Agilent1200高效液相色譜儀操作規(guī)程

Agilent1200高效液相色譜儀操作規(guī)程

題目Agilent1200高效液相色譜儀操作規(guī)程編號共5頁SOP-YQ-010A第1頁制訂人審核人批準(zhǔn)人生效日期

一、目的：規(guī)范實驗室Agilent1200高效液相色譜儀的操作維護方法，保證實驗的有效性。二、適用范圍：適用于實驗室Agilent1200高效液相色譜儀的使用和維護。三、職責(zé)：所有使用Agilent1200高效液相色譜儀的分析人員，需正確操作，并做好維護保養(yǎng)和狀態(tài)檢查工作。四、操作步驟1.Agilent1200化學(xué)工作站開機順序(LAN卡聯(lián)接)

1.1、將待測樣品按要求前處理，準(zhǔn)備HPLC所需流動相，檢查線路是否連接完好，廢液瓶是否夠用等

1.2、打開計算機，進入Bootp；1.3、打開主機各模塊電源（不分先后），等待Bootp接收,等待各模塊就緒后,再雙擊工作站圖標(biāo),進入化學(xué)工作站；1.4、調(diào)出一個分析方法，檢查各參數(shù)的設(shè)置；1.5、旋開泵上的排氣閥，將工作站中的泵流量設(shè)到5ml/min，溶劑A設(shè)到100%；題目Agilent1200高效液相色譜儀操作規(guī)程編號共5頁SOP-YQ-010A第2頁1.6、在工作站中打開泵，排出管線中的氣體數(shù)分鐘；1.7、依此切換到B、C、D溶劑分別排氣；1.8、將工作站中的泵流量設(shè)到1ml/min，多元泵則再設(shè)定溶劑配比，如A=80%，B=20%；1.9、關(guān)閉排氣閥，檢查柱前壓力；1.10、待柱前壓力基本穩(wěn)定后,打開檢測器燈，觀察基線情況；2、數(shù)據(jù)采集方法編輯2.1由運行控制進入樣品信息，設(shè)定操作者姓名，樣品數(shù)據(jù)文件名等。2.2自動進樣器參數(shù)設(shè)定:1）選擇合適的進樣方式,“StandardInjection”----只能輸入進樣體積，此方式無洗針功能。“InjectionwithNeedleWash”----可以輸入進樣體積和洗瓶位置，“UnRegistered”--此方式針從樣品瓶抽完樣品后，會在洗瓶中洗針?！癠seinjectorprogram”---可以點擊“Edit”鍵進行進樣程序編輯。2)單擊確定進入下一畫面。2.3泵參數(shù)設(shè)定：（四元泵）1）在流量（Flow）處輸入流量,如1.5ml/min，在溶劑B處輸入70.0,(A=100-B-C-D),也可插入一行時間列表（Timetable）,編輯梯度。在最大壓力極限處（PressureLimitsMax）輸入柱子的最大題目Agilent1200高效液相色譜儀操作規(guī)程編號共5頁SOP-YQ-010A第3頁耐高壓，以保護柱子。2）單擊確定進入下一畫面。2.4柱溫箱參數(shù)設(shè)定:1）在柱溫下面的方框內(nèi)輸入所需溫度,并選中它,點擊更多鍵,選中與左側(cè)一致，使柱溫箱的溫度左右一致。2）單擊確定進入下一畫面。2.5DAD檢測器參數(shù)設(shè)定:1）在波長下方的空白處輸入所需的檢測波長,如254nm,在峰寬(響應(yīng)時間)下方點擊下拉式三角框,選擇合適的響應(yīng)時間,如>0.1min(2s)。2）在時間列表中可以插入一行，輸入隨時間切換的波長，如1min，波長=300nm。3）點擊確定進入下一畫面。2.6單擊方法菜單，選中保存方法，輸入一方法名，如“test”，單擊確定。2.7、運行序列：新建序列，在序列參數(shù)中輸入樣品信息，在序列表中輸入樣品位置，方法等，運行該序列，等儀器就緒，基線平穩(wěn)，從方法菜單中選擇運行方法，進樣。3、數(shù)據(jù)處理操作步驟3.1由主菜單上的視圖進入數(shù)據(jù)分析，到數(shù)據(jù)處理界面；題目Agilent1200高效液相色譜儀操作規(guī)程編號共5頁SOP-YQ-010A第4頁3.2由主菜單上的文件進入調(diào)用信號，調(diào)出要分析的數(shù)據(jù)文件色譜圖；3.3由主菜單上的圖形進入信號選項，調(diào)整譜圖坐標(biāo):1)點自定義量程，在時間范圍中輸入橫坐標(biāo)(時間）(例如0到10)；2)在響應(yīng)范圍:中輸入縱坐標(biāo)(響應(yīng)值）(例如-50到800)；3)在量程框中，調(diào)到全部使用相同量程；4)點擊確定退出。3.4由主菜單上的積分進入積分事件，設(shè)置、修改積分參數(shù)；1)在斜率靈敏度后，輸入斜率值；2)在峰寬后中，輸入最小峰寬值；3)在最小峰面積后，輸入最小峰面積值；4)在最小峰高后，輸入最小峰高值；5)點擊左上方帶鉤的圖標(biāo)，確認(rèn)；3.5由主菜單上的報告進入設(shè)定報告，設(shè)置報告參數(shù)：1)在定量結(jié)果欄中，選擇計算（面積百分比，外標(biāo)法，內(nèi)標(biāo)法等）；2)在目標(biāo)欄，選打印機打印，或屏幕打?。?)點擊確定退出。3.6由主菜單上的報告進入打印報告，打印報告；4、關(guān)機4.1關(guān)機前，用95%水沖洗柱子和系統(tǒng)0.5-1小時，流量0.5—1ml/min，再用100%有機溶劑沖0.5小時，然后關(guān)泵，（適于反相色譜柱）。題目Agilent1200高效液相色譜儀操作規(guī)程編號共5頁SOP-YQ-010A第5頁[正相色譜柱用適當(dāng)?shù)娜軇_洗]4.2退出化學(xué)工作站，及其它窗口，關(guān)閉計算機（用shutdown關(guān)）。4.3關(guān)閉Agilent1200各模塊電源開關(guān)。5、Agilent1200高效液相色譜儀維護保養(yǎng)：5.1氘燈是易耗品，應(yīng)最后開燈，不分析樣品即關(guān)燈；5.2開機時，打開排氣閥，100%水，泵流量5ml/min，若此時顯示壓力>10bar，則應(yīng)更換排氣閥內(nèi)玻璃料。5.3流動相使用前必須過濾，不要使用多日存放的蒸餾水（易長菌）。5.4流動相使用前必須進行脫氣處理，可用超聲波振蕩10-15min。5.5配制90%水+10%異丙醇，以每分2—3滴的速