![動(dòng)物狂歡節(jié)及動(dòng)物克隆資料_第1頁(yè)](http://file4.renrendoc.com/view/ac5b7bc20008fdebe192f1898b96d6db/ac5b7bc20008fdebe192f1898b96d6db1.gif)
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![動(dòng)物狂歡節(jié)及動(dòng)物克隆資料_第3頁(yè)](http://file4.renrendoc.com/view/ac5b7bc20008fdebe192f1898b96d6db/ac5b7bc20008fdebe192f1898b96d6db3.gif)
![動(dòng)物狂歡節(jié)及動(dòng)物克隆資料_第4頁(yè)](http://file4.renrendoc.com/view/ac5b7bc20008fdebe192f1898b96d6db/ac5b7bc20008fdebe192f1898b96d6db4.gif)
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音樂(lè)初二教案(2單元)第二單元?jiǎng)游锟駳g節(jié)(第1課時(shí))教學(xué)內(nèi)容:歌曲《小鳥(niǎo),小鳥(niǎo)》,欣賞《動(dòng)物狂歡節(jié)》。教學(xué)目標(biāo):1、啟發(fā)學(xué)生能用輕快活潑的情緒演唱歌曲。2、感受歌曲的情感并完整地表現(xiàn)歌曲。3、引導(dǎo)學(xué)生為歌曲編配伴奏以培養(yǎng)其創(chuàng)造能力。重點(diǎn)與難點(diǎn):1、歌曲:《小鳥(niǎo),小鳥(niǎo)》重點(diǎn):感受歌曲中八分休止符對(duì)于表現(xiàn)歌曲所起的作用,在表現(xiàn)歌曲時(shí)注意情緒的把握,并有感情地演唱歌曲。難點(diǎn):注意解決六度音程大跳的音準(zhǔn)和二部合唱的音準(zhǔn)、聲部的和諧、統(tǒng)一。2、欣賞:《白鳥(niǎo)朝鳳》《動(dòng)物狂歡節(jié)》二胡曲《空山鳥(niǎo)語(yǔ)》引導(dǎo)學(xué)生感受樂(lè)曲所描寫(xiě)的情緒及樂(lè)器音色的聽(tīng)辨。使學(xué)生聽(tīng)辨在一種樂(lè)器上表現(xiàn)的動(dòng)物形象和通過(guò)多種樂(lè)器表現(xiàn)的動(dòng)物形象的異同。教學(xué)準(zhǔn)備:鋼琴、三角鐵、碰鈴、木魚(yú)、豎笛。錄音機(jī)、磁帶、CD機(jī)、光盤(pán)。教學(xué)過(guò)程:1、聽(tīng)錄音。你能感受歌曲所表現(xiàn)的情緒嗎?(教師可引導(dǎo)學(xué)生帶問(wèn)題去欣賞歌曲,以明確欣賞的目的,提高欣賞效果。)2、采用聽(tīng)唱法或時(shí)唱法學(xué)唱歌曲3、解決難點(diǎn)——八分休止符、六度大跳、6/8拍的強(qiáng)弱規(guī)律及其韻律。(可采用對(duì)比法進(jìn)行教學(xué)(重點(diǎn)體驗(yàn)有無(wú)休止附的異同),以利于學(xué)生理解休止符在表現(xiàn)歌曲情緒時(shí)所起的作用。)4、教師啟發(fā)學(xué)生用輕快、活潑的情緒演唱歌曲。5、引導(dǎo)學(xué)生選擇適當(dāng)?shù)拇驌魳?lè)器為歌曲編配伴奏。(可分組討論,討論的結(jié)果可能是多種多樣,在不出現(xiàn)科學(xué)性錯(cuò)誤的情況下教師應(yīng)以激勵(lì)法去評(píng)價(jià)學(xué)生的作品,不要隨意否定學(xué)生。)6、教師引導(dǎo)學(xué)生了解前奏的作用及常用的編配方法。7、欣賞《動(dòng)物狂歡節(jié)》片斷,提問(wèn):你能想象出每段音樂(lè)所描繪的動(dòng)物形象嗎?請(qǐng)你結(jié)合教材種的圖片對(duì)號(hào)入座。通過(guò)欣賞樂(lè)曲提高學(xué)生對(duì)音樂(lè)要素在音樂(lè)表現(xiàn)中的作用的認(rèn)識(shí)。(可以選聽(tīng)“公雞與母雞”的片斷,提問(wèn):你能根據(jù)此段音樂(lè)編一個(gè)故事嗎?以培養(yǎng)學(xué)生的創(chuàng)造力和想象力。)8、全班演奏《青春舞曲》。小結(jié):積極評(píng)價(jià)學(xué)生的創(chuàng)造力和想象力。課后記:在學(xué)吹豎笛方面要多鼓勵(lì)。(第2課時(shí))教學(xué)內(nèi)容:復(fù)習(xí)歌曲《小鳥(niǎo),小鳥(niǎo)》、學(xué)習(xí)二聲部,欣賞樂(lè)曲《蝴蝶》《白鳥(niǎo)朝鳳》《蜻蜓點(diǎn)水》,歌曲《CanYouFeeltheLoveTonight》。教學(xué)目標(biāo):1、能準(zhǔn)確演唱《小鳥(niǎo),小鳥(niǎo)》的合唱部分,達(dá)到和諧統(tǒng)一。2、體驗(yàn)與感受:觀看《動(dòng)物狂歡節(jié)》片段,(1)獅子,模唱主旋律;(2)天鵝,隨音樂(lè)舞蹈,模仿天鵝動(dòng)作。欣賞(《白鳥(niǎo)朝鳳》)《空山鳥(niǎo)語(yǔ)》,感受(嗩吶)二胡的音色特點(diǎn)及豐富的表現(xiàn)力。重點(diǎn)遇難點(diǎn):1、歌曲:《小鳥(niǎo),小鳥(niǎo)》重點(diǎn):感受歌曲中八分休止符對(duì)于表現(xiàn)歌曲所起的作用,在表現(xiàn)歌曲時(shí)注意情緒的把握,并有感情地演唱歌曲。難點(diǎn):注意二部合唱的音準(zhǔn)、聲部的和諧、統(tǒng)一。2、欣賞:(《白鳥(niǎo)朝鳳》)《空山鳥(niǎo)語(yǔ)》《動(dòng)物狂歡節(jié)》引導(dǎo)學(xué)生感受樂(lè)曲所描寫(xiě)的情緒及樂(lè)器音色的聽(tīng)辨。使學(xué)生聽(tīng)辨在一種樂(lè)器上表現(xiàn)的動(dòng)物形象和通過(guò)多種樂(lè)器表現(xiàn)的動(dòng)物形象的異同。3、欣賞:《蝴蝶》《蜻蜓點(diǎn)水》引導(dǎo)學(xué)生想象樂(lè)曲描繪的意境,使學(xué)生了解現(xiàn)代音樂(lè)的一些表現(xiàn)手法。4、欣賞:《CanYouFeeltheLoveTonight》引導(dǎo)學(xué)生感受現(xiàn)代音樂(lè)的音響效果。教學(xué)準(zhǔn)備:鋼琴、三角鐵、碰鈴、木魚(yú)、豎笛。錄音機(jī)、磁帶、CD機(jī)、光盤(pán)。教學(xué)過(guò)程:1、復(fù)習(xí)歌曲《小鳥(niǎo),小鳥(niǎo)》的第一聲部,要求音高準(zhǔn)確,情緒把握正確,演唱時(shí)能達(dá)到盛情并茂。2、學(xué)習(xí)二部合唱部分。(可先分聲部學(xué)習(xí),待兩聲部都能唱準(zhǔn)確后再進(jìn)行合唱,注意聲部和諧、統(tǒng)一。)3、全體同學(xué)完整地表現(xiàn)歌曲(加入打擊樂(lè)器伴奏)。4、欣賞《動(dòng)物狂歡節(jié)》片斷,(1)小鳥(niǎo),欣賞(《白鳥(niǎo)朝鳳》)《空山鳥(niǎo)語(yǔ)》,感受(嗩吶)二胡的音色特點(diǎn)及豐富的表現(xiàn)力。(2)獅子,模唱主旋律;(3)天鵝,隨音樂(lè)舞蹈,模仿天鵝動(dòng)作。5、欣賞《蜻蜓點(diǎn)水》,在欣賞過(guò)程中啟發(fā)學(xué)生想象樂(lè)曲所描繪的意境。(可啟發(fā)學(xué)生根據(jù)樂(lè)曲描繪的景象創(chuàng)作一幅畫(huà)或聽(tīng)音樂(lè)講故事。)6、欣賞《CanYouFeeltheLoveTonight》,先請(qǐng)同學(xué)講述動(dòng)畫(huà)片《獅子王》的故事情節(jié),啟發(fā)學(xué)生體驗(yàn)故事中的不同的動(dòng)物性格,為課后創(chuàng)編英語(yǔ)音樂(lè)劇作準(zhǔn)備。小結(jié):課后記:歌曲二聲部的效果不理想,今后還應(yīng)加強(qiáng)訓(xùn)練。動(dòng)物克隆主要結(jié)構(gòu):四:介紹動(dòng)物克隆研究的歷史(動(dòng)物克隆研究的三個(gè)階段:胚胎細(xì)胞克隆階段、同種體細(xì)胞克隆階段、異種體細(xì)胞克隆階段;其中可以重點(diǎn)找一些比較有名的克隆動(dòng)物進(jìn)行詳細(xì)介紹,比如”克隆羊多莉”等。所提到的克隆動(dòng)物最好都能附上圖片)五:介紹中國(guó)的動(dòng)物克隆技術(shù)研究歷史六:介紹動(dòng)物克隆技術(shù)的方法、環(huán)節(jié)(看能不能找到視頻)七:動(dòng)物克隆技術(shù)存在的問(wèn)題(主要是技術(shù)方面的缺陷)四.動(dòng)物克隆研究的歷史科學(xué)家們很早就開(kāi)始了動(dòng)物克隆的研究。早在1938年,德國(guó)胚胎學(xué)家Spemann即提出“奇異的實(shí)驗(yàn)”的設(shè)想。1952年,英國(guó)科學(xué)家Briggs和King首次報(bào)道了蛙的核移植研究。1962年,英國(guó)劍橋大學(xué)的Gurdon獲得了成年蛙。我國(guó)已故科學(xué)家童第周教授在20世紀(jì)60—70年代曾用囊胚細(xì)胞進(jìn)行魚(yú)類細(xì)胞核移植工作,獲得屬間和種間移核魚(yú),使我國(guó)魚(yú)類核移植研究居世界領(lǐng)先水平。早期的動(dòng)物克隆研究?jī)H限于兩棲類和魚(yú)類,直到20世紀(jì)80年代,核移植克隆技術(shù)才開(kāi)始應(yīng)用于哺乳動(dòng)物。根據(jù)供核細(xì)胞的不同,可將動(dòng)物克隆研究分為三個(gè)階段:1.胚胎細(xì)胞克隆階段1981年,Illmensee和Hoppe報(bào)道了他們用小鼠的正常囊胚或孤雌活化囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)細(xì)胞作為核供體,直接注入去掉雌雄原核的受精卵胞質(zhì)中,重構(gòu)胚體外發(fā)育到桑葚胚或囊胚后移植寄母子宮,獲得克隆小鼠,這是第一次用胚胎細(xì)胞對(duì)哺乳類進(jìn)行核移植獲得成功。1983年,美國(guó)科學(xué)家利用核移植技術(shù)和細(xì)胞融合方法獲得了克隆小鼠。1986年,英國(guó)的Willadsen用綿羊的8—16細(xì)胞階段的胚胎細(xì)胞作為供體進(jìn)行核移植,首次應(yīng)用電融合的方法克隆出一只小羊。此后,科學(xué)家們又相繼克隆出小鼠、綿羊、牛、兔、豬和猴等。我國(guó)科學(xué)家也在20世紀(jì)90年代成功開(kāi)展了胚胎細(xì)胞克隆兔、山羊、小鼠、牛和豬等研究。2.同種體細(xì)胞克隆階段1997年2月,英國(guó)羅斯林研究所Wilmut等人宣布,他們用6歲成年羊的高度分化的乳腺細(xì)胞進(jìn)行了核移植,成功地獲得了克隆羊“多莉”。這是第一次用成年體細(xì)胞作為供核細(xì)胞,由此說(shuō)明高度分化的成年動(dòng)物的體細(xì)胞可在適當(dāng)條件下發(fā)生逆轉(zhuǎn),恢復(fù)全能性,這是生物技術(shù)史上具有劃時(shí)代意義的重大突破,是克隆技術(shù)的一個(gè)里程碑,也改寫(xiě)了部分生物學(xué)的理論。1998年5月,美國(guó)科學(xué)家Robl的研究組利用牛胎兒成纖維細(xì)胞克隆出了3頭牛,而且攜帶了轉(zhuǎn)移的基因。1998年7月,日本科學(xué)家Kato等用牛的輸卵管細(xì)胞克隆出了8頭小牛。1998年7月和1999年6月,美國(guó)夏威夷大學(xué)Yanag2imachi領(lǐng)導(dǎo)的研究小組克隆小鼠成功,并打破了哺乳動(dòng)物克隆研究初期人們認(rèn)為只有雌性動(dòng)物才能被克隆的迷信。此后,同種體細(xì)胞克隆出的山羊、豬、貓和兔也都相繼誕生。1999年和2002年,我國(guó)體細(xì)胞克隆山羊和克隆牛也都獲得成功。3.異種體細(xì)胞克隆階段異種體細(xì)胞克隆與同種體細(xì)胞克隆的差異在于供核體細(xì)胞與受體卵母細(xì)胞來(lái)源于不同的物種。即將一種動(dòng)物的體細(xì)胞核移植到另一種動(dòng)物的去核(遺傳物質(zhì))卵母細(xì)胞中。異種克隆研究面臨著許多問(wèn)題,如體細(xì)胞核能否在異種卵胞質(zhì)中去分化并支持早期發(fā)育?異種核質(zhì)能否相容?異種重構(gòu)胚能否著床并進(jìn)行全程發(fā)育等。1999年,中國(guó)科學(xué)院動(dòng)物研究所生殖生物學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室將成年大熊貓?bào)w細(xì)胞作為供核體細(xì)胞移植到去核(遺傳物質(zhì))的日本大耳白兔卵母細(xì)胞中,成功地構(gòu)建出異種重構(gòu)胚,體外培養(yǎng)獲得孵化囊胚。2001年將重構(gòu)胚移植寄母子宮,獲得了著床的重大進(jìn)展。1999年,美國(guó)Wisconsin2Madison大學(xué)以來(lái)自綿羊、豬、猴和大鼠的皮膚成纖維細(xì)胞做為供核體細(xì)胞,移植到去核(遺傳物質(zhì))牛卵母細(xì)胞中獲成功,表明牛的卵母細(xì)胞質(zhì)可以支持來(lái)自不同物種的細(xì)胞核進(jìn)行早期發(fā)育;2000年,Lanza等人從死亡的瀕危牛上取材并培養(yǎng)了皮膚成纖維細(xì)胞做為供核體細(xì)胞,重構(gòu)胚移植后,受體最長(zhǎng)懷孕至202天流產(chǎn),微衛(wèi)星技術(shù)分析證明,所有克隆牛胎兒的基因型均與供體細(xì)胞一致;2001年,NatureBiotechnolo2gy上報(bào)道了異種體細(xì)胞克隆瀕危哺乳動(dòng)物———?dú)W洲盤(pán)羊的成功,為瀕危動(dòng)物的保護(hù)提供了重要的借鑒[5]。隨著體細(xì)胞克隆技術(shù)的發(fā)展,它與人類生產(chǎn)和生活的關(guān)系也就愈發(fā)密切,不同研究領(lǐng)域的科研人員都認(rèn)識(shí)到克隆技術(shù)在不同領(lǐng)域的應(yīng)用前景。1996年第一只成年體細(xì)胞克隆羊“多利”誕生1997年一頭用胎盤(pán)克隆而成的荷蘭牛亮相。1998年兩頭由母牛細(xì)胞克隆而成的小牛在東京出生。一個(gè)國(guó)際研究小組宣布克隆出了三代實(shí)驗(yàn)鼠2000年曾參與克隆“多利”羊的英國(guó)公司培育了第一批克隆豬2001年一頭稀有品種的克隆亞洲牛誕生,兩天后死亡。2002年法國(guó)研究人員克隆出兔子。2003年美國(guó)科學(xué)家推出了一匹克隆騾。愛(ài)荷華州的研究人員稱他們克隆出了一頭瀕臨滅絕的爪哇野牛。2004年美國(guó)加利福尼亞的一家公司培育出了第一只克隆貓。這只貓后來(lái)為第一只被賣(mài)出的克隆寵物。2005年韓國(guó)科學(xué)家宣布他們培育出了首條克隆狗叫“斯納皮”克隆羊多莉1996年7月5日,英國(guó)愛(ài)丁堡羅斯林研究所(Roslin)的伊恩·維爾穆特(Wilmut)領(lǐng)導(dǎo)的一個(gè)科研小組,利用克隆技術(shù)培育出一只小母羊。這是世界上第一只用已經(jīng)分化的成熟的體細(xì)胞(乳腺細(xì)胞)克隆出的羊。克隆羊多利的誕生,引發(fā)了世界范圍內(nèi)關(guān)于動(dòng)物克隆技術(shù)的熱烈爭(zhēng)論。是科學(xué)界克隆成就的一大飛躍。它還被美國(guó)《科學(xué)》雜志評(píng)為1997年世界十大科技進(jìn)步的第一項(xiàng),也是當(dāng)年最引人注目的國(guó)際新聞之一。科學(xué)家們普遍認(rèn)為,多莉的誕生標(biāo)志著生物技術(shù)新時(shí)代來(lái)臨。繼多莉出現(xiàn)后,克隆,這個(gè)以前只在科學(xué)研究領(lǐng)域出現(xiàn)的術(shù)語(yǔ)變得廣為人知。克隆豬、克隆猴、克隆?!娂妴?wèn)世,似乎一夜之間,克隆時(shí)代已來(lái)到人們眼前。其整個(gè)克隆過(guò)程簡(jiǎn)述如下:步驟一從一只6歲芬蘭多塞特白面母綿羊(姑且稱為A)的乳腺中取出乳腺細(xì)胞,將其放入低濃度的營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)液中,細(xì)胞逐漸停止分裂,此細(xì)胞稱之為“供體細(xì)胞”;步驟二從一頭蘇格蘭黑面母綿羊(B)的卵巢中取出未受精的卵細(xì)胞,并立即將細(xì)胞核除去,留下一個(gè)無(wú)核的卵細(xì)胞,此細(xì)胞稱之為“受體細(xì)胞”;步驟三利用電脈沖方法,使供體細(xì)胞和受體細(xì)胞融合,最后形成“融合細(xì)胞”。電脈沖可以產(chǎn)生類似于自然受精過(guò)程中的一系列反應(yīng),使融合細(xì)胞也能像受精卵一樣進(jìn)行細(xì)胞分裂、分化,從而形成“胚胎細(xì)胞”;步驟四將胚胎細(xì)胞轉(zhuǎn)移到另一只蘇格蘭黑面母綿羊(C)的子宮內(nèi),胚胎細(xì)胞進(jìn)一步分化和發(fā)育,最后形成小綿羊--多莉總之,多利有3個(gè)母親:它的“基因母親”是芬蘭多塞特白面母綿羊(A);科學(xué)家取這頭綿羊的乳腺細(xì)胞,將其細(xì)胞核移植到第二個(gè)母親(借卵母親)--一個(gè)剔除細(xì)胞核的蘇格蘭黑臉羊(B)的卵子中,使之融合、分裂、發(fā)育成胚胎;然后移植到第三頭羊(C)--“代孕母親”子宮內(nèi)發(fā)育形成多莉。從理論上講,多莉繼承了提供體細(xì)胞的那只綿羊(A)的遺傳特征,它是一只白臉羊,而不是黑臉羊。分子生物學(xué)的測(cè)定也表明,它與提供細(xì)胞核的那頭羊,有完全相同的遺傳物質(zhì)(確切地說(shuō),是完全相同的細(xì)胞核遺傳物質(zhì)。還有極少量的遺傳物質(zhì)存在于細(xì)胞質(zhì)的線粒體中,遺傳自提供卵母細(xì)胞的受體),它們就像是一對(duì)隔了6年的雙胞胎。多利沒(méi)有父親,它是通過(guò)無(wú)性繁殖--或者說(shuō)克隆而來(lái)。豬堅(jiān)強(qiáng)5?12”汶川地震后,“豬堅(jiān)強(qiáng)”在被掩埋的極端環(huán)境里存活了36天,創(chuàng)造了汶川地震中的生命奇跡,象征了汶川地震中的堅(jiān)強(qiáng)精神。獲救后,“豬堅(jiān)強(qiáng)”很快恢復(fù)了健康。但不幸的是,現(xiàn)年5歲的“豬堅(jiān)強(qiáng)”地震后完全喪失了生育能力。為了延續(xù)“豬堅(jiān)強(qiáng)”的優(yōu)質(zhì)遺傳基因,2011年2月16日,華大基因?qū)Α柏i堅(jiān)強(qiáng)”開(kāi)展耐受性相關(guān)分子機(jī)制及健康檢查研究,獲取其耳組織帶回華大基因。科研人員將采集組織培養(yǎng)出成纖維細(xì)胞,并采用手工克隆技術(shù)將其體細(xì)胞進(jìn)行胚胎克隆,在汶川地震3周年之日即2011年5月12日將克隆胚胎移植入兩頭健康的代孕母豬受體內(nèi)。經(jīng)過(guò)110天的體內(nèi)胚胎發(fā)育,代孕母豬于8月31日成功生產(chǎn)出“豬堅(jiān)強(qiáng)”的復(fù)制個(gè)體“小豬堅(jiān)強(qiáng)”。此次克隆“豬堅(jiān)強(qiáng)”是首次采用老齡豬體細(xì)胞克隆獲得成功的事例,也是華大基因手工克隆的一次技術(shù)突破,同時(shí)展現(xiàn)了華大基因在動(dòng)物克隆領(lǐng)域走在了國(guó)際前沿的技術(shù)實(shí)力。此前,無(wú)論是傳統(tǒng)克隆還是手工克隆,所采用的體細(xì)胞主要是胎兒成纖維細(xì)胞,這是首次應(yīng)用5歲老齡豬體細(xì)胞克隆獲得成功。五.介紹中國(guó)的動(dòng)物克隆技術(shù)研究歷史六.動(dòng)物克隆的方法、環(huán)節(jié)目前看比較現(xiàn)實(shí)可行的生產(chǎn)哺乳動(dòng)物克隆的方法主要有胚胎分割和細(xì)胞核移植兩種。胚胎分割是把發(fā)育不同時(shí)期腳臺(tái)經(jīng)顯微手術(shù)切割成幾半。每半分別移植,出生多胞胎動(dòng)物的過(guò)程。把一細(xì)胞至囊胚階段胚胎一分為二都可形成兩個(gè)胚胎。在綿羊、豬和牛經(jīng)胚胎分割都已生出同卵雙胞胎后代。在牛目前胚胎分割已廣泛應(yīng)用半胚移植妊娠率接近整胚。使產(chǎn)犢數(shù)幾乎加倍。然而,經(jīng)胚胎分割生的遺傳相同個(gè)體數(shù)有限一般為兩個(gè),最多不四個(gè)。細(xì)胞核移植是指將發(fā)育不同時(shí)期胚胎或成體動(dòng)物細(xì)胞核經(jīng)顯微手術(shù)和細(xì)胞融合的方法移植到去核卵母細(xì)胞中重新組成胚胎并使之發(fā)育到產(chǎn)仔的過(guò)程。與胚胎分割技術(shù)不同。細(xì)胞核移植技術(shù),特別是細(xì)胞核連續(xù)移植技術(shù)所能夠產(chǎn)生的遺傳相同個(gè)體數(shù)目是無(wú)限的。例如,把奶牛的16一細(xì)胞期胚胎的16個(gè)細(xì)胞核,分別移植到16個(gè)去核的肉牛卵母細(xì)胞中重新組成16個(gè)胚胎。再把這16個(gè)移核胚胎移植到中間受體動(dòng)物,羊或兔輸卵管內(nèi)。發(fā)育到可進(jìn)行非手術(shù)移植階段,(桑堪胚或囊胚期)取出并移植到肉牛受體的子宮內(nèi)。妊娠后便可產(chǎn)生出數(shù)頭遺傳上完全相同的(克隆)奶牛犢。所出生的這些移核牛之所以遺傳上完全相同,是因?yàn)槠浼?xì)胞核都來(lái)源于同一個(gè)胚胎。如果自中間受體動(dòng)物輸卵管內(nèi)取出移核囊胚或桑堪胚后不移植到終末受體肉牛的子宮內(nèi),而是取其卵裂球細(xì)胞核再移植到多個(gè)去核的肉牛卵母細(xì)胞中便重新組成了第二代移核胚胎。待第二代移核胚胎發(fā)育到囊胚或桑樁胚期時(shí),又可取其核進(jìn)行移植。做成第三代移核胚胎、此過(guò)程可以無(wú)限期地進(jìn)行下去,不斷擴(kuò)增克隆胚胎的數(shù)目最終產(chǎn)生出許許多多的遺傳上完全相同的動(dòng)物來(lái)。此即所謂的細(xì)胞核連續(xù)移植技術(shù)。胚胎分割的基本過(guò)程胚胎移入培養(yǎng)液 分割胚胎(機(jī)械法、酶處理)移植胚胎給受體著床產(chǎn)仔動(dòng)物核移植技術(shù)程序胚胎細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植體細(xì)胞核移植七.動(dòng)物克隆技術(shù)存在的問(wèn)題1.克隆效率太低,克隆動(dòng)物早衰嚴(yán)重克隆動(dòng)物健康問(wèn)題很多,世界各地的克隆動(dòng)物流產(chǎn)、夭折、畸形現(xiàn)象都非常嚴(yán)重。核移植總體效率低,一般僅為1%~6%。這可能與供體核移入受體胞質(zhì)后的重塑有關(guān)。供體核發(fā)生去甲基化、去乙?;榷喾N變化,在核重塑過(guò)程中基因表達(dá)異常都可能導(dǎo)致克隆效率降低。這說(shuō)明應(yīng)進(jìn)一步明確供核基因組的甲基化和乙?;c核移植胚胎發(fā)育的作用機(jī)制??寺?dòng)物效率低與核移植胚胎細(xì)胞內(nèi)的染色體異常、胚胎細(xì)胞凋亡、胚胎早期死亡、流產(chǎn)、胎盤(pán)發(fā)育異常有關(guān)。重組胚胎的形態(tài)、發(fā)育潛能與胚胎細(xì)胞凋亡,囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)之間,內(nèi)細(xì)胞團(tuán)同滋養(yǎng)層細(xì)胞之間的關(guān)系與細(xì)胞數(shù)量的比例之間關(guān)系及發(fā)育機(jī)制需進(jìn)一步深入研究。染色體異常與核移植胚胎的妊娠失敗和克隆動(dòng)物的先天性畸形之間的關(guān)系尚不清楚。克隆動(dòng)物早衰、存活率低現(xiàn)象是當(dāng)今核移植技術(shù)的最大缺陷。而以成年體細(xì)胞核作核供體問(wèn)題尤為嚴(yán)重。它突出表現(xiàn)為:孕期流產(chǎn)率高,圍產(chǎn)期死亡率高,新生仔畜體重較重及出生后對(duì)環(huán)境適應(yīng)性較差,出生后發(fā)病率高和畸形率高。這可能與核移植技術(shù)程序有關(guān),對(duì)細(xì)胞膜和細(xì)胞超顯微結(jié)構(gòu)產(chǎn)生了機(jī)械和電擊損傷以及一些物質(zhì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生的化學(xué)毒害作用,這些機(jī)理需進(jìn)一步研究。2.端粒問(wèn)題在正常生理?xiàng)l件下的體細(xì)胞隨著分裂次數(shù)的增加,端粒會(huì)逐漸縮短。克隆羊“多莉”細(xì)胞端粒較短,可能影響其壽命。據(jù)Shiels等報(bào)道克隆羊端粒較同年羊的短。Tian等報(bào)道以牛胎兒成纖維細(xì)胞作供體的核移植后代端粒比對(duì)照組長(zhǎng)。Miyashita等報(bào)道克隆個(gè)體間端粒長(zhǎng)度差異顯著。Xu等的研究表明克隆動(dòng)物端粒長(zhǎng)度可以恢復(fù)。Lanza等報(bào)道體細(xì)胞克隆牛實(shí)驗(yàn)過(guò)程逆轉(zhuǎn)了供體母牛體細(xì)胞的老化,端粒長(zhǎng)度反而增加,克隆牛壽命延長(zhǎng)。Kubota等指出,克隆胚胎流產(chǎn)不是端粒長(zhǎng)短造成的。這一系列的研究結(jié)果表明,克隆后代端粒長(zhǎng)度有差別。端粒長(zhǎng)度可能不是造成克隆動(dòng)物高死亡率的原因。在胚胎發(fā)育過(guò)程中的端粒機(jī)制還有待進(jìn)一步深入研究。3.重新編程的問(wèn)題重新編程的機(jī)制不明,缺乏基礎(chǔ)理論支撐。有些學(xué)者認(rèn)為卵母細(xì)胞內(nèi)有重編程因子存在,也有學(xué)者認(rèn)為,MPF和有絲分裂原激活蛋白激酶的活性與重編程沒(méi)有直接調(diào)控關(guān)系。重編程程度尚不足以支持著床后胚胎的
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