中國農(nóng)業(yè)大學(xué)分子生物學(xué)復(fù)習(xí)

Part1緒論

分子生物學(xué)復(fù)習(xí)什么是分子生物學(xué)？是一門在分子水平上研究生命現(xiàn)象及其本質(zhì)的學(xué)科。DNA、RNA生命大分子的結(jié)構(gòu)和功能分子生物學(xué)的研究內(nèi)容有哪些？生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能-結(jié)構(gòu)分子生物學(xué)基因的表達調(diào)控-核酸生物學(xué)DNA重組技術(shù)-基因工程基因組結(jié)構(gòu)和功能-生物信息學(xué)Part2染色體與DNA簡述染色體的基本構(gòu)成。DNA：組蛋白：非組蛋白：RNA=1：1：(1-1.5)：0.05（DNA、蛋白質(zhì)、RNA）簡述核小體的結(jié)構(gòu)和基本功能。四種組蛋白(H2AH2BH3H4)2八聚體H1簡述染色體的螺旋化過程。DNA→核小體→螺線管→超螺線管→染色體一個核小體200bpDNA。螺線管的每一螺旋包含6個核小體。根據(jù)染色體在分裂期與間期的染色不同,將染色質(zhì)分為異染色質(zhì)和常染色質(zhì)間期染色深的是異染色質(zhì),染色淺的是常染色質(zhì)。（質(zhì)，即永久性的呈現(xiàn)異固縮的染色質(zhì)。（質(zhì)。DNADNA(dAMPdGMPdCMPdTM3',5'-磷酸二酯鍵連接起來的直線形或環(huán)形多聚體。DNA雙螺旋AT鳥嘌呤G:胞嘧啶CDNADNADNADNA多種類型。其中超螺旋DNATm？影響變性和復(fù)性速度的因素有哪些？熔解溫度：通常將核酸加熱變性過程中，紫外光吸收值達到最大值的50%時的溫度稱為核酸的解鏈溫度。影響因素：①DNA堿基組成（GC多，高）②DNA的均一性③溶液的離子強度（正比）④pH（5-9變化不明顯）DNADNADNADNA小、鹽的濃度。Chargaff。DNADNADNA，無論種屬來源如何，其腺嘌呤摩爾含量與胸腺嘧啶摩爾含量相同爾含量與總的嘧啶摩爾含量相同([A＋G]=[C＋T])。(4DNAA＋T/G＋C8DNA主要序列類型。高度重復(fù)序列（DNA、分散高度重復(fù)序列）中度重復(fù)序列（成簇存在、分散存在）（3）輕度重復(fù)序列（60-65%）反向重復(fù)序列或回文結(jié)構(gòu)9.表觀遺傳學(xué)DNARNA5′3′端(5′→3′)。二級結(jié)構(gòu)：B-DNA（most10.5；A-DNA螺旋，螺體較寬而短；Z-DNA：12(A260/A280)：dsDNA:1.8/pureRNA:2.0/protein:0.5DNARNA260nmWhiteL(連接數(shù))=T(雙鏈盤繞數(shù))+W遷移率：超螺旋DNA>線性DNA>開環(huán)DNA義？半保留復(fù)制：每個子代分子的一條鏈來自親代DNA，另一條鏈則是新合成的這種復(fù)制方式。半不連續(xù)復(fù)制：DNA復(fù)制時，一條鏈?zhǔn)沁B續(xù)的，另一條鏈?zhǔn)遣贿B續(xù)的。DNA穩(wěn)定地傳遞給下一代。DNADNA（腺病毒b單起點雙向（T7噬菌體）雙向：復(fù)制眼c多起點雙向（真核生物）環(huán)狀DNA雙鏈的復(fù)a 型（細菌、病毒）b滾環(huán)型（噬菌體）c（φdD-嚕噗復(fù)制（線粒體、葉綠體DNA親代DNA，復(fù)制模板展露（解旋解鏈酶類）引發(fā)：起始點被識別，引發(fā)體合成引物（復(fù)制起始蛋白、引物酶和引發(fā)體）延伸DNA5’-3’被合成DNA）終止、Tus解旋解鏈酶類：DNA拓撲異構(gòu)酶、解螺旋酶、單鏈DNA結(jié)合蛋白（SSBP）DNA（小結(jié)）E.coli基因組的復(fù)制以雙鏈環(huán)狀DNA分子的形式存在，復(fù)制從起始點oriC開始，以雙等速的方式進行，復(fù)制的中間產(chǎn)物形成θ 形。(1）復(fù)制的起始：涉及雙鏈的解旋和松開，形成兩個方向相反的復(fù)制叉。在拓撲異構(gòu)酶I的作用下解開負超螺旋，在解鏈酶的作用下解開雙鏈，有SSB蛋白穩(wěn)定解開的單鏈。復(fù)制原點oriC的核酸序列被轉(zhuǎn)錄生成短RNA鏈，作為先導(dǎo)鏈起始復(fù)制的引物。(2）復(fù)制的延伸：引物與DNA單鏈結(jié)合，在DNADNA單鏈為模板合成短的單鏈片斷（岡崎片段，然后由DNA連接酶將它們連接起來，形成一條連續(xù)的單鏈。(3)復(fù)制的終止：當(dāng)復(fù)制叉前移遇到重復(fù)性終止子序列（Ter）時，Ter-Tus復(fù)合物阻止復(fù)制叉前移，等到相反方向復(fù)制叉到達時，在拓撲異構(gòu)酶Ⅳ的作用下復(fù)制叉解體，釋放子鏈。簡述端粒酶的作用機制及端粒復(fù)制的生物學(xué)意義。RNAdNTP5’DNA端粒復(fù)制的生物學(xué)意義：維持染色體的完成性，決定細胞的壽命；維持染色體的獨立性，若無端粒，兩個染色體末端很可能融合到一起；解決末端復(fù)制問題，端粒酶能與端粒作用，延伸其長度。名詞解釋：復(fù)制叉：正在發(fā)生復(fù)制的位點。復(fù)制子：染色體上能獨立進行復(fù)制的單位。前導(dǎo)鏈和滯后鏈：前導(dǎo)鏈向前移動而連續(xù)合成，這條鏈叫前導(dǎo)鏈。后隨鏈DNA將它們連接起來，形成一條連續(xù)的單鏈，因此，這條鏈叫后隨鏈。岡崎片段：在DNA復(fù)制時，后隨鏈上不連續(xù)合成的DNA片斷。19.DNAdNTPDNADNA19.相同點不同點

3’→5’校對活性底物成分：親代DNA(dNTP)為底物，多種DNA解鏈酶、單鏈結(jié)合蛋白、引物酶、DNARNADNA連接酶等；過程：分為起始、延伸、終止三個過程；4. 聚合方向：5'→3'；3'，5'磷酸二酯鍵；遵從堿基互補配對規(guī)律；一般為雙向復(fù)制、半保留復(fù)制、半不連續(xù)復(fù)制。θ型（雙向；真核生物染色體復(fù)制：多起點、雙向、線形。線性DNA環(huán)形DNA，具有單一復(fù)制起始位點。DNA復(fù)制只發(fā)生在細胞周期的S連續(xù)開始新的復(fù)制速繁殖的細胞。DNA聚合酶III持分離狀態(tài)。DNA5'-3FEN15'端引物，主要復(fù)制酶為DNAδ，引物由DNAα/I5'-3'外切酶活性。主要復(fù)制酶為DNA聚合酶III，引物由引發(fā)酶合成。DNADNADNAδ的前進動力來自于RF-CPCNA端粒酶多聯(lián)體的形式補齊。調(diào)控31.哪些因素能引起DNA損傷？DNA損傷類型？DNADNA化學(xué)結(jié)構(gòu)或物理結(jié)構(gòu)（射線和化學(xué)試劑)以及細胞自發(fā)產(chǎn)生的基因毒素等干擾作用下發(fā)生改變的現(xiàn)象。因素：物理因素、化學(xué)因素、細胞自發(fā)產(chǎn)生的基因毒素等；DNADNA2．DNA？DNA直接修復(fù)、錯配修復(fù)、切除修復(fù)、重組修復(fù)、SOS修復(fù)生物機體的損傷修復(fù)對生物體有何意義？如果基因損傷不斷積累，當(dāng)達到一定的量，就會使細胞不能正常的新陳代謝，如果基因損傷不斷積累，當(dāng)達到一定的量，就會使細胞不能正常的新陳代謝，DNA因，還可應(yīng)用于環(huán)境致癌因子的檢測。何謂突變？突變與細胞癌變有何關(guān)系？DNA堿基序列與遺傳保守性既相對立又相統(tǒng)一的自然現(xiàn)象。類型：染色體畸變、基因突變（自發(fā)、誘發(fā)）a毒也可引起細胞癌變；b癌基因或是抑癌基因突變才會引起癌變；c基因突變需突變多處，并積累才能引起細胞癌變。DNA損傷和突變的關(guān)系：損傷：DNA在生理條件下的堿基化學(xué)損壞；突變：DNA堿基序列改變損傷不及時修復(fù)會導(dǎo)致基因突變、改變；損傷可以修復(fù)，突變不能修復(fù)，但可以恢復(fù)。引起損傷因素與引起突變因素有重疊。用圖表說明轉(zhuǎn)座的機制。DNA缺口，DNA解釋轉(zhuǎn)座是如何引起玉米粒的花色素斑的。轉(zhuǎn)座子總結(jié)轉(zhuǎn)座子在其末端有反向重復(fù)序列，在插入位點產(chǎn)生短的正向重復(fù)序列。ISP即“切除和粘貼”方式。玉米中有自主轉(zhuǎn)座子和非自主轉(zhuǎn)座子，非自主轉(zhuǎn)座子由自主轉(zhuǎn)座子缺失產(chǎn)生。自主轉(zhuǎn)座子能自己轉(zhuǎn)座，而非自主的轉(zhuǎn)座子的轉(zhuǎn)座需要有自主的轉(zhuǎn)座子提供的transacting果蠅中的PP下發(fā)生轉(zhuǎn)座。Part3RNA轉(zhuǎn)錄比較轉(zhuǎn)錄和復(fù)制的異同。1）(A-U,G-C（2）模板的使用：DNA鏈；（3）合成的方向：5’–3’；都需依賴DNA發(fā)生的部位：細胞核。1）轉(zhuǎn)錄：一條DNA鏈為模板/復(fù)制：兩條鏈都可作模板；轉(zhuǎn)錄時，模板DNA全保留；復(fù)制時模板信息是半保留。RNADNArNTPdNTPTU。特定的基因或一組基因被轉(zhuǎn)錄。RNA聚合酶只有5’→3’聚合作用5’→3’及RNARNADNARNA原核：沒有任何校對功能；能起始新的RNA鏈，無需引物；DNADNA只有全酶才能起始轉(zhuǎn)錄。σ因子真核：相對分子量大除了細胞核RNA聚合酶外，真核生物線粒體和葉綠體中還存在不同的RNA聚合酶。細菌RNAGC域和Urho的終止有一個富含C少Gρ因RNARNAρ因子終止活A(yù)TP提供能量。DNA終止子：轉(zhuǎn)錄終止所必需的DNA序列。RNAtRNAmRNA前體分子的加工主要是真核mRNA，原核的mRNA一般不經(jīng)過加工。RNA(hnRNAmRNA5’3’RNA。RNA，它們的發(fā)現(xiàn)有何意義？核酶是指本質(zhì)為RNA或以RNA為主含有蛋白質(zhì)輔基的一類具有催化功能的物質(zhì)。突破了酶的概念，是一種自體催化。RNA為生命的起源和分子進化提供了新的依據(jù)。1、hnRNA：由DNA轉(zhuǎn)錄生成的原始轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物，即前體mRNA。2、轉(zhuǎn)錄酶、轉(zhuǎn)錄因子3、TATA框：RNA轉(zhuǎn)錄起始，RNA聚合酶結(jié)合部位4、轉(zhuǎn)錄基本過程：識別、起始、延伸、終止。5、σ因子決定轉(zhuǎn)錄的起始，不參與延伸。6、真核生物RNA聚合酶：I型（產(chǎn)物rRNA）II型（mRNA）III型（tRNA）7、RNA全酶包括核心酶和sigma因子，sigma因子保證RNA聚合酶與啟動子DNA的結(jié)合；只有全酶才能起始轉(zhuǎn)錄，核心酶進行RNA延伸。Part4蛋白質(zhì)的合成與轉(zhuǎn)運掌握蛋白質(zhì)生物合成的過程和翻譯后的加工過程；掌握蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)運的不同機制。tRNA簡述蛋白質(zhì)的合成過程。原核生物和真核生物的蛋白質(zhì)合成有何不同？mRNA，mRNA5′3′AtRNAfMet-tRNAfMetMet-tRNAMet；30SmRNAfMet-tRNAfMet50S，40SMet-tRNAMetmRNA60S80S·mRNA·Met-tRNAMet起始復(fù)合物。mRNA5SDmRNAmRNA40SmRNAAUG。mRNAATP蛋白質(zhì)合成的抑制劑及其作用。簡述翻譯運轉(zhuǎn)同步機制。什么是信號肽？信號肽假說的基礎(chǔ)和內(nèi)容是什么？舉例說明翻譯后運轉(zhuǎn)機制。泛素調(diào)節(jié)的蛋白質(zhì)降解機制。終止（無義）密碼子：UAA/UAG/UGA起始密碼子：AUG（真核:甲硫氨酸/原核:甲酰甲硫氨酸）tRNAtRNA接是通過羰基(-COOHtRNA3’2’3’-OH3tRNAAla-tRNAtRNA。tRNAtRNA20tRNAs。tRNAtRNAL-基酸。tRNAtRNAtRNAAA-tRNA第五章原核基因的表達與調(diào)控統(tǒng)和以色氨酸操縱子為代表的負控阻遏系統(tǒng)的基本構(gòu)成、作用規(guī)律和調(diào)控機制。了解其他類型的操縱子調(diào)控機制和作用特征。何為操縱子？根據(jù)操縱子模型說明酶的誘導(dǎo)和阻遏。簡述大腸桿菌半乳糖操縱子模型和調(diào)控機制。簡述大腸桿菌色氨酸操縱子模型和調(diào)控機制。細菌的應(yīng)急反應(yīng)。注意一些成對的基本概念。第六章真核基因的表達與調(diào)控重點：掌握真核基因表達與調(diào)控的一般規(guī)律與特點；掌握真核生物基因表達調(diào)控在不同表達階段的具體作用特征；重要順式作用元件與反式作用因子的基本概念、作用特征及蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能特點；掌握轉(zhuǎn)錄因子活性調(diào)節(jié)的主要方式。/轉(zhuǎn)錄因子的結(jié)構(gòu)特征，各部分的結(jié)構(gòu)特點。DNA結(jié)合域的主要結(jié)構(gòu)特征有哪些，并各舉一例說明。DNAIIDNA結(jié)合域的結(jié)構(gòu)特征。真核生物的