話)表面箱無相諸應(yīng)的飛特異悄性受謹(jǐn)體(6窯)抗性【即時朝鞏固1】(2斯00詳8·山東時理綜)為擴吵大可枯耕地茄面積傲，增宏加糧溜食產(chǎn)確量，認(rèn)黃河含三角選洲等綁鹽堿徹地的蜻開發(fā)驗利用牽備受煌關(guān)注。我臟國科學(xué)家奸應(yīng)用抗耐鹽幻玉基因菊培育甜了耐念鹽水詳?shù)拘洛e品系臺。(1育)獲得滿耐鹽局基因輕后，猶構(gòu)建沃重組DN堅A分子飛所用將的限捧制性抓內(nèi)切浩酶作王用于吧圖中思的__禁__誤__裂__處，DN本A連接丈酶作既用于__耽__兆__偉__處。(填“a”或“b”)(2渴)將重辣組DN幼A分子燈導(dǎo)入王水稻你受體眠細(xì)胞慌的常怎用方址法有曬農(nóng)桿友菌轉(zhuǎn)哨化法償和__酒__縫__史__。(3買)由導(dǎo)飾入目虹的基瘋因的薦水稻惰細(xì)胞例培養(yǎng)最成植絡(luò)株需勒要利撒用__螺__帽_技術(shù)擊，該名技術(shù)朽的核虧心是__音__發(fā)__鮮__和__令__侵__礦__。(4馬)為了兔確定漿耐鹽柏轉(zhuǎn)基課因水字稻是匯否培圖育成險功，班既要鑒用放寸射性乖同位挑素標(biāo)奸記的__山__送__乞__作探秩針進(jìn)桃行分惰子雜次交檢貓測，作又要魯用__住__宰__灑__方法酒從個爪體水犯平鑒粘定水環(huán)稻植青株的按耐鹽淡性。【解析】本題查以社練會的截?zé)狳c勻和科椅技新排進(jìn)展陰為背并景，兵通過舍轉(zhuǎn)基蒼因水片稻的餡培育陜綜合供考查村了基子因工靈程的耐基本材工具樂、基介本操時作程波序和奇植物街細(xì)胞僻工程協(xié)等知已識，廟屬于伏識記慨內(nèi)容卻，要燃求簡苗單。(1以)限制靈性核叮酸內(nèi)爹切酶頂破壞白的是來相鄰臭兩個榨脫氧騾核苷上酸之免間的鳳化學(xué)歇鍵。DN饑A連接診酶的恐作用機部位莊也是災(zāi)該處袋，但趨作用杏與限顫制酶爛正好農(nóng)相反秘。(2洪)重組DN拆A分子寶導(dǎo)入非植物鴉細(xì)胞撲常用孝的方槍法是頁農(nóng)桿另菌轉(zhuǎn)膨化法賠，也煮可以建使用不基因慮槍法吩或花耐粉管哈通道沸法。(3胡)目的右基因詳?shù)氖軔垠w細(xì)梯胞是杯植物煩體細(xì)吊胞或軋受精桑卵，疊因此請，要竄經(jīng)過育植物探組織彈培養(yǎng)缸過程配才能含成為植偏株。青該過決程的檢核心路是脫海分化冷和再冒分化危。(4環(huán))目的件基因害是否呀導(dǎo)入米受體耳細(xì)胞津，用DN冤A分子名雜交雁技術(shù)鑰進(jìn)行碑檢測屬，即吼以帶桐有放閉射性艱的目研的基凱因的噴單鏈攪為探譜針，盒檢測撕受體尖細(xì)胞托中是與否含啞有能舟與探冊針進(jìn)迅行配斯對雜夜交的DN舊A(目的博基因)。檢冶測目笑的基螞因是榜否表仗達(dá)，島可以絮用個饑體檢相驗的誼方法,將植謝物栽丙培到迫高濃襯度鹽飄的環(huán)趴境中(如鹽天堿地)，然魯后觀籍察其鼓生活桃狀況琴?！敬鸢浮?1羅)aa(2慨)基因朋槍法(花粉消管通憲道法)(3叮)植物辦組織母培養(yǎng)湯脫娛分化(去分瓣化)再分竟化(4過)耐鹽禾基因(目的怠基因)一定息濃度簽鹽水級澆灌(移栽雄到鹽建堿地亭中)考點潑二蛋白煎質(zhì)工膏程與睜基因孔工程匹的比旨較

項目區(qū)別與聯(lián)系蛋白質(zhì)工程基因工程區(qū)別過程預(yù)期蛋白質(zhì)功能―→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)―→推測應(yīng)有的氨基酸序列―→找到相對應(yīng)的脫氧核苷酸序列獲取目的基因―→構(gòu)建基因表達(dá)載體―→將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞―→目的基因的檢測與鑒定實質(zhì)定向改造或生產(chǎn)人類所需的蛋白質(zhì)定向改造生物的遺傳特性，以獲得人類所需的生物類型或生物產(chǎn)品結(jié)果可生產(chǎn)自然界沒有的蛋白質(zhì)只能生產(chǎn)自然界已有的蛋白質(zhì)聯(lián)系(1)蛋白質(zhì)工程是在基因工程的基礎(chǔ)上延伸出來的第二代基因工程(2)基因工程中所利用的某些酶需要通過蛋白質(zhì)工程進(jìn)行修飾、改造【案例2】慰20腸08年諾財貝爾剪化學(xué)駝獎授照予了臂三位撓在研踢究綠濫色熒扎光蛋犯白(G繪FP在)方面犧做出儀突出問貢獻(xiàn)度的科稍學(xué)家虜。綠蓄色熒射光蛋鬧白能饒在藍(lán)檢光或看紫外蘋光的允激發(fā)舉下發(fā)浪出熒碼光。香借助GF不P發(fā)出慚的熒柄光就華可以陽跟蹤斜蛋白悅質(zhì)在群細(xì)胞抖內(nèi)部隸的移遮動情駁況，斧幫助爪推斷迅蛋白港質(zhì)的置功能它。GF全P基因枯可作偽為目茂的基凝因用乘于培伶育綠源色熒窩光小賞鼠，寸如圖老表示療培育補綠色環(huán)熒光沖小鼠辛的基妄本流鎖程：請根廉據(jù)上叼述材表料回臂答下駝列問總題：(1褲)用于倍培育撲綠色與熒光胃小鼠毛的基口因表羊達(dá)載嚼體的祝組成盲必須旨有啟行動子棍、__編__撈__錘__、__還__汁__談__和__遙__螺__拆__等。曉圖中耕過程淺②常銹用的折方法斧是__茄__鍬__糧__；過警程③辮利用擠的生駱物技遺術(shù)是__卷__帽__從__；在進(jìn)進(jìn)行么過程韻④前括，利排用__島__辣__嗎__可以賺獲得袍數(shù)目呢更多旅且基固因型姥相同嘩的綠匹色熒岸光小匹鼠。(2疾)G鐵FP基因暈與目面的基介因一皮起構(gòu)逝建到搖載體料上不誕影響段目的硬基因怖的表檢達(dá)，枯也不妄影響鑼由目嗓的基劉因控介制合罩成的炸蛋白蘇質(zhì)的照結(jié)構(gòu)賤與功誘能，腳且對假細(xì)胞錄無毒嚷性，極因此GF墊P基因瓶可以服作為商基因櫻表達(dá)奇載體更上的__銀__魂__意__。(3冠)目前武科學(xué)趙家們放通過__疊__繳__工程減制造蜜出了芒藍(lán)色耍熒光古蛋白翅、黃抓色熒揀光蛋窮白等術(shù)，該辦工程企是直返接改畢造GF嘉P分子汁，還暗是改拒造GF餐P基因聾？__振__息__具_(dá)_。該陶工程異的基哨本流誓程是__推__沉__廟__更__左__菜__?！窘馕觥炕蚣谋磉_(dá)至載體里由4部分舊組成挪，分以別是幟目的融基因斥、啟遺動子躬、終直止子晉、標(biāo)絡(luò)記基玩因。觸把目其的基倆因?qū)У萌雱有椅锸荇旙w細(xì)灰胞的岡常用旅方法悼是顯閃微注令射技固術(shù)。駛由受憲精卵利培養(yǎng)蛋得到箭早期授胚胎燥，這學(xué)屬于葉細(xì)胞近培養(yǎng)聞技術(shù)牙，可城以利壩用胚宴胎分臥割技候術(shù)由麗一個漢胚胎暢獲得悟多個左胚胎掩。GF體P基因落不影麻響目程的基軟因控蘆制合妖成的閉蛋白勒質(zhì)的刪結(jié)構(gòu)霉與功街能，軟且對并細(xì)胞墨無毒適性，亞又可遇以發(fā)頌出熒繭光，熄因此羅可以漠作為鄰標(biāo)記烤基因殖。蛋橡白質(zhì)滴工程汁是指助通過佛基因窯修飾開或基天因合作成，伐對現(xiàn)逗有蛋共白質(zhì)裝進(jìn)行滑改造再，獲秒得各隸種各聞樣的蜓自然兇界中藍(lán)沒有蚊的蛋蛙白質(zhì)款。蛋適白質(zhì)壞工程煉的基本頌流程賺：預(yù)芹期蛋剪白質(zhì)梯功能→設(shè)計國預(yù)期廢的蛋屑白質(zhì)畢結(jié)構(gòu)→推測畝應(yīng)有怠的氨航基酸狐序列→找到針相對失應(yīng)基岔因的型脫氧嚇核苷貼酸序冤列→修飾(合成)相應(yīng)姓的基智因→表達(dá)頌出相睛應(yīng)蛋皇白質(zhì)捷?！敬鸢浮?1不)G美FP基因替終岸止子糞標(biāo)黃記基秩因廚顯微拍注射撓法雅早期嚷胚胎窯培養(yǎng)躲技術(shù)拜胚摔胎分脆割(2癥)標(biāo)記縱基因(3寺)蛋白悲質(zhì)GF少P基因煉預(yù)于期蛋丈白質(zhì)魯功能→設(shè)計條預(yù)期雕的蛋任白質(zhì)洪結(jié)構(gòu)→推測甘應(yīng)有首的氨愛基酸盡序列→找到脹相對嚷應(yīng)基傅因的百脫氧裹核苷厚酸序姥列→修飾(合成)相應(yīng)尾的基草因→表達(dá)盲出相綢應(yīng)蛋生白質(zhì)【即時曉鞏固2】胰島吃素可鑰以用爛于治平療糖行尿病屆，但苦是胰嚴(yán)島素側(cè)被注抄射到底人體必后，饒會堆袖積在迷皮下情，要純經(jīng)過坦較長發(fā)的時冶間才戰(zhàn)能進(jìn)牽入血委液，亂而進(jìn)膛入血資液的顯胰島孔素又撿容易鏟分解尊，因莫此，雨治療琴效果宏受到影響訓(xùn)。如宵圖是橋用蛋泛白質(zhì)侍工程歸設(shè)計攤速效