藥物常見定量分析方法 色譜聯(lián)用技術(shù)簡介 （藥物分析課件）

色譜聯(lián)用技術(shù)及其應(yīng)用質(zhì)譜法（MS）是在離子源中將分子解離成氣態(tài)離子，測定生成離子的質(zhì)量和強度（質(zhì)譜），進行定性和定量分析的常用譜學分析方法。概述（一）液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)1.概念高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（LC-MS）將高分離能力、使用范圍極廣的液相色譜分離技術(shù)與高靈敏、高專屬的質(zhì)譜技術(shù)結(jié)合起來，成為一種強有力、多用途的定性、定量分析工具。（一）液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)2.應(yīng)用藥物（包括生物大分子）結(jié)構(gòu)信息的獲取、分子質(zhì)量的確定藥物質(zhì)量控制（藥物雜質(zhì)、異構(gòu)體、抗生素組分的分析）藥物的體內(nèi)過程分析、藥物代謝產(chǎn)物研究ABCF（一）液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)2.應(yīng)用臨床血藥濃度檢測代謝組學蛋白組學高通量藥物篩選研究DE（一）液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)3.組成高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀器由高效液相色譜系統(tǒng)（進樣系統(tǒng)）、色譜-質(zhì)譜接口（離子源和真空接口）、質(zhì)量分析器等部分組成。這些離子經(jīng)真空接口進入質(zhì)量分析器，按質(zhì)荷比（m/z）分離經(jīng)進樣系統(tǒng)引入的待測化合物，在離子源中生成氣態(tài)正離子（或負離子）獲得待測化合物的質(zhì)譜圖（一）液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)離子檢測器檢測檢測信號經(jīng)轉(zhuǎn)換計算機系統(tǒng)處理若待測樣品經(jīng)色譜分離后，被部分或全部的依次引入離子源時，將獲得該待測樣品的色譜圖。（一）液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)外標法和內(nèi)標法是質(zhì)譜常用的定量方法，內(nèi)標法具有更高的準確度。質(zhì)譜法可實現(xiàn)高專屬性、高靈敏度的定量分析。定量分析采用選擇離子檢測或選擇反應(yīng)檢測、多反應(yīng)檢測等方式，通過測定某一特定離子或多個離子的豐度，并與已知標準物質(zhì)的響應(yīng)比較。LC-MS將液相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用，特別適合組分復(fù)雜樣品和微痕量樣品的分離分析。在中藥成分分析、抗生素分析、體內(nèi)藥物分析等方面得到廣泛應(yīng)用。（一）液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)（二）氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)1.概念現(xiàn)行版《中國藥典》通則增訂了中藥材農(nóng)藥殘留量測定法，其中包括了用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)測定74種農(nóng)殘，為中藥材農(nóng)殘測定確定了分析方法，具有更好的特異性和靈敏性。2.組成氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)法（GC-MS）將高效的氣相色譜分離技術(shù)與能夠提供豐富結(jié)構(gòu)信息和專屬性定量結(jié)果的質(zhì)譜技術(shù)相結(jié)合，廣泛應(yīng)用于易揮發(fā)的或經(jīng)衍生化處理后易揮發(fā)的有機物分析。（二）氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)GC-MS法與LC-MS法互補，已成為藥物研究、生產(chǎn)、臨床檢測的重要技術(shù)手段。（二）氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)計算機系統(tǒng)用于氣相色譜、接口和質(zhì)譜儀的控制，同時進行數(shù)據(jù)采集和處理。質(zhì)譜作為氣相色譜的檢測器，將分離后的各組分分別離子化、離子檢測。接口把氣相色譜流出的各組分導(dǎo)入處于真空狀態(tài)的質(zhì)譜儀，起著氣相色譜和質(zhì)譜之間適配器的作用。氣相色譜儀在大氣壓下分離待測樣品中的各組分。（二）氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)注意選用高純氦氣作為載氣；GC-MS所用毛細管色譜柱應(yīng)為MS專用柱。供試樣品應(yīng)采用