抗風(fēng)濕及鎮(zhèn)痛類中成藥和保健品非法添加化學(xué)物質(zhì)的檢測(cè)方法研究進(jìn)展修改

年4月19日抗風(fēng)濕及鎮(zhèn)痛類中成藥和保健品非法添加化學(xué)物質(zhì)的檢測(cè)方法研究進(jìn)展修改文檔僅供參考，不當(dāng)之處，請(qǐng)聯(lián)系改正?？癸L(fēng)濕類及鎮(zhèn)痛類中藥制劑中非法添加化學(xué)物質(zhì)的檢測(cè)方法研究進(jìn)展申蘭慧（江蘇省無(wú)錫藥品檢驗(yàn)所，無(wú)錫，214021）摘要對(duì)抗風(fēng)濕類及解熱鎮(zhèn)痛類中藥制劑中非法添加化學(xué)物質(zhì)的分析方法進(jìn)行綜述?，F(xiàn)在主流的分析方法主要是薄層色譜法、高效液相色譜法、液質(zhì)聯(lián)用。并參考相關(guān)文獻(xiàn)，根據(jù)分析方法對(duì)各種抗風(fēng)濕類及解熱鎮(zhèn)痛化學(xué)物質(zhì)分別進(jìn)行闡述。關(guān)鍵詞中藥制劑非法添加化學(xué)物質(zhì)檢測(cè)方法ProgressofDetectionMethodsforChemicalMaterialsillegallyaddedinAntirheunaticandAnalgesiaTraditionalChineseMedicine Shen（WuxiInstituteforDrugcontrolJiangsuProvince,Wuxi，214021）ABSTRACTTheauthoroverviewedtheanalyticalmethodsforchemicalmaterialsillegallyaddedinAntirheunaticandAnalgesiaTraditionalChineseMedicine.ThemaincurrentanalyticalmethodwereTLC,HPLC,andLC-MS.TheauthorreferredcorrelatedocumentsandexplainedAntirheunaticandAnalgesiachemicalmaterialsseparatelyaccordingtheanalyticalmethods.KEYWORDSTraditionalChineseMedicine,illegallyadded,chemicalmaterials,detectionmethods近年來(lái)，中成藥及保健品非法添加化學(xué)物質(zhì)越來(lái)越引起人們的關(guān)注，特別是抗風(fēng)濕類及解熱鎮(zhèn)痛類的情況比較突出，因?yàn)橹袊?guó)風(fēng)濕類及骨刺骨痛的人群比較多，需要患者一直服藥，不法藥商為了謀取非法利益，經(jīng)過(guò)非法加入化學(xué)藥品,使療效緩和的中成藥具有了暫時(shí)的速效、高效或特效,增加銷量,獲取非法高額利潤(rùn)。同時(shí),由于中成藥成分復(fù)雜,《藥品標(biāo)準(zhǔn)》不可能規(guī)定與化學(xué)藥品同樣進(jìn)行“全成分”檢測(cè),添加西藥不易被識(shí)別,隱蔽性較強(qiáng),造成這些“藥品”容易蒙混過(guò)關(guān),逃避了監(jiān)督檢查。筆者就近幾年來(lái)結(jié)合自己的日常檢驗(yàn)及文獻(xiàn)資料對(duì)抗風(fēng)濕類及解熱鎮(zhèn)痛類中成藥和保健品中非法添加西藥成分的分析方法進(jìn)行綜述，以便為相關(guān)藥品監(jiān)督管理部門(mén)及時(shí)發(fā)現(xiàn)這種非法添加行為提供技術(shù)支持，保證患者用藥安全?？赡芴砑拥目癸L(fēng)濕類及解熱鎮(zhèn)痛類西藥1、糖皮質(zhì)激素藥：氫化可的松、地塞米松、曲安奈德、醋酸潑尼松龍、醋酸氫化可的松、醋酸潑尼松、醋酸氫化潑尼松、醋酸可的松、醋酸地塞米松、醋酸曲安奈德、醋酸氟輕松。收稿日期-3-19修回日期-3-252、解熱鎮(zhèn)痛抗炎藥：阿司匹林、布洛芬、萘普生、芬布芬、布洛芬、吲哚美辛、雙氯芬酸鈉、吡羅昔康、美洛昔康、對(duì)乙酰氨基酚、鹽酸羅通定。分析方法薄層色譜法（TLC）TLC檢測(cè)靈敏度差，不易定量，但實(shí)驗(yàn)操作簡(jiǎn)便快速，故能夠作為初篩方法，為HPLC、HPLC-MS進(jìn)行進(jìn)一步確證提供參考。夏瑞[等[1]采用氯仿-甲醇(9：1)提取樣品后，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板，以二氯甲烷-乙醚-甲醇-水(385：60：15：2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)后，以堿性四氮唑藍(lán)試液為顯色劑，同時(shí)有效地分離5種糖皮質(zhì)激素，共檢查十幾批治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和哮喘的中藥制劑，有兩批中檢出含有醋酸潑尼松，同樣采用MS／MS進(jìn)行驗(yàn)證，本法檢測(cè)陽(yáng)性反應(yīng)的，經(jīng)質(zhì)譜驗(yàn)證確認(rèn)為陽(yáng)性。周鎰等[2]采用甲醇提取樣品后，分別點(diǎn)于同一4.68%磷酸二氫鈉溶液制備硅膠GF254薄層板，以正己烷-醋酸乙酯-冰醋酸(15：5：1)為展開(kāi)劑，檢出三批天麻膠囊中非法摻入吲哚美辛。劉元瑞等[3]采用薄層色譜聯(lián)合質(zhì)譜(TLC-MS)技術(shù)檢測(cè)中藥制劑中含有的多種化學(xué)藥品，采用薄層色譜法初篩，利用薄層制備色譜技術(shù)將可疑斑點(diǎn)分離后進(jìn)行質(zhì)譜檢測(cè)，并與對(duì)照品的質(zhì)譜圖比較確認(rèn)，在延香鎮(zhèn)痛膠囊檢出雙氯芬酸鈉、卡馬西平、鹽酸曲馬多。HPLC法HPLC專屬性強(qiáng)，具高效、快速、適應(yīng)面廣，特別是近年來(lái)采用二極管陣列檢測(cè)器（DAD），提供了識(shí)別添加化學(xué)物質(zhì)成分的科學(xué)性與準(zhǔn)確性。當(dāng)前HPLC儀已經(jīng)比較普及使用，因此建立的檢驗(yàn)方法一旦成熟，將成為當(dāng)前這類研究中最為普遍采用的方法。郭瑞峰等[4]采用反相高效液相色譜法(RP-HPLC法)同時(shí)分離測(cè)定中藥保健品中l(wèi)0種常見(jiàn)的激素成分。方法是：色譜柱為ODSC18柱，以乙腈-水為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)為240nm，能夠快速篩查出純中藥制劑或食用保健品中的激素類西藥成分。夏瑞等[5]建立抗風(fēng)濕類中藥制劑中違法添加糖皮質(zhì)激素的檢測(cè)方法，以DiamondC18色譜柱，流動(dòng)相A為水-四氫呋喃(100：1)，B為乙腈-水-四氫呋喃(80：20：1)梯度洗脫，檢測(cè)波長(zhǎng)240nm。結(jié)果表明在該液相條件下，能同時(shí)有效分離13種糖皮質(zhì)激素，經(jīng)過(guò)比較樣品和對(duì)照品色譜保留時(shí)間和其紫外光譜信息，以及樣品中峰純度檢查，并經(jīng)MS-MS驗(yàn)證，證實(shí)樣品中含有醋酸潑尼松。莊曉慶[6]利用HPLC法測(cè)定天麻膠囊中非法摻入的吲哚美辛，以KromasilC8柱為色譜柱，0.1mol/L冰醋酸溶液-乙腈(52.5：47.5)為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為228nm，經(jīng)過(guò)TLC法發(fā)現(xiàn)樣品在與吲哚美辛對(duì)照品相應(yīng)的位置上有相同顏色的斑點(diǎn)，初步確定樣品中含有吲哚美辛。再經(jīng)過(guò)二極管陣列檢測(cè)器對(duì)供試品色譜圖中與吲哚美辛對(duì)照品峰保留時(shí)間基本一致的色譜峰進(jìn)行了紫外光區(qū)的光譜檢測(cè)，兩者的光譜行為一致。進(jìn)一步確定供試品中含有吲哚美辛，并經(jīng)過(guò)方法學(xué)驗(yàn)證，測(cè)定三批天麻膠囊中摻入吲哚美辛的量分別為2.56mg/粒，2.96mg/粒，2.68mg/粒。徐燦輝等[7]利用HPLC法測(cè)定神風(fēng)液中非法摻加的雙氯芬酸鈉，以KromasilC18柱為色譜柱，流動(dòng)相為0.025mo1/L磷酸液(用三乙胺調(diào)節(jié)pH值至3.0士0.05)一乙腈(40：60)，檢測(cè)波長(zhǎng)為276nm。該方法能靈敏、準(zhǔn)確地對(duì)神風(fēng)液中摻加的雙氯芬酸鈉進(jìn)行定量分析，專屬性較強(qiáng)，同樣也能適用于其它藥品或食品中非法摻加的雙氯芬酸鈉的定量分析。3、紫外掃描分析法（UV法）王世清[8]采用TLC法，成條帶狀點(diǎn)樣，在紫外燈（254nm）下刮下與醋酸潑尼松對(duì)照品相應(yīng)位置上的樣品斑點(diǎn)，加無(wú)水乙醇溶解，在200~300nm范圍內(nèi)進(jìn)行掃描，結(jié)果樣品溶液與醋酸潑尼松對(duì)照品在229~235nm之間均有最大吸收。4、液相色譜-質(zhì)譜法（HPLC-MS）HPLC-MS是當(dāng)前鑒別中藥制劑中摻入化學(xué)藥物有效分析方法之一，中藥制劑化學(xué)成分復(fù)雜，要獲得準(zhǔn)確的結(jié)果就必須采用專屬性高的分析手段，HPLC-MS正好具備這一優(yōu)勢(shì)，由于其分析不需要實(shí)現(xiàn)待測(cè)物質(zhì)與干擾組分的完全色譜分離，能夠經(jīng)過(guò)對(duì)質(zhì)荷比的篩選得到單一組分的色譜圖，同時(shí)還能夠經(jīng)過(guò)二級(jí)質(zhì)譜分析對(duì)結(jié)構(gòu)做進(jìn)一步確證，但當(dāng)前液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀價(jià)格昂貴，尚不能普及使用。姜建國(guó)等[9]采用液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法檢測(cè)中藥是否添加激素，樣品以VenusilMPC18柱色譜柱進(jìn)行分離，以0.01mo1/L醋酸銨-乙腈(45：55)為流動(dòng)相，二極管檢測(cè)器掃描表明，醋酸潑尼松對(duì)照品溶液和供試品溶液中相應(yīng)的紫外光譜圖一致，并得到相應(yīng)的一級(jí)質(zhì)譜準(zhǔn)分子離子。綜合色譜保留時(shí)間、準(zhǔn)分子離子和紫外光譜三方面的信息，證實(shí)風(fēng)濕筋骨康膠囊非法添加了醋酸潑尼松。韓加怡等[10]利用LC-MS和AA等方法檢測(cè)確定中成藥豨薟風(fēng)濕片中摻有雙氯芬酸鈉，即經(jīng)過(guò)TLC，HPLC，LC-MS，AA四種色譜和光譜的聯(lián)合檢測(cè)，逐步證明中成藥豨薟風(fēng)濕片中摻有雙氯芬酸鈉。劉福艷等[11]采用液相色譜-離子阱質(zhì)譜聯(lián)用法對(duì)6種抗風(fēng)濕中藥制劑的提取液進(jìn)行分析，選用AgilentC18柱，以0.02mol/L醋酸銨-1%醋酸溶液-甲醇(32：3：65)為流動(dòng)相，經(jīng)過(guò)相對(duì)分子質(zhì)量、一級(jí)及二級(jí)質(zhì)譜碎片信息、液相色譜保留時(shí)間和紫外光譜四方面的信息對(duì)抗風(fēng)濕制劑中非法摻入的化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行定性鑒別，結(jié)果6批抗風(fēng)濕類中藥，3批檢出摻有萘普生，其中2批檢出同時(shí)摻有吲哚美辛。三、我所近幾年來(lái)在抗風(fēng)濕及鎮(zhèn)痛類中成藥及保健品非法添加化學(xué)物質(zhì)的檢出情況以來(lái)，我所在中成藥及保健品非法添加化學(xué)物質(zhì)方面很關(guān)注，以日常篩查及建立補(bǔ)充檢驗(yàn)方法及項(xiàng)目來(lái)對(duì)可疑中成藥及保健品進(jìn)行檢測(cè)，對(duì)抗風(fēng)濕及鎮(zhèn)痛類中成藥及保健品非法添加化學(xué)物質(zhì)檢測(cè)情況見(jiàn)表1表1無(wú)錫所在抗風(fēng)濕及鎮(zhèn)痛類中成藥及保健品非法添加化學(xué)物質(zhì)情況年份品種批號(hào)檢出可疑成分檢測(cè)方法天麻膠囊050802鹽酸羅通定TLC、HPLC、LC-MS天蠶鎮(zhèn)痛片875043，875016雙氯芬酸鈉TLC、HPLC抗痛風(fēng)中成藥無(wú)（群眾舉報(bào)）醋酸潑尼松TLC、HPLC美諾骨德參酮片080501美洛昔康TLC、HPLC抗風(fēng)濕膠囊無(wú)證經(jīng)營(yíng)萘普生、吲哚美辛、雙氯芬酸鈉、布洛芬、吡羅昔康TLC、HPLC追風(fēng)透骨丸無(wú)證經(jīng)營(yíng)吲哚美辛、布洛芬、醋酸潑尼松TLC、HPLC為提高檢出效率，藥檢工作者逐漸摸索出同時(shí)測(cè)定多種非法添加化學(xué)成分的液相系統(tǒng)，筆者針對(duì)抗風(fēng)濕及解熱鎮(zhèn)痛類中成藥和保健品非法添加化學(xué)物質(zhì)建立了2~3個(gè)液相系統(tǒng)，將可能添加的化學(xué)物質(zhì)進(jìn)行有效的分析。在建立中藥非法添加化學(xué)藥品的檢測(cè)方法時(shí)，筆者按照如下的思路進(jìn)行分析檢測(cè)：首先了解非法添加化學(xué)成分及基質(zhì)的信息，根據(jù)中成藥的處方以及藥效、臨床上提供的毒副作用、群眾舉報(bào)等方面的信息初步確定非法添加化學(xué)成分的種類及其理化性質(zhì)。其次，尋找目標(biāo)化學(xué)物質(zhì)的對(duì)照品或原料，初步確立分析手段。最后進(jìn)行樣品分析，與對(duì)照品或原料比較，相互驗(yàn)證，確證陽(yáng)性樣品。綜上所述，近年來(lái)在中藥制劑中非法摻入化學(xué)藥物以醋酸潑尼松、雙氯芬酸鈉、吲哚美辛、萘普生、吡羅昔康為常見(jiàn)。在檢驗(yàn)方法或技術(shù)方面，大部分文獻(xiàn)均采用TLC、HPLC、HPLC-MS等技術(shù)，TLC操作簡(jiǎn)便、成本較低，易在基層推廣，可用于初步篩選可疑樣品；UV法可作為有力的鑒別工作；經(jīng)過(guò)HPLC分離樣品，用二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)，可基本確定樣品中是否含有某一化學(xué)成分；有條件者再采用HPLC-MS聯(lián)用或直接電噴霧三重四級(jí)桿質(zhì)譜技術(shù)等手段深入分析，將更進(jìn)一步確保結(jié)果準(zhǔn)確無(wú)誤。靈活運(yùn)用各種檢測(cè)方法，在以后的檢驗(yàn)工作中有針對(duì)性地進(jìn)行檢測(cè)，就能夠更快更準(zhǔn)地發(fā)現(xiàn)非法添加物質(zhì)，為監(jiān)管部門(mén)提供技術(shù)支持。但作為出具檢驗(yàn)報(bào)告書(shū)的藥品檢驗(yàn)部門(mén)則必須嚴(yán)格按國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局批準(zhǔn)的方法進(jìn)行檢驗(yàn)，方可判定是否非法添加化學(xué)物質(zhì)，當(dāng)前大多以HPLC-MS-MS聯(lián)用法作為主要的檢驗(yàn)手段。但由于補(bǔ)充檢驗(yàn)方法及項(xiàng)目具有一定的時(shí)效性，在具體工作中，僅依靠國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局的授權(quán)方法是遠(yuǎn)遠(yuǎn)不夠的，建議國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局出臺(tái)有關(guān)中成藥非法添加化學(xué)藥品檢驗(yàn)方面的指導(dǎo)原則，使各級(jí)藥品檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)在工作中能夠靈活把握，避免出現(xiàn)藥檢機(jī)構(gòu)對(duì)于使用非標(biāo)方法檢測(cè)出來(lái)的結(jié)果無(wú)法出具正式報(bào)告而使非法添加化學(xué)藥品的中成藥繼續(xù)逍遙法外的尷尬局面[12]。參考文獻(xiàn)1夏瑞,董素英,車寶泉薄層色譜法快速鑒別中藥制劑中的糖皮質(zhì)激素[J].藥物分析雜志,，28（3）：470-4712周鎰,許嘯,龔旭東等薄層色譜法測(cè)定天麻膠囊中摻入的吲哚美辛[J].藥學(xué)與臨床研究,，16（2）：161-1623劉元瑞,葛海生,趙康虎等應(yīng)用TLC-MS技術(shù)檢測(cè)鎮(zhèn)痛中藥制劑中添加的3種化學(xué)藥品[J].中國(guó)藥學(xué)雜志,，43（22）：1747-17504郭瑞峰,郄冰冰,何建峰反相高效液相色譜法檢查中藥保健品中的激素類西藥成分[J].《中國(guó)藥業(yè)》,，16(5):23-245夏瑞,車寶泉RP-HPLC方法鑒別中藥制劑中的糖皮質(zhì)激素[J].《藥物分析雜志》,，28（2）：316-3186莊曉慶HPLC法測(cè)定天麻膠囊中非法摻入的吲哚美辛[J].《中國(guó)藥師》,，10（1）：316-3187徐燦輝,何維為高效液相色譜法測(cè)定神風(fēng)液中摻加的雙氯芬酸鈉[J].《中國(guó)藥業(yè)》,，15（21）：37-388王世清痹效膠囊中醋酸潑尼松的檢出[J].中國(guó)藥師,，5(10):603-6049姜建國(guó),張西如液相色譜