吳茱萸多基原、多產(chǎn)地毒性特征變化研究

吳茱萸多基原、多產(chǎn)地毒性特征變化研究

吳茱萸是一種天然的吳茱萸。材料表面疏毛吳兩種基原和地區(qū)Ⅰ吳茱萸(重慶紅廟村),Ⅱ吳茱萸(重慶合川),Ⅲ吳茱萸(貴州遵義),Ⅳ石虎(貴州松桃),Ⅴ石虎(湖南黃雷),Ⅵ石虎(湖南涼傘),Ⅶ疏毛吳茱萸(貴州玉屏),Ⅷ疏毛吳茱萸(貴州印江),Ⅸ疏毛吳茱萸(貴州松桃)共3個基原9個產(chǎn)地,由四川省中醫(yī)藥科學(xué)院資源與種植研究所舒光明研究員實(shí)地采集并鑒定。以上Ⅰ~Ⅸ號藥材各取1kg,加水煎煮2次,每次加水10倍,第1次煎煮2h,第2次煎煮1.5h,濾過,濃縮。依次得405,499,426,489,701,679,590,587,695g濃稠藥膏,每克藥膏含原生藥2.47,2.00,2.35,2.04,1.43,1.47,1.69,1.70,1.44g,-20℃冰箱保存。實(shí)驗(yàn)動物及分組KM小鼠,SPF級,雌雄各半,體重18~22g,由四川省中醫(yī)藥科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動物中心提供,許可證號SCXK(川)2008-0019。leica落實(shí)u2004全自動生化測試儀(7020型日立,日本產(chǎn))。BMJ-Ⅲ型包埋機(jī)及病理組織包埋冷凍臺(常州市中威電子儀器有限公司);LEICARM2135切片機(jī),PHY-Ⅲ型病理組織漂烘儀(LeicaMicrosystems,Germany);XYTX-2000新藥圖像彩色定量分析系統(tǒng)。PB302型電子天平。AST(批號0111011),ALT(批號0211021),TC(批號0211011),TG(批號0311021)均由四川省邁克科技有限責(zé)任公司提供。方法大鼠急性毒性試驗(yàn)參照急性毒性(半數(shù)致死量LD制備大鼠長期毒性試驗(yàn)根據(jù)吳茱萸水提取物對小鼠急性毒性試驗(yàn)和作者正在進(jìn)行的大鼠長期毒性試驗(yàn)的毒性劑量,并綜合各藥物提取物的特點(diǎn),每個試驗(yàn)樣品設(shè)原生藥16.67g·kg統(tǒng)計(jì)方法計(jì)量數(shù)據(jù)用表示,采用PEMS3.1統(tǒng)計(jì)軟件對各組數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析,進(jìn)行組間比較,結(jié)果大鼠急性毒性試驗(yàn)單次給藥量大鼠有致死或未被毒性表現(xiàn)Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅶ,Ⅷ,Ⅸ號樣品1d單次最大給藥量動物均有毒性表現(xiàn)和死亡,Ⅳ,Ⅴ,Ⅵ單次最大給藥量有毒性表現(xiàn)但未出現(xiàn)動物死亡,各樣品組均難以測出LD大鼠亞急毒試驗(yàn)Ⅰ~Ⅸ號藥材的水提取物灌胃小鼠,每天給藥劑量為生藥16.67g·kg肝臟組織病理學(xué)觀察Ⅰ~Ⅸ號藥材的水提取物灌胃小鼠15d后,解剖取肝臟,肉眼觀察藥物組肝臟表面顆粒略顯粗糙。正常對照組小鼠肝臟指數(shù)為41.8g·kg討論石虎水提取物單次給藥劑量結(jié)果顯示,各試驗(yàn)組小鼠急性毒性癥狀基本相同;吳茱萸與疏毛吳茱萸的毒性劑量(MTD)無明顯差別,毒性大小與產(chǎn)地相關(guān);3個產(chǎn)地石虎水提取物單次最大給藥量小鼠均未出現(xiàn)死亡?？赡芘c石虎的提取率略高,最大給藥劑量低于其他2個品種有關(guān)。至于石虎與吳茱萸,疏毛吳茱萸急性毒性大小是否存在差異,有待增加藥材產(chǎn)地進(jìn)一步研究,才能更加全面的反映吳茱萸基原產(chǎn)地毒性特征。肝靶器官毒性相關(guān)臨床有個案報(bào)道大劑量服用吳茱萸有劇烈腹痛、頭痛、暈厥、嘔吐胃內(nèi)容物、視物不清、錯覺、胸悶等癥狀拓展吳兩種藥物的生物質(zhì)量評價體系從本課題組前期對吳茱萸多基原產(chǎn)地24個樣品化學(xué)成分含量測定發(fā)現(xiàn),不同產(chǎn)地不同基原吳茱萸的指紋相似度差異不大,但有效成分吳茱萸堿、吳茱萸次堿、檸檬苦素含量均有一定的差異,這個差異與吳茱萸品種基原無相關(guān)性,主要與產(chǎn)地有關(guān)綜上所述,吳茱萸有毒,肝臟為其毒性靶器官之一,其毒性大小與產(chǎn)地關(guān)系密切,而與基原似無明顯相關(guān)性。提示藥典將吳茱萸、疏毛吳茱萸、石虎3個品種收載在吳茱萸藥材項(xiàng)下存在一定的合理性。為了更好的說明吳茱萸多基原和產(chǎn)地的毒性相特征及相關(guān)性,需再增加產(chǎn)地樣本數(shù),并結(jié)合化學(xué)研究,進(jìn)一步明確吳茱萸的毒性物質(zhì)基礎(chǔ)和機(jī)制。同時,在中藥材質(zhì)量控制方面,亦可以加入藥材的生物質(zhì)量評價方法,從毒性、藥效、化學(xué)成分含量多方面綜合評價中藥材質(zhì)量的優(yōu)劣Ⅰ~Ⅸ號樣品給藥后,各組樣品毒性癥狀產(chǎn)生時間和恢復(fù)時間基本一致,主要表現(xiàn)為怠動,小鼠扭體運(yùn)動,呼吸急促等。怠動的發(fā)生時間一般為藥后5min~4h;扭體運(yùn)動發(fā)生時間為藥后2~20min;呼吸急促發(fā)生時間為藥后5min~4h。動物給藥4h后動物行為活動基本恢復(fù)正常。3.1.2毒性劑量3.2.1對各局部alt的影響藥后15d,Ⅰ,Ⅱ,Ⅶ,Ⅸ號組ALT升高,與對照組比較有顯著性差異(P<0.05或P<0.01)。其余各組ALT均有不同程度升