版權說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內容提供方,若內容存在侵權,請進行舉報或認領
文檔簡介
實驗動物質量監(jiān)測的意義生物學實驗研究的四個基本條件
Animal,Equipment,Information,Reagent,簡稱AEIR四要素這4個要素在整個實驗研究中具有同等重要的地位,不能忽略或偏廢。事實上,實驗動物質量往往成為制約性要素,影響整個實驗的質量和水平實驗動物質量監(jiān)測是實驗動物科學的重要內容,是確保實驗動物質量的必要手段。2023/6/721、實驗工作人員的健康和生命的保證常見的人畜共患?。毫餍行猿鲅獰?、狂犬病、猴B病毒、淋巴細胞脈絡叢腦膜炎病毒、利什曼原蟲等2023/6/732、動物生產(chǎn)和繁殖的保證動物一旦染上傳染病,則種群難以凈化,一些烈性傳染病如鼠痘、兔病毒性出血癥等可致動物全軍覆沒,造成巨大經(jīng)濟損失。2023/6/743、實驗結果準確性、規(guī)律性、重復性的保證2023/6/75實驗動物質量監(jiān)測主要包括以下幾個方面:遺傳質量微生物與寄生蟲質量飼料質量環(huán)境質量監(jiān)測。2023/6/76第一節(jié)遺傳質量監(jiān)測實驗動物的遺傳背景與反應特性,是影響實驗結果的重要因素。不同遺傳背景與反應特性的實驗動物,對同一刺激有時可引起不同質和量的反應。為了保存實驗動物品種品系特性。使實驗動物使用者在動物實驗中能得到正確的、可重復的科學數(shù)據(jù),實驗動物生產(chǎn)者在嚴格遵守品系繁育技術路線的同時,還必須努力做好實驗動物遺傳質量的嚴格監(jiān)測,以防止實驗動物遺傳上的污染和變異。2023/6/77如:BALB/c對放射線比其他品系更為敏感。C57BL/6腫瘤發(fā)生率低,A系高。BALB/c和C3H小鼠對鼠傷寒沙門氏菌的敏感性存在顯著差異SHR為自發(fā)性高血壓大鼠,心血管疾病發(fā)生率高2023/6/78一、群體管理管理上人為的粗心最易引起遺傳上的混雜,所以對育種群進行恰當?shù)墓芾硎潜WC遺傳質量的最有效方法。每一個實驗動物育種機構都應當認真執(zhí)行良好的育種制度,完善地保持育種記錄,基礎群應有系譜記錄。要做到以上要求,最重要的因素就是要有訓練有素、經(jīng)驗豐富的技術人員。2023/6/79二、免疫學標記監(jiān)測(一)皮膚移植法這是目前最常用和最靈敏的檢測亞系內或亞系間組織相容性基因差異的方法。在小鼠和大鼠中普遍采用的是尾部或背部皮膚移植法。皮膚移植法靈敏度高。易掌握,經(jīng)濟。不需昂貴設備,易對植皮成活情況進行觀察和判斷。能有效地測出新發(fā)生的、造成亞系變異的遺傳混雜和突變。2023/6/710(二)混合淋巴細胞反應混合淋巴細胞反應的原理為:異源動物或遺傳上有差異個體的淋巴細胞混合培養(yǎng)一定時間后,這些細胞會增殖,甚至進一步裂解。此反應結果可在7~9天獲得,定期地從群體中抽取足夠量的動物進行監(jiān)測能夠維護實驗動物的品質。2023/6/711(三)淋巴組織移植用供體的均質淋巴器官,如骨髓、脾、淋巴結、胸腺或胚胎肝臟制備出單細胞懸液。然后將適量活細胞通過靜脈或腹腔注射到受體動物體內,組織相容性由受體中存活者及脾增大者來確定,也可以用放射學方法。根據(jù)移植細胞的存活數(shù)測定。2023/6/712三、生化標記監(jiān)測
通過多種形式的電泳和電聚集。可檢定生化標記即同工酶或蛋白質,常用的電泳介質有乙酸纖維素膜、淀粉凝膠、聚丙烯酰胺凝膠。每一種標記系統(tǒng)做特異性染色,最后將得到的帶型與公布的生化遺傳圖式進行比較。如中華人民共和國國家標準GB;T14923-2001公布9種常用近交系大鼠生化位點標記基因(表5-2)。2023/6/713表5-2常用近交系大鼠生化位點標記基因StrainAkp1Cs2Es1Es3Es4Es6Es8Es9F344/NaaaababaLOU/CaaaabbbaSHRababaabaWKYbbadbaacLEW/MaaadbabcACIbababbba2023/6/714四、骨骼形態(tài)特征監(jiān)測常采用“下頜骨分析法”來鑒別和檢測大小鼠的亞系變異。將年齡、性別、體重相當?shù)拇笫蠡蛐∈筇幩篮?,分辨右下頜骨,加以標記,在直角坐標系上測量出多個形態(tài)特征參考點距離。將所有測量的平均數(shù)作統(tǒng)計分析,利用判別函數(shù)確定下頜骨形狀。如果測量值集中,則表明被測亞系間無顯著的遺傳變異。2023/6/715五、染色體帶型監(jiān)測
可以利用染色體分帶技術,鑒別C帶和Q帶作為染色體標記,用來區(qū)分大、小鼠的近交系,在多數(shù)大、小鼠的近交系中,所有中期染色體都存在C帶材料,同源染色體的C帶區(qū)域大小相同;不同的近交系,C帶材料大小不同,是品系特異的,是一種很有價值的檢測亞系變異和混雜來源的方法。2023/6/716六、現(xiàn)代分子生物學技術
傳統(tǒng)的遺傳監(jiān)測方法來源于過去研究者對哺乳動物進行遺傳分析時采用的研究手段。隨著分子生物學技術的發(fā)展,分子生物學技術有可能取代傳統(tǒng)的遺傳監(jiān)測方法,其優(yōu)點是多態(tài)性高,位點豐富,實驗技術成熟,直接涉及生物的遺傳基礎,DNA樣品容易保存和運輸?shù)鹊取?023/6/7171.限制性片斷長度多態(tài)(RFLP)技術當動物基因組DNA被限制性內切酶消化時,酶能夠識別雙鏈DNA鏈上的特定核苷酸序列,并在每條DNA鏈上切割產(chǎn)生一個切口,使DNA裂解為片斷。這些片斷的長度在動物群體中存在變異,造成多態(tài)現(xiàn)象。通過DNA電泳和DNA探針分子雜交技術,即可觀察到不同帶型。2023/6/718
例如:位于小鼠第2號染色體補體-5(complement-5)位點(He)的pC5探針,當用HindⅢ消化小鼠DNA時,C3H品系將產(chǎn)生一條2.7kb的帶型,而AKP品系將產(chǎn)生6.0kb和4.6kb兩條帶型。從而可以在He位點上區(qū)別這兩個品系。目前所報道的RFLP位點已多達1098個,給遺傳學研究帶來許多便利條件。2023/6/7192.簡單序列長度多態(tài)(SSLP)技術簡單序列長度多態(tài)位點是動物基因內廣泛存在的由l~4個核苷酸組成的成串的重復序列,又稱為微衛(wèi)星(microsatellite)。估計這樣的DNA結構在哺乳動物基因組內的數(shù)目多達5萬~10萬個。在每個特定的位點上,重復序列的長度在不同品系中存在著差異。采用夾在這些序列兩端的引物,通過聚合酶鏈式反應(PCR)和電泳,就能觀察到這些位點的差異,從而區(qū)分不同的品系。2023/6/720
例如:小鼠第16條染色體的D16Mit4位點,其PCR產(chǎn)物的大?。╞p)在常用近交系中分別如下:C57BL/6-132,DBA/2-123,A/J-147,C3H-123,BALB/c-149,AKR-126,CBA-132。SSLP測試技術比RFLP技術簡便,多態(tài)性高,需要的DNA樣品較少,引物容易獲得,推廣應用前景可觀。2023/6/7213.DNA指紋(fingerprinting)技術
上述兩種DNA技術是針對單個DNA位點進行的測試。DNA指紋技術一次可同時測試多個位點,所以有一定的優(yōu)勢。DNA指紋技術經(jīng)過電泳后可獲得十幾到幾十條帶,而這些帶型在個體之間或品系之間有差異,如同人類的指紋在每個人都不同一樣,因此而得名。通常有兩種方法獲得DNA指紋圖。一是用限制性內切酶和小衛(wèi)星探針技術獲得的DNA指紋。二是用較短的隨機擴增引物或小衛(wèi)星引物,通過PCR而獲得的DNA指紋。2023/6/722DNA指紋圖譜有時在亞系或亞群之間有區(qū)別,所以對亞系的監(jiān)測十分有用。但是DNA指紋的結果因為電泳帶太多而不好辨認和比較。因此,也影響其在遺傳監(jiān)測和其他研究中的應用。目前所做的DNA指紋比上述兩種DNA技術少,但隨著研究的深入和方法的改進,將來一定會有所突破。2023/6/723
4.隨機擴增多態(tài)(RAPD)技術
RAPD技術是20世紀90年代發(fā)展起來的一種簡便、快捷的檢測基因組DNA多態(tài)性的遺傳標記技術。該項技術首先將動物目的基因組DNA提純、酶切,用含10個堿基的隨機引物,對DNA進行PCR擴增,經(jīng)電泳,便可在多個位點上得到擴增產(chǎn)物。各種DNA多態(tài)分析方法,2023/6/724
如:DNA指紋、限制性片段長度多態(tài)(RFLP)等,雖然可直接檢測基因組的遺傳變異,但都不同程度地存在操作復雜、需要特異性操作、需要事先知道動物基因組DNA序列等不足。而RAPD技術,由于引物可任意改變,有可能找到任何一個個體特異的RAPD標記,從而為實驗動物的遺傳檢測和分析提供一個十分有效的工具。2023/6/725七、遺傳性狀監(jiān)測結果的分析
當被檢查的遺傳性狀與每個品系的遺傳概貌圖一致時,同時遺傳管理資料清晰、可信,可以認為有關品系的繁育生產(chǎn)正在正確地進行,該品系的動物遺傳質量合格;若與遺傳概貌圖不一致時,可以考慮以下原因:2023/6/726
1.遺傳污染(geneticcontamination)
這是最常見的遺傳變異,往往是由于遺傳學管理不善所致。這種情況如發(fā)現(xiàn)得早,在被檢查的性狀中至少可以觀察到一個以上基因標記發(fā)生改變,出現(xiàn)雜合型,或與遺傳概貌不符的其他表型;如果發(fā)現(xiàn)得較遲,一些雜合基因可隨機地固定為單一的純合型,但與原品系的遺傳概貌不一致。出現(xiàn)上述情況均應淘汰原品系,更換來源清楚、質量合格的動物作為新種,重新進行品系的繁育。2023/6/7272.遺傳漂變(geneticdrift)
遺傳漂變是指一個品種或品系動物基因型在飼養(yǎng)的過程中可能發(fā)生隨機的改變。這種改變多由于近交系動物部分雜合基因尚未純合時即進行了分系,造成了亞系和支系的形成。監(jiān)測時可以看到一個品系所有的動物在1~2個基因標記上與原品系的遺傳概貌不符,但表型一致又均為純合型。這種情況在經(jīng)同系異體移植試驗排除了遺傳污染后需按照亞系和支系重新命名。2023/6/728
3.遺傳突變(mutation)
遺傳突變在哺乳類動物中的頻率為10-5。在分析監(jiān)測結果時,如果僅看到一只動物單個基因標記出現(xiàn)雜合型,應考慮有否發(fā)生遺傳突變。為了證實此點,往往需要根據(jù)動物編號查詢該只動物同窩兄妹或雙親的基因標記表型。如遺傳突變發(fā)生在親代,則同窩兄妹均應為雜合型或分離產(chǎn)生不同的表型。2023/6/729
如果在同窩兄妹或雙親中該基因標記的表型與遺傳概貌圖一致,應考慮被測個體發(fā)生了遺傳突變。在檢查時如同時發(fā)現(xiàn)其他基因標記的表型與遺傳概貌圖不符,無論是雜合型還是純合型均應考慮發(fā)生了遺傳污染,應立即淘汰換種。遺傳突變如無特殊保留價值,在剔除突變的個體后,整個品系可以繼續(xù)保存;如有保存價值,可將突變個體單獨培育成同源突變近交系。2023/6/730第二節(jié)微生物學與寄生蟲學監(jiān)測如何控制微生物和寄生蟲,是實驗動物標準化的主要內容之一。一般而言,科研中使用的實驗動物,其微生物和寄生蟲的控制級別越高,其結果就越精確、越可靠。2023/6/731一、監(jiān)測意義1.對實驗動物進行微生物、病毒與寄生蟲的監(jiān)控,對保證實驗研究的順利進行和工作人員的身體健康具有十分重要的意義。實驗動物被集中飼養(yǎng),極易導致疾病的爆發(fā)與流行。實驗動物疾病的爆發(fā),除造成動物死亡外,還會干擾實驗的順利進行,引起生物制品的污染,對人類健康產(chǎn)生危害。2023/6/7322.對實驗動物飼養(yǎng)設施的監(jiān)測,為確保這些設施能否控制微生物污染提供依據(jù)。3.對引進的實驗動物進行檢疫,避免病原體入侵原有的動物群。4.如動物群發(fā)生疾病,為了確證病原,對患病動物進行病原學診斷,積累對疾病的認識,收集菌株和毒株,進一步研究病原,為診斷試劑和疫苗的制備提供菌株和毒株。2023/6/733二、監(jiān)測方法(一)實驗動物病毒學檢測方法1.血清學檢測適用于各級各類實驗動物的經(jīng)常性檢測和疫情普查。常用方法有:酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)、免疫熒光試驗(IFA)、免疫酶染色試驗(IEA)、血凝試驗(HA)、血凝抑制試驗(HI)、病毒中和試驗、補體結合試驗、瓊脂擴散試驗。2023/6/7342.病原學檢測適用于動物群中有疾病流行,需要檢出病毒或確認病毒存在的情況。檢測方法有:病毒分離與鑒定,病毒顆粒、抗原或核酸的檢出,潛在病毒的激活,抗體產(chǎn)生試驗等。例如:采用HA或HI方法檢查患病動物排泄物或組織懸液中的血凝素抗原;采用聚丙烯酰胺凝膠電泳(PAGE)檢查病毒基因組;采用核酸分子雜交技術或聚合酶鏈反應(PCR)檢出組織或排泄物中的病毒核酸。2023/6/735(二)實驗動物細菌學檢測方法最常用的方法是病原菌的分離與培養(yǎng)或進行動物接種。部分病原菌,如:鼠傷寒沙門菌、鼠棒狀桿菌、布氏桿菌、沙門菌、氣管敗血波氏桿菌等,可采取血清學方法,但仍需結合分離培養(yǎng)結果最后做出診斷。對于泰澤菌,由于不能在人工培養(yǎng)基上生長,因此宜采用組織壓片、鏡檢的方法進行檢查,并結合病理檢查結果最后做出診斷。2023/6/736(三)實驗動物真菌學檢測方法目前主要采用沙氏培養(yǎng)基分離培養(yǎng)。皮膚真菌一般在25℃培養(yǎng),深部真菌在37℃培養(yǎng)。不同的真菌具有一定的菌落特點,鏡下染色檢查可進行種屬鑒定,有時,還需借助于生物化學反應結果和免疫學方法進行最后診斷。2023/6/737(四)實驗動物寄生蟲學檢測方法
1.體外寄生蟲肉眼觀察法、透明膠紙粘取法、拔毛取樣法、皮屑刮取法、黑背景檢查法、解剖鏡下通體檢查法等,主要檢查蚤、虱、螨等節(jié)肢動物。
2023/6/7382.體內寄生蟲主要檢查蠕蟲和原蟲,可用直接涂片法(糞便、血液、臟器、腸內容物)、飽和鹽水漂浮法或沉淀法、透明膠紙肛門周圍粘取法、組織或器官剖面壓印法、病變組織切片或壓片法、尿液的離心法(如查鼠膀胱線蟲)等。實驗動物的微生物、寄生蟲檢測具體操作方法詳見《國家標準實驗動物微生物學和寄生蟲學的檢測方法(嚙齒類和兔類)》(GB/T14926.1-14926.41-2001)。2023/6/739三、監(jiān)測要求1.選定監(jiān)測項目任何一種實驗動物都有許多致病性微生物、寄生蟲,結合具體情況選擇合適的檢測項目,既達到保證動物質量的目的,又可節(jié)省人力物力。我國經(jīng)過十多年來對各地實驗動物感染病原微生物、寄生蟲情況的調查,結合其他國家的規(guī)定和經(jīng)驗,制定了我國嚙齒類和兔類微生物學、寄生蟲學等級標準,貓、犬、猴等中型實驗動物,衛(wèi)生部醫(yī)學實驗動物管理委員會亦有初步規(guī)定。2023/6/7402.采樣數(shù)量和頻度檢測結果的準確性,要采取合適的動物數(shù)量。采樣動物數(shù)可根據(jù)動物群體的污染程度而有所不同。按照國家標準規(guī)定,動物數(shù)量超過100只的生產(chǎn)繁殖單元取樣如下:普通級動物不能少于10只;清潔級動物檢測5~10只;飼養(yǎng)于小隔離罩內的無菌動物和無特定病原體動物隨機抽檢2只;飼養(yǎng)于生產(chǎn)繁殖單元的抽檢5~10只。2023/6/741除了采樣的數(shù)量,還必須考慮到檢測的間隔時間。一般來說,一旦病原體侵入動物群體引起感染,初期分離病原體較容易,抗體的檢出率上升。2~3個月后可因某些個體抗體水平的降低以及新出生的非感染個體的增加等原因,抗體檢出率下降,據(jù)此,檢測間隔時間以3個月一次為宜。至少每年檢查2次,選在春、秋季疾病多發(fā)季節(jié)為宜。2023/6/742采樣時,宜在動物群中不同方位隨機采取育成動物,選擇至少4個不同的位置采集樣品或采用前哨動物放人群內,不時調換位置,飼養(yǎng)一定時間后解剖檢查抗體或病原。運輸途中保證動物的安全和避免污染。引種的動物則需有檢疫隔離期,小鼠、大鼠和豚鼠l~7天,兔21天,犬、貓21~28天,猴l~9周。2023/6/743第三節(jié)飼料質量監(jiān)控實驗動物作為生物體離不開營養(yǎng),飼料是實驗動物攝人營養(yǎng)素的主要來源。只有良好的營養(yǎng)才能使實驗動物保持良好的健康狀態(tài),而健康的實驗動物才能確保實驗結果的可靠。因此,加強飼料質量標準化管理,是實現(xiàn)實驗動物標準化的重要環(huán)節(jié)。2023/6/744一、實驗動物飼料
生產(chǎn)加工、儲存與管理
實驗動物飼料是以實驗動物飼養(yǎng)標準為依據(jù),經(jīng)過嚴密設計、科學配方、精心加工、生產(chǎn)制造而形成的標準化產(chǎn)品。因此,進行實驗動物飼料生產(chǎn)必須了解有關實驗動物飼養(yǎng)管理法規(guī)條例,全面掌握飼料的生產(chǎn)過程。2023/6/7451.實驗動物配合飼料的生產(chǎn)加工應根據(jù)各種實驗動物的特性和不同的實驗目的,采用不同的飼料加工方法。常用實驗動物如大鼠、小鼠、豚鼠及兔等實驗動物的飼料應制成具有一定硬度的顆粒飼料較為適合其攝食習性;狗、貓則以膨化飼料為好;而有的實驗動物根據(jù)實驗目的不同,常要求制作糊狀、粉狀或液體飼料以滿足研究需要。但是無論其形狀如何,在實驗動物飼料加工生產(chǎn)過程中都應注意生產(chǎn)規(guī)格及其產(chǎn)品標準。2023/6/7462.實驗動物飼料的儲存
包括原料儲存和成品儲存兩部分內容。
原料儲存:應按原料種類、生產(chǎn)廠家、進貨日期等分開保管。保管中要注意溫度、濕度變化,防止鳥類、鼠類和昆蟲的污染。盡量做到先進先出。成品儲存:要定期清掃存儲罐,產(chǎn)品變更時徹底清掃存儲罐,成品庫內嚴格執(zhí)行先進先出原則。注意存儲罐的溫、濕度,防止成品飼料霉變,防止野鼠、昆蟲及有毒物質自引污染。分類堆放,標志清楚,嚴防與原料混貯,保證標準貨物出庫登記。2023/6/7473.實驗動物的飼料管理實驗動物飼料管理是指從飼料原料選擇、生產(chǎn)加工到成品以及生產(chǎn)過程中的蟲害、安全及衛(wèi)生管理的全過程。2023/6/748
二、實驗動物飼料的消毒
實驗動物的飼料在收獲、加工、儲存及運輸過程中都有污染病菌的可能,為確保實驗動物質量和動物實驗的準確性,我們要通過適當?shù)南痉椒ㄊ蛊溥_到滅菌的目的。常用飼料消毒方法有干熱、濕熱、輻照及藥物熏蒸等多種,應按飼養(yǎng)動物的不同要求和飼料種類以及所具備的條件來選擇。2023/6/7491.干熱滅菌法將飼料在80~100℃的條件下烘烤。此法設備比較簡單,但溫度不好掌握,滅菌不夠徹底,而且營養(yǎng)損失較大。2023/6/7502.高溫高壓滅菌法高溫高壓滅菌法是指將飼料在121℃,1.0kg/cm3的高溫高壓蒸鍋內加熱15min以上,將細菌全部殺死。一般115℃30min、12l℃20min、125℃15min。絕大多數(shù)維生素。尤其是維生素C、維生素B1、維生素B6和維生素A等,過熱會受到破壞,而純化學性飼料比天然飼料更不穩(wěn)定。2023/6/7513.藥物熏蒸滅菌法熏蒸是利用化學藥品的氣霧劑對飼料進行消毒。如用環(huán)氧乙烷進行滅菌,熏蒸后必須在不低于20℃的自然空氣中將殘余氣體揮發(fā)。實驗證明,即使這樣處理,在飼料中仍然殘存一些對動物代謝有損害的化合物。2023/6/7524.放射線照射滅菌法通常在對谷物類飼料消毒時,采用5Mrad劑量的60Co照射對營養(yǎng)成分損失甚小。γ射線對維生素B1和維生素B6僅有微小破壞,通常采用的劑量為3~5Mrad。此法在滅菌效果和對營養(yǎng)素的破壞程度方面都優(yōu)于其他方法。但受條件所限,不便推廣。2023/6/753三、實驗動物飼料的檢測
飼料檢測是實驗動物飼料質量管理必不可少的重要手段。飼料質量變化不僅直接影響著實驗動物質量,而且也間接影響實驗結果的可靠性。我國實驗動物飼料質量應符合國家標準GBl4924-2001規(guī)定的根據(jù)實驗動物的不同種類、性別、年齡、體重和生理階段制定的飼養(yǎng)標準。2023/6/7541.感觀性狀的檢驗用手、眼、鼻等器官直接通過色澤、氣味、手感、雜質情況等項指標對飼料的新鮮程度、均勻度、含水量等進行直觀判斷。2.營養(yǎng)成分的測定按照國家實驗動物飼料營養(yǎng)標準所規(guī)定的養(yǎng)分含量及分析方法,對產(chǎn)品的營養(yǎng)成分和混合均勻度等進行檢測。522023/6/755第四節(jié)環(huán)境質量監(jiān)測
嚴格監(jiān)控實驗動物生產(chǎn)環(huán)境和動物實驗環(huán)境,可保證實驗動物健康和質量標準化,可保障實驗研究獲得正確的結果。合乎標準的環(huán)境,不僅為實驗動物及動物實驗工作者提供適宜的條件,維持實驗動物等級標準,而且是保障工作人員身體健康,使他們不受危害因素傷害的需要。2023/6/756一、噪聲測定1.儀器
普通噪聲計、積分型噪聲計。2.測定方法
分靜態(tài)和動態(tài):靜態(tài)為在動物飼養(yǎng)前,所有系統(tǒng)正常運轉時檢測;動態(tài)為飼養(yǎng)動物后,在正常飼養(yǎng)條件下檢測。
通常在潔凈室無人、無動物,空調凈化系統(tǒng)正常運行的情況下測定潔凈室的噪聲,測定點選擇在被測環(huán)境的中央,如房間大于15m2,可選擇兩個或兩個以上的測定點,距地面1m。2023/6/757二、照度測定1.儀器
便攜式照度計。2.測定方法
測定者需穿著黑色衣服,避免反射光影響測定結果。測定前開啟所有的照明設備,測定時以距墻壁1m以上、離地面85cm處的平面照明度為準。每隔1.0~2.0m選擇一個測量點,每點測3次,取平均值,單位為lx。2023/6/758三、空氣落下細菌測定
空氣落下菌數(shù)測定應在實驗動物設施經(jīng)消毒滅菌,空調凈化系統(tǒng)正常運行48h后進行。1.試劑直徑9cm的血液瓊脂培養(yǎng)基。2.測定方法在無動物的狀態(tài)下,每5~10m2放置一個直徑9cm的血液瓊脂培養(yǎng)基,敞開皿蓋暴露30min,蓋上皿蓋,置于37℃培養(yǎng)48~72h后,計算培養(yǎng)皿內菌落數(shù)。2023/6/759四、空氣潔凈度測定在動物飼養(yǎng)前,空調凈化系統(tǒng)運行48h后進行。1、檢測儀器塵埃粒子計數(shù)器。2、方法亂流潔凈室面積不大于50m2的布置5個測點,每增加20~50m2應增加3~5個測點。每個測定點連續(xù)測定3次。測定時100級凈化室的采樣量每分鐘不少于1L,1000級以上的凈化室的采樣量每分鐘不小于0.3L。層流潔凈室取各測定點最大值;亂流潔凈室取潔凈室各測點的平均值作為實測結果。2023/6/760五、相鄰潔凈區(qū)靜壓差測定1.儀器
微壓計,最小刻度為1.0Pa。2.測定方法
測定順序一般由低壓到高壓,測定前將需要測定壓差的兩個區(qū)域封閉,關閉所有的門。測定時將測定用的膠管穿過墻上或門上預留的孔洞進入室內(穿膠管的孔洞必須密封,設置在離墻面不遠處垂直氣流的方向,且周圍無阻擋物、氣流干擾小的區(qū)域)。s12023/6/761六、氣流方向和速度測定1.儀器
發(fā)煙管、熱球式電風速儀或數(shù)字顯示式風速儀。2.測定方法
測定氣流方向一般用煙霧法,也可用紙條測定法。測定氣流速度,將風速儀放置在有代表性的飼養(yǎng)實驗動物籠具的位置進行測定。測量點設置可參照溫度測試點設置。測量時風速計傳感器與風向垂直,指針做周期性運動,要取其平均值。2023/6/762七、換氣次數(shù)測定1.儀器熱球式電風速儀或數(shù)字顯示式風速儀。2.測定方法
測量換氣次數(shù),首先必須計算出換氣量。換氣量由送風管道風速求得。在一個以上進氣口的房間,要將各進氣口合并計算。2023/6/763八、溫度、濕度測定溫、濕度是日常管理中最基本也是最重要的環(huán)境檢測指標之一,溫、濕度的檢測除了可觀察連接到空調設備上的自動溫、濕度控制儀,還應在每個房間設置溫度、濕度計。常用的溫度計有棒狀溫度計、最高最低溫度計、熱敏電阻溫度計、數(shù)字型溫度計等。常用濕度計有干濕球溫度計、通風干濕機溫度計、氯化鋰露點計及自動記錄溫、濕度計等。2023/6/7641.儀器棒狀溫度計、熱敏溫度計、簡易干濕球溫度計和自動記錄溫度計等。2.測定方法實驗動物設施建成使用之前,應對動物室內環(huán)境進行檢測。在測定溫度、濕度時,空調通風系統(tǒng)應連續(xù)運轉,并做多點檢測,如在外界空氣最冷和最熱時檢測最佳。測量點應具有代表性,在距地面10,50,150,200cm高度水平設定間隔0.5,1m的很多格狀測點,依次測量,并將結果制成不同等高的溫度度數(shù)分布圖。2023/6/765
一般動物室常采用“田”字形、9點模式,即在入口、中央、內側相當于動物飼養(yǎng)高度的上、中、下三層設置三個格測定(50,100,150cm)。以潔凈室面積小于50m2為例,測定前空調系統(tǒng)連續(xù)運轉24h以上,測定時空調系統(tǒng)處于運轉狀態(tài)。2023/6/766九、氨氣的測定
在設施正常運行,狀態(tài),動物飼養(yǎng)密度符合設計標準,墊料更換時符合時限要求下進行。1.便攜式氨氣檢測儀
2023/6/767《化妝品術語》起草情況匯報中國疾病預防控制中心環(huán)境與健康相關產(chǎn)品安全所一、標準的立項和下達時間2006年衛(wèi)生部政法司要求各標委會都要建立自己的術語標準。1ONE二、標準經(jīng)費標準研制經(jīng)費:3.8萬三、標準的立項意義術語標準有利于行業(yè)間技術交流、提高標準一致性、消除貿(mào)易誤差,作為標準體系中的基礎標準,術語標準在各個領域的標準體系中均起著重要的作用。隨著我國化妝品衛(wèi)生標準體系建設逐步加快,所涉及的術語和定義的數(shù)量也在迅速增長,在此情形下,化妝品術語標準的制定就顯得尤為重要。四、標準的制訂原則1.合法性遵守《化妝品衛(wèi)生監(jiān)督條例》、《化妝品衛(wèi)生監(jiān)督條例實施細則》中關于化妝品的定義。2.協(xié)調性直接引用或修改采用的方式,與相關標準中的術語和定義相協(xié)調。3.科學性對于沒有國標或定義不統(tǒng)一的術語,在定義時體現(xiàn)科學性的原則。4.實用性在標準體系中出現(xiàn)頻率較高,與行業(yè)聯(lián)系較緊密的術語優(yōu)先選用。五、標準的起草經(jīng)過
第一階段:資料搜集
搜集國內外相關法規(guī)、標準、文獻并對國外文獻如美國21CFR進行翻譯。第二階段:2007年末形成初稿
初稿內容包括一般術語、衛(wèi)生化學術語、毒理學術語、微生物術語、產(chǎn)品術語、人體安全和功效評價術語,常用英文成份術語等7部分。第三階段:專家統(tǒng)稿1.2007年12月第一次專家統(tǒng)稿會(修訂情況:1.在結構上增加原料功能術語、相關國際組織和科研機構等內容;2.在內容上增加一般術語、產(chǎn)品術語的種類,將化妝品行業(yè)的新產(chǎn)品類別納入本標準;3.對于毒理學、衛(wèi)生化學、微生物學術語進行修改;4.刪除與化妝品聯(lián)系不緊密、無存在必要的常用英文成分術語。2.2009年1月第二次專家統(tǒng)稿會會議意見:1.修改能引用國家標準的盡量引用國家標準;對存在歧義的個別用詞進行修改。2.刪除由于本標準中的“產(chǎn)品術語”一章和香化協(xié)會所制定的某個標準存在重復,因此刪除“產(chǎn)品術語”一章的內容
溫馨提示
- 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
- 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權益歸上傳用戶所有。
- 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內容里面會有圖紙預覽,若沒有圖紙預覽就沒有圖紙。
- 4. 未經(jīng)權益所有人同意不得將文件中的內容挪作商業(yè)或盈利用途。
- 5. 人人文庫網(wǎng)僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內容負責。
- 6. 下載文件中如有侵權或不適當內容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
- 7. 本站不保證下載資源的準確性、安全性和完整性, 同時也不承擔用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。
最新文檔
- 2024年安全教育培訓管理考核制度范文(三篇)
- 2024年幼兒園保育員工作總結樣本(二篇)
- 2024年處方藥銷售管理制度樣本(二篇)
- 2024年客服主管個人工作計劃(七篇)
- 2024年山林承包合同參考樣本(四篇)
- 2024年小學班主任工作職責(二篇)
- 2024年室內設計合同范文(四篇)
- 2024年安全辦公會議制度范文(三篇)
- 2024年小學財務預算管理制度(六篇)
- 2024年單位消防安全責任制范文(二篇)
- 盆底功能障礙性疾病護理
- 浙江9+1聯(lián)盟高二11月期中考試語文試題及答案
- 大學生信息素養(yǎng)大賽題庫1000題及答案
- 大數(shù)據(jù)安全與隱私保護技術
- 《故事》羅伯特·麥基
- BOTDR應用于管道變形監(jiān)測的試驗研究的開題報告
- 感動中國十大人物顧方舟事跡ppt(思修課堂展示or愛國主題演講)
- Zippo年度機系列(更新至C23)
- 培訓課程開發(fā)思路和備課技巧
- 譯林版小學英語五年級上冊知識點(全)
- 國家開放大學2023年《幼兒游戲與玩具》期末大作業(yè)滿分答案
評論
0/150
提交評論