常用玻璃器皿的清洗、包扎和干熱滅菌（微生物學與操作技術）

常用玻璃器皿的清洗、包扎和干熱滅菌微生物學及操作技術常見玻璃器皿的清洗1吸量管和培養(yǎng)皿的包扎2干熱滅菌3目錄頁CONTENTSPAGE1常見玻璃器皿的洗滌實驗室洗滌劑的種類和應用常見玻璃器皿的洗滌方法洗滌工作注意事項一、實驗室洗滌劑的種類和應用常見玻璃器皿的洗滌（1）肥皂：使用時多用濕刷子（試管刷、瓶刷）沾肥皂刷洗容器，再用水洗去肥皂。熱的肥皂水（5％）去污力很強，洗去器皿上的油脂很有效。

（2）去污粉：用時一般將玻璃器皿或搪瓷器皿潤濕，將去污粉涂在污點上，用布或刷子擦拭，再用水洗去去污粉。

（3）洗衣粉：常用1％的洗衣粉溶液洗滌載玻片和蓋玻片，能達到良好的清潔效果。一、實驗室洗滌劑的種類和應用常見玻璃器皿的洗滌（4）鉻酸洗液：是重鉻酸鉀（或重鉻酸鈉）的硫酸溶液。重鉻酸鉀（或重鉻酸鈉）與硫酸作用后形成鉻酸。鉻酸是一種強氧化劑，去污能力很強，實驗室常用之洗去玻璃和瓷質器皿上的有機質。切不可用于洗滌金屬器皿。

鉻酸洗液分為濃溶液和稀溶液兩種，配方如下：

a

濃配方：重鉻酸鉀（工業(yè)用）50g，蒸餾水150mL，濃硫酸（粗）800mL。

b

稀配方：重鉻酸鉀（工業(yè)用）50g，蒸餾水850mL，濃硫酸（粗）100mL。

配法：將重鉻酸鉀溶解在溫熱蒸餾水中（可加熱），待冷卻后，再緩慢加入濃硫酸，邊加邊攪拌。配好的溶液呈棕紅色或橘紅色。應始終存儲于有蓋容器內(nèi)，以防變質。此液可多次使用，直至溶液變成青褐色或墨綠色時失效。

二、常見玻璃器皿的洗滌方法常見玻璃器皿的洗滌（1）新玻璃器皿的洗滌法：新購置的玻璃器皿（包括載玻片、蓋玻片、試管、吸管、平皿、三角瓶等）含有游離堿，應用2％的鹽酸溶液浸泡數(shù)小時，以中和其堿質，再用水充分沖洗干凈。

（2）載玻片及蓋玻片的洗滌法：用過的載玻片放入1％洗衣粉溶液中煮沸20～30min（注意溶液一定要浸沒玻片，否則會使玻片鈣化變質），待冷卻后，逐個用自來水洗凈，浸泡于95％的乙醇中備用。蓋玻片散入1％的洗衣粉溶液中，煮沸1min，待稍冷后再煮沸1min，如此重復2～3次（如煮沸時間過長會使玻片鈣化變白且變脆易碎）。待冷卻后用自來水沖洗。洗凈后于95％的乙醇中浸泡。帶有活菌的載玻片或蓋玻片可先浸在5％石炭酸，或2～3％來蘇水，或0.1％升汞溶液中消毒24～48小時后，再按上述方法洗滌。使用前，可用干凈紗布擦去酒精，并經(jīng)火焰微熱，使殘余酒精揮發(fā)，再用水滴檢查，如水滴在玻片上均勻散開，方可使用。

二、常見玻璃器皿的洗滌方法常見玻璃器皿的洗滌（3）血球計數(shù)板的清洗：血球計數(shù)板（或Petrof

Hausser細菌計數(shù)板）使用后應立即在水龍頭下用水沖凈，必要時可用95％酒精浸泡，或用酒精棉輕輕擦拭，切勿用硬物洗刷或抹擦，以免損壞網(wǎng)格刻度。洗滌完畢鏡檢計數(shù)區(qū)是否殘留菌體或其他沉淀物，若不干凈，則必須重復洗滌至潔凈為止。洗凈后自行晾干或用吹風機吹干，放入盒內(nèi)保存。

（4）一般玻璃器皿的洗滌法：三角瓶、培養(yǎng)皿、試管等可用毛刷蘸洗滌劑或去污粉或肥皂洗去灰塵、油污、無機鹽等物質，然后用自來水沖洗干凈。如果器皿要盛高純度的化學藥品或者做較精確的實驗，可先在洗液中浸泡過夜，再用自來水沖洗，最后用蒸餾水洗2～3次。洗刷干凈的玻璃器皿烘干備用。

染菌的玻璃器皿，應先經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌20～30min后取出，趁熱倒出容器內(nèi)的培養(yǎng)物，再用熱的洗滌劑溶液洗刷干凈，最后用水沖洗。染菌的移液管和毛細吸管，使用后應立即放入5％的石炭酸溶液中浸泡數(shù)小時，先滅菌，然后再沖洗

二、常見玻璃器皿的洗滌方法常見玻璃器皿的洗滌（5）含有瓊脂培養(yǎng)基的玻璃器皿的洗滌法：先用小刀或鑷子、玻璃棒將器皿中的瓊脂培養(yǎng)基刮下。如果瓊脂培養(yǎng)基已經(jīng)干燥，可將器皿放在少量水中煮沸，使瓊脂熔化后趁熱倒出，然后用水洗滌，并用刷子沾洗滌劑擦洗內(nèi)壁，然后用清水沖洗干凈。

如果器皿上沾有蠟或油漆等物質，可用加熱的方法使之熔化后揩去，或用有機溶劑（苯、二甲苯、丙酮等）擦拭；如器皿沾有焦油、樹脂等物質，可用濃硫酸或40％氫氧化鈉溶液浸泡，也可用洗滌液浸泡。二、常見玻璃器皿的洗滌方法常見玻璃器皿的洗滌（6）光學玻璃的清洗：光學玻璃用于儀器的鏡頭、鏡片、棱鏡、玻片等，在制造和使用中容易沾上油污、水溶性污物、指紋等，影響成像及透光率。清洗光學玻璃，應根據(jù)污垢的特點、不同結構選用不同的清洗劑、清洗工具及清洗方法。

清洗鍍有增透膜的鏡頭，如照相機、投影儀、顯微鏡的鏡頭，可用30％的酒精可70%的乙醚配制清洗劑清洗。清洗時應用軟毛刷或棉球沾少量清洗劑，從鏡頭中心向外做圓周運動。切忌將鏡頭浸泡在清洗劑中清洗；清洗鏡頭不得用力擦拭，否則會劃傷增透膜，損壞鏡頭。清洗棱鏡、平面鏡的方法，可依照清洗鏡頭的方法進行。

光學玻璃表面生霉后，光線在其表面發(fā)生散射，使成像模糊不清，嚴重者將使儀器報廢。生霉原因是霉菌孢子在溫度濕度適宜和有營養(yǎng)物時生長成形成霉斑。消除霉斑可用0.1%~0.5%的乙基含氫二氯硅烷與無水酒精配制的清洗劑清洗，潮濕天氣還需摻入少量的乙醚，或用環(huán)氧丙烷、稀氨水等清洗。使用上述清洗劑也能清洗光學玻璃上的油脂性霧、水濕性霧和油水混合性霧，其清洗方法與清洗鏡頭方法相似。三、洗滌工作注意事項常見玻璃器皿的洗滌（1）任何洗滌方法，都不應對玻璃器皿造成損傷。所以不能使用對玻璃器皿有腐蝕作用的化學試劑，也不能使用比玻璃硬度大的制品擦拭玻璃器皿。

（2）用過的器皿必須立即洗刷，放置太久會增加洗刷的困難。

（3）含有對人有傳染性或非傳染性致病菌的玻璃器皿，應先浸在5％石炭酸溶液內(nèi)或經(jīng)蒸煮、高壓滅菌后再行洗滌。

（4）盛過有毒物質的器皿，不要與其他器皿放在一起。

（5）難洗滌的器皿不要與易洗滌的器皿放在一起，以免增加洗滌的麻煩。有油的器皿不要與無油的器皿混在一起，否則本來無油的器皿沾上了油污，浪費藥劑和時間。

（6）強酸、強堿及其他氧化物和揮發(fā)性的有毒物品，都不能倒在洗滌槽內(nèi)，必須倒在廢液缸中。三、洗滌工作注意事項常見玻璃器皿的洗滌（7）用過的升汞溶液，切勿裝在鋁鍋等金屬容器中，以免引起金屬的腐蝕。

（8）盛用液體培養(yǎng)物的器皿，應先將培養(yǎng)物倒在廢液缸中，然后洗滌。切勿將培養(yǎng)物尤其是瓊脂培養(yǎng)物倒入洗滌槽中，否則會逐漸阻塞下水道。

（9）使用洗滌液時，投入的玻璃器皿應盡量干燥，以避免稀釋洗滌液。如要去污作用

更強，可將之加熱至40～50℃（稀鉻酸洗液可以煮沸）。器皿上帶有大量有機質時，不可直接加洗滌液，應盡可能先行清除，再用洗滌液，否則洗滌液會很快失效。用洗滌液洗過的器皿，應立即用水沖洗至無色為止。洗滌液有強腐蝕性，使用時應注意防護，如濺于桌椅上，應立即用水洗并用濕布擦去。皮膚及衣服上沾有洗滌液，應立即用水洗，然后用蘇打（碳酸鈉）水或氨液中和。

（10）注意安全！洗滌前應檢查玻璃器皿是否有裂縫或者缺口。

（11）不論用何種洗滌劑洗滌，最后都要用水沖洗干凈。必要時用蒸餾水沖洗2~3次，用蒸餾水沖洗原則是：“少量多次”。

（12）凡是已洗凈的儀器，不能再用布或紙去擦，以免第二次污染。2吸量管和培養(yǎng)皿的包扎3干熱滅菌干熱滅菌干熱滅菌

使玻璃器皿達到無菌狀態(tài)叫滅菌，通過使用干熱空氣殺滅微生物的方法叫干熱滅菌。一般是把待滅菌的物品包裝就緒后，放入電烘箱中烘烤。

干熱滅菌法常用于空玻璃器皿、金屬器具的滅菌。凡帶有膠皮的物品，液體及固體培養(yǎng)基等都不能用此法滅菌。干熱滅菌一、干熱滅菌的具體方法（1）將包扎好的物品放入干燥烘箱內(nèi)，注意不要擺放太密，以免妨礙空氣流通；不得使器皿與烘箱的內(nèi)層底板直接接觸。（2）接通電源，把箱頂?shù)耐饪谶m當打開，使箱內(nèi)濕空氣能逸出，至箱內(nèi)溫度達到100℃時關閉。

（3）調(diào)節(jié)溫度控制器旋扭，直至箱內(nèi)溫度達到所需溫度為止，觀察溫度是否衡定，若溫度不夠再行調(diào)節(jié)，調(diào)節(jié)完畢后不可再撥動調(diào)節(jié)旋扭和通氣口，保持140~160℃

2~3小時。注意勿使溫度過高，超過170℃，器皿外包裹的紙張、棉花會被烤焦燃燒。如果是為了烤干玻璃器皿，溫度為120℃持續(xù)30分鐘即可。（4）切斷電源，冷卻到60℃時，才能把箱門打開，取出滅菌物品，否則玻璃器皿會因驟冷而爆裂。

（5）將溫度調(diào)節(jié)控制旋扭返回原處，并將箱頂通氣口打開所有空箱，干凈的玻璃器皿及其它耐熱器皿等一般都可用此法滅菌。注意的是用此法滅菌時，絕不能用油、蠟紙包扎物