腫瘤免疫與CART細(xì)胞治療-課件

腫瘤免疫與CAR-T細(xì)胞治療12020/11/13腫瘤免疫與CAR-T細(xì)胞治療12020/11/13主要內(nèi)容腫瘤免疫逃逸腫瘤免疫治療CAR-T細(xì)胞治療22020/11/13主要內(nèi)容腫瘤免疫逃逸22020/11/13精品資料精品資料你怎么稱呼老師？如果老師最后沒有總結(jié)一節(jié)課的重點(diǎn)的難點(diǎn)，你是否會認(rèn)為老師的教學(xué)方法需要改進(jìn)？你所經(jīng)歷的課堂，是講座式還是討論式？教師的教鞭“不怕太陽曬，也不怕那風(fēng)雨狂，只怕先生罵我笨，沒有學(xué)問無顏見爹娘……”“太陽當(dāng)空照，花兒對我笑，小鳥說早早早……”腫瘤免疫與CART細(xì)胞治療-課件腫瘤抗原定義：細(xì)胞癌變過程中新出現(xiàn)的抗原以及過度表達(dá)的抗原物質(zhì)的總稱產(chǎn)生機(jī)制新的蛋白質(zhì)蛋白的特殊降解產(chǎn)物基因突變或重排使蛋白結(jié)構(gòu)發(fā)生改變隱蔽的抗原表位暴露多種膜蛋白分子的異常聚集胚胎抗原或分化抗原的異常高表達(dá)52020/11/13腫瘤抗原定義：細(xì)胞癌變過程中新出現(xiàn)的抗原以及過度表達(dá)的抗原物腫瘤特異性抗原：腫瘤相關(guān)抗原：（Tumorspecificantigen,TSA)（Tumorassociatedantigen,TAA)腫瘤細(xì)胞特有，正常細(xì)胞不存在正常細(xì)胞組織也存在，但腫瘤細(xì)胞中含量明顯增高62020/11/13腫瘤特異性抗原：腫瘤相關(guān)抗原：（Tumorspecifi二.機(jī)體抗腫瘤免疫機(jī)制非特異性免疫：特異性免疫巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞、多形核細(xì)胞體液免疫細(xì)胞免疫72020/11/13二.機(jī)體抗腫瘤免疫機(jī)制非特異性免疫：特異性免疫巨噬細(xì)胞、(一）體液免疫機(jī)制1.CDC、ADCC、調(diào)理作用：通過補(bǔ)體、巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞、中性粒細(xì)胞介導(dǎo)殺傷腫瘤細(xì)胞82020/11/13(一）體液免疫機(jī)制1.CDC、ADCC、調(diào)理作用：通過補(bǔ)2.封閉抗體：抑制：與腫瘤細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化、增殖、轉(zhuǎn)移有關(guān)的抗原如p185可抑制增殖、轉(zhuǎn)鐵蛋白受體可抑制生長、粘附分子可阻止克隆形成與轉(zhuǎn)移增強(qiáng)抗體：封閉抗原位點(diǎn)，阻礙殺傷性免疫細(xì)胞的作用92020/11/132.封閉抗體：抑制：如p185可抑制增殖、轉(zhuǎn)鐵蛋白受（二）細(xì)胞免疫機(jī)制1.T細(xì)胞腫瘤Ag腫瘤細(xì)胞的MHCI類分子遞呈CD8+CTL脫落后由APC攝取、MHCII類分子遞呈CD4+Th102020/11/13（二）細(xì)胞免疫機(jī)制1.T細(xì)胞腫瘤Ag腫瘤細(xì)胞的MHCICD8+CTL直接殺傷分泌多種細(xì)胞因子IFN-

、TNFCD4+Th釋放CK如IL-2：激活CTL、NK、巨噬細(xì)胞釋放IFN-

、TNF：促進(jìn)MHCI類表達(dá)、有利于直接殺傷促進(jìn)B細(xì)胞活化、增殖、分化少數(shù)可直接殺傷腫瘤細(xì)胞112020/11/13CD8+CTL直接殺傷分泌多種細(xì)胞因子IFN-、TNFC122020/11/13122020/11/13132020/11/13132020/11/131.NK細(xì)胞不依賴抗體或補(bǔ)體、不需預(yù)先活化、無MHC限制即可直接殺傷腫瘤細(xì)胞通過激活性受體/抑制性受體的平衡而識別特異性免疫應(yīng)答的效應(yīng)階段（ADCC）（三）非特異性免疫142020/11/131.NK細(xì)胞不依賴抗體或補(bǔ)體、不需預(yù)先活化、通過激活性受2、

T細(xì)胞3.巨噬細(xì)胞作為APC，激活T巨噬細(xì)胞殺傷腫瘤152020/11/132、T細(xì)胞3.巨噬細(xì)胞作為APC，激活T巨噬細(xì)胞殺傷三.腫瘤免疫逃逸機(jī)制（一）與腫瘤有關(guān)的因素1.抗原缺失或抗原調(diào)變遺傳不穩(wěn)定性突變或丟失免疫原性極弱抗原調(diào)變(antigenicmodulation)免疫系統(tǒng)攻擊導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞表面抗原表位減少或丟失，從而逃避殺傷162020/11/13三.腫瘤免疫逃逸機(jī)制（一）與腫瘤有關(guān)的因素1.抗原缺2.MHCI類分子表達(dá)減少3.缺乏協(xié)同刺激分子：B7、ICAM-1、LFA-14.漏逸：腫瘤迅速生長超越機(jī)體清除能力5.腫瘤導(dǎo)致的免疫抑制：分泌某些CK（如TGF-

、IL-10）營造局部免疫豁免（如高表達(dá)FasL破壞免疫細(xì)胞）172020/11/132.MHCI類分子表達(dá)減少3.缺乏協(xié)同刺激分子：182020/11/13182020/11/13（二）與宿主有關(guān)的因素免疫功能低下或缺陷免疫抑制免疫耐受狀態(tài)192020/11/13（二）與宿主有關(guān)的因素免疫功能低下或缺陷免疫抑制免疫耐受狀態(tài)腫瘤免疫治療（cancerimmunotherapy）是利用人體的免疫機(jī)制，通過主動或被動的方法來增強(qiáng)患者免疫功能，達(dá)到殺傷腫瘤細(xì)胞的目的，為腫瘤生物治療方法之一。202020/11/13腫瘤免疫治療（cancerimmunotherap腫瘤免疫治療的原理是通過增強(qiáng)抗腫瘤免疫應(yīng)答和打破腫瘤的免疫抑制產(chǎn)生抗腫瘤作用。

強(qiáng)化免疫應(yīng)答打破免疫耐受212020/11/13腫瘤免疫治療的原理是通過增強(qiáng)抗腫瘤免疫應(yīng)答和打破腫瘤腫瘤免疫治療分類一、主動免疫治療二、被動免疫治療三、非特異性免疫調(diào)節(jié)劑治療222020/11/13腫瘤免疫治療分類一、主動免疫治療二、被動免疫治療三、非特異性一、主動免疫治療

也稱為腫瘤疫苗，主要是利用腫瘤細(xì)胞或腫瘤抗原物質(zhì)免疫機(jī)體，使宿主免疫系統(tǒng)產(chǎn)生針對腫瘤抗原的抗腫瘤免疫應(yīng)答，從而阻止腫瘤生長、轉(zhuǎn)移和復(fù)發(fā)。腫瘤疫苗是對已患病者進(jìn)行免疫接種，激發(fā)腫瘤患者機(jī)體產(chǎn)生對腫瘤的特異性免疫應(yīng)答?？僧a(chǎn)生免疫記憶，抗腫瘤作用比較持久。

分類：腫瘤細(xì)胞疫苗、腫瘤多肽（蛋白）疫苗、樹突狀細(xì)胞疫苗、抗獨(dú)特型抗體疫苗、DNA疫苗232020/11/13一、主動免疫治療也稱為腫瘤疫苗，主要是利用腫瘤

1.腫瘤細(xì)胞疫苗

2.腫瘤多肽（蛋白）疫苗

3.DC疫苗

4.抗獨(dú)特型抗體疫苗

5.DNA疫苗T-cellDC腫瘤全細(xì)胞疫苗腫瘤細(xì)胞裂解物疫苗基因修飾的腫瘤細(xì)胞疫苗3.DC疫苗4.抗獨(dú)特型抗體疫苗2.腫瘤多肽（蛋白）疫苗5.DNA疫苗腫瘤的主動免疫治療分類1.腫瘤細(xì)胞疫苗242020/11/131.腫瘤細(xì)胞疫苗T-cellDC腫瘤全細(xì)胞疫苗腫瘤細(xì)胞裂解已批準(zhǔn)進(jìn)行Ⅲ期臨床試驗(yàn)及臨床應(yīng)用的腫瘤疫苗舉例適應(yīng)證疫苗名稱疫苗性質(zhì)黑色素瘤M-Vax腫瘤細(xì)胞疫苗MDX-1379多肽疫苗Melacine異體腫瘤細(xì)胞裂解物疫苗Allovectin-7?基因修飾腫瘤疫苗前列腺癌Sipuleucel-T自體樹突狀細(xì)胞疫苗CG1940/CG8711GM-CSF修飾腫瘤細(xì)胞疫苗肺癌Stimuvax（L-BLP25）/BLP25脂質(zhì)體包埋蛋白疫苗Belagenpumatucel-L基因修飾腫瘤細(xì)胞疫苗胰腺癌Algenpantucel-L基因修飾腫瘤細(xì)胞疫苗GV-1001端粒酶肽疫苗腎癌TroVAX（MVA-5T4）基因修飾腫瘤疫苗IMA901多肽疫苗結(jié)直腸癌OncoVAX自體腫瘤細(xì)胞疫苗卵巢癌Abagowomab抗獨(dú)特型抗體疫苗中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤DCVax?-Brain自體樹突狀細(xì)胞疫苗Rindopepimut（CDX-110）多肽疫苗淋巴瘤BiovaxID?（Id-KLH/GM-CSF）抗獨(dú)特型抗體疫苗252020/11/13已批準(zhǔn)進(jìn)行Ⅲ期臨床試驗(yàn)及臨床應(yīng)用的腫瘤疫苗舉例適應(yīng)證疫苗名稱二、被動免疫治療被動免疫治療（passiveimmunotherapy）又稱為過繼免疫治療（adoptiveimmunotherapy）是被動性的將具有抗腫瘤活性的免疫制劑或細(xì)胞轉(zhuǎn)輸給腫瘤患者，以達(dá)到治療腫瘤的目的。

被動免疫治療與腫瘤疫苗不同，并不需要機(jī)體產(chǎn)生初始免疫應(yīng)答，因此適用于已經(jīng)沒有時(shí)間或能力產(chǎn)生初始免疫應(yīng)答的腫瘤晚期患者。分類：單克隆抗體治療;過繼性細(xì)胞治療

262020/11/13二、被動免疫治療被動免疫治療（passive

又稱之為生物導(dǎo)彈技術(shù)，通過補(bǔ)體系統(tǒng)、自然殺傷細(xì)胞和阻斷信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路起抗腫瘤作用。

嵌合型單抗達(dá)到95%以上人源化，減少了免疫原性。

利妥西單抗－治療惡性淋巴瘤；曲妥珠單抗－治療乳癌，聯(lián)合化療增強(qiáng)療效。單克隆抗體治療272020/11/13又稱之為生物導(dǎo)彈技術(shù)，通過補(bǔ)體系統(tǒng)、自然殺傷細(xì)過繼性細(xì)胞治療過繼性細(xì)胞治療是通過分離自體或異體免疫效應(yīng)細(xì)胞，經(jīng)體外激活并回輸，直接殺傷腫瘤或激發(fā)機(jī)體抗腫瘤免疫反應(yīng)。

過繼性細(xì)胞治療的關(guān)鍵在于產(chǎn)生數(shù)量足夠、能夠識別并殺傷腫瘤的免疫細(xì)胞，以及效應(yīng)細(xì)胞能夠到達(dá)腫瘤所在部位，并在腫瘤周圍被激活且發(fā)揮抗瘤作用。淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（LAK）、自然殺傷細(xì)胞（NK）、細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（CIK）、腫瘤浸潤T淋巴細(xì)胞（TIL）、γδT細(xì)胞、自然殺傷T細(xì)胞（NKT）、CD3單抗激活的殺傷細(xì)胞（CD3AK）、供者淋巴細(xì)胞輸注（donorlymphocyteinfusion，DLI）、受體基因修飾的T細(xì)胞等282020/11/13過繼性細(xì)胞治療過繼性細(xì)胞治療是通過分離自體或異體免疫

淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（LAK）是外周血單個(gè)核細(xì)胞在體外經(jīng)IL-2刺激活化后誘生的具有非特異性細(xì)胞毒作用的效應(yīng)細(xì)胞，是多種免疫細(xì)胞的群體。LAK細(xì)胞抗癌譜廣，抗腫瘤作用不依賴抗原致敏。LAK細(xì)胞通過直接接觸或釋放炎癥細(xì)胞因子間接殺傷腫瘤。臨床應(yīng)用：由于其體外增殖活性不強(qiáng)，體內(nèi)抗瘤活性有限，且為維持LAK細(xì)胞體內(nèi)活性，需要注射大劑量IL-2，而出現(xiàn)較強(qiáng)毒副作用，因此逐漸淡出臨床應(yīng)用。淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞292020/11/13淋巴因子激活的殺傷細(xì)胞（LAK）是外周血單個(gè)核細(xì)胞在體

腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞（TIL）是從腫瘤部位分離出的一群淋巴細(xì)胞，經(jīng)IL-2等細(xì)胞因子擴(kuò)增后產(chǎn)生。其表型以CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞為主，具有一定的腫瘤特異性和MHC限制性。TIL的抗腫瘤效果是LAK的50～100倍。臨床應(yīng)用：TIL已應(yīng)用于臨床試驗(yàn)，主要治療皮膚、腎、肺、頭頸部、肝、卵巢部位的原發(fā)或繼發(fā)腫瘤。但其取材不便和制作過程的相對復(fù)雜性限制了其在臨床的應(yīng)用。腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞302020/11/13腫瘤浸潤性淋巴細(xì)胞（TIL）是從腫瘤部位分離出的一群

細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokineinducedkillercells，CIK）是外周血單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)抗CD3單克隆抗體，以及IL-2、IFN-γ和IL-1α等細(xì)胞因子體外誘導(dǎo)分化獲得的NK樣T細(xì)胞。CIK呈CD3+CD56+表型，既具有NK細(xì)胞的非MHC限制性特點(diǎn)，又有T淋巴細(xì)胞抗腫瘤活性。具有增殖速度快，殺傷活性高，腫瘤殺傷譜廣等優(yōu)點(diǎn)。臨床應(yīng)用：目前發(fā)現(xiàn)CIK在腎癌、肝癌、肺癌、白血病等多種腫瘤中具有抗瘤活性。

細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞312020/11/13細(xì)胞因子誘導(dǎo)的殺傷細(xì)胞（cytokineinduce

NK細(xì)胞可識別MHC-I表達(dá)下調(diào)或缺失的腫瘤細(xì)胞，無需抗原預(yù)先致敏即可以直接殺傷腫瘤細(xì)胞，其殺傷腫瘤細(xì)胞的機(jī)制有：通過分泌穿孔素、顆粒酶來殺傷腫瘤細(xì)胞；通過死亡配體介導(dǎo)靶細(xì)胞凋亡；分泌炎癥因子間接殺傷腫瘤細(xì)胞；通過ADCC效應(yīng)殺傷腫瘤細(xì)胞。臨床應(yīng)用：隨著純化技術(shù)及擴(kuò)增技術(shù)的不斷改進(jìn)，NK細(xì)胞逐漸成為過繼性免疫治療重要組成部分。NK細(xì)胞目前仍處于Ⅰ/Ⅱ期臨床試驗(yàn)階段。NK細(xì)胞322020/11/13NK細(xì)胞可識別MHC-I表達(dá)下調(diào)或缺失的腫瘤細(xì)胞，無

γδT細(xì)胞是一類T細(xì)胞，因其TCR由γ和δ肽鏈組成而被命名，多為CD4-CD8-雙陰性表型。其殺傷腫瘤細(xì)胞的機(jī)制非常復(fù)雜，主要涉及到穿孔蛋白途徑和Fas/FasL介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡途徑，也可以通過NK樣的受體，使之像NK細(xì)胞一樣可直接識別蛋白質(zhì)或肽類抗原，以非MHC限制性方式殺傷腫瘤細(xì)胞。臨床應(yīng)用：以γδT細(xì)胞為基礎(chǔ)的免疫治療在肺癌、腎癌、惡性黑色素瘤等Ⅰ期臨床研究中已顯示出良好效果，尤其是轉(zhuǎn)移性惡性黑色素瘤，提示其可能成為腫瘤治療的新途徑。γδT細(xì)胞332020/11/13γδT細(xì)胞是一類T細(xì)胞，因其TCR由γ和δ肽鏈組成而被三、非特異性免疫調(diào)節(jié)劑治療（一）效應(yīng)細(xì)胞刺激劑

——刺激活化免疫效應(yīng)細(xì)胞

（二）免疫負(fù)調(diào)控抑制劑

——抑制免疫負(fù)調(diào)控細(xì)胞或分子342020/11/13三、非特異性免疫調(diào)節(jié)劑治療（一）效應(yīng)細(xì)胞刺激劑（二）免疫負(fù)α干擾素

具有免疫調(diào)節(jié)、抗增殖、誘導(dǎo)分化、促凋亡、抗血管生成等多種作用，是第一個(gè)被證實(shí)具有抗腫瘤活性的細(xì)胞因子咪喹莫特是Toll樣受體7（toll-likereceptor7，TLR7）的激動劑，能增強(qiáng)固有免疫應(yīng)答和適應(yīng)性免疫應(yīng)答效應(yīng)細(xì)胞刺激劑

IL-2是調(diào)控T細(xì)胞和NK細(xì)胞等淋巴細(xì)胞生長的重要因子卡介苗既可以激發(fā)固有免疫應(yīng)答，又可以激發(fā)適應(yīng)性免疫應(yīng)答（一）效應(yīng)細(xì)胞刺激劑352020/11/13α干擾素咪喹莫特效應(yīng)細(xì)胞刺激劑

IL-2卡介苗（一）效應(yīng)細(xì)胞Denileukindiftitox由IL-2的受體結(jié)合片斷與具有酶活性的白喉毒素跨膜片段重組融合，與IL-2受體（CD25）結(jié)合后，被攝取進(jìn)入胞漿，裂解釋放白喉毒素A鏈，持續(xù)抑制蛋白的合成，導(dǎo)致細(xì)胞死亡。CTLA-4單克隆抗體Ipilimumab和tremelimumab都是CTLA-4人源化單克隆抗體，主要通過抑制活化T細(xì)胞的CTLA-4與抗原遞呈細(xì)胞的B7結(jié)合，打破免疫耐受，增強(qiáng)T細(xì)胞的活性。（二）免疫負(fù)調(diào)控抑制劑362020/11/13DenileukindiftitoxCTLA-4單克隆PD-L1抗體PD-1是程序性死亡受體-1，大部分表達(dá)于活化T細(xì)胞表面，為免疫抑制性受體，與其配體PD-L1、PD-L2相互作用傳遞抑制性信號，在免疫應(yīng)答中發(fā)揮負(fù)向調(diào)控作用。由于腫瘤細(xì)胞高表達(dá)PD-L1，故阻斷PD-L1與PD-1的結(jié)合可阻止此種機(jī)制介導(dǎo)的免疫抑制作用。（二）免疫負(fù)調(diào)控抑制劑372020/11/13PD-L1抗體（二）免疫負(fù)調(diào)控抑制劑372020/11/嵌合抗原受體（chimericantigenreceptor,CAR）T細(xì)胞技術(shù)；是過繼細(xì)胞免疫治療（adoptivecellularimmunotherapy，ACI)的一種；通過基因改造技術(shù)，讓患者T細(xì)胞表達(dá)嵌合抗原受體，使效應(yīng)T細(xì)胞的靶向性、殺傷性和持久性均較常規(guī)應(yīng)用的免疫細(xì)胞高，并可克服腫瘤局部免疫抑制微環(huán)境和打破宿主免疫耐受狀態(tài)；是一種特異性的免疫細(xì)胞抗腫瘤治療。什么是CAR-T細(xì)胞

382020/11/13嵌合抗原受體（chimericantigenrecepT淋巴細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞的天敵，在腫瘤免疫應(yīng)答中起重要作用，對腫瘤細(xì)胞有極強(qiáng)的殺傷作用。對T細(xì)胞進(jìn)行基因工程處理，從而在其表面表達(dá)能夠識別特異性腫瘤抗原的特殊受體稱為嵌合抗原受體（CAR），同時(shí)在受體的胞內(nèi)段可加上引起T細(xì)胞活化的信號傳遞區(qū)域。腫瘤對患者的免疫系統(tǒng)具有抑制作用，限制了自身免疫功能的誘導(dǎo)和激活，因此可以把患者的免疫細(xì)胞放到一種可以避開腫瘤抑制因素的環(huán)境中進(jìn)行激活和擴(kuò)增，然后再將擴(kuò)增后的免疫細(xì)胞回輸患者，從而使患者的免疫功能迅速增強(qiáng)，達(dá)到殺傷腫瘤細(xì)胞的作用，這種療法就是過繼性免疫療法392020/11/13T淋巴細(xì)胞是腫瘤細(xì)胞的天敵，在腫瘤免疫應(yīng)答中起重要作用，對腫嵌合抗原受體（CARs）是由一個(gè)胞外抗原識別域（通常是一個(gè)單鏈抗體，也可以是多肽或者其他蛋白質(zhì)）和一個(gè)胞內(nèi)信號域組成。CAR的胞外部分用來識別特異性的腫瘤抗原，隨后胞內(nèi)信號域會刺激T細(xì)胞增殖，并且通過細(xì)胞溶解和細(xì)胞因子釋放來消除腫瘤細(xì)胞。402020/11/13402020/11/13第一代CARs的胞內(nèi)信號域是CD3ζ信號鏈（signal1），這一代產(chǎn)品在臨床試驗(yàn)中效果有限，可能由于移植T細(xì)胞的活化誘導(dǎo)細(xì)胞死亡（AICD）或者T細(xì)胞擴(kuò)增的持續(xù)性不好所導(dǎo)致。第二代CARs相比第一代CARs增加了一個(gè)胞內(nèi)共刺激信號域（signal2）。在過去的5年里，對于第二代含有CD28或者4-1BB(CD137)共刺激信號域的抗CD19CAR-T，在治療B淋巴細(xì)胞白血病的臨床試驗(yàn)中都表現(xiàn)出優(yōu)異的療效，但是仍然需要尋找更好的共刺激信號分子，來解決第二代CAR-T產(chǎn)品作用不持久等問題。第三代CARs不僅包含CD3ζ信號域，還包括兩個(gè)共刺激信號分子（圖1），這些共刺激信號分子主要包括CD28、4-1BB以及OX40(CD134)等，在臨床前研究中發(fā)現(xiàn)第三代CAR-T細(xì)胞療法效果要優(yōu)于第二代產(chǎn)品412020/11/13第一代CARs的胞內(nèi)信號域是CD3ζ信號鏈（signal1CAR構(gòu)成（1）----scFV（單鏈抗體）識別腫瘤表面抗原特異性422020/11/13CAR構(gòu)成（1）----scFV（單鏈抗體）識別腫瘤表面抗原CAR構(gòu)成（2）----TCR/CD3/ζ產(chǎn)生信號，激活T淋巴細(xì)胞有效性432020/11/13CAR構(gòu)成（2）----TCR/CD3/ζ產(chǎn)生信號，激活T淋CAR構(gòu)成（3）----co-stimulator增殖與存活加入CD28，產(chǎn)生IL-2等加入CD137（4-1BB），增強(qiáng)多種能力

CD28是T細(xì)胞表面的一個(gè)蛋白，能夠?yàn)門細(xì)胞提供共刺激信號，對T細(xì)胞的活化和存活具有重要作用。T細(xì)胞刺激信號通過CD28，能夠促進(jìn)多種白介素的分泌。

CD137，又被稱作4-1BB、TNFRSF9等，它是TNF受體家族成員。CD137表達(dá)于活化后的T細(xì)胞，也表達(dá)于樹突細(xì)胞，濾泡樹突狀細(xì)胞、NK細(xì)胞、粒細(xì)胞以及炎癥位置的血管壁細(xì)胞等。

CD137可以作為共刺激信號激活T細(xì)胞，能夠增強(qiáng)T細(xì)胞的增殖、存活能力、細(xì)胞裂解作用以及IL-2分泌等。442020/11/13CAR構(gòu)成（3）----co-stimulator增殖與第一代CAR-T細(xì)胞發(fā)表時(shí)間：1989年；嵌合受體的形成方法：Eshhar研究小組將免疫球蛋白樣scFv和FcεRI受體(γ鏈)或CD3復(fù)合物(ζ鏈)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)域融合形成嵌合受體；激活方式：表達(dá)CAR的T細(xì)胞以抗原依賴、非MHC限制的方式結(jié)合腫瘤抗原,啟動并活化特異性殺傷腫瘤反應(yīng)；CARs表達(dá)的穩(wěn)定性依賴于所用的胞內(nèi)信號域；大多數(shù)試驗(yàn)在細(xì)胞擴(kuò)增、體內(nèi)存活時(shí)間、細(xì)胞因子分泌等方面存在不足，治療效果不明顯。CAR-T細(xì)胞的發(fā)展過程452020/11/13第一代CAR-T細(xì)胞CAR-T細(xì)胞的發(fā)展過程452020/1462020/11/13462020/11/13第二代CAR-T細(xì)胞發(fā)表時(shí)間：2010年；嵌合受體的形成方法：T細(xì)胞的完全活化有賴于雙信號*和細(xì)胞因子的作用。因此，依照T細(xì)胞活化的雙信號學(xué)說,第二和第三代CARs在嵌合受體上加上如CD28、CD134(OX40)和CD137(4-1BB)等共刺激分子(costimulatorymolecule,CM)，以提高T細(xì)胞的細(xì)胞毒性、增殖活性,維持T細(xì)胞應(yīng)答,延長T細(xì)胞存活時(shí)間等（圖2）；CD28、CD134對提高初始T細(xì)胞獲得持久的體外增殖和較強(qiáng)的細(xì)胞因子分泌非常重要；在治療慢淋中觀察到：體內(nèi)擴(kuò)增1000倍以上,而且在血液和骨髓中存活的時(shí)間也超過6個(gè)月,分泌的細(xì)胞因子如干擾素-γ、CXCL9等較治療前顯著增高。CAR-T細(xì)胞的發(fā)展過程472020/11/13第二代CAR-T細(xì)胞CAR-T細(xì)胞的發(fā)展過程472020/1T細(xì)胞激活需要雙信號第一信號為特異性信號,由TCR識別抗原遞呈細(xì)胞表面的抗原肽-MHC復(fù)合物所啟動;第二信號為協(xié)同刺激信號,

通過CD28/B7等重要的共刺激分子,促進(jìn)IL-2合成,并使T細(xì)胞充分活化及免于凋亡。482020/11/13T細(xì)胞激活需要雙信號第一信號為特異性信號,由TCR識別抗原第三代CAR-T細(xì)胞發(fā)表時(shí)間：2012年；嵌合受體的形成方法：以逆轉(zhuǎn)錄病毒為載體構(gòu)建第三代CAR-T細(xì)胞(scFvCD20-CD28-CD137-CD3ζ）；兩個(gè)共刺激因子，進(jìn)一步提高細(xì)胞增殖能力及細(xì)胞毒性患者輸注后4小時(shí)血液就檢測出有高水平的IFN-γ、GM-CSF、TNF-α和IL-6等細(xì)胞因子；效應(yīng)細(xì)胞在體內(nèi)存活的時(shí)間超過12個(gè)月；由于目前第三代CAR-T細(xì)胞臨床應(yīng)用還比較少,故其安全性和有效性是否就一定優(yōu)于第二代CAR-T細(xì)胞,以及選擇怎樣的共刺激分子組合,還需進(jìn)一步觀察。CAR-T細(xì)胞的發(fā)展過程492020/11/13第三代CAR-T細(xì)胞CAR-T細(xì)胞的發(fā)展過程492020/12nd&3rdgenerationCAR結(jié)構(gòu)示意圖502020/11/132nd&3rdgenerationCAR結(jié)構(gòu)示意圖5512020/11/13512020/11/13第四代CAR-T細(xì)胞（展望）整合自殺基因，精確調(diào)控，細(xì)胞因子釋放（如IL-12）激活等第五代CAR-T細(xì)胞（展望）通用CAR-TCAR-T高度個(gè)性化不便于cGMP管理成本非常高CAR-T細(xì)胞的發(fā)展過程522020/11/13第四代CAR-T細(xì)胞（展望）CAR-T細(xì)胞的發(fā)展過程5220TAA（Tumor-AssociatedAntigen，腫瘤相關(guān)抗原）：

即腫瘤所表達(dá)的抗原，是scFV的結(jié)合抗原，對CAR-T起定向作用。PerfectTAA：1.僅存在于腫瘤表面，不在任何正常組織中表達(dá)；2.為腫瘤生長所必需，能產(chǎn)生強(qiáng)大的效力；3.不能通過免疫編輯和腫瘤逃逸而逃脫。TAA基本要求：1.抗原必須表達(dá)在細(xì)胞表面；2.腫瘤之外的抗原表達(dá)絕對不能在重要臟器或者細(xì)胞類型上（例如造血干細(xì)胞）；3.為了防止抗原逃逸，所有的腫瘤細(xì)胞都必須表達(dá)這個(gè)抗原，換句話說，抗原對于腫瘤維持其腫瘤特性來說是必需的。CAR-T技術(shù)中TAA概念532020/11/13TAA（Tumor-AssociatedAntigen，CAR-T細(xì)胞治療技術(shù)的五大優(yōu)勢（1）

CAR-T細(xì)胞治療采用的是患者自體來源的細(xì)胞回輸技術(shù)，避免了移植物抗宿主病等疾病。近年來，美國多項(xiàng)臨床試驗(yàn)數(shù)據(jù)證實(shí)，惡性腫瘤的CAR-T細(xì)胞治療是一項(xiàng)安全有效的生物治療技術(shù)。針對CAR-T細(xì)胞所用載體長達(dá)192人·年的安全性觀測結(jié)果顯示，載體是非常安全的。

未名CAR-T技術(shù)全程處于GMP標(biāo)準(zhǔn)潔凈車間，嚴(yán)格質(zhì)量控制，全流程檢查，全部合格后才放行，安全性絕對可靠。安全性高542020/11/13CAR-T細(xì)胞治療技術(shù)的五大優(yōu)勢（1）CAR-T細(xì)胞CAR-T細(xì)胞治療技術(shù)的五大優(yōu)勢（2）CAR-T細(xì)胞治療技術(shù)的精髓就是為T細(xì)胞裝上“精確導(dǎo)航系統(tǒng)”，對腫瘤細(xì)胞進(jìn)行靶向“定點(diǎn)清除”，成功避免了對正常組織和細(xì)胞的傷害。這個(gè)“精確導(dǎo)航系統(tǒng)”就是位于嵌合抗原受體上的scFv片段，它能準(zhǔn)確識別腫瘤細(xì)胞表面的腫瘤相關(guān)抗原，然后激活CAR-T細(xì)胞，對腫瘤細(xì)胞進(jìn)行殺傷。靶向性強(qiáng)552020/11/13CAR-T細(xì)胞治療技術(shù)的五大優(yōu)勢（2）CAR-T細(xì)胞CAR-T細(xì)胞治療技術(shù)的五大優(yōu)勢（3）

CAR-T細(xì)胞治療技術(shù)，除了靶向性強(qiáng)之外，還實(shí)現(xiàn)了T細(xì)胞體內(nèi)增殖以及長時(shí)期存活，并能形成中樞記憶T細(xì)胞。嵌合抗原受體中包含的腫瘤相關(guān)抗原單鏈抗體、細(xì)胞激活信號以及共刺激信號，為T細(xì)胞精準(zhǔn)有效的殺傷作用提供了強(qiáng)有力的支持。目前對某些類型腫瘤的治愈率（CR）超過60%，部分類型的腫瘤治愈率（CR）甚至超過90%。臨床效果好562020/11/13CAR-T細(xì)胞治療技術(shù)的五大優(yōu)勢（3）CAR-T細(xì)胞CAR-T細(xì)胞治療技術(shù)的五大優(yōu)勢（4）副作用小CAR-T細(xì)的低燒、乏力等癥狀，完全可控胞整個(gè)治療全程，只需抽血與回輸即可，幾乎無創(chuàng)，對患者正常生活的影響很小。CAR-T細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的精確殺傷，極大地避免了對身體正常組織和細(xì)胞的損害。CAR-T細(xì)胞治療的臨床副作用很少，主要為CAR-T回輸之后，可能會出現(xiàn)短時(shí)間內(nèi)。572020/11/13CAR-T細(xì)胞治療技術(shù)的五大優(yōu)勢（4）副作用小CARCAR-T細(xì)胞治療技術(shù)的五大優(yōu)勢（5）適用范圍廣適用CAR-T細(xì)胞治療的腫瘤呼吸系統(tǒng)肺癌（小細(xì)胞肺癌、鱗癌、腺癌）、鼻咽癌等消化系統(tǒng)肝癌、胃癌、結(jié)直腸癌等泌尿系統(tǒng)腎癌、腎上腺癌及其轉(zhuǎn)移癌等血液系統(tǒng)急慢性淋巴細(xì)胞白血病、淋巴瘤（T淋巴瘤除外）等其他腫瘤惡性黑色素瘤、乳腺癌、前列腺癌、舌癌等CAR-T細(xì)胞治療還適用下述患者手術(shù)切除原發(fā)灶，但免疫力低下、恢復(fù)慢的患者腫瘤已廣泛轉(zhuǎn)移、無法進(jìn)行手術(shù)的患者對放化療毒副作用較大或?qū)Ψ呕煵幻舾械幕颊呓?jīng)手術(shù)及放化療治療后，需預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)的患者582020/11/13CAR-T細(xì)胞治療技術(shù)的五大優(yōu)勢（5）適用范圍廣適用CAR-CAR-T細(xì)胞療法的治療過程CAR-T細(xì)胞的生產(chǎn)和治療主要有以下幾個(gè)步驟：（1）白細(xì)胞分離：將病人的T細(xì)胞從外周血中分離出來；（2）T細(xì)胞活化：使用抗體包被的磁珠（人工樹突狀細(xì)胞）來激活T細(xì)胞；（3）轉(zhuǎn)染：在體外對T細(xì)胞進(jìn)行基因改造，使其表達(dá)嵌合抗原受體；（4）擴(kuò)增：基因修飾過的T細(xì)胞在體外擴(kuò)增；（5）化療：在T細(xì)胞回輸之前對病人進(jìn)行化療預(yù)處理；（6）回輸：將基因修飾過的T細(xì)胞回輸入病人體內(nèi)（圖2）。592020/11/13CAR-T細(xì)胞療法的治療過程592020/11/13602020/11/13602020/11/13基因?qū)氲妮d體主要分為病毒類和非病毒類;病毒載