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文檔簡介
判斷1.將目的基因整合到受體細胞染色體DNA上的過程屬于基因重組√×2.若能在植物細胞中檢測到抗性基因,則說明該基因工程成功了3.體細胞雜交技術(shù)可用于克隆動物和制備單克隆抗體×4.動物可通過細胞融合技術(shù)培養(yǎng)出新品種×5.一種基因探針能檢測水體中的各種病毒×6.人工種子相比天然種子可隨意改變植物的遺傳性狀×10.一種限制酶只能識別一種特定核苷酸序列11.生產(chǎn)單克隆抗體時,在培養(yǎng)液中加入某種試劑能夠篩選出雜交瘤細胞,因為該試劑能選擇性地抑制骨髓瘤細胞的DNA復(fù)制?!獭?.同一株綠色開花植物不同部位的細胞經(jīng)組織培養(yǎng)獲得的愈傷組織基因相同。×8.將人的胰島素基因?qū)氪竽c桿菌細胞內(nèi),使大腸桿菌生產(chǎn)人的胰島素技術(shù)屬于蛋白質(zhì)工程?!?.利用PCR技術(shù)擴增目的基因,在PCR合成儀中應(yīng)加入的物質(zhì)不應(yīng)該有解旋酶。
√12.小鼠骨髓瘤細胞和B淋巴細胞融合可制備單克隆抗體?!?3.人胰島素原基因在大腸桿菌中表達的胰島素原無生物活性√×14.在植物細胞組織培養(yǎng)中胚不能作為組織培養(yǎng)的材料16.植物體細胞雜交過程就是原生質(zhì)體融合的過程×17.將目的基因直接導(dǎo)入大腸桿菌,然后讓其感染并轉(zhuǎn)入某植物細胞中×15.對胚胎進行性別鑒定時可取囊胚的滋養(yǎng)層細胞做DNA分析?!?8.外源DNA必須位于重組質(zhì)粒的啟動子和終止子之間才能進行復(fù)制
×19.重組質(zhì)粒與探針能進行分子雜交是因為DNA分子脫氧核糖和磷酸交替連接×20.無論動物細胞的原代培養(yǎng),還是傳代培養(yǎng)過程中都會發(fā)生細胞貼壁和接觸抑制的現(xiàn)象。21.目的基因是否被整合到受體細胞DNA上,檢測方法是用同位素標(biāo)記的目的基因做探針,進行
DNA分子雜交實驗。√√22.排卵是指卵子從卵泡中排出√1.DNA重組技術(shù)的工具酶:限制酶、DNA連接酶2.DNA重組技術(shù)的工具:限制酶、DNA連接酶、運載體(載體)3.在基因工程中使用的載體:質(zhì)粒、λ噬菌體衍生物、動植物病毒4.天然質(zhì)粒是否能直接用做載體?不能5.不同生物的DNA分子(或基因)能重組的原因是:結(jié)構(gòu)和基本單位相同基因工程6.基因工程的基本操作程序第一步、獲取目的基因第二步、構(gòu)建表達載體第三步、將目的基因?qū)胧荏w細胞第四步、目的基因的檢測與鑒定(核心)7.目的基因的獲取途徑基因文庫、PCR技術(shù)擴增、人工合成8.PCR技術(shù)擴增目的基因DNA雙鏈復(fù)制(1)原理:(2)前提:要有一段已知目的基因的核苷酸序列(3)互補鏈延伸時所用酶:Taq酶(熱穩(wěn)定性DNA聚合酶)9.基因表達載體的組成(1)目的基因(2)啟動子(3)終止子(4)標(biāo)記基因(抗性基因或熒光蛋白基因)10.將目的基因?qū)胫参锛毎?)采用最多的方法:農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(2)農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上有可轉(zhuǎn)移的T-DNA11.將目的基因?qū)雱游锛毎?)常用的受體細胞受精卵(1)采用最多、最有效方法顯微注射技術(shù)12.將目的基因?qū)胛⑸锛毎S锰幚矸椒–a2+
處理使細胞呈感受態(tài)13.目的基因的檢測與鑒定(1)檢測:分子水平是否插入目的基因(關(guān)鍵):是否轉(zhuǎn)錄:是否翻譯:(2)鑒定:個體水平做接種實驗DNA分子雜交分子雜交抗原—抗體雜交探針:用同位素標(biāo)記的目的基因的片段14.將藥用蛋白基因與乳腺蛋白基因的啟動子等重組在一起得到的轉(zhuǎn)基因動物,稱為乳腺(乳房)生物反應(yīng)器15.治療遺傳病的最有效手段是:基因治療16.蛋白質(zhì)工程直接操作對象是:基因是否遵循中心法則?遵循是否需要基因工程中的工具酶?需要被喻為:第二代基因工程1.植物組織培養(yǎng)技術(shù)脫分化營養(yǎng)、激素再分化光照胚狀體或叢芽離體植物組織、器官、細胞(外植體)試管苗(1)當(dāng)生長素含量高于細胞分裂素時,主要誘導(dǎo)植物組織脫分化和根原基形成(2)反之則誘導(dǎo)再分化和芽原基形成愈傷組織細胞工程2.植物體細胞雜交技術(shù)(1)去壁的常用方法:酶解法(纖維素酶和果膠酶)(2)原生質(zhì)體融合方法:物理法:離心、振動、電激等化學(xué)法:聚乙二醇(PEG)(3)細胞融合的原理:細胞膜的流動性(4)意義:克服了遠緣雜交不親和的障礙3.動物細胞培養(yǎng)的條件(1)無菌、無毒的環(huán)境(2)營養(yǎng)(3)溫度和pH(4)氣體環(huán)境①對和培養(yǎng)用具進行無菌處理;②在培養(yǎng)液中添加一定量的;③定期更換;合成培養(yǎng)基:葡萄糖、氨基酸、無機鹽、
、微量元素等還需要加等天然成分。溫度±0.5度,pH7.2~7.495%空氣加的混合氣體。
O2是所必需的;CO2是培養(yǎng)液抗生素培養(yǎng)液促生長因子動物血清、血漿36.55%CO2細胞代謝維持培養(yǎng)液PHMⅡ中期卵母細胞4.體細胞核移植的受體細胞通常為5.雜交瘤細胞的特點:即能迅速大量繁殖、又能產(chǎn)生專一抗體特異性強、靈敏度高、可大量制備6.單克隆抗體的主要優(yōu)點7.利用單克隆抗體可制作“生物導(dǎo)彈”,其作用為:導(dǎo)向作用(特異性)8.制備單克隆抗體是,選擇B淋巴細胞的原因是每個B淋巴細胞只產(chǎn)生一種特異性抗體9.誘導(dǎo)答動物沉細胞旺間融燃合的愧方法虹與植燦物細墊胞不偶同的爺是:用滅勁活的花病毒10妻.目前啄使用待的或旱冷凍休保存舞的正錄常細鋒胞為斷:10代以蘿內(nèi),蛛以?;⒊终6都怏w核青型11.當(dāng)培養(yǎng)時,少部分細胞克服自然壽命極限,已經(jīng)發(fā)生了,并朝向方向發(fā)展。傳代突變癌細室胞接觸桐抑制12.無論原代還是傳代培養(yǎng),細胞都會出現(xiàn)的現(xiàn)象:貼壁武生長13啞.精子吊細胞錫變形捧中的哀主要等變化皺:1)細胞騰核——2)高爾再基體——3)中心允體——4)線粒妨體——5)細胞怪內(nèi)其敢他物宇質(zhì)——精子抱頭的晴主要批部分頭部凍的頂從體精子鳥的尾線粒果體鞘原生淘質(zhì)滴14角.卵子理受精逗的重玻要標(biāo)騎志:在卵帆細胞茶膜和福透明每帶間縮慧隙觀吸察到皇兩個榆極體15片.獲能杯的精滲子和酒卵子多相遇受時,觸依次癢會發(fā)政生什竭么現(xiàn)塑象?雨(防位止多墓精入枝卵的忙兩個夾屏障售是什圍么?序)透明卻帶反攝應(yīng)卵細孫胞膜痛反應(yīng)16恐.哺乳靜動物顯的受六精過答程主慰要包標(biāo)括:頂體霧反應(yīng)卵細露胞膜壺反應(yīng)重)(透梯明帶節(jié)反應(yīng)精子師穿越毫放射搶冠和將透明掌帶,架進入降卵細弟胞膜挨,原核術(shù)的形雁成和南融合勢。17勒.卵子撒的發(fā)亡生(1研)發(fā)生頸部位脂:(2眨)時間伴:減數(shù)漫第一總次分奧裂是殼在雌拔性動仿物完成狐;幻玉減數(shù)華第二補次分怒裂是劫在的過抄程完峰成的占。卵巢始于寫胚胎悄時期睬性別勇分化把后排卵引前后精卵婆結(jié)合18平.胚胎須發(fā)育卵裂伍期:在透滲明帶伍內(nèi)進棵行,細和胞數(shù)勢量不焰斷增膀加,趴但胚關(guān)胎并不殊增加肉,或廣略有孕減少懼。有絲窮分裂總體塑積桑椹紋胚:由具蕩有構(gòu)成戴,細腦胞數(shù)友在32個左假右。全能侄性細爺胞囊胚豬:細胞質(zhì)開始往出現(xiàn)垂了。分化內(nèi)細苦胞團暴:滋養(yǎng)弱層:發(fā)育誤成胎散兒各載組織發(fā)育映成胎虎膜和謙胎盤19.試管動物技術(shù)是指通過
使卵子和精子在下成熟和受精,并通過培養(yǎng)發(fā)育為后,再經(jīng)移植產(chǎn)生后代的技術(shù)。人工葡操作體外頸條件早期錄胚胎20.對實驗小鼠用處理,使其排出更多的卵子,然后,從中沖取卵子,與獲能的精子在體外受精。促性殿腺激渡素輸卵途管直接21餡.通常秤采用快的對殖精子襯獲能宿處理碌的方奴法有擾:培養(yǎng)撫法和妖化學(xué)島誘導(dǎo)繭法(肝奇素或春鈣離問子載茅體A2都31綁87溶液渠)22亂.胚胎位移植齊的實梯質(zhì)是?。涸缙谔撆咛?quán)在相址同生址理環(huán)縱境條桐件下奏空間嗓位置遇的轉(zhuǎn)醫(yī)移23.精子和卵子在體外受精后,應(yīng)將受精卵移入中繼續(xù)培養(yǎng),其成分有發(fā)育妄培養(yǎng)縣液無機俯鹽、晃有機角鹽、餓維生防素、畝激素稠、氨命基酸殲、核悉苷酸乏、血虜清等炭。24越.沖卵蜜是指:從子增宮內(nèi)突沖洗郵出胚盞胎25會.將均等樂分割帝,否皇則影蛙響分況割后息胚胎的恢柏復(fù)和訊進一個步發(fā)狼育。內(nèi)細桂胞團26鍵.胚胎性分割適的份企數(shù)越倒多,指操作蛙的難計度會圣越大殲,移豎植的南成功桃率也。越低27墊.胚胎荒分割慣可以材看做挨動物的方法栗之一無性蟲繁殖共或克笑?、賮硪略矗?8丟.胚胎停干細吸胞早期伐胚胎剝或原拆始性殺腺②形取態(tài)特估點:體積兔小,細胞伴核大,核仁優(yōu)明顯③功防能特昨點:發(fā)育永的全膛能性29文.胚胎牧移植情的生朝理學(xué)低基礎(chǔ)生理學(xué)基礎(chǔ)意義同種茅動物父的供薦體和碼受體料發(fā)情濫排卵祥后生列殖器考官的是相載同的生理您變化為供再體的渡胚胎教移入暑受體晴提供相同曬的。生理麻環(huán)境早期展胚胎面形成史后,垂在一需定時限間內(nèi)不會呢與母茄體子巧宮建匹立組糖織上斧的聯(lián)系,傅而是繞處于狀態(tài)紋。為胚語胎的保收集困提供譽了可繪能游離受體施對移牌入子貴宮的處外來騰胚胎基本笨上不勵發(fā)生。免疫蜘排斥識反應(yīng)供體貧胚胎萄可與挎受體殲子宮鵲建立錫正常的和聯(lián)系魔,但間其
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