低密度脂蛋白膽固醇測定標準操作規(guī)程

低密度脂蛋白膽固醇測定標準操作規(guī)程1.檢驗原理：采用能特異性水解樣品中高密度脂蛋白（HDL）、極低密度脂蛋白（VLDL）及乳糜微粒（CM）的表面活性劑，釋放其膽固醇與酶試劑反應，產生的在無偶聯(lián)劑時被消耗而不顯色。當加入試劑R2時，低密度脂蛋白（LDL）被水解，與酶試劑反應而測定低密度脂蛋白膽固醇的含量。第一步：LDL-CLDL-C不溶性復合物膽固醇酯+游離膽固醇+脂肪酸HDL-C,VLDL-C,CM和游離膽固醇+膽甾-4-烯-3-酮++第二步LDL-C不溶性復合物LDL-C可溶性復合物LDL-C可溶性復合物+膽甾-4-烯-3-酮++4-氨基安替比林+TOOS紅色醌+TOOS:N-乙基-間甲基苯胺-2-羥丙基磺酸鈉2.試劑主要組成成分產品組成成分濃度R11，4-哌嗪二乙磺酸倍半鈉（PIPES緩沖液）50mmol/L4-氨基安替比林（4-AA）5mmol/L膽固醇氧化酶800U/L膽固醇酯酶400U/L過氧化物酶3kU/LTritonX-405（表面活性劑）0.1%(V/V)R21，4-哌嗪二乙磺酸倍半鈉（PIPES緩沖液）50mmol/LN-乙基-間甲基苯胺-2-羥丙基磺酸鈉（TOOS）2mmol/L抗壞血酸氧化酶100U/LTritonX-1003%(V/V)CAL低密度脂蛋白膽固醇(2.0-4.0)mmol/L3.樣本要求；靜脈采血后立即分離。新鮮無溶血血清。在22～25℃可保存8小時，2～8℃保48小時，-20℃可保存7天。樣本應避免反復凍融。4.檢驗方法；儀器法（詳見DF-603/DI-600標準操作規(guī)程）5參考范圍：樣本參考范圍mmol/L血清1.50-3.106.檢驗結果的解釋：6.1樣本含量超出線性范圍時，建議用0.9%（W/V）的氯化鈉溶液稀釋樣本。建議最大稀釋倍數(shù)不超過10倍。6.2.單位換算：ukat/L=U/L×16.67×7.檢驗方法的局限性7.1結果的準確性依賴于儀器的校正和測定溫度、時間的控制。7.2若試劑渾濁，或以水空白在600nm處吸光度大于0.05時不能使用。7.3檢驗結果僅供參考，不作為臨床診斷唯一依據。8.產品性能指標8.1空白吸光度：在600nm波長，光徑1cm時，空白吸光度A≤0.05。8.2分析靈敏度：在600nm處，光徑1cm時，測定1mmol/L的樣本，吸光度差值△A＞0.038.3線性區(qū)間：試劑的線性區(qū)間為[0.30-10]mmol/L,a）線性相關系數(shù)r應不小于0.995；b線性相對偏差不超過±10%。8.4精密度8.4.1重復性：重復測試（2.50±0.50）mmol/L和（5.00±1.00）mmol/L的樣本，所得結果的變異系數(shù)（CV）應不大于3.0%8.4.2批間差：測試（2.50±0.50）mmol/L的樣本，所得結果的批間相對極差（R）應不大于10%.8.5準確度：相對偏差應不大于±10%。8.6校準品8.6.1外觀：凍干粉，復溶后為淡黃色液體。8.6.2準確度：校準生化分析儀和試劑后，測定校準品，相對偏差應不大于10%。8.6.3均一性：瓶間均一性：CV≤5%8.7干擾試驗干擾物濃度（g/L）是否有干擾抗壞血酸0.3無明顯干擾脂血3.0無明顯干擾血紅蛋白3.5無明顯干擾無明顯干擾：添加干擾物后