講課月季的花藥培養(yǎng)演示文稿

講課月季的花藥培養(yǎng)演示文稿本文檔共22頁；當前第1頁；編輯于星期六\17點11分（優(yōu)選）講課月季的花藥培養(yǎng)本文檔共22頁；當前第2頁；編輯于星期六\17點11分本文檔共22頁；當前第3頁；編輯于星期六\17點11分花的結(jié)構(gòu)：花梗、花托、萼片、花瓣、雌蕊和雄蕊3、花的結(jié)構(gòu)本文檔共22頁；當前第4頁；編輯于星期六\17點11分二、被子植物花粉粒的形成花絲花藥：囊狀結(jié)構(gòu)，內(nèi)有很多花粉粒1、雄蕊的結(jié)構(gòu)雄蕊：本文檔共22頁；當前第5頁；編輯于星期六\17點11分花粉是花粉母細胞經(jīng)過減數(shù)分裂而形成的，因此，花粉是單倍體的生殖細胞。2、被子植物花粉的發(fā)育②花粉粒的形成花粉母細胞（小孢子母細胞）減數(shù)分裂①經(jīng)歷時期：四分體時期、單核期、雙核期本文檔共22頁；當前第6頁；編輯于星期六\17點11分四分體時期（進入單核期）有絲分裂單核靠邊期(小孢子)單核居中期(小孢子)

小孢子（單核花粉粒）本文檔共22頁；當前第7頁；編輯于星期六\17點11分精子精子有絲分裂花粉管細胞核生殖細胞核生殖細胞營養(yǎng)細胞雙核期兩個精子和一個營養(yǎng)核的基因型相同本文檔共22頁；當前第8頁；編輯于星期六\17點11分1個花粉母細胞4個小孢子減數(shù)分裂有絲分裂4個花粉管細胞核4個生殖細胞核有絲分裂8個精子2nnnnn本文檔共22頁；當前第9頁；編輯于星期六\17點11分四、產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑五、影響花藥培養(yǎng)的因素1、材料的選擇沒有絕對的界限，主要取決于培養(yǎng)基中激素的種類及其濃度配比。本文檔共22頁；當前第10頁；編輯于星期六\17點11分不同植物的誘導(dǎo)成功率很不相同，就同一種植物來說親本的生理狀況對誘導(dǎo)成功率也有直接影響。②選擇合適的花粉發(fā)育時期是提高誘導(dǎo)成功率的重要因素。因為并不是任何時期的花粉都可以經(jīng)過培養(yǎng)產(chǎn)生愈傷組織或胚狀體，花粉發(fā)育的過程中，只有某一個時期對離體刺激敏感。選材是否成功是花藥培養(yǎng)成功的關(guān)鍵。①選材本文檔共22頁；當前第11頁；編輯于星期六\17點11分一般來說，在單核期，細胞核由中央移向細胞一側(cè)的時期，花藥培養(yǎng)的成功率最高。即：最適合花藥培養(yǎng)的小孢子發(fā)育時期為單核靠邊期。選擇單核期以前的花藥接種，質(zhì)地幼嫩，極易破碎；選擇單核期之后的花藥接種，花瓣已有些松動，又給材料的消毒帶來困難，且難以挑選到單核期的花藥。③花藥培養(yǎng)時期的選擇④其它時期選擇的缺點本文檔共22頁；當前第12頁；編輯于星期六\17點11分為了挑選到單核期的花藥，通常選擇完全未開放的花蕾。盛開的或略微開放的花，都不宜選作實驗材料。⑥選擇完全未開放花蕾的原因完全未開放的花蕾，可挑選到單核期的花藥，菌少、易消毒⑤單核期花藥的挑選本文檔共22頁；當前第13頁；編輯于星期六\17點11分(二)、材料的消毒：花蕾（70％酒精）大約30s（無菌水）清洗（無菌吸水紙）吸干水分（1％氯化汞溶液）2～4min（無菌水）沖洗

月季花蕾的消毒與菊花外植體的消毒相比較，二者有何不同？

在酒精消毒前，花藥不需要預(yù)先用流水沖洗、洗衣粉洗滌和軟刷刷洗；消毒時間不同。本文檔共22頁；當前第14頁；編輯于星期六\17點11分⑦為什么花瓣松動會給材料的消毒帶來困難？

花瓣松動后，微生物就可能侵入到花藥，給材料的消毒帶來困難。⑦花藥培養(yǎng)時間一般月季的花藥培養(yǎng)時間選在5月初到5月的中旬，即月季的初花期。初花期的花蕾營養(yǎng)狀態(tài)及生理狀態(tài)會比較好，可提高花粉的誘導(dǎo)成功率。本文檔共22頁；當前第15頁；編輯于星期六\17點11分月季花藥培養(yǎng)時的花粉粒最好是（）

A、四分體時期B、單核居中期

C、單核靠邊期D、二核或三核花粉粒C2、培養(yǎng)基：花藥培養(yǎng)基所采用的培養(yǎng)基可能因植物的不同而有所變化小麥為N6培養(yǎng)基，馬鈴薯、月季為MS培養(yǎng)基，油菜為B5培養(yǎng)基。本文檔共22頁；當前第16頁；編輯于星期六\17點11分3、其他因素親本植株的生長條件、材料的低溫預(yù)處理以及接種的密度等對誘導(dǎo)成功都有一定的影響六、實驗操作（一）材料的選?、谀承┲参锏幕ǚ奂毎瞬灰字璨捎帽夯ㄇ?鉻礬法，這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色。①最常用的方法有醋酸洋紅法1、方法本文檔共22頁；當前第17頁；編輯于星期六\17點11分①醋酸洋紅法染色機理醋酸洋紅為堿性染色劑，而花粉細胞內(nèi)有染色體，染色體主要成分是DNA和蛋白質(zhì),易被堿性染料著色染成紅色

。將體積分數(shù)45％的醋酸100ml煮沸，緩緩加入1g洋紅，再加熱回流8h，冷卻至50℃，過濾即可。②醋酸洋紅的配置2、醋酸洋紅法本文檔共22頁；當前第18頁；編輯于星期六\17點11分將花藥放在載玻片上，加一滴質(zhì)量分數(shù)1％的醋酸洋紅，用鑷柄將花藥搗碎，蓋上蓋玻片在顯微鏡下檢查。③染色操作3、焙花青—鉻釩法將無水酒精與冰醋酸按體積比為3：1的比例混勻①卡諾氏固定液的配制方法本文檔共22頁；當前第19頁；編輯于星期六\17點11分花藥應(yīng)該在卡諾氏固定液中固定20min，然后取出放在載玻片上，加焙花青—鉻釩溶液染色，蓋上蓋玻片后在顯微鏡下檢查。這種方法能將花粉細胞核染成藍黑色。將5g鉻明礬[K2SO4Cr2(SO4)·24H2O]加入90ml蒸餾水中，溶解后加入0.1g焙花青，混勻并加熱至沸騰，煮沸5分鐘后冷卻至室溫，過濾，加蒸餾水定容至100ml。②焙花青—鉻釩溶液的配制方法③染色操作本文檔共22頁；當前第20頁；編輯于星期六\17點11分（二）材料的消毒1、酒精處理①花蕾用體積分數(shù)為70%的酒精浸泡30秒，立即取出。②無菌水清洗③無菌吸水紙吸干花蕾表面的水分本文檔共22頁；當前第21頁；編輯于星期六\17點11分2、消毒液處理①放入質(zhì)量分數(shù)為0.1%的氯化汞溶液中2-4