氨基葡萄糖的檢測方法匯總

氨基葡萄糖的檢測1=葡萄糖的一個羥基被一個氨基取代的化合物。分子式C6H13O5N,俗稱氨基糖，簡稱氨糖。又名葡萄糖胺，廣泛存在于自然界；市面上氨糖主要分為鹽酸氨糖與硫酸氨糖兩種。目前，氨糖的分析方法主要有分光光度法、HPLC和HPIC等，最常用的分析方法為高效液相色譜法，近年來離子色譜技術在糖類化合物分析中的應用也越來越廣泛。分光光度法（《中國藥典》2010年版二部附錄IVA）測定。1對照品溶液的制備：精密稱取經105干燥至恒重的鹽酸氨基葡萄糖對照品適量，加水溶解制成每1ml約含25u的溶液作為對照品溶液。2供試品溶液的制備：精密稱取樣品約25mg，置100ml量瓶中，用水溶解并稀釋至刻度，搖勻。精密量取10ml，置100ml量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，既得。3測定法：分別取對照品溶液及供試品溶液各5ml分別置具塞試管中，另取具塞試管蒸餾水5ml作為空白，各加乙酰丙酮試液（取乙酰丙酮2ml，加0.5mol/L碳酸鈉溶液至50ml，臨用前配置成1.0ml，搖勻，置沸水浴中（1分鐘后密塞），準確加熱25分鐘，取出，用冰水迅速冷卻后，加無醛乙醇3.0ml，60水浴中保溫10分鐘后，再加對二甲氨基苯甲醛試液（對二甲氨基苯甲醛0.8g，加無醛乙醇15ml及鹽酸15ml，搖勻）1.0ml，強力振搖，并繼續(xù)在60水浴中保溫1小時，立即用冷水冷卻至室溫。參照分光光度法（《中國藥典》2010年版二部附錄IVA）在525nm波長處分別測定吸光度，計算，既得。HPLC-ELSD法（高效液相色譜法）依據：GB/T20365-20061、 主要使用儀器高效液相色譜儀，ELSD蒸發(fā)光散射檢測器，色譜柱2、 標準溶液的配制準確稱取硫酸軟骨素和氨基葡萄糖標準品各約0.1g。分別加1mL乙臘，超聲1min后，加純水定容至10mL。吸取上述硫酸軟骨素和氨基葡萄糖標準溶液各0.1、0.2、0.4、0.8、1.6mL,分別合并于5個10mL容量瓶中，并加入1:9的乙臘溶液定容，配制成0.1、0.2、0.4、0.8、1.6mg/mL的混標溶液。3、 樣品處理準確稱取樣品約0.5g與50mL容量瓶中，加入5mL乙臘，超聲分散1min。加純水定容至50mL，搖勻，超聲15minX2,靜置，取上清液5mL,加入1:9乙臘溶液定容至25mL，搖勻，待用。4、 樣品測定：取10uL標準溶液及樣品提取液，注入高效液相色譜儀，以保留時間定性，吸收峰高或峰面積與標準比較定量。5、 計算結果h/hsx阪75X=m式中：X一樣品中硫酸軟骨素或氨基葡萄糖的含量，g/100gh一樣品對應峰高取對數hs—標準對應峰高取對數P—標準對應濃度取對數，mg/mLm—樣品質量，gHPIC-PAD法(離子色譜法)主要儀器：離子色譜儀(Dionex)：電化學檢測器，Au工作電極，Ti對電極，pH/Ag/AgCl復合參比電極，糖類分析柱。硫酸氨基葡萄糖和鹽酸氨基葡萄糖它們作用是相似的，主要成份是氨基葡萄糖，它能刺激軟骨細胞產生有正常多聚體結構的蛋白多糖，抑制損傷軟骨的酶如膠原酶和磷脂酶A2,并可防止損傷細胞的超氧化自由基的產生，從而可延緩骨性關節(jié)炎的病理過程和疾病的進展，改善關節(jié)活動，緩解疼痛?；A研究顯示：鹽酸根形式氨基葡萄糖的濃度高于硫酸.相對的生物可利用度較高；鹽酸氨基葡萄糖形式每有效劑量中含鹽量低于硫酸根形式，其原因是硫酸氨基葡萄糖需要氯化鈉作為穩(wěn)定劑，含鹽量可高達30%，這不利于需要減少飲食中鈉鹽攝入的骨關節(jié)炎患者；氨基葡萄糖對骨關節(jié)炎的治療作用主要與已與載體分解了的、可吸收的氨基葡萄糖劑量有關，而與酸根載體處于結合狀態(tài)的氨基葡萄糖不能被吸收，無法被生物利用。因此，無論何種形式的氨基葡萄糖，只要能在體內與載體分解，并能被機體吸收，其生物學作用應是相似的。同時，任何種類的氨基葡萄糖由于所結合的酸根載體不同，其氨基葡萄糖的結合率各不相同，鹽酸氨基葡萄糖中含氨基葡萄糖83%。硫酸氨基葡萄糖中含65%，任何臨床研究無論采用何種