人教選修三《基因工程的基本操作程序》

1．2基因工程的基本操作程序?qū)W習導航1.掌握目的基因獲取的常見方法。

[難點]2.學會基因表達載體構建的方法和要求。

[重點]3.理解目的基因?qū)胧荏w細胞的具體過程。4.掌握目的基因檢測與鑒定的具體操作。

[要點]新知初探思維啟動一、目的基因的獲取1..從基因文庫中獲取目的基因?qū)⒑心撤N生物的不同______的DNA片段導入受體菌的群體中儲存，各個受體菌分別含有這種生物不同的基因，稱為基因文庫。基因基億因府文屋庫失包減括膏兩粘種伙：_齒_雹_紗_響_皇_喇_灘_文惕庫眾，獄即抹包億含米一床種她生第物奮所祥有賀基飯因基的己文悄庫送；_即_把_監(jiān)_興_敞_潮_伏_項_膛_文刑庫,即凡只恨包遞含村一嘴種表生緣瑞物烘的幫一晃部我分元基兼因牌的灘文皺庫吩，角如c需D麻N跡A文伶庫巖。2呆.利繡用P蘭C兩R技墊術械擴逮增抽目傾的塑基宏因(處1眨)迅P磚C陜R的袋含落義腹：狀是累一薯項乳在卸生替物_酬_者_翅_拳_逮_復書制賓特梨定D堡N釋A片暴段托的招核拿酸警合塔成蓮技市術柴。(獵2形)目構的仗：糠短賓時功間賊內(nèi)豆大別量淋擴孟增茂目捧的廉基尸因脫。(怒3秀)原宋理屋：_弱_可_孝_崇_漲_心_革_弓_蠢_橡_聲_蔬_齡_輕_僵_。基租因助組部級分丸基稈因體秧外D塌N引A雙曾鏈杜復恰制(陳4爺)過且程慢：第勺一之步醫(yī)：池加房誠熱桶至9待0～9悔5℃裙,_厭_羅_均_兆_帥_失_輪_派_怨_國_酒_掀_恥_丸_;第框二稿步斥：悶冷累卻花至_廟_管_表_饑_骨_邁_逢_豪_℃，美引孤物蹄與嬌兩偵條洽單疑鏈D陜N妖A相渾應瞧互彩補漲序鍛列浩結透合運；第滲三煉步政：零加子熱擋至7狗0～7返5℃，謎熱怪穩(wěn)匹定D漸N憂A聚讀合吵酶(貝T摧a某q酶)從娛引蝦物恥起天始額進狹行牛互蓄補丑鏈需的析合修成飛。如珍此霧重僚復偶循托環(huán)榨多萄次照。(筐5則)特妹點局：碎指蜂數(shù)作形胞式虛擴萌增執(zhí)。D仗N蘋A解欺鏈頃為傾單榆鏈5親5～6籌0想請一阿想1．P墻C奧R過男程絮中迎，蛛需驅(qū)要傅解無旋賴酶秘嗎患？蠶所乞需防要昨的D抽N潛A聚搏合斬酶柔應信具甜有妻什帽么允特凍點索？【提槽示】P濁C凳R過渴程愉中軌，D懼N蛇A雙親鏈乏解衡開蜜是爛在諒高況溫慮下獨完她成悉的貓，蔥不其需需要猶解偏旋輛酶座；司由串于P爸C延R過軋程熔溫楚度王較強高治，煮所鴿以疾需定要戒能恨耐嗓高存溫泳的D蠟N直A聚啄合織酶侵。3河.用亡化乘學衫方貼法陽人盯工弱合奔成如漿果吳基竹因顛比騙較_的_堂_句,核箱苷片酸炕序槍列鬼又枕已殘知,也唱可房誠以不通胃過D射N榨A合支成赤儀餐用裁化族學堆方宜法槽直柱接位人蛙工噴合途成叨。二慣、悔基忙因卵表躁達淋載種體凳的斑構壤建基公因吹表菠達鬼載鑰體撒的食組嫩成絨：陜必共須棚有稅啟脊動錯子歉、_蓋_被_抓_臘_傻_皆_鐘_瓦_肉_爐_痕_、荒終勝止到子狗以遭及奪標遇記獎基必因醉等火。小目劉的回基早因三臉、屢將們目倉的閥基創(chuàng)因幼導炒入涼受阻體竭細述胞1混.紗.轉追化_聽_贈_吸_安_瞎_報_許_乞_蘿_諷_進譜入效受余體妙細絮胞蘇內(nèi)票，畜并押且暈在揭受華體矩細敢胞剪內(nèi)漢維課持委穩(wěn)架定億和臣表峽達檢的筋過護程恐，裁稱襖為陡轉敵化忙。2德.常析用渠的扒導擁入乳方母法(騰1貪)將鵲目脆的敗基灰因?qū)Щ蛉虢渲不椅锊寮氀槪涸覆善坑猛庾罡愣嘣S的跡方常法歐是_搖_醉_眉_串_泛_底_跡_轉音化變法絲式，視其套次斬還囑有兄基露因廣槍碼法未和轎花甜粉襲管狡通威道惠法孫。目謠的逗基惕因農(nóng)捏桿蛋菌(討2恭)將寇目救的找基爐因翻導始入贊動膊物訓細鉤胞證：投最粒常婚用旨的勇方俊法糟是_割_傅_事_才_剃_敗_焦_呀_宮_技養(yǎng)術蓮。使此鮮方宿法蠶的圣受嶼體咐細墾胞考多此是_狹_填_味_臭_寶_箏_弦_件_。(瘦3昨)將歷目隨的牽基業(yè)因稼導伙入淋微爐生憂物城細壯胞昏的舍方隸法素：①用_珠_震_府_砍_熊_窗_處返理飲細散胞趴，攏使典細啦胞怕處肚于薪能飄吸駁收重周叉圍撿環(huán)則境礎中D慮N基A分估子銹的姑生濫物艙狀修態(tài),這睬種鮮細坊胞蛋稱格為_吩_米_可_耍_伙_肚_搞_細瘦胞段。②固將托重損組箱表弱達撞載鈴體D唯N突A分煩子歪與遍感菜受杰態(tài)阻細拒胞損混趴合芬，服在齡一歲定熄溫榨度腳下善完賣成右轉諷化插過療程絡。顯侍微滿注疲射受喝精談卵C臺a2＋感溉受古態(tài)想晨一羽想2．羊從崗細糟胞床器戲的絮功路能搜上蜜分倉析患，鞏若吊通獄過云基灑因梨工陰程寺生定產(chǎn)始人恨的卸糖級蛋拘白價，啦可朱以嗓用份大趣腸扎桿說菌葉嗎壟？【提隱示】不丟可劉以泡，納糖儲蛋梅白挎上貢的腹糖發(fā)鏈倡是深在虎內(nèi)脫質(zhì)擊網(wǎng)森和恥高區(qū)爾旅基化體橡上忘加藝工懂完臨成蘇的饑，耐而甘內(nèi)勺質(zhì)答網(wǎng)否和畢高義爾桿基炊體埋存源在永于輛真宰核繞細償胞拳中狠，是大蹲腸盯桿疾菌環(huán)是殖原擠核攏生遣物籌，齡細遷胞垮中愉不夏含桌有器這吸兩鍵種靈細乳胞缺器喪。四哄、舌目拋的伙基物因惱的開檢旬測隸與袍鑒餃定1辱.壺.首靠先姻要缺檢請測健轉存基度因汪生腦物租的D蠟N碌A上院是比否劃插霞入四了_折_刷_傻_鼓_斜_截_繼_漏_刪,方妹法商是旁采志用_進_岡_礦_梁_愚_儀_酬_卡_脅_貪_樂_國_都_技厭術利。2既.其前次捷還敬要博檢淋測暮目你的丑基委因傅是艷否久轉薪錄測出躺了_薦_昨_仙_撈_遣_廁_咱_招,方童法鄙是雞采拐用_獎_途_拿_費_酬_己_枕_感_撥_技棋術吹。目作的捉基御因D獅N州A分券子們雜巾交m帝R刑N胃A分臺子定雜猶交3洗.最述后門檢脆測栽目子的逐基甜因若是亡否間翻膏譯常成_購_凡_梅_劑_素_旦_作_火,從氣分襖子效水蓮平聚檢絹測嘉的土方疲法如是賴采質(zhì)用_象_凱_腫_睡_奔_擇_殘_尺_傲_浙_鄭_轉_勾_技肆術第。4礙.有而時疾還駱需稼進灣行_胳_鴿_嚷_膠_姜_攔_程_感_猾_洞_水肌平泛的展鑒艷定筍。換如伸需脖要拐做港抗填蟲駱或沖抗宵病窗的頂接煮種庸實組驗奏等獎。蛋肅白腐質(zhì)抗鳴原—抗抄體扇雜屢交個償體骨生押物假學要點突破講練互動要虎點絕一“目鴉的鄉(xiāng)豐基友因研的戴獲違取”應貫注妄意嚇的熟幾搞個卻問促題1離.止.儀P允C減R技虜術總與D件N臉A復吹制很的腐比越較比較項目DNA復制PCR技術區(qū)別解旋方式解旋酶催化DNA在高溫下變性解旋場所細胞內(nèi)(主要在細胞核內(nèi))細胞外(主要在PCR擴增儀中)比較項目DNA復制PCR技術區(qū)別酶DNA解旋酶、DNA聚合酶耐熱的DNA聚合酶溫度細胞內(nèi)溫和條件控制溫度，需90℃～95℃高溫結果合成DNA分子合成DNA片段或基因聯(lián)系(1)模板：均需要脫氧核苷酸雙鏈作為模板(2)原料：均為四種脫氧核苷酸(3)酶：均需DNA聚合酶(4)引物：都需要引物，使DNA聚合酶從引物的3′端開始連接脫氧核苷酸2并.人紡工濫合上成稻目園的陵基屢因告常斧用梳方曬法人懷工瞞合腐成相目近的嬸基椅因飽的暗方糧法葬主槽要嚷有訴兩頑種籌。(顯1神)反朋轉我錄價法功，朗主滲要窯用辣于礎相裝對配分某子出質(zhì)棗量掃較犬大酒而吊又鞠不距知章其徒序偷列斯的子基躍因攀，情它斯是使以潮目餓的應基進因回的m閣R失N甚A為號模管板碎，朋借霞助遠反米轉楊錄銹酶市合計成揀堿怪基云互念補欄的尸單彩鏈D鴿N透A，揉然械后傅在D斃N息A聚刷合扶酶尼的派作講用疼下哀合噸成到雙殿鏈D離N汁A，殃其盞過格程燦如聚下拳：(掛2發(fā))化繩學坊合污成捎法估，徒即勁依咽照弱某冶一矩蛋共白判質(zhì)良的碎氨跌基娃酸羽序吉列販，弟通禮過怒密爐碼攜子匹推南算諷出典其制基司因萌序球列非，仇然脂后徒直哀接閱合巨成押目材的知基爆因癢，踢其遷過懲程迷如樸下躁：(禮2召0傅1果2恒·青勵島貞市杜高窗二騾期掩末)伴1戰(zhàn)9攤7獵0年泰，雪科亡學倚家船證唐實努了R馳N停A病代毒象能絕依紋賴R遮N論A合唉成D較N弓A的窗過醬程鉛，遼并晨發(fā)蕉現(xiàn)謙了火催辯化惑此纖過兆程膜的別酶襲。銀下予面泄為耳形顛成c頁D讀N綿A的缸過基程勿和P追C蓋R擴差增示過槽程貌示必意辭圖墊。漏請矩根勝據(jù)脂圖墓解寬回形答危下扔列勒問倉題虜：例1(洽1霧)催鉤化①過降程渠的若酶捏是_看_墓_霸_念_啄_脆_固_；呢核艙酸司酶H的鼓作勻用他是_臥_欣_棟_永_久_顯_仇_。(苗2杠)③過穩(wěn)程覆也老稱秧為D叮N訪A的挽變寶性賠，吉此湊過留程項在茶溫弄度未高染達9腿0～9亦5℃時貪才窄能傾完勻成視，達說休明D喝N描A分誘子臂具傾有_埋_消_艘_封_仿_跨_延_性爆。(谷3伶)由負圖意中漫信切息拐分肅析糾可廟知躁，俘催示化②性⑤過廢程主的績酶喝都疼是_品_咽_藥_催_寬_捷_牢_懂_蒸_倆_眼_院_常_，致兩室者釣在膛作鼓用零特訴性務上舞的訓區(qū)壓別煌是_磁_沿_斯_屈_哲_尼_亡_或_繳_鋤_雞_桐_役_銀_練_污_疼_膠_地_縮慧_幟_略_誦_癥_理_誼_拋_惜_留_五_紐奉_顯_庭_擦_巾__亭_離_王_脅_待_堆_姨_服_嘆_假_閘_婦_掏_求_賞_愧_搶_癢_痛_裹_微_師_尼_日_房誠_奶_啄_影_貍_第_師_弓_蹄_片_醫(yī)_。(寧4崇)如疏果R澤N康A單傻鏈搖中悔有烏堿諷基1閉0同0個花，季其爆中A占2龜5晴%，U占1灰5景%，艱則題通逝過博該爽過富程閃合促成矩的貪一暮個亂雙怪鏈D針N歡A片世段智中哨有熱胞賴嘧川啶_駱_鑄_裳_再_梅_師_窄_個令。【解仔析】根傍據(jù)規(guī)圖臂示孔可燥以脫看涼出靜，學該隙過酬程畝是R縮慧N寸A在昆逆繳轉離錄表酶條的里催均化暴作悠用陡下全形轎成c酬D榴N歡A跑(負期鏈D拿N話A抄)，郊構裂成R焦N沒A蛙—組D矩N歉A中波間農(nóng)體痕。便中橫間肆體沉中謀的R陸N劇A再換經(jīng)樓過R幫N急A酶H水易解侄，買而逮以檔剩夏下院的器負瘡鏈D負N免A復另制能成僅雙段鏈D質(zhì)N鋤A。騰①已過浴程屯是鈔由R切N屑A合自成D婦N兇A的缸過欄程截，杯需救要藏逆挽轉遵錄頃酶近進筋行征催晴化檢。文②央過櫻程唯是碎以套單黃鏈D肯N欣A復托制享獲勵得奧雙千鏈D把N牽A的冒過脂程壤需昆要D妹N雜A聚零合顯酶哀催緣瑞化襪。⑤數(shù)屬網(wǎng)于神雙路鏈D標N遠A復敲制煎的風過厘程錦，申需紫要D亞N足A聚堆合偷酶后催倚化得。漠⑤投過烘程痛在7斬0～7錦5℃環(huán)爆境惜下撕進勻行烈，鏡所氏需米要密的移酶牌能登夠呼耐嶼高籌溫姥?！敬鹋诎浮?承1套)反桶轉摔錄刮酶(或茫逆吉轉棉錄喂酶)分直解R訂N禁A(怠2宏)穩(wěn)路定(御3輝)語D竟N糖A聚幣合駁酶嚼催奏化⑤過步程理的綠酶液耐采高銹溫(艙4晶)構6絨0互算動安探悠究(齡1廉)上改述拜過嘗程脊中為需代要亮限著制岸酶戰(zhàn)和D典N送A連斯接露酶合嗎欠？(茅2哄)由m輝R拼N斃A逆斗轉擠錄倘形潛成佛的D角N贏A具似有侮啟貓動賣子猛嗎?【提否示】(擾1蹲)不怎需忌要喘。(懼2悲)無漏?！咎郊?guī)戶尋劈燕律】(水1輝)猛P今C燦R技片術唱不蜓需偷要色解阻旋詢酶綁，泉但耳需姨利汁用9概0～9麗5℃高青溫洋使D間N高A分沃子躁解蛛旋魂。(秘2墳)判P材C伍R技比術巧的念前派提拌是磚要暈有臭一葬段旋已還知花目由的脂基辦因撓的喚核氏苷窯酸記序從列,以袋便帶根雁據(jù)征這純一禿序賣列智合培成俱引揚物印。(杠3球)擇P演C很R技厭術摸需聾要顫耐總高壺溫皂的D渣N華A聚取合盛酶要悔點薄二緊基言因銳表怨達飾載架體么的獻構萍建1德.構步建柔基胳因鹽表擔達憤載忘體棟的吳目壞的冒：子使多目同的典基湖因羨在摩受擔體杜細棵胞哭中柴穩(wěn)同定狠存忘在屈，脫并竊且脫可視以藍遺爹傳鈔給略下濾一鍬代頑，貨使箏目禾的水基膝因野能裁夠匹表勇達社和鐵發(fā)群揮牛作洋用曾。2沉.基脹因圖表跡達背載屠體告的市構特建(膀1友)啟炭動科子餓：澆一己段黃有杏特糞殊鏈結筒構樂的D霞N脈A片構段議，謹位吩于?；疽螂p的何首擱端參。陰它捆是R扣N傭A聚姑合薪酶欄識內(nèi)別跨和患結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