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文檔簡(jiǎn)介
各種蛋白質(zhì)的含氮量很接近,平均為16%。由于體內(nèi)的含氮物質(zhì)以蛋白質(zhì)為主,因此,只要測(cè)定生物樣品中的含氮量,就可以根據(jù)以下公式推算出蛋白質(zhì)的大致含量:100克樣品中蛋白質(zhì)的含量(g%)=每克樣品含氮克數(shù)×6.25×1001/16%蛋白質(zhì)元素組成的特點(diǎn)(一)側(cè)鏈含烴鏈的氨基酸屬于非極性脂肪族氨基酸(二)側(cè)鏈有極性但不帶電荷的氨基酸是極性中性氨基酸(三)側(cè)鏈含芳香基團(tuán)的氨基酸是芳香族氨基酸(四)側(cè)鏈含負(fù)性解離基團(tuán)的氨基酸是酸性氨基酸(五)側(cè)鏈含正性解離基團(tuán)的氨基酸屬于堿性氨基酸三、20種氨基酸具有共同或特異的理化性質(zhì)兩性解離及等電點(diǎn)氨基酸是兩性電解質(zhì),其解離程度取決于所處溶液的酸堿度。等電點(diǎn)(isoelectricpoint,pI)
在某一pH的溶液中,氨基酸解離成陽(yáng)離子和陰離子的趨勢(shì)及程度相等,成為兼性離子,呈電中性。此時(shí)溶液的pH值稱(chēng)為該氨基酸的等電點(diǎn)。(一)氨基酸具有兩性解離的性質(zhì)(二)含共軛雙鍵的氨基酸具有紫外吸收性質(zhì)色氨酸、酪氨酸的最大吸收峰在280nm
附近。大多數(shù)蛋白質(zhì)含有這兩種氨基酸殘基,所以測(cè)定蛋白質(zhì)溶液280nm的光吸收值是分析溶液中蛋白質(zhì)含量的快速簡(jiǎn)便的方法。芳香族氨基酸的紫外吸收四、蛋白質(zhì)是由許多氨基酸殘基組成的多肽鏈肽鍵(peptidebond)是由一個(gè)氨基酸的-羧基與另一個(gè)氨基酸的-氨基脫水縮合而形成的化學(xué)鍵。(一)氨基酸通過(guò)肽鍵連接而形成肽(peptide)一級(jí)結(jié)構(gòu)是蛋白質(zhì)空間構(gòu)象和特異生物學(xué)功能的基礎(chǔ),但不是決定蛋白質(zhì)空間構(gòu)象的唯一因素。二、多肽鏈的局部主鏈構(gòu)象為蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)的二級(jí)結(jié)構(gòu)是指多肽鏈骨架中原子的局部空間排列,不涉及側(cè)鏈的構(gòu)象,也就是該肽段主鏈骨架原子的相對(duì)空間位置,主要有α-螺旋、β-折疊、β-轉(zhuǎn)角和無(wú)規(guī)則卷曲。維持二級(jí)結(jié)構(gòu)的力量為氫鍵。三、在二級(jí)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)上多肽鏈進(jìn)一步折疊形成蛋白質(zhì)三級(jí)結(jié)構(gòu)疏水鍵、離子鍵、氫鍵和VanderWaals力等。主要的化學(xué)鍵:整條肽鏈中全部氨基酸殘基的相對(duì)空間位置。即肽鏈中所有原子在三維空間的排布位置。定義:(一)三級(jí)結(jié)構(gòu)是指整條肽鏈中全部氨基酸殘基的相對(duì)空間位置(三)分子伴侶參與蛋白質(zhì)折疊分子伴侶(chaperon)通過(guò)提供一個(gè)保護(hù)環(huán)境從而加速蛋白質(zhì)折疊成天然構(gòu)象或形成四級(jí)結(jié)構(gòu)。分子伴侶可逆地與未折疊肽段的疏水部分結(jié)合隨后松開(kāi),如此重復(fù)進(jìn)行可防止錯(cuò)誤的聚集發(fā)生,使肽鏈正確折疊。分子伴侶也可與錯(cuò)誤聚集的肽段結(jié)合,使之解聚后,再誘導(dǎo)其正確折疊。分子伴侶在蛋白質(zhì)分子折疊過(guò)程中二硫鍵的正確形成起了重要的作用。亞基之間的結(jié)合主要是氫鍵和離子鍵。四、含有二條以上多肽鏈的蛋白質(zhì)具有四級(jí)結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)分子中各亞基的空間排布及亞基接觸部位的布局和相互作用,稱(chēng)為蛋白質(zhì)的四級(jí)結(jié)構(gòu)。有些蛋白質(zhì)分子含有二條或多條多肽鏈,每一條多肽鏈都有完整的三級(jí)結(jié)構(gòu),稱(chēng)為蛋白質(zhì)的亞基(subunit)。(一)一級(jí)結(jié)構(gòu)是空間構(gòu)象的基礎(chǔ)一、蛋白質(zhì)一級(jí)結(jié)構(gòu)是高級(jí)結(jié)構(gòu)與功能的基礎(chǔ)牛核糖核酸酶的一級(jí)結(jié)構(gòu)二硫鍵蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能的關(guān)系協(xié)同降效應(yīng)(co克op包er煩at包iv狡it衰y)一個(gè)團(tuán)寡聚夏體蛋態(tài)白質(zhì)辨的一榨個(gè)亞晨基與凈其配毅體結(jié)恭合后吳,能揉影響蝴此寡第聚體帶中另精一個(gè)周亞基令與配活體結(jié)卸合能殼力的田現(xiàn)象滾,稱(chēng)梁為協(xié)同誘效應(yīng)。如果弱是促桃進(jìn)作葬用則妻稱(chēng)為正協(xié)貌同效焦應(yīng)(po炕si霜ti辰ve夜c童oo巴pe今ra病ti宿vi諸ty)如果并是抑黨制作搖用則主稱(chēng)為負(fù)協(xié)愈同效歡應(yīng)(ne肚ga窮ti父ve性c萬(wàn)oo怕pe矛ra富ti星vi更ty)變構(gòu)燈效應(yīng)(a砌ll結(jié)os秋te揪ri涂c胃ef啞fe倡ct群)蛋白字質(zhì)空餅間結(jié)引構(gòu)的左改變多伴隨薯其功趕能的瘋變化蘭,稱(chēng)先為變構(gòu)累效應(yīng)。一、蛋白午質(zhì)具涉有兩圍性電甘離的壓性質(zhì)蛋白歪質(zhì)分辦子除淺兩端奴的氨破基和筐羧基姨可解宋離外鍛,氨幣基酸挽殘基塑側(cè)鏈桌中某鞠些基夾團(tuán),尺在一營(yíng)定的扶溶液pH條件范下都漁可解妖離成室?guī)ж?fù)賤電荷混或正塘電荷跪的基鳴團(tuán)。當(dāng)?shù)翱诎踪|(zhì)還溶液柄處于制某一pH時(shí),秒蛋白察質(zhì)解蓋離成自正、天負(fù)離伴子的返趨勢(shì)愈相等譯,即或成為竹兼性測(cè)離子納,凈庫(kù)電荷殖為零率,此倡時(shí)溶居液的pH稱(chēng)為蛋白槽質(zhì)的耍等電災(zāi)點(diǎn)。蛋白稀質(zhì)的利等電禍點(diǎn)(鳥(niǎo)is儀oe鍋le堂ct它ri霉c頑po憑in李t,延p宮I)蛋白稈質(zhì)的補(bǔ)理化痰性質(zhì)+++++++帶正電荷的蛋白質(zhì)--------帶負(fù)電荷的蛋白質(zhì)在等電點(diǎn)的蛋白質(zhì)水化楚膜++++++++帶正電荷的蛋白質(zhì)--------帶負(fù)拐電荷柔的蛋刷白質(zhì)不穩(wěn)定的蛋白質(zhì)顆粒酸堿酸堿酸堿脫水作用脫水作用脫水作用溶液刺中蛋激白質(zhì)沖的聚特沉三、怪蛋白亦質(zhì)空畜間結(jié)叼構(gòu)破宿壞而副引起掠變性在某捐些物望理和妙化學(xué)茶因素失作用乘下,笑其特雷定的攝空間哄構(gòu)象總被破貨壞,臘也即宮有序徒的空競(jìng)間結(jié)診構(gòu)變錯(cuò)成無(wú)若序的醬空間濃結(jié)構(gòu)膝,從門(mén)而導(dǎo)合致其脂理化猜性質(zhì)簡(jiǎn)改變慘和生獅物活差性的晉喪失拋。蛋白歌質(zhì)的束變性(d疤en論at汗ur龍at撫io唱n)變性夠的本凡質(zhì):破壞價(jià)非共奸價(jià)鍵介和二望硫鍵脖,不橋改變燙蛋白蓋質(zhì)的俯一級(jí)巾結(jié)構(gòu)臟。造成暗變性悟的因塞素:如加熱難、乙羨醇等惰有機(jī)府溶劑盲、強(qiáng)秩酸、業(yè)強(qiáng)堿逗、重咽金屬誘離子曬及生判物堿厭試劑薄等。應(yīng)用饒舉例:臨床沙醫(yī)學(xué)爭(zhēng)上,端變性添因素躬常被叨應(yīng)用先來(lái)消持毒及感滅菌擱。此外,防止呢蛋白閉質(zhì)變滾性也害是有瞞效保培存蛋限白質(zhì)退制劑恨(如蠅疫苗蘿等)旨的必候要條誕件。防止宣變性臂:低安溫保炮存生遇物制軟品取代段變性距:乳館品解尊毒(用于析急救州重金珍屬中悼毒)若蛋州白質(zhì)賽變性背程度留較輕艷,去靜除變隱性因剪素后勤,蛋尤白質(zhì)登仍可失恢復(fù)烈或部俱分恢火復(fù)其費(fèi)原有調(diào)的構(gòu)遷象和軟功能藍(lán),稱(chēng)驅(qū)為復(fù)性(r辦en籌at經(jīng)ur綿at孟io格n)。四、負(fù)蛋白任質(zhì)在紫鑼外光股譜區(qū)集有特受征性局吸收杜峰由于強(qiáng)蛋白斷質(zhì)分球子中別含有降共軛屢雙鍵孟的酪當(dāng)氨酸同和色獵氨酸冬,因由此在28繡0n鋼m波長(zhǎng)藥處有鏈特征室性吸猶收峰療。蛋壟白質(zhì)損的OD壤28石0與其刻濃度獄呈正富比關(guān)艘系,紙因此充可作百蛋白責(zé)質(zhì)定益量測(cè)拍定。核酸占的分秧類(lèi)及吸分布存在于細(xì)土胞核較和線粒削體分布棟于細(xì)掛胞核武、細(xì)君胞質(zhì)艷、線粒瓣體(d開(kāi)eo固xy礦ri奪bo估nu紐奉cl詳ei包c(diǎn)框ac開(kāi)id搏,筆DN合A)(r巡壽ib丈on驢uc旺le捉ic隸a夕ci輩d,俘R所NA吹)脫氧右核糖郵核酸核糖涼核酸攜帶遺傳信息,并通過(guò)復(fù)制傳遞給下一代。是DNA轉(zhuǎn)錄的產(chǎn)物,參與遺傳信息的復(fù)制與表達(dá)。某些病毒RNA也可作為遺傳信息的載體脫氧帽核苷嘌呤N-觀9或嘧啶N-架1與脫敏氧核厭糖C-氣1通過(guò)β-N旬-糖苷挽鍵相連資形成脫氧面核苷(de感ox乓yr虧ib紐奉on桂uc稱(chēng)le親os霧id泳e)。二、DN星A是脫釣氧核這苷酸腿通過(guò)3’同,5莫’-磷酸夸二酯鳴鍵連胡接形倒成的緒大分彼子一個(gè)紅脫氧尾核苷捷酸3的羥基與另績(jī)一個(gè)構(gòu)核苷斥酸5的α-磷酸基團(tuán)默縮合底形成磷酸歌二酯床鍵(ph紛os炮ph取od透ie夠st梳erbo勵(lì)nd版)。多個(gè)肅脫氧肥核苷均酸通坊過(guò)磷酸晌二酯劑鍵構(gòu)成肌了具戚有方向機(jī)性的線暢性分姜子,漆稱(chēng)為多聚岔脫氧聲核苷凡酸(po扭ly勿de哭ox放yn眠uc庫(kù)le歪ot侮id阻e),即DN璃A鏈。交替醒的磷酸基團(tuán)和戊村糖構(gòu)成損了DN岔A的骨品架(b遞ac停kb功on四e)。DN滴A鏈的句方向福是5→3三、RN欄A也是桑具有3’番,5職’-磷酸炮二酯謹(jǐn)鍵的她線性攪大分靠子RN泊A也是塔多個(gè)綢核苷稻酸分范子通惹過(guò)酯向化反者應(yīng)形轉(zhuǎn)成的威線性械大分慕子,育并且響具有異方向劫性;RN急A的戊兆糖是叮核糖態(tài);RN麥A的嘧役啶是胳胞嘧泉啶和視尿嘧變啶。DN息A和RN拘A的區(qū)尿別核糖G、C、A、URNA脫氧核糖G、C、A、TDNA堿基核糖核酸兩條援多聚胡核苷殘酸鏈舌在空悼間的聾走向哀呈反向肆平行(a黨nt妄i-樓pa朽ra虛ll順el駝)。兩條效鏈圍雜繞著它同一片個(gè)螺川旋軸冒形成右手秩螺旋(r緞ig櫻ht罰-h祝an鍋de寫(xiě)d)的結(jié)胸構(gòu)。建雙螺陡旋結(jié)康構(gòu)的惠直徑榆為2.付37養(yǎng)nm,螺程距為3.帝54昨nm。脫氧濾核糖種和磷表酸基受團(tuán)組催成的跪親水僑性骨紗架位蹄于雙勢(shì)螺旋瀉結(jié)構(gòu)修的外側(cè),疏蓋水的局堿基盲位于內(nèi)側(cè)。雙螺劈燕旋結(jié)絮構(gòu)的順表面拉形成就了一揚(yáng)個(gè)大溝(m永aj匠or命g羽ro難ov芒e)和一明個(gè)小溝(m脆in皮or臘g魄ro蒸ov犁e)。(二堆)DN珠A雙螺知旋結(jié)邁構(gòu)模舉型要修點(diǎn)1.DN攤A是反割向平酷行、連右手忍螺旋燥的雙益鏈結(jié)炮構(gòu)親水臭性的晉骨架蹤蝶位于胖雙鏈狂的外觀側(cè)。疏水伯性的媽堿基暫位于嘩雙鏈旨的內(nèi)講側(cè)。骨架扎與堿掉基相鄰居兩個(gè)殖堿基虹對(duì)會(huì)松有重號(hào)疊,機(jī)產(chǎn)生凡了疏益水性紹的堿駁基堆酒積力(b桑as歐e艙st名ac刃ki仙ng暗i碰nt雹er同ac補(bǔ)ti好on炒)。堿基濕堆積界力和稼互補(bǔ)快堿基臥對(duì)的廟氫鍵命共同咽維系蒜著DN慘A結(jié)構(gòu)刷的穩(wěn)臨定。3.疏水臟作用鳳力和劍氫鍵哥共同搶維系站著DN壩A雙螺廈旋結(jié)浙構(gòu)的穗穩(wěn)定詞。二、DN肚A的高司級(jí)結(jié)董構(gòu)是擇超螺援旋結(jié)第構(gòu)超螺迎旋結(jié)頌構(gòu)(su賊pe戀rh雄el截ix或su魔pe前rc蔬oi旬l)DN疤A雙螺蕩旋鏈割再盤(pán)貢繞即赴形成鉗超螺必旋結(jié)慨構(gòu)。正超拜螺旋(p辟os雞it器iv當(dāng)esu創(chuàng)pe錯(cuò)rc勢(shì)oi斥l)盤(pán)繞司方向添與DN爪A雙螺暑旋方特同相歇同。負(fù)超困螺旋(n蹲eg展at殼iv算esu歉pe括rc令oi姨l)盤(pán)繞浩方向句與DN掠A雙螺秘旋方裕向相巧反。DN題A的基繳本功辭能是短以基予因的競(jìng)形式漲荷載緒遺傳韻信息紋,并究作為板基因胃復(fù)制站和轉(zhuǎn)茄錄的離模板捏。它菌是生酒命遺問(wèn)傳的鼻物質(zhì)胳基礎(chǔ)節(jié),也舌是個(gè)我體生鎖命活未動(dòng)的防信息園基礎(chǔ)隆?;蚨艔慕Y(jié)御構(gòu)上噸定義烤,是之指DN沿A分子落中的脈特定盲區(qū)段雖,其徹中的為核苷勺酸排斤列順挪序決躬定了愿基因敗的功協(xié)能。三、DN會(huì)A是遺目傳信核息的裝物質(zhì)驕基礎(chǔ)RN限A與蛋航白質(zhì)散共同粱負(fù)責(zé)凱基因身的表盈達(dá)和通表達(dá)肅過(guò)程剪的調(diào)陡控。RN嫌A通常勁以單溪鏈的坊形式頁(yè)存在寨,但衛(wèi)有復(fù)即雜的寒局部礙二級(jí)死結(jié)構(gòu)接或三劃級(jí)結(jié)享構(gòu)。RN愛(ài)A比DN記A小的顆多。RN少A的種蒼類(lèi)、腐大小追和結(jié)腥構(gòu)遠(yuǎn)輔比DN貓A表現(xiàn)績(jī)出多鏟樣性蓋。RN抖A的結(jié)罰構(gòu)與鎮(zhèn)功能RN續(xù)A的種究類(lèi)、飽分布商、功辨能信使RN溪A(乖me鹽ss攪en銷(xiāo)ge謠rRN紫A,蔑m爹RN踏A)是合鴿成蛋謀白質(zhì)緊的模兔板。不均援一核RN乓A(足hn叫RN舍A)含有前內(nèi)含滴子(i鍵nt竊ro算n)和外脫顯子(e推xo淡n)。外顯壓子是侵氨基紫酸的暗編碼所序列懇,而撞內(nèi)含臟子是金非編燙碼序殿列。hn遼RN運(yùn)A經(jīng)過(guò)設(shè)剪切勿后成澤為成熟勞的mR哥NA。一、mR予NA是蛋景白質(zhì)氧合成飛中的菊模板從AU影G開(kāi)始番,每員三個(gè)武核苷昆酸為婆一組付編碼擋了一注個(gè)氨耳基酸什,稱(chēng)汗為三珍聯(lián)體烘密碼(c頂od足on皆)。成熟罵的mR鎖NA由氨漫基酸潛編碼鄙區(qū)和作非編繭碼區(qū)偵構(gòu)成挨。5-末端瓜的帽訂子(c沃ap立)結(jié)構(gòu)撈和3-末端垃的多跡聚A尾(p胡ol沉y-蓄A(yù)籌ta知il皂)結(jié)構(gòu)調(diào)。成熟敲的真賢核生叔物mR姨N(yùn)A帽子鏟結(jié)構(gòu):m7觸Gp橋pp都Nm(一脅)大專(zhuān)部分龍真核醒細(xì)胞mR能NA的5'末端你都以7-甲基證鳥(niǎo)嘌犬呤-三磷俯酸核怎苷為墾起始恭結(jié)構(gòu)mR戰(zhàn)NA的帽幣結(jié)構(gòu)綁可以序與帽結(jié)揮合蛋誕白(c輪ap撞b角in帥di論ng遺p解ro牲te慎in,CB駝P)結(jié)合博。真核漏生物盲的mR識(shí)NA的3借-末端早轉(zhuǎn)錄衫后加撒上一昨段長(zhǎng)共短不喪一的襖聚腺腥苷酸濤。(二約)在鵲真核賄生物mR涂NA的3'末端匠有多掠聚腺沙苷酸蹤蝶結(jié)構(gòu)mR熱NA核內(nèi)士向胞俊質(zhì)的熄轉(zhuǎn)位mR層NA的穩(wěn)圈定性需維系翻譯敬起始殃的調(diào)歸控帽子臣結(jié)構(gòu)蓮和多聚A尾的傍功能(三糖)mR廚NA依照長(zhǎng)自身消的堿挪基順融序指薪導(dǎo)蛋擋白質(zhì)啟氨基脊酸順酷序的戶(hù)合成從mR懷NA分子5'末端其起的丸第一蜂個(gè)AU悉G開(kāi)始模,每3個(gè)核墨苷酸孫為一船組稱(chēng)桐為密碼全子(c薪od股on斥)或三聯(lián)劣體密雁碼(t僵ri薄pl堂et厚c屑o(jì)d跡e)。AU資G被稱(chēng)損為起烏始密通碼子鄙;決嚴(yán)定肽睬鏈終謊止的乓密碼辱子則亮稱(chēng)為風(fēng)終止儉密碼壁子。位于煉起始嫂密碼爹子和債終止明密碼救子之酬間的嫩核苷替酸序鹿列稱(chēng)俗為開(kāi)放尊閱讀冠框(o孩pe佩n宜re炕ad北in餡g覆fr燥am駝e,掉O媽RF避),決會(huì)定了敢多肽邁鏈的益氨基在酸序雀列餅。轉(zhuǎn)運(yùn)RN晝A(電tr犯an僚sf誼erRN肺A,瘡t鍋RN榆A)在蛋跌白質(zhì)旗合成醬過(guò)程燥中作姜為各德種氨復(fù)基酸移的載躬體,將氨兩基酸該轉(zhuǎn)呈間給mR籍NA。由74~95核苷配酸組飄成;占細(xì)蒼胞總RN割A(yù)的15鴉%;具有聾很好教的穩(wěn)吊定性埋。二、tR濕NA是蛋鳳白質(zhì)植合成辭中的肚氨基脈酸載倡體tR鴿NA具有塔局部令的莖京環(huán)(s煙te刮m-賴(lài)lo溫op套)結(jié)構(gòu)斑或發(fā)篇卡(h勵(lì)ai眼rp瞧in船)結(jié)構(gòu)百。(二豬)tR稈NA具有萬(wàn)莖環(huán)兼結(jié)構(gòu)tR響NA的二萌級(jí)結(jié)就構(gòu)——三葉趴草形氨基組酸臂DH表U環(huán)反密取碼環(huán)TψC環(huán)附加漿叉tR材NA的3-末端都罵是以CC滑A結(jié)尾觀。3-末端的A與氨指基酸事共價(jià)魚(yú)連結(jié)潛,tR臉NA成為搬了氨帝基酸勵(lì)的載戒體。不同化的tR左NA可以勾結(jié)合師不同籃的氨恩基酸進(jìn)。(三箏)tR舟NA的3-末端連啦接氨基職酸t(yī)R筍NA的反演密碼差子環(huán)糖上有渡一個(gè)兆由三狐個(gè)核雪苷酸餅構(gòu)成絲式的反密編碼子(an碎ti馳co親do印n)。tR端NA上的設(shè)反密宴碼子掏依照銀堿基陷互補(bǔ)尾的原票則識(shí)偉別mR輩NA上的左密碼艦子。(四私)tR樹(shù)NA的反喇密碼燒子識(shí)綿別mR注NA的密處碼子核蛋沉白體RN寬A(奏ri勒bo脫so竄ma酒lRN頭A,rR嬌NA)是細(xì)姑胞內(nèi)漠含量脾最多萬(wàn)的RN慣A(供>8請(qǐng)0%)。rR捉NA與核贊蛋白浪體蛋忽白結(jié)析合組妖成核蛋椅白體(r酒ib沾os岸om列e),為收蛋白級(jí)質(zhì)的觸合成扎提供倡場(chǎng)所慣。三、嗚以rR珍N(xiāo)A為組遙分的列核蛋統(tǒng)白體密是蛋祥白質(zhì)款合成詢(xún)的場(chǎng)那所核酶某些侄小RN慰A分子貍具有恥催化繩特定RN推A降解猾的活兩性,倉(cāng)這種婆具有強(qiáng)催化幼作用鍋的小RN鴿A亦被卵稱(chēng)為核酶(ri察bo績(jī)zy烏me)或催捐化性RN棉A(塞ca赴ta形ly盞ti鴿cRN園A)。原核贈(zèng)生物團(tuán)基因津表達(dá)錢(qián)的特綠異性五、糾核酸沃在真砍核細(xì)傭胞和得原核前細(xì)胞茫中表昌現(xiàn)了滾不同舒的時(shí)鞭空特唐性真核澤生物聲基因器表達(dá)犁的特屈異性核酸炕在波仗長(zhǎng)26訓(xùn)0n斯m處有膚強(qiáng)烈重的吸挑收,架是由堿基厚的共違軛雙余鍵所決認(rèn)定的權(quán)。這彼一特較性常妻用作丟核酸始的定告性和掠定量習(xí)分析較。一、釘核酸康分子肥具有姓強(qiáng)烈水的紫撕外吸帽收二、DN診A變性狂是雙坑鏈解勝離為象單鏈竹的過(guò)驅(qū)程在某消些理補(bǔ)化因拍素作賺用下堂,DN國(guó)A雙鏈刺解開(kāi)遮成兩料條單泰鏈的過(guò)源程。定義DN紐奉A(yù)變性寶的本乒質(zhì)是香雙鏈脂間氫碗鍵的盈斷裂撓。增色紐奉效應(yīng)(hy就pe滿(mǎn)rc踐hr本om理icef吃fe亞ct袖):DN社A變性渾時(shí)其螞溶液OD26菠0增高的現(xiàn)約象。DN思A解鏈規(guī)時(shí)的紫外吸管收變授化DN岸A的解鏈曲線連續(xù)酒加熱DN罰A的過(guò)月程中療以溫惹度相愉對(duì)于A2州60值作跳圖,老所得膨的曲份線稱(chēng)尋為解鏈響曲線。解鏈箭過(guò)程傍中,扔紫外勵(lì)吸光術(shù)度的絲式變化橋達(dá)到預(yù)最大醫(yī)變化仁值的仍一半之時(shí)所不對(duì)應(yīng)小的溫梳度。解鏈煎溫度(m挖el微ti盆ng室t本em姓pe輛ra階tu困re,Tm虛)三、繁變性知的核礦酸可畝以復(fù)攻性或允形成注雜交攻雙鏈當(dāng)變雹性條抹件緩請(qǐng)慢地戶(hù)除去氧后,途兩條程解離您的互怠補(bǔ)鏈永可重出新配顛對(duì),藝恢復(fù)縣原來(lái)劉的雙劈燕螺旋堡結(jié)構(gòu)左,這兇一現(xiàn)洽象稱(chēng)筋為DN芒A復(fù)性(re劇na金tu素ra耳ti屢on)。減色懇效應(yīng)剩:DN載A復(fù)性保時(shí),益其溶露液OD江26圈0降低創(chuàng)。熱變介性的DN躁A經(jīng)緩刪慢冷幣卻后他即可騎復(fù)性寬,這慌一過(guò)短程稱(chēng)講為退火(a矮nn蟻ea某li釘ng錢(qián))。不同可種類(lèi)班的DN佛A單鏈粘分子牌或RN約A分子遮放在豬同一哪溶液塊中,告只要他兩種祝單鏈賤分子此之間舞存在靜著一慣定程惹度的炕堿基典配對(duì)延關(guān)系憤,在那適宜窩的條吃件可薄以在混不同蒼的分格子間恢形成雜化晚雙鏈(he欲te特ro排du宇pl鑒ex)。這種亡雜化已雙鏈芬可以性在不燃同的DN谷A與DN騎A之間期形成賄,也射可以意在DN斃A和RN仿A分子唱間或衰者RN棗A與RN穴A分子求間形患成。絕這種甲現(xiàn)象密稱(chēng)為給核酸怨分子筆雜交誤。核酸著分子肚雜交(h低yb姿ri鐮di縮慧za冤ti稈on嘉)依據(jù)墳底物膠不同羽分類(lèi)DN于A酶(de攪ox回yr冶ib以on戀u(mài)c泡le硬as巾e,DN傅as患e):專(zhuān)一寒降解DN閥A。RN聾A酶(ri凳bo針nu藏cl歲ea解se,RN的as遣e):專(zhuān)一發(fā)降解RN繪A。依據(jù)糾切割課部位收不同核酸度內(nèi)切辟酶:蜂分為偏限制寒性核鬼酸內(nèi)貪切酶壓和非命特異老性限誓制性拌核酸倆內(nèi)切喉酶。核酸死外切豬酶:5′灑→3贊′或3′展→5旗′核酸淺外切訓(xùn)酶。核酸注酶是指撞所有魯可以谷水解列核酸巴的酶淘。核酸平酶酶的罷概念目前兩將生們物催鑰化劑蕩分為落兩類(lèi):酶距、春核酶劍(脫攻氧核毫酶)酶是轎一類(lèi)須對(duì)其鍬特異狼底物素具有耽高效葛催化目作用苦的蛋手白質(zhì)腳。酶的浩不同煉形式:單體據(jù)酶(mo拿no乖me辱ri貧cen蜻zy礦me柏):僅具新有三慨級(jí)結(jié)腦構(gòu)的葬酶。寡聚牲酶(ol統(tǒng)ig違om薯er討icen銀zy櫻me櫻):由多供個(gè)相冊(cè)同或擠不同挽亞基孔以非培共價(jià)登鍵連此接組喝成的場(chǎng)酶。多酶項(xiàng)體系(mu剛lt原ie背nz腦ym總esy木st滴em團(tuán)):由幾吹種不忘同功涼能的聲酶彼唐此聚側(cè)合形冠成的悄多酶丈復(fù)合誼物。多功傾能酶(m腸ul深ti覆fu罵nc冶ti師o(wú)n乒al咬e歷nz渡ym畏e)或串品聯(lián)酶(t愁an慨de架m氣en坑zy繼me與):一些治多酶盯體系宵在進(jìn)滴化過(guò)抬程中策由于身基因撫的融笛合,叉多種滿(mǎn)不同歪催化齡功能者存在殊于一歲條多厘肽鏈塑中,毫這類(lèi)控酶稱(chēng)教為多顫功能特酶。酶的喂分子疊結(jié)構(gòu)行與功塞能一、簽酶的彩分子躲組成驗(yàn)中常哲含有秤輔助復(fù)因子蛋白評(píng)質(zhì)部帽分:渡酶蛋掉白(ap柱oe悄nz從ym恥e)輔助銅因子(c的of員ac今to息r)金屬炎離子小分純子有旅機(jī)化揀合物全酶(ho規(guī)lo恰en遣zy概me)單純擺酶(s謙im托pl趙e栗en羅zy籮me非)結(jié)合泉酶(c哲on心ju信ga立te臨d分en錦zy雄me番)全酶責(zé)分子賊中各溪部分鞏在催爐化反態(tài)應(yīng)中斃的作睡用:酶蛋割白決定庫(kù)反應(yīng)解的特吳異性輔助簡(jiǎn)因子決定洪反應(yīng)尺的種云類(lèi)與熊性質(zhì)金屬離子凝的作浪用:參與均催化霸反應(yīng)腳,傳丘遞電徹子;在酶顆與底孩物間鄭起橋競(jìng)梁作卡用;穩(wěn)定剃酶的森構(gòu)象陶;中和孫陰離毒子,換降低蠟反應(yīng)肺中的沾靜電睡斥力敬等。小分尖子有美機(jī)化座合物否是一府些化井學(xué)穩(wěn)飯定的營(yíng)小分踏子物攤質(zhì),斯稱(chēng)為羽輔酶(c予oe臟nz農(nóng)ym菊e)。其主徹要作該用是初參與飽酶的女催化傍過(guò)程瓦,在無(wú)反應(yīng)色中傳墊遞電地子、皺質(zhì)子撥或一袖些基只團(tuán)。輔酶章的種秧類(lèi)不撫多,貼且分驗(yàn)子結(jié)償構(gòu)中架常含掩有維波生素字或維桶生素剃類(lèi)物俯質(zhì)。輔酶乒中與衫酶蛋糾白共毫價(jià)結(jié)距合的釀?shì)o酶校又稱(chēng)披為輔洗基(p儉ro魔st鑼he挎ti嘉c頌gr染ou箱p)。輔基艦和酶稠蛋白互結(jié)合榨緊密絲式,不騙能通岔過(guò)透乞析或踩超濾輩等方捎法將床其除望去,移在反掙應(yīng)中章不能群離開(kāi)錢(qián)酶蛋線白,叢如FA育D、FM祥N、生烘物素遙等。二、徑酶的努活性拐中心柳是酶政分子央中執(zhí)蜻行其戒催化僵功能寒的部噴位酶分柴子中額氨基唇酸殘愚基側(cè)軟鏈的睜化學(xué)猴基團(tuán)族中,一些怖與酶盒活性代密切箏相關(guān)糧的化癢學(xué)基誕團(tuán)。必需增基團(tuán)(e章ss弊en丙ti售al然g統(tǒng)ro含up套)指必需敏基團(tuán)般在空瓦間結(jié)疏構(gòu)上漁彼此吼靠近穩(wěn),組捆成具凱有特材定空偵間結(jié)筑構(gòu)的丸區(qū)域風(fēng),能病與底肥物特厲異結(jié)魔合并慣將底蓮物轉(zhuǎn)痛化為精產(chǎn)物帖。酶的暢活性弦中心(a此ct丸iv真e額ce男nt居er逆)底去物活性墨中心蟻以外慘的必客需基披團(tuán)結(jié)合逝基團(tuán)催化您基團(tuán)活性方中心三、港同工渠酶同工拍酶(is紀(jì)oe稠nz桑ym糊e)是指劍催化污相同我的化環(huán)學(xué)反話應(yīng),翅而酶欄蛋白逢的分她子結(jié)虧構(gòu)理槽化性拖質(zhì)乃紙至免穗疫學(xué)憂(yōu)性質(zhì)毯不同毀的一銜組酶連。根據(jù)揮國(guó)際閉生化向?qū)W會(huì)唉的建呢議,殿同工浸酶是新由不雅同基巡壽因編疼碼的夠多肽付鏈,泳或由起同一倆基因蘆轉(zhuǎn)錄旗生成贊的不邪同mR副NA所翻索譯的哨不同話多肽鐵鏈組伏成的埋蛋白饑質(zhì)。同工窗酶存健在于刑同一幸種屬野或同搖一個(gè)未體的敵不同島組織謎或同單一細(xì)蜓胞的良不同炸亞細(xì)燥胞結(jié)挑構(gòu)中州,它坦使不護(hù)同的名組織御、器速官和若不同辣的亞權(quán)細(xì)胞彈結(jié)構(gòu)秒具有羅不同動(dòng)的代沈謝特候征。擦這為愧同工隱酶用噴來(lái)診看斷不道同器酬官的呆疾病變提供杏了理黎論依侵據(jù)。在反囑應(yīng)前劃后沒(méi)木有質(zhì)雅和量例的變價(jià)化;只能錘催化暑熱力朋學(xué)允恨許的醬化學(xué)鍛反應(yīng)農(nóng);只能書(shū)加速船可逆損反應(yīng)很的進(jìn)辨程,哀而不投改變鮮反應(yīng)釀的平碌衡點(diǎn)瞎。酶與距一般沖催化毫劑的容共同膝點(diǎn):酶的來(lái)作用疫機(jī)制(一浪)酶促俘反應(yīng)良具有獸極高船的效嗚率一、偽酶促床反應(yīng)胸的特戰(zhàn)點(diǎn)酶的最催化病效率宮通常緞比非效催化教反應(yīng)明高108~1020倍,閣比一風(fēng)般催扣化劑蜘高107~1013倍。酶的門(mén)催化氣不需溝要較蓄高的佩反應(yīng)倘溫度菊。酶和鋒一般仔催化怠劑加滋速反廚應(yīng)的痰機(jī)理婆都是透降低差反應(yīng)庸的活化遮能(a思ct蘇iv陣at陳io恒n普en喊er晉gy慈)。酶客比一漆般催首化劑粱更有暢效地拍降低觸反應(yīng)梯的活虎化能主。酶的幸催化著效率浩可用延酶的轉(zhuǎn)換扎數(shù)(t逮ur測(cè)no賊ve立r好nu喬mb飄er埋)來(lái)表悼示。隆酶的扔轉(zhuǎn)換淘數(shù)是扁指在傷酶被鴿底物堆飽和砍的條渾件下偶,每栗個(gè)酶胡分子大每秒毫鐘將教底物谷轉(zhuǎn)化攔為產(chǎn)肝物的欣分子槐數(shù)。二、左酶通剪過(guò)促雪進(jìn)底題物形落成過(guò)問(wèn)渡態(tài)繩而提兇高反練應(yīng)速排率(一快)酶比樓一般趕催化作劑更拌有效價(jià)地降監(jiān)低反袍應(yīng)活遙化能酶和串一般謎催化杰劑一揀樣,多加速侵反應(yīng)裹的作忌用都貝是通課過(guò)降宿低反夏應(yīng)的活化尖能(a叔ct符iv砍at路io襯n符en殺er芬gy間)實(shí)現(xiàn)趟的?;罨埽旱孜锵敕肿诱l(shuí)從初省態(tài)轉(zhuǎn)斗變到澇活化歡態(tài)所宏需的菜能量。19孝13年Mi米ch滴ae蛇li助s和Me冶nt基en提出粉反應(yīng)明速率奮與底撞物濃曉度關(guān)喘系的旁數(shù)學(xué)盛方程拋式,憑即米悄-曼亞氏方役程式商,簡(jiǎn)頑稱(chēng)米氏惰方程四式(Mi形ch館ae甚li鋸seq頂ua換ti裕on輝)。[S鮮]:底物師濃度V:不同[S筑]時(shí)的攔反應(yīng)鵲速率Vma蘆x:最大沖反應(yīng)內(nèi)速率(m彼ax吵im芽um制v論el趴oc民it獨(dú)y)Km:米氏逼常數(shù)(Mi黃ch鋤ae傅li嘆sco充ns柿ta朱nt鉆)VVmax[S]
Km+[S]=──E與S形成ES復(fù)合厲物的崖反應(yīng)惑是快換速平印衡反表應(yīng),傍而ES分解厲為E及P的反茫應(yīng)為腸慢反所應(yīng),鉗反應(yīng)話速率評(píng)取決誼于慢西反應(yīng)濕即V抗=k3[E曠S]。(1勻)S的總核濃度您遠(yuǎn)遠(yuǎn)妖大于E的總謹(jǐn)濃度擋,因礎(chǔ)此在憤反應(yīng)籍的初偽始階聽(tīng)段,S的濃咬度可與認(rèn)為核不變宣即[S經(jīng)]懷=[構(gòu)St]。米-舌曼氏似方程爹式推行導(dǎo)基掠于兩艇個(gè)假仍設(shè):米-認(rèn)曼氏扛方程夫式推袍導(dǎo)過(guò)販程:ES的生翁成速博率=訊ES的分脾解速拍率k2+k3=Km
(米氏常數(shù))
k1令:則(2數(shù))變?yōu)?([踏Et]-[E蓮S]炮)諷[S伐]=Km[E失S](2)=([Et]-[ES])[S]k2+k3[ES]k1整理蛾得:k1摔([小Et枯]-[E汁S]攔)約[S扎]慢=k2錢(qián)[E彎S]胃+k3牢[E挽S]當(dāng)反影應(yīng)處去于穩(wěn)俘態(tài)時(shí)燙:當(dāng)?shù)讉阄餄饽投群艽雀撸i將酶衣的活村性中幻玉心全筋部飽鋤和時(shí)抓,即[Et]=[E壤S],反應(yīng)升達(dá)最踏大速膠率Vma缸x=k3[E間S]=k3[Et](5貨)[ES]=
───[Et][S]Km+[S](3)
整理得:將(5艘)代入(4禍)得米訊氏方灰程式秩:Vmax[S]Km+[S]V=
────將(3)代入(1)得k3[Et][S]Km+[S](4)V=
────(二成)Km與Vm是有尸意義倒的酶納促反填應(yīng)動(dòng)蔑力學(xué)愈參數(shù)Km值的暈推導(dǎo)Km與Vm鍛ax的意幅義當(dāng)反委應(yīng)速狀率為室最大澡反應(yīng)角速率鬼一半案時(shí):Km值的粉推導(dǎo)Km=[S痕]Km值等禽于酶赤促反沒(méi)應(yīng)速男率為口最大宣反應(yīng)珠速率室一半旗時(shí)的馬底物任濃度新,單偷位是mo皺l/勁L。2=Km+[S]VmaxVmax[S]VmaxV[S]KmVmax/2Km與Vm叼ax的意蛇義定義茶:Km等于鼓酶促假反應(yīng)反速率味為最宏大反疑應(yīng)速飄率一見(jiàn)半時(shí)懲的底伸物濃疊度。意義寬:Km是酶頑的特絮征性趁常數(shù)獄之一播,只拒與酶遭的結(jié)就構(gòu)、怖底物代和反寺應(yīng)環(huán)依境(黨如,喪溫度底、pH、離渾子強(qiáng)訓(xùn)度)班有關(guān)泰,與增酶的及濃度脆無(wú)關(guān)指。Km可近班似表欠示酶膏對(duì)底頓物的摘親和孔力;同一鋼酶對(duì)爐于不棍同底荒物有把不同斥的Km值。Km值Vm萍ax意義儉:Vm雪ax=k慢3藍(lán)[E社]定義拐:Vm是酶晶完全睜被底綿物飽鏡和時(shí)垃的反拒應(yīng)速趙率,憂(yōu)與酶嶄濃度項(xiàng)成正魂比。如果暮酶的蹄總濃閥度已出知,掏可從Vm逐ax計(jì)算磨酶的停轉(zhuǎn)換載數(shù)(t閥ur路no佩ve盜r蹄nu碌mb鏡er梯),即截動(dòng)力歉學(xué)常釘數(shù)k3。1.雙倒介數(shù)作卻圖法(d圓ou勸bl衡e好re繭ci被pr焦oc垃al紅p轉(zhuǎn)lo點(diǎn)t),又撓稱(chēng)為當(dāng)林-貝氏(Li次ne獅we危av趨er-滴Bu扭rk鍬)作圖聾法Vmax[S]Km+[S]V=(林-貝氏方程)+1/V=KmVmax1/Vmax1/[S]兩邊同取倒數(shù)(三麗)Km值與勁Vma江x值可捧以通呆過(guò)作贈(zèng)圖法侵求取-1/Km1/Vmax1/[S]1/V五、活抑制垂劑可趨逆地太或不帖可逆崖地降以低酶攏促反餓應(yīng)速路率酶的該抑制鳳劑(i潛nh關(guān)ib悄it碰or廊)酶的戒抑制同區(qū)別晶于酶飼的變躍性:抑制孩劑對(duì)掀酶有基一定眠選擇第性引起績(jī)變性沙的因嘆素對(duì)稅酶沒(méi)新有選辛擇性凡能無(wú)使酶尋的催拜化活憶性下瓜降而鳳不引窮起酶塵蛋白拌變性乖的物勢(shì)質(zhì)稱(chēng)攏為酶若的抑僚制劑盾。競(jìng)爭(zhēng)辮性抑稿制作貧用的多抑制俊劑與柔底物初競(jìng)爭(zhēng)答結(jié)合突酶的鐮活性妹中心有些息抑制舒劑與役底物我的結(jié)棵構(gòu)相活似,千能與版底物呢競(jìng)爭(zhēng)繼酶的嚷活性這中心柴,從渠而阻縣礙酶南-底浸物復(fù)前合物警的形荷成。這種境抑制喂作用倍稱(chēng)為純競(jìng)爭(zhēng)趴性抑騾制作五用。定義特點(diǎn)抑制答程度額取決腐于抑序制劑柳與酶底的相帥對(duì)親逮和力驕及底瞎物濃木度;I與S結(jié)構(gòu)院類(lèi)似蹲,競(jìng)?cè)?zhēng)酶族的活仍性中棒心;動(dòng)力價(jià)學(xué)特現(xiàn)點(diǎn):Vma然x不變獅,表設(shè)觀Km增大綿。抑制劑↑無(wú)抑制劑1/V1/[S]有些吊抑制射劑與舞酶活掩性中遵心外告的必暖需基四團(tuán)相厚結(jié)合邪,不霉影響悉酶與總底物料的結(jié)市合,忍酶和漲底物君的結(jié)喂合也柄不影帥響酶撫與抑慌制劑藝的結(jié)騾合。旬底物岸和抑豎制劑祖之間添無(wú)競(jìng)艇爭(zhēng)關(guān)膀系。顆但酶-底物-抑制賽劑復(fù)跨合物(E頓SI許)不能位進(jìn)一討步釋鋒放出葉產(chǎn)物描。這洞種抑盆制作辟用稱(chēng)蔥作非哲競(jìng)爭(zhēng)插性抑吹制作縮慧用。非競(jìng)住爭(zhēng)性仁抑制傭作用奇的抑頸制劑乏不改堂變酶鼻對(duì)底揉物的蕉親和摩力定義特點(diǎn)抑制嚼劑與葛酶活殼性中救心外哈的必揀需基偏團(tuán)結(jié)享合,坡底物賓與抑合制劑啞之間絞無(wú)競(jìng)貞爭(zhēng)關(guān)戰(zhàn)系;抑制懷程度付取決驗(yàn)于抑回制劑瞞的濃侵度;動(dòng)力洗學(xué)特芝點(diǎn):Vma租x降低悠,表群觀Km不變李。抑制劑↑1/V1/[S]無(wú)抑制劑抑制哪劑僅酷與酶軍和底竿物形爹成的血中間扯產(chǎn)物(E悠S)結(jié)合雕,使昆中間街產(chǎn)物ES的量離下降益。這螞樣,俱既減重少?gòu)拿酥虚g賞產(chǎn)物混轉(zhuǎn)化影為產(chǎn)喜物的往量,益也同帝時(shí)減沙少?gòu)难曛虚g掃產(chǎn)物粥解離烘出游銳離酶飾和底率物的廳量。庫(kù)這種賞抑制雁作用蹈稱(chēng)為具反競(jìng)泥爭(zhēng)性翠抑制樓作用伙。定義反競(jìng)扛爭(zhēng)性?shī)W抑制嘗作用炊的抑能制劑尋僅與路酶-底物樓復(fù)合帥物結(jié)贏合特點(diǎn)珍:抑制氣劑只揮與酶遲-底弦物復(fù)蠢合物錘結(jié)合游;抑制焰程度夢(mèng)取決捕與抑撿制劑鎖的濃概度及處底物撞的濃瘡度;動(dòng)力小學(xué)特胡點(diǎn):Vma企x降低辦,表脂觀Km降低只。抑制劑↑1/V1/[S]無(wú)抑制劑?各種夾可逆范性抑批制作堵用的質(zhì)比較變構(gòu)從效應(yīng)井劑(al息lo閃st懂er作icef冰fe但ct哪or)變構(gòu)激活劑變構(gòu)抑制劑變構(gòu)頂調(diào)節(jié)(al棒lo技st把er狼icre越gu坐la逢ti雄on則)變構(gòu)出酶(al裹lo中st橡er繩icen教zy劉me佛)變構(gòu)紫部位(al御lo控st裂er倒icsi亂te解)一些袋代謝鋒物可務(wù)與某鐘些酶古分子活性給中心津外的某攀部分且可逆屬地結(jié)莖合,扯使酶構(gòu)樹(shù)象改栽變,從廈而改劑變酶浪的催南化活吧性,有此種旨調(diào)節(jié)意方式吊稱(chēng)變構(gòu)晌調(diào)節(jié)。(一予)變趴構(gòu)酶耐通過(guò)度變構(gòu)反調(diào)節(jié)奴酶的泰活性一、第調(diào)節(jié)嘉酶實(shí)擊現(xiàn)對(duì)毫酶促舟反應(yīng)珍速率穩(wěn)的快耐速調(diào)亮節(jié)變構(gòu)貞酶常且為多愈個(gè)亞狐基構(gòu)巷成的串寡聚蛋體,除具有故協(xié)同紛效應(yīng)撒。變構(gòu)激活變構(gòu)抑制變構(gòu)酶的S形曲線[S]V無(wú)變構(gòu)效應(yīng)劑酶的雀變構(gòu)剝調(diào)節(jié)初是體絮內(nèi)代損謝途亞徑的蟻重要儉快速鐮調(diào)節(jié)輕方式今之一爐。(二鉆)酶系的化湖學(xué)修她飾調(diào)毯節(jié)是極通過(guò)鐘某些遺化學(xué)展基團(tuán)威與酶飽的共類(lèi)價(jià)結(jié)棄合與緣瑞分離地實(shí)現(xiàn)妥的在其妹他酶濫的催卵化作哲用下斑,某剃些酶桑蛋白儉肽鏈奮上的猴一些徹基團(tuán)趟可與袍某種防化學(xué)小基團(tuán)遞發(fā)生酸可逆先的共寸價(jià)結(jié)轟合,轉(zhuǎn)從而丹改變咬酶的嗽活性愉,此猜過(guò)程脅稱(chēng)為惹共價(jià)危修飾抖。共價(jià)膨修飾(c泰ov呈al勾en賤t漂mo吊di徒fi例ca亦ti好on槳)有些霧酶在猛細(xì)胞眠內(nèi)合雀成或舞初分播泌時(shí)謹(jǐn)只是杠酶的機(jī)無(wú)活匠性前立體,肚此前悲體物催質(zhì)稱(chēng)車(chē)為酶裳原。在一律定條獵件下魄,酶喂原向令有活哭性酶梢轉(zhuǎn)化旁的過(guò)辱程。(三斧)酶噸原的殘激活撐使無(wú)庭活性計(jì)的酶鬧原轉(zhuǎn)守變成庸有催膀化活斗性的嘗酶酶原(z仗ym玩og靜en撤)酶原鄭的激烘活酶原朗激活東的機(jī)造理酶原分子構(gòu)象發(fā)生改變形成或暴露出酶的活性中心一個(gè)或幾個(gè)特定的肽鍵斷裂,水解掉一個(gè)或幾個(gè)短肽在特定條件下酶原姨激活艱的生總理意對(duì)義避免爆細(xì)胞遮產(chǎn)生嫂的酶巴對(duì)細(xì)聞胞進(jìn)隔行自色身消豪化,嬸并使散酶在映特定視的部比位和睛環(huán)境軍中發(fā)圓揮作面用,鍋保證眉體內(nèi)飄代謝抄正常駕進(jìn)行振。有的妹酶原魔可以臨視為穩(wěn)酶的毯儲(chǔ)存伙形式皇。在鉆需要撇時(shí),讀酶原旺適時(shí)羊地轉(zhuǎn)誘變成瓶有活該性的廟酶,屠發(fā)揮姥其催影化作監(jiān)用。淀粉——是植呆物中納養(yǎng)分蘿的儲(chǔ)晃存形串式。淀粉失顆粒糖原——是動(dòng)饞物體代內(nèi)葡憂(yōu)萄糖補(bǔ)的儲(chǔ)宿存形墓式。一、價(jià)糖的鏈主要槍生理仁功能筑是氧愧化供磨能糖在紋生命勾活動(dòng)拖中的濤主要豬作用啦是提碌供碳駛源和藝能源檢。如糖段可提汪供合償成某偽些氨永基酸刪、脂碌肪、年膽固膏醇、窮核苷響等物列質(zhì)的噸原料窗。作為黑機(jī)體鈴組織譽(yù)細(xì)胞涌的組室成成讀分。提供譜合成斷體內(nèi)各其他形物質(zhì)承的原掛料。如糖窮是糖穗蛋白遷、蛋澆白聚冤糖、戰(zhàn)糖脂成等的駱組成過(guò)成分助。概庫(kù)述食物酷中含月有的刮大量拋纖維筍素,勝因人辛體內(nèi)躁無(wú)-糖苷庫(kù)酶而幅不能徹對(duì)其晴分解鞠利用紹,但朗卻具遍有刺逗激腸劃蠕動(dòng)平等作蠟用,遠(yuǎn)也是選維持撿健康師所必袍需。糖的璃吸收吸收鉗部位規(guī):小腸椅上段吸收桶形式遍:?jiǎn)翁翘堑幕紵o(wú)氧釋分解在機(jī)同體缺領(lǐng)氧條托件下岸,葡堪萄糖舌經(jīng)一應(yīng)系列葡酶促菠反應(yīng)娛生成占丙酮然酸進(jìn)蟲(chóng)而還謊原生牛成乳咬酸的菜過(guò)程袖稱(chēng)為糖酵鴿解(g樂(lè)ly跳co騰ly缺si撞s),亦件稱(chēng)糖的運(yùn)無(wú)氧裹氧化(a孫na霸er責(zé)ob燈ic紀(jì)o腸xi核da迫ti畫(huà)on氣)。糖酵靠解的僅反應(yīng)障部位邀:胞漿役。一、旱糖無(wú)竭氧氧胞化反朋應(yīng)過(guò)頭程分褲為酵拾解途上徑和義乳酸賴(lài)生成暖兩個(gè)婚階段第一祥階段仇:由葡繪萄糖襯分解劍成丙遣酮酸(p絡(luò)yr艱uv霜at使e),稱(chēng)鼓之為糖酵自解途劉徑(g蠶ly嚇co霜ly葵ti讓c租pa死th篩wa裁y)。第二牢階段拋:由丙數(shù)酮酸衫轉(zhuǎn)變鍋成乳切酸。糖酵亞解分做為兩鵝個(gè)階泥段:葡萄栽糖磷巨酸化選為6-磷酸腎葡萄含糖ATP
ADPMg2+己糖激酶(hexokinase)GluG-6-PF-6-PF-1,6-2PATPADPATPADP1,3-二磷酸甘油酸3-磷酸甘油酸2-磷酸甘油酸丙酮酸磷酸二羥丙酮3-磷酸甘油醛NAD+NADH+H+ADPATPADPATP磷酸烯醇式丙酮酸葡萄糖6-磷酸葡萄糖(glucose-6-phosphate,G-6-P)(一椒)葡伙萄糖片經(jīng)酵棗解途市徑分汁解為眉兩分灣子丙詳酮酸1,良3-二磷戶(hù)酸甘徐油酸甩轉(zhuǎn)變攔成3-磷酸葵甘油物酸ADPATP
磷酸甘油酸激酶(phosphoglyceratekinase)
GluG-6-PF-6-PF-1,6-2PATPADPATPADP1,3-二磷酸甘油酸3-磷酸甘油酸2-磷酸甘油酸丙酮酸磷酸二羥丙酮3-磷酸甘油醛NAD+NADH+H+ADPATPADPATP磷酸烯醇式丙酮酸在以抵上反傅應(yīng)中允,底叮物分撕子內(nèi)潛部能皆量重澡新分振布,鐵生成漢高能權(quán)鍵,咱使AD撞P磷酸引化生誦成AT押P的過(guò)所程,臨稱(chēng)為底物賺水平害磷酸倒化(s羽ub禍st城ra治te急l嗽ev用el殃p責(zé)ho望sp嶄ho侮ry斗la討ti肆on已)。1,3-二磷酸甘油酸3-磷酸甘油酸(二蠻)丙幻玉酮酸顆轉(zhuǎn)變繁成乳臥酸反應(yīng)暑中的NA瞇DH趴+H+來(lái)自免于上綢述第6步反武應(yīng)中漿的3-磷酸怎甘油塌醛脫核氫反翼應(yīng)。丙酮御酸乳酸乳酸跪脫氫恭酶(La磨ct挪at部e誤de柱hy跳dr被og鑰en性as踢e,LD抓H)NA栽DH該+虛H+NA截D+E1:己糖激酶E2:6-磷酸果糖激酶-1E3:丙酮酸激酶NAD+乳酸糖酵召解的已代謝安途徑GluG-6-PF-6-PF-1,6-2PATPADPATPADP1,3-二磷酸甘油酸3-磷酸甘油酸2-磷酸甘油酸丙酮酸磷酸二羥丙酮3-磷酸甘油醛NAD+NADH+H+ADPATPADPATP磷酸烯醇式丙酮酸E2E1E3NADH+H+產(chǎn)能鵝的方蠢式和我數(shù)量方式丸:底物奴水平廊磷酸扯化凈生既成AT紛P數(shù)量駐:從G開(kāi)始2×燦2-播2=授2眠AT蜓P從Gn開(kāi)始2×化2-期1=型3數(shù)AT黨P終產(chǎn)蠶物乳帳酸的啄去路釋放羊入血畜,進(jìn)態(tài)入肝肚臟再購(gòu)進(jìn)一貸步代敗謝:分解喇利用乳酸達(dá)循環(huán)防(糖暗異生嶼)果糖己糖激酶GluG-6-PF-6-PF-1,6-2PATPADPATPADP丙酮酸半乳糖1-磷酸半乳糖1-磷酸葡萄糖半乳糖激酶變位酶甘露糖6-磷酸甘露糖己糖激酶變位酶除葡涉萄糖強(qiáng)外,經(jīng)其它滔己糖進(jìn)也可磚轉(zhuǎn)變洲成磷酸父己糖而進(jìn)普入酵傘解途箱徑。三、堤糖酵驗(yàn)解的才主要甜生理淺意義堤是在昏機(jī)體肚缺氧愁的情抖況下閥快速愿供能是機(jī)系體在新缺氧央情況舟下獲肚取能敏量的衫有效給方式燦。是某辱些細(xì)剩胞在球氧供莫應(yīng)正來(lái)常情筑況下瓶的重負(fù)要供憐能途錢(qián)徑。①變無(wú)線斯粒體命的細(xì)膠胞,機(jī)如:賄紅細(xì)錫胞②歉代謝白活躍酒的細(xì)漆胞,毫如:交白細(xì)潤(rùn)胞、態(tài)骨髓常細(xì)胞糖的花有氧陡氧化(a字er睬ob堂ic勿o優(yōu)xi客da屑ti臂on角)指在蝦機(jī)體橡氧供它充足啦時(shí),淺葡萄綠糖徹流底氧跑化成H2O和CO2,并沒(méi)釋放鳴出能量的過(guò)納程。喘是機(jī)咽體主紋要供偷能方搞式。部位券:胞液寺及線霸粒體概念糖的繡有氧虎氧化一、捷糖有單氧氧望化的躲反應(yīng)她過(guò)程同包括伙糖酵酸解途苦徑、告丙酮廚酸氧律化脫淋羧、結(jié)三羧賊酸循育環(huán)及飾氧化帖磷酸學(xué)化第一洞階段燃:酵淺解途胳徑第二沙階段臉:丙筆酮酸繳的氧查化脫膊羧第三呼階段姿:三起羧酸跟循環(huán)G(Gn)第四性階段隸:氧抱化磷恢酸化丙酮捧酸乙酰Co混ACO2NADH+H+FADH2H2O[O拍]AT嬸PAD燃PTA煩C循環(huán)胞液線??h體三羧里酸循濤環(huán)(T訴ri屢ca則rb默ox察yl父ic噸A襲ci暴d好Cy縱cl乎e,摘T隙AC導(dǎo))也稱(chēng)他為檸檬桌酸循蜓環(huán),這吊是因遭為循隔環(huán)反辭應(yīng)中端的第啄一個(gè)皂中間小產(chǎn)物版是一童個(gè)含瓣三個(gè)瘋羧基惑的檸餃檬酸軟。由填于Kr阿eb脾s正式只提出故了三龜羧酸敘循環(huán)病的學(xué)概說(shuō),血故此積循環(huán)貴又稱(chēng)玩為Kr怠eb管s循環(huán),它差由一已連串照反應(yīng)假組成取。二、播三羧唱酸循鑒環(huán)是犧以形菠成檸層檬酸授為起案始物催的循瞎環(huán)反痕應(yīng)系唱統(tǒng)概述反應(yīng)穩(wěn)部位碰:線粒蹲體(一鈴)TC聽(tīng)A循環(huán)甲由8步代仁謝反妙應(yīng)組雅成乙酰Co茂A與草辨酰乙闊酸縮誘合成扔檸檬高酸檸檬姑酸經(jīng)掠順烏逗頭酸冊(cè)轉(zhuǎn)變梨為異氧檸檬白酸異檸收檬酸疲氧化驢脫羧趨轉(zhuǎn)變膝為α-酮戊迎二酸α-酮戊撒二酸畜氧化眾脫羧什生成輩琥珀刮酰Co貍A琥珀勁酰Co鋤A合成簡(jiǎn)酶催殃化底偷物水沫平磷暢酸化果反應(yīng)琥珀腥酸脫揚(yáng)氫生觸成延吃胡索庫(kù)酸延胡駐索酸卸加水大生成手蘋(píng)果理酸蘋(píng)果赴酸脫坡氫生膽成草辨酰乙廳酸CoASHNA鴿DH論+H+NA厘D+CO2NA采D+NA櫻DH劉+H+CO2GT薄PGD暴P+塌PiFA瓣DFA揚(yáng)DH2NA細(xì)DH采+H+NA雕D+H2OH2OH2OCo稠AS糟HCoASH⑧①②③④⑤⑥⑦②H2O①檸擊檬酸奔合酶②順明烏頭傘酸梅③異求檸檬漿酸脫未氫酶④α-酮戊節(jié)二酸勞脫氫曉酶復(fù)員合體⑤琥仆珀酰Co谷A合成倡酶⑥琥放珀酸醉脫氫往酶⑦延莖胡索正酸酶⑧蘋(píng)櫻果酸風(fēng)脫氫紡酶GT籍PGD胖PAT言PAD外P核苷掌二磷襖酸激幕酶經(jīng)過(guò)焦一次嚇三羧夾酸循辨環(huán),消耗嫂一分咱子乙銷(xiāo)酰Co穗A;經(jīng)四釣次脫田氫,謀二次宰脫羧坦,一鐵次底瓜物水呈平磷張酸化家;生成1分子FA匙DH2,3分子NA縫DH鹽+H+,2分子CO2,1分子GT灰P;關(guān)鍵亭酶有膨:檸檬緊酸合鄰酶,α-酮戊氣二酸性脫氫蝦酶復(fù)皆合體扛,蛾異檸兼檬酸射脫氫仙酶。整個(gè)坊循環(huán)綁反應(yīng)汪為不塔可逆削反應(yīng)撤。三羧局酸循再環(huán)的店要點(diǎn)當(dāng):1.TC芹A循環(huán)仔中有3個(gè)關(guān)披鍵酶檸檬償酸合雕酶異檸葡檬酸砍脫氫脊酶α-酮戊掙二酸血脫氫執(zhí)酶反應(yīng)輔酶最終獲得ATP第一階段(胞漿)葡糖糖→6-磷酸葡糖糖-16-磷酸果糖→1,6-二磷酸果糖-12×3-磷酸甘油醛→2×1,3-二磷酸甘油酸2NADH3或5*2×1,3-二磷酸甘油酸→2×3-磷酸甘油酸22×磷酸烯醇式丙酮酸→2×丙酮酸2第二階段(線粒體基質(zhì))2×丙酮酸→2×乙酰CoA2NADH5第三階段(線粒體基質(zhì))2×異檸檬酸→2×α-酮戊二酸2×α-酮戊二酸→2×琥珀酰CoA2×琥珀酰CoA→2×琥珀酸2×琥珀酸→2×延胡索酸2×蘋(píng)果酸→2×草酰乙酸2NADH2NADH2FADH2
2NADH55235由一個(gè)葡糖糖總共獲得30或32概念磷酸帽戊糖扮途徑(p雖en互to涌se穩(wěn)p尤ho幸sp摘ha悔te偽p挽at慶hw撕ay絞)是指達(dá)由葡教萄糖顆生成磷酸廣戊糖及NA謊DP河H+叮H+,前蓋者再金進(jìn)一疏步轉(zhuǎn)千變成3-磷酸亮甘油仔醛和6-磷酸攤果糖的反逗應(yīng)過(guò)為程。一、爺磷酸煮戊糖可途徑戴生成NA攀DP茂H和磷鴨酸戊惹糖葡萄惑糖的貞其他捕代謝貿(mào)途徑總反傾應(yīng)式:3×6-磷酸葡萄糖+6NADP+2×6-磷酸果糖+3-磷酸甘油醛+6NADPH+H++3CO2(三進(jìn))磷安酸戊孫糖途吵徑的哲生理揭意義蠻在于園生成NA霉DP異H和5-磷酸紗核糖2.提揮供NA痕DP沫H作為塔供氫儉體參松與多饞種代初謝反丹應(yīng)1.為堂核酸養(yǎng)的生下物合儉成提說(shuō)供核嬌糖(1)NA侄DP宜H是體魂內(nèi)許屬多合鼠成代證謝的臺(tái)供氫確體;(2)NA翠DP播H參與圈體內(nèi)處羥化寫(xiě)反應(yīng)便;(3)NA艦DP安H還用狐于維千持谷胱甘炮肽(g望lu櫻ta況th凝io牽ne,GS陳H)的還取原狀勢(shì)態(tài)。1.葡萄享糖單故元以α-1掃,4粗-糖苷耕鍵形撈成長(zhǎng)屑鏈。2.約10個(gè)葡狹萄糖束單元胞處形躲成分狼枝,暑分枝浩處葡體萄糖掀以α-1憲,6搭-糖苷拉鍵連旦接,兄分支抹增加壓,溶脹解度歉增加桶。3.每條調(diào)鏈都沈終止聯(lián)于一憲個(gè)非雜還原釀端.非還冰原端賤增多鞏,以錢(qián)利于黃其被薄酶分腔解。糖原箭的結(jié)儲(chǔ)構(gòu)特辱點(diǎn)及壤其意箭義:UD掠PG齊可看班作“海活性歲葡萄錫糖”誦,在難體內(nèi)暑充作舞葡萄弊糖供假體。3.后1-磷酸沃葡萄計(jì)糖轉(zhuǎn)羽變成恩尿苷疑二磷室酸葡罷萄糖+UTP尿苷PPPPP郵iUD壺PG焦磷公酸化爺酶2P停i+能量1-磷酸葡萄糖尿苷正二磷簽酸葡開(kāi)萄糖(u謠ri兆di肝ne植d手ip偵ho態(tài)sp羞h(yuǎn)a巖te瓦g錘lu浸co皂se欠,蹤蝶UD浸PG埋)糖原n為原凈有的樸細(xì)胞閥內(nèi)的吊較小青糖原態(tài)分子品,稱(chēng)淡為糖原老引物(p材ri特me爺r),們作為UD齒PG上葡遞萄糖語(yǔ)基的止接受森體。糖原n+UDPG糖原n+1+UDP糖原合酶(glycogensynthase)2.脫枝橋酶的挪作用①轉(zhuǎn)移鮮葡萄竄糖殘妖基②水解-1盒,6聽(tīng)-糖苷睬鍵脫枝撕酶(d童eb柔ra仗nc勸hi艷ng巨e揀nz盾ym步e)磷酸仙化酶轉(zhuǎn)移呆酶活籌性α-閥1,尋6糖苷漏酶活皇性在幾壩個(gè)酶婚的共戲同作辨用下遙,最歌終產(chǎn)香物中克約85肢%為1-磷酸指葡萄不糖,15被%為游杠離葡惡萄糖串。二、變肝糖狹原分丙解產(chǎn)孕物——葡萄稱(chēng)糖可領(lǐng)補(bǔ)充污血糖亞細(xì)迎胞定棵位:胞漿肝糖塑元的達(dá)分解技過(guò)程圣:糖原n+1糖原n+1-磷酸葡萄糖糖原磷酸化酶(Glycogenphosphorylase)1.糖原般的磷邁酸解糖原辜分解(g尚l(wèi)y煩co彼ge委no鞭ly疫si申s占)習(xí)慣舞上指害肝糖撒原分歇解成熱為葡虎萄糖衫的過(guò)晝程。肌糖厘原的旅分解肌糖唐原分蘭解的潔前三砍步反拉應(yīng)與芝肝糖爬原分糖解過(guò)均程相廳同,嚴(yán)但是目生成6-磷酸拳葡萄蜂糖之貸后,割由于甲肌肉灰組織鞠中不存白在葡蓄萄糖-6貴-磷酸哥酶,所亭以生行成的6-磷酸鐮葡萄霞糖不金能轉(zhuǎn)猜變成味葡萄胖糖釋爆放入丟血,自提供粱血糖邪,而欲只能穗進(jìn)入煎酵解粗途徑怎進(jìn)一懷步代閣謝。肌糖昏原的哨分解吧與合事成與乳酸侍循環(huán)有關(guān)瞎。糖原吳的合業(yè)成與淋分解典總圖UDPG焦磷酸化酶G-1-PUTPUDPGPPi糖原n+1
UDPG-6-PG糖原合酶磷酸葡萄糖變位酶己糖(葡萄糖)激酶糖原n
Pi磷酸化酶葡萄糖-6-磷酸酶(肝)糖原n
調(diào)節(jié)案小結(jié):雙向殖調(diào)控遇:對(duì)合漲成酶侍系與鑄分解沙酶系癥分別蟲(chóng)進(jìn)行響調(diào)節(jié)風(fēng),如孟加強(qiáng)公合成繁則減請(qǐng)弱分鐮解,她或反恩之。雙重廁調(diào)節(jié)得:別構(gòu)刮調(diào)節(jié)貸和共雕價(jià)修踏飾調(diào)伐節(jié)。肝糖禁原和僻肌糖寶原代依謝調(diào)歌節(jié)各慢有特孕點(diǎn):釀如分司解肝格糖原胃的激碎素主插要為宏胰高狂血糖禮素,常分解堪肌糖偏原的覆激素沉主要喚為腎腹上腺雄素。關(guān)鍵太酶調(diào)個(gè)
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