實(shí)驗(yàn)三培養(yǎng)基的制備

實(shí)驗(yàn)三培養(yǎng)基的制備第1頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)三培養(yǎng)基的制備二、實(shí)驗(yàn)原理（一）培養(yǎng)基的概念指人工配制的適合微生物生長繁殖或積累代謝產(chǎn)物的混合營養(yǎng)成分，用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存各種微生物或積累代謝產(chǎn)物。第2頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)三培養(yǎng)基的制備（二）培養(yǎng)基的分類1、按成分的不同分天然培養(yǎng)基：主要成分是復(fù)雜的有機(jī)物質(zhì)，如馬鈴薯、豆餅粉、玉米粉、豆芽汁、牛肉膏、蛋白胨、血清等，如馬鈴薯培養(yǎng)基、玉米粉、豆餅粉培養(yǎng)基、血瓊培養(yǎng)基等合成培養(yǎng)基：用化學(xué)成分完全了解的純化合物藥品配制而成的培養(yǎng)基，也稱化學(xué)成分明確的培養(yǎng)基（chemicallydefinedmedium），如高氏一號培養(yǎng)基、查氏培養(yǎng)基等半合成培養(yǎng)基：在以天然有機(jī)物作為微生物營養(yǎng)來源的同時，適當(dāng)補(bǔ)充一些成分已知的化學(xué)藥品所配制的培養(yǎng)基，如PDA培養(yǎng)。第3頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)三培養(yǎng)基的制備（二）培養(yǎng)基的分類2、按物理狀態(tài)的不同分液體培養(yǎng)基：一類外觀呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基，不含任何凝固劑。固體培養(yǎng)基：在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑。凝固劑：瓊脂（1.5~2%）和明膠（5~12%）半固體培養(yǎng)基：瓊脂（0.5%）脫水培養(yǎng)基：又稱脫水商品培養(yǎng)基或預(yù)制干燥培養(yǎng)基，指含有除水以外的一切成分的商品培養(yǎng)基，使用時只要加入適量水分并加以滅菌即可，是一類既有成分精確又使用方便等優(yōu)點(diǎn)的現(xiàn)代化培養(yǎng)基。第4頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)三培養(yǎng)基的制備（二）培養(yǎng)基的分類3、按培養(yǎng)基的用途分選擇培養(yǎng)基：利用微生物對某種或某些化學(xué)物質(zhì)的敏感性不同，在培養(yǎng)基中加入這些物質(zhì)，抑制不需要的微生物生長，而利于所需分離的微生物的生長，從而達(dá)到分離或鑒別某種微生物的目的。如馬丁氏培養(yǎng)基鑒別培養(yǎng)基：主要用于不同類型微生物的生理生化鑒定；如伊紅美藍(lán)乳糖培養(yǎng)基第5頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)三培養(yǎng)基的制備（三）培養(yǎng)基的簡介1、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基是一種應(yīng)用最廣泛和最普通的細(xì)菌基礎(chǔ)培養(yǎng)基。牛肉膏：提高碳源、能源、磷酸鹽和維生素；蛋白胨：提供氮源、維生素；NaCl：提供無機(jī)鹽；pH：稀酸或稀堿將pH值調(diào)至中性或微堿性。第6頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)三培養(yǎng)基的制備（三）培養(yǎng)基的簡介2、高氏一號培養(yǎng)基用來培養(yǎng)和觀察放線菌形態(tài)特征的合成培養(yǎng)基。主要特點(diǎn)是：含有各種化學(xué)成分已知的無機(jī)鹽。3、馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（即PDA培養(yǎng)基）用來培養(yǎng)和觀察真菌的半合成培養(yǎng)基。第7頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)三培養(yǎng)基的制備三、實(shí)驗(yàn)儀器與用具電磁爐、搪瓷缸、50ml的小燒杯、紗布、玻璃棒、稱量紙、分析天平、1mol/lNaOH溶液、1mol/lHCl溶液、pH試紙四、實(shí)驗(yàn)材料與試劑牛肉膏、蛋白胨、NaCl、可溶性淀粉、KNO3、K2HPO4·3H2O、MgSO4·7H2O、FeSO4·7H2O、蒸餾水、瓊脂、馬鈴薯、葡萄糖第8頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)三培養(yǎng)基的制備五、實(shí)驗(yàn)操作1、計算2、稱量藥品，如牛肉膏、蛋白胨；3、溶化按照順利加入，防治沉淀產(chǎn)生；對于可溶性淀粉，先用少量冷水調(diào)成糊狀，再放入沸水中。瓊脂溶化溫度96℃，凝固溫度~40℃。4、調(diào)pH值5、分裝①液體分裝：以試管高度的1/4左右為宜；一般不超過三角瓶容積的1/2為宜；②固體分裝：以不超過試管高度的1/5左右為宜；③半固體分裝：以不超過試管高度的1/3左右為宜；第9頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)三培養(yǎng)基的制備五、實(shí)驗(yàn)操作6、加塞；7、包扎：注明培養(yǎng)基的名稱、組別、配制日期；8、滅菌：0.1MPa，121℃，滅菌20min即可。9、擱置斜面：斜面長度不超過試管高度的1/2左右為宜；10、無菌檢查將滅菌培養(yǎng)基放入37℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24~48h，以檢查滅菌是否徹底。第10頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)三培養(yǎng)基的制備六、實(shí)驗(yàn)作業(yè)1、2組配制200ml的牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、3組配制200ml的高氏一號培養(yǎng)基，4組配制200ml的PDA培養(yǎng)基。2、培養(yǎng)基配制好后，為什么必須立即滅菌?如何檢查滅菌后的培養(yǎng)基是無菌的？3、配制合成培養(yǎng)基加入微量元素時最好用什么方法加入?天然培養(yǎng)基為什么不需要另加微量元素?第11頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)三培養(yǎng)基的制備六、實(shí)驗(yàn)作業(yè)4．你配制的高氏I號培養(yǎng)基有沉淀產(chǎn)生嗎?說明產(chǎn)生或未產(chǎn)生的原因。5、細(xì)菌能在高氏I號培養(yǎng)基上生長嗎?為了分離放線菌，你認(rèn)為應(yīng)該采取什么措施?第12頁，課件共13頁，創(chuàng)作于2023年2月實(shí)驗(yàn)三培養(yǎng)基的制備六、實(shí)驗(yàn)作業(yè)6．現(xiàn)有培養(yǎng)基成分如下葡萄糖10gK2HPO4·3H2O0.2gNaCl0.2gMgSO4·7H2O0.2gK2SO40.2gCaCO35g

瓊脂20g蒸餾水