風(fēng)濕性疾病自身抗體課件

自身抗體檢測的意義診斷與鑒別診斷病情活動性評估和監(jiān)測協(xié)助轉(zhuǎn)歸和預(yù)后的評判預(yù)警自身抗體是指抗自身細(xì)胞內(nèi)，細(xì)胞表面和外抗原的免疫球蛋白ANA抗體譜自身免疫性肝病抗體譜ANCA磷脂抗體譜RA抗體譜抗核抗體ANA概念：抗核酸和核蛋白抗體的總稱細(xì)胞核內(nèi)和細(xì)胞漿內(nèi)成分檢測底物人喉癌上皮細(xì)胞(Hep-2)鼠肝、鼠腎（大/小鼠組織不含SSA/RO抗原）

熒光顯微鏡下ANA的染色型別均質(zhì)型（Homogeneous）H抗組蛋白、抗dsDNA、ANuA斑點型（Speckle）S與抗ENA有關(guān)核膜型（Membranous）M抗dsDNA、抗gp210核仁型（Nucleolar）N抗Scl70、抗RNA聚合酶著絲點型（Centromere）CACA胞漿型：AMA、抗Jo-1、抗rRNP、抗SSA抗dsDNA抗rRNPAMARNA多聚酶/抗Scl-70板層素抗體Gp210抗體抗Jo-1抗SSAHMSNIIF法原理抗β2-糖蛋白1抗體（aβ2-GP1）1957年，在BFP（+）SLE患者血漿中發(fā)現(xiàn)：狼瘡抗凝物（LA）在SS和自身免疫性肝病中也可存在通過糾正試驗確診：若有LA，缺乏血小板正常血清不能糾正凝血時間，只有加入過量磷脂或血小板溶解物后，延長的APTT可被糾正。與SLE中樞神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)相關(guān)敏感性：ACL＞aβ2-GP1——BruceIN,etal.在多種自身免疫性結(jié)締組織病（如SLE、SS、RA、SSC)中出現(xiàn)對SLE的特異性>98%與壞死性新月體腎小球腎炎NGGN相關(guān)，且與疾病活動度相關(guān)一種IgG/IgM型免疫球蛋白，作用于凝血酶原復(fù)合物，影響凝血反應(yīng)，阻斷活化的凝血因子V與凝血酶原作用，抑制纖維蛋白的形成，致使凝血時間延長?！翱鼓冈贵w”更為適宜。這里要排除其他原因引起的凝血異常，如肝素、Ⅷ因子復(fù)合物等。對SLE的特異性>98%核仁型（Nucleolar）NCREST(軟組織鈣化,雷諾現(xiàn)象,食道功能障礙,指端硬化,毛細(xì)血管擴張)綜合征80%陽性抗原是組氨酰tRNA合成酶與肺間質(zhì)病有關(guān)--抗Scl-70陽性SD病人,發(fā)生肺間質(zhì)病變的危險性較抗Scl-70陰性的SD病人增加10倍，陽性者易出現(xiàn)皮膚硬化快速進展冷球蛋白血癥、SS可出現(xiàn)RF高滴度陽性自身抗體是指抗自身細(xì)胞內(nèi)，細(xì)胞表面和免疫印跡法抗RNP抗體抗核內(nèi)的核糖核蛋白高滴度抗RNP抗體是MCTD的特異性抗體25~30%SLE出現(xiàn)抗RNP陽性與雙手腫脹,雷諾現(xiàn)象,肌炎和指(趾)端硬化和肺動脈高壓相關(guān)73、32、17.5KD抗Sm抗體抗原：核內(nèi)小核糖核蛋白，其抗原決定簇主要在與U1、U2、U5、U4/6RNA連接的B和D蛋白多肽上28/29/13.5三條帶同時出現(xiàn)時有意義,V型LN若抗Sm抗體陽性，抗U1RNP往往也陽性抗RNP抗體陽性常出現(xiàn)抗Sm抗體28/29KDSLE中陽性率：30%左右，SLE的標(biāo)記抗體，幾乎只出現(xiàn)于SLE與疾病活動度不相關(guān)抗SSA、SSB抗體抗SSA多在胞漿中，52KD與SS相關(guān)，60KD與SLE相關(guān)抗SSA在SLE中陽性率40%，抗SSB在SLE中陽性率10-15%抗SSB陽性，抗SSA往往也陽性母親抗SSA和抗SSB抗體陽性——新生兒狼瘡及嬰兒心臟傳導(dǎo)阻滯常與亞急性皮膚型狼瘡（環(huán)形紅斑，丘疹鱗屑）、平滑肌受累、光過敏、血管炎、皮損、紫癜、淋巴結(jié)腫大、高球/RF↑、NS損傷、WBC減少有關(guān)抗DNA抗ssDNA抗體：針對嘌呤和嘧啶堿基，在多種疾病中及正常人血清中存在，無特異性抗dsDNA抗體：針對脫氧核糖核酸骨架，對SLE有較高的特異性抗dsDNA陽性者85%5年內(nèi)發(fā)展為SLE抗dsDNA與疾病活動度相關(guān)抗dsDNA與LN相關(guān)抗組蛋白抗體AHA組蛋白是染色質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)核小體的重要組成部分，包括H1，H2A，H2B，H3，H4在多種自身免疫性結(jié)締組織?。ㄈ鏢LE、SS、RA、SSC)中出現(xiàn)藥物性狼瘡中陽性率達(dá)95%.不同藥物所致的抗組蛋白的亞單位抗體不同抗Scl-70抗體抗原：DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶1硬皮?。⊿Sc）中抗Scl-70陽性率40%左右，為SSc的標(biāo)記抗體，提示彌漫性SSc與肺間質(zhì)病有關(guān)--抗Scl-70陽性SD病人,發(fā)生肺間質(zhì)病變的危險性較抗Scl-70陰性的SD病人增加10倍，陽性者易出現(xiàn)皮膚硬化快速進展ACA（抗著絲點抗體）抗原為CENP-A、B、CCREST(軟組織鈣化,雷諾現(xiàn)象,食道功能障礙,指端硬化,毛細(xì)血管擴張)綜合征80%陽性（Calcinosis/Raynaud’sphenomenon/Esophagealysmotility/Sclerodactyly/Telangiectasia）在SS和自身免疫性肝病中也可存在PBC中陽性率53.5%，陽性者易出現(xiàn)門脈高壓和消化道出血ACA陽性的SS更易出現(xiàn)淋巴瘤，高球少，RP多抗rRNP抗體抗原：核糖體60s亞基P0，P1，P2磷酸化蛋白，主要位于胞漿與SLE中樞神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)相關(guān)對SLE高度特異，出現(xiàn)于10~15%的SLE抗Jo-1抗體抗原是組氨酰tRNA合成酶PM/DM的標(biāo)記抗體PM/DM病人中25~35%陽性，合并肺間質(zhì)病變的PM/DM病人中高達(dá)60~70%陽性抗合成酶抗體綜合征：急性發(fā)熱,對稱性關(guān)節(jié)炎,技工手,雷諾現(xiàn)象,肌炎及肺間質(zhì)病變ANuA（抗核小體抗體）對SLE的特異性>98%可見于藥物性狼瘡早期SLE、非活動期SLE檢出率高于抗dsDNA201907年，先天性梅毒胎兒的肝臟提取物作為抗原檢測梅毒抗體1941年，發(fā)現(xiàn)心磷脂及抗心磷脂抗體（ACL）“梅毒血清反應(yīng)生物學(xué)假陽性（BFP-STS）”1950年，慢性BFP人群自身免疫病發(fā)生率高1957年，在BFP（+）SLE患者血漿中發(fā)現(xiàn)：狼瘡抗凝物（LA）后證明其是一種免疫球蛋白：靶向前凝血酶活性復(fù)合物中磷脂1983年，LA能與其他帶負(fù)電荷的磷脂結(jié)合，稱之為抗磷脂抗體（APL）1986年，Hughes命名：與之有關(guān)的疾病則稱為抗磷脂綜合征（APS）1990年，APS患者的ACL識別血漿中的一種磷脂結(jié)合蛋白…β2-GPⅠ在SLE和APS中，β2-GPI可顯著增加ACL和心磷脂的結(jié)合強度1999年，第八屆APL國際研討會會后發(fā)表了APS的初步診斷標(biāo)準(zhǔn)(札幌標(biāo)準(zhǔn))2006年，悉尼國際血栓止血學(xué)會（ISTH）會議修訂了APS分類診斷標(biāo)準(zhǔn)抗磷脂抗體認(rèn)識過程21一組針對各種帶負(fù)電荷磷脂（結(jié)合蛋白）的自身抗體，作用于磷脂結(jié)合蛋白如β2-糖蛋白1、凝血酶原、蛋白C、蛋白S、錨定蛋白等而產(chǎn)生病理反應(yīng)。APL主要包括狼瘡抗凝物（LA）抗心磷脂抗體（ACL）梅毒血清試驗假陽性（RPR+，TPPA確證陰性）

抗β2-GPI抗體（aβ2-GPI）抗磷脂抗體1983年，LA能與其他帶負(fù)電荷的磷脂結(jié)合，稱之為抗磷脂抗體（APL）一種IgG/IgM型免疫球蛋白，作用于凝血酶原復(fù)合物，影響凝血反應(yīng)，阻斷活化的凝血因子V與凝血酶原作用，抑制纖維蛋白的形成，致使凝血時間延長。但是先天性缺乏β2-GP1并不會導(dǎo)致嚴(yán)重的血栓或出血性疾??；敏感性25%，特異性80%，與RA關(guān)節(jié)外受累相關(guān)與肺間質(zhì)病有關(guān)--抗Scl-70陽性SD病人,發(fā)生肺間質(zhì)病變的危險性較抗Scl-70陰性的SD病人增加10倍，陽性者易出現(xiàn)皮膚硬化快速進展Atherosclerosis,2000,152(2):337-346稀釋蛇毒凝血時間(dRVVT)稀釋凝血酶原時間(dPT)以中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞胞漿成分為靶抗原篩選試驗：證實有磷脂依賴的凝血時間延長Atherosclerosis,2000,152(2):337-346P-ANCA（核周型）：主要抗原MPO2000,27:2833-7.——PierangeliSS,HarrisEN．ClinChimActa,2005,357:l7-33.6%）和特異性（96.核仁型（Nucleolar）N抗核周因子-(APF)1957年，在BFP（+）SLE患者血漿中發(fā)現(xiàn)：狼瘡抗凝物（LA）自身抗體是指抗自身細(xì)胞內(nèi)，細(xì)胞表面和2004,144(3):141-147在APS患者中，同一亞型（IgG、M、A）aβ2-GP1與ACL水平顯著相關(guān)2006年，悉尼國際血栓止血學(xué)會（ISTH）會議修訂了APS分類診斷標(biāo)準(zhǔn)22最先發(fā)現(xiàn)的抗磷脂自身抗體之一，和血小板減少有明顯相關(guān)性，ACL陽性者，血小板減少3倍于ACL陰性者。習(xí)慣性流產(chǎn)與IgG型ACL關(guān)系密切，并可能和抗體的滴定度有關(guān)。檢測方法：ELISA無金標(biāo)準(zhǔn)以混合磷脂作為抗原進行包被，特異性較好采用半定量方式表示檢測結(jié)果可提高室間質(zhì)控水平兩種類型：ACLIg類型與血栓形成常見疾病β2-GP1依賴高滴度IgG型密切相關(guān)自身免疫病、APS非β2-GP1依賴低滴度IgM型不引起血栓梅毒、AIDS等感染性疾病抗心磷脂抗體（ACL）23β2-GP1由肝細(xì)胞合成，又稱apoH，5個功能區(qū)；通過多種途徑參與凝血和纖溶系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，被認(rèn)為是一種天然的抗凝劑；但是先天性缺乏β2-GP1并不會導(dǎo)致嚴(yán)重的血栓或出血性疾?。籝asudaS,etal.Atherosclerosis,2000,152(2):337-346β2-GP1抗體與APS的血栓形成密切相關(guān)，具體機制：可與β2-GP1、氧化型LDL結(jié)合，抑制其抗凝作用可誘導(dǎo)β2-GP1二聚體化，引起細(xì)胞表面膜聯(lián)蛋白II交聯(lián)，促進β2-GP1與細(xì)胞膜表面磷脂的穩(wěn)定結(jié)合，進一步活化內(nèi)皮細(xì)胞二聚化后的β2-GP1可與血小板結(jié)合，活化血小板β2GP1與磷脂結(jié)合，改變表面結(jié)構(gòu)，暴露抗原決定簇，介導(dǎo)抗磷脂抗體結(jié)合到膜磷脂。β2GP1是必需的輔助因子，檢測抗β2GP1可能比ACL更有意義?？功?-糖蛋白1抗體（aβ2-GP1）24檢測方法：ELISA，靈敏度5ng/ml在APS患者中，同一亞型（IgG、M、A）aβ2-GP1與ACL水平顯著相關(guān)對APS診斷而言，aβ2-GP1特異性最高：敏感性：ACL＞aβ2-GP1特異性：aβ2-GP1＞ACL和LA亞型研究顯示無論是aβ2-GP1，還是ACL，都是IgG亞型占有主導(dǎo)地位。

——SarmarcoM,etal.JLabClinMed.2004,144(3):141-14720％SLE患者LA和ACL陰性，而aβ2-GP1陽性——BruceIN,etal.JRheumatol.2000,27:2833-7.約10％APS患者僅aβ2-GP1陽性——PierangeliSS,HarrisEN．ClinChimActa,2005,357:l7-33.抗β2-糖蛋白1抗體（aβ2-GP1）25一種IgG/IgM型免疫球蛋白，作用于凝血酶原復(fù)合物，影響凝血反應(yīng)，阻斷活化的凝血因子V與凝血酶原作用，抑制纖維蛋白的形成，致使凝血時間延長?！翱鼓冈贵w”更為適宜。篩選試驗：證實有磷脂依賴的凝血時間延長活化部分凝血酶原時間(APTT)白陶土凝血時間(KCT)稀釋蛇毒凝血時間(dRVVT)稀釋凝血酶原時間(dPT)通過糾正試驗確診：若有LA，缺乏血小板正常血清不能糾正凝血時間，只有加入過量磷脂或血小板溶解物后，延長的APTT可被糾正。這里要排除其他原因引起的凝血異常，如肝素、Ⅷ因子復(fù)合物等。狼瘡抗凝物L(fēng)AANCA以中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞胞漿成分為靶抗原靶抗原：PR3，MPO、乳鐵蛋白酶、彈性蛋白酶、組織蛋白酶、殺菌/通透性蛋白C-ANCA（胞漿型）：主要抗原PR3P-ANCA（核周型）：主要抗原MPOP-ANCAC-ANCApANCA（核周型）pANCA≠MPOANCA可見于MPA（60%-80%），GPA，EGPA，IBD，PSC、PAN、SLE、RA、SS與壞死性新月體腎小球腎炎NGGN相關(guān)，且與疾病活動度相關(guān)核仁型（Nucleolar）N可見于MPA（60%-80%），GPA，EGPA，IBD，PSC、PAN、SLE、RA、SS與肺間質(zhì)病有關(guān)--抗Scl-70陽性SD病人,發(fā)生肺間質(zhì)病變的危險性較抗Scl-70陰性的SD病人增加10倍，陽性者易出現(xiàn)皮膚硬化快速進展ACA（抗著絲點抗體）1957年，在BFP（+）SLE患者血漿中發(fā)現(xiàn)：狼瘡抗凝物（LA）JLabClinMed.胞漿型：AMA、抗Jo-1、抗rRNP、抗SSA抗SSA多在胞漿中，52KD與SS相關(guān)，60KD與SLE相關(guān)——PierangeliSS,HarrisEN．ClinChimActa,2005,357:l7-33.與SLE中樞神經(jīng)系統(tǒng)表現(xiàn)相關(guān)抗dsDNA與疾病活動度相關(guān)1983年，LA能與其他帶負(fù)電荷的磷脂結(jié)合，稱之為抗磷脂抗體（APL）與肺間質(zhì)病有關(guān)--抗Scl-70陽性SD病人,發(fā)生肺間質(zhì)病變的危險性較抗Scl-70陰性的SD病人增加10倍，陽性者易出現(xiàn)皮膚硬化快速進展對SLE高度特異，出現(xiàn)于10~15%的SLE抗GPI(葡萄糖-6-磷酸異構(gòu)酶)2004,144(3):141-147類風(fēng)濕因子

（RheumatoidFactor）少數(shù)MPA、EGPA、PAN等也可陽性活化部分凝血酶原時間(APTT)白陶土凝血時間(KCT)檢測方法：ELISA，靈敏度5ng/mlcANCA（胞漿型）cANCA≠PR3ANCAGPA中特異性高，與疾病活動性平行少數(shù)MPA、EGPA、PAN等也可陽性類風(fēng)濕因子

（RheumatoidFactor）靶抗原為IgG的FC片段，是抗IgG的抗體與疾病活動性有關(guān)陽性不足以診斷RA，陰性不能除外RA多種結(jié)締組織病（SLE，SD，SS，PM/DM）、感染疾病（TB，hepatitis）、肝硬化、結(jié)節(jié)病、淋巴瘤等均可陽性，正常人2%陽性，老年人可達(dá)5%陽性冷球蛋白血癥、SS可出現(xiàn)RF高滴度陽性病后半年才產(chǎn)生，有關(guān)節(jié)外表現(xiàn)者滴度高。持續(xù)高滴度RF預(yù)示疾病嚴(yán)重，骨侵蝕發(fā)生率高，預(yù)后差抗核周因子-(APF)對RA診斷的敏感性35%，特異性高達(dá)91%RF陰性者40%陽性APF與疾病嚴(yán)重程度、關(guān)節(jié)外表現(xiàn)及放射學(xué)進展相關(guān)，提示預(yù)后欠佳抗角蛋白抗體-（AKA）對RA診斷的敏感性32-44.13%、特異性89-90%RF陰性者34%陽性與RA的病情嚴(yán)重程度相關(guān),提示預(yù)后不良抗環(huán)瓜氨酸多肽(CCP)抗體對RA診斷具有高度敏感性（46.6%）和特異性（96.6%）可以在關(guān)節(jié)炎早期出現(xiàn),與嚴(yán)重的骨關(guān)節(jié)破壞相關(guān)與APF、AKA以及HLA-DR4之間有相關(guān)性,與RF之間無相關(guān)性——SarmarcoM,etal.Atherosclerosis,2000,152(2):337-346一種IgG/IgM型免疫球蛋白，作用于凝血酶原復(fù)合物，影響凝血反應(yīng)，阻斷活化的凝血因子V與凝血酶原作用，抑制纖維蛋白的形成，致使凝血時間延長。（Calcinosis/Raynaud’sphenomenon/Esophagealysmotility/Sclerodactyly/Telangiectasia）細(xì)胞核內(nèi)和細(xì)胞漿內(nèi)成分藥物性狼瘡中陽性率達(dá)95%.2000,27:2833-7.一種IgG/IgM型免疫球蛋白，作用于凝血酶原復(fù)合物，影響凝血反應(yīng)，阻斷活化的凝血因子V與凝血酶原作用，抑制纖維蛋白的形成，致使凝血時間延長。與肺間質(zhì)病有關(guān)--抗Scl-70陽性SD病人,發(fā)生肺間質(zhì)病變的危險性較抗Scl-70陰性的SD病人增加10倍，陽性者易出現(xiàn)皮膚硬化快速進展“梅毒血清反應(yīng)生物學(xué)假陽性（BFP-STS）”抗dsDNA與LN相關(guān)在多種自身免疫性結(jié)締組織?。ㄈ鏢LE、SS、RA、SSC)中出現(xiàn)高滴度抗RNP抗體是MCTD的特異性抗體——SarmarcoM,etal.以中性粒細(xì)胞和單核細(xì)胞胞漿成分為靶抗原1986年，Hughes命名：與之有關(guān)的疾病則稱為抗磷脂綜合征（APS）“梅毒血清反應(yīng)生物學(xué)假陽性（BFP-STS）”但是先天性缺乏β2-GP1并不會導(dǎo)致嚴(yán)重的血栓或出血性疾??；高滴度抗RNP抗體是MCTD的特異性抗體1957年，在BFP（+）SLE患者血漿中發(fā)現(xiàn)：狼瘡抗凝物（LA）抗MCV（mutatedcitrullinatedvimentin

）

(突變型瓜氨酸波形蛋白)敏感性高，聯(lián)合抗CCP提高診斷敏感性與RA嚴(yán)重程度和疾病活動度有一定相關(guān)

抗GPI(葡萄糖-6-磷酸異構(gòu)酶)敏感性25%，特異性80%，與RA關(guān)節(jié)外受累相關(guān)類風(fēng)濕結(jié)節(jié)類風(fēng)濕血管炎Felty抗核抗體ANA概念：抗核酸和核蛋白抗體的總稱細(xì)胞核內(nèi)和細(xì)胞漿內(nèi)成分檢測底物人喉癌上皮細(xì)胞(Hep-2)鼠肝、鼠腎（大/小鼠組織不含SSA/RO抗原）

抗RNP抗體抗核內(nèi)的核糖核蛋白高滴度抗RNP抗體是MCTD的特異性抗體25~30%SLE出現(xiàn)抗RNP陽性與雙手腫脹,雷諾現(xiàn)象,肌炎和指(趾)端硬化和肺動脈高壓相關(guān)73、32、17.5KD抗SSA、SSB抗體抗SSA多在胞漿中，52KD與SS相關(guān)，60KD與SLE相關(guān)抗SSA在SLE中陽性率40%，抗SSB在SLE中陽性率10-15%抗SSB陽性，抗SSA往往也陽性母親抗SSA和抗SSB抗體陽性——新生兒狼瘡及嬰兒心臟傳導(dǎo)阻滯常與亞急性皮膚型狼瘡（環(huán)形紅斑，丘疹鱗屑）、平滑肌受累、光過敏、血管炎、皮損、紫癜、淋巴結(jié)腫大、高球/RF↑、NS損傷、WBC減少有關(guān)ANuA（抗核小體抗體）對SLE的特異性>98%可見于藥物性狼瘡早期SLE、非活動期SLE檢出率高于抗dsDNA41檢測方法：ELISA，靈敏度5ng/ml在APS患者中，同一亞型（IgG、M、A）aβ2-GP1與ACL水平顯著相關(guān)對APS診斷而言，aβ2-GP1特異性最高：敏感性：ACL＞aβ2-GP1特異性：aβ2-GP1＞ACL和LA亞型研究顯示無論是aβ2-GP1，還是ACL，都是IgG亞型占有主導(dǎo)地位。

——SarmarcoM,etal.JLabClinMed.2004,144(3):141-14720％SLE患者LA和ACL陰性，而aβ2-GP1陽性——BruceIN,etal.JRheumatol.2000,27:2833-7.約10％APS患者僅aβ2-GP1陽性——PierangeliSS,HarrisEN．ClinChimActa,2005,357:l7-33.抗β2-糖蛋白1抗體（aβ2-GP1）約10％APS患者僅aβ2-GP1陽性細(xì)胞核內(nèi)和細(xì)胞漿內(nèi)成分亞型研究顯示無論是aβ2-GP1，還是ACL，都是IgG亞型占有主導(dǎo)地位?！狿ierangeliSS,HarrisEN．ClinChimActa,2005,357:l7-33.通過多種途徑參與凝血和纖溶系統(tǒng)的調(diào)節(jié)，被認(rèn)為是一種天然的抗凝劑；對RA診斷具有高度敏感性（46.梅毒、AIDS等感染性疾病抗原：核糖體60s亞基P0，P1，P2磷酸化蛋白，主要位于胞漿對SLE的特異性>98%抗心磷脂抗體（ACL）梅毒血清試驗假陽性（RPR+，TPPA確證陰性）JRheumatol.6%）和特異性（96.13%、特異性89-90%與肺間質(zhì)病有關(guān)--抗Scl-70陽性SD病人,發(fā)生肺間質(zhì)病變的危險性較抗Scl-70陰性的SD病人增加10倍，陽性者易出現(xiàn)皮膚硬化快速進展一種IgG/IgM型免疫球蛋白，作用于凝血酶原復(fù)合物，影響凝血反應(yīng)，阻斷活化的凝血因子V與凝血酶原作用，抑制纖維蛋白的形成，致使凝血時間延長。——BruceIN,etal.RNA多聚酶/抗Scl-70采用半定量方式表示檢測結(jié)果可提高室間質(zhì)控水平“抗凝血酶原抗體”更為適宜。對RA診斷的敏感性32-44.核膜型（Membranous）M一種IgG/IgM型