潔凈區(qū)微生物基礎知識培訓

潔凈區(qū)微生物基礎知識培訓第1頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月《藥品生產質量管理規(guī)范》附錄中明確規(guī)定：潔凈區(qū)內的人員數(shù)量應嚴格控制，其工作人員（包括維修、輔助人員）應定期進行衛(wèi)生和微生物學基礎知識、潔凈作業(yè)等方面的培訓及考核；對進入潔凈室的臨時人員進行指導和監(jiān)督?！段⑸飳W》第2頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月醫(yī)藥工業(yè)潔凈室必須以塵粒和微生物為環(huán)境控制對象二者相比，微生物更難以控制。1、存在范圍廣2、生長速度快3、生存能力強第3頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月什么是微生物？

微生物（Microorganism）通常是描述一切不借助顯微鏡用肉眼看不見的微小生物，包括病毒、細菌、真菌、原生動物、和某些藻類。第4頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物的種類具有細胞結構的微生物沒有細胞結構的微生物：病毒原核生物：（由原核細胞構成的）真核微生物（由真核細胞構成的）真菌顯微藻類原生動物細菌草履蟲水綿放線菌第5頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物的共同特點

（小、多、快、強、廣）（1）體積小，面積大（細胞以微米、納米來計算）

（2）吸收多，轉化快（3）生長旺，繁殖快如大腸桿菌（4）適應強，易變異如感冒病毒（5）分布廣，種類多

第6頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月分解者微生物消費者動物環(huán)境土壤、空氣、水生產者植物（包括部分微生物）微生物在生態(tài)系統(tǒng)中的地位：消費者，部分生產者第7頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月微生物對環(huán)境的有害影響植物病原菌：稻瘟病煙草花葉病煙草野火病動物病原菌：雞霍亂豬瘟(口涕疫)人類的疾?。悍堑湫头窝?SARS）愛滋病流感傷寒第8頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月常見污染藥品制劑的微生物1、葡萄球菌可引起局部感染2、大腸桿菌膽道和尿道感染3、綠膿桿菌化膿性感染、中耳炎、肺炎4、枯草桿菌結膜炎5、酵母菌使糖分解，藥液產生有機酸6、霉菌使制劑霉壞，酸敗變質第9頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月潔凈室內微生物在哪里空氣水人員器具第10頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月空氣中的微生物灰塵——微生物的飛行器微生物不是憑空存在，99%的微生物都附在顆粒上?？刂瓶諝庵械奈⒘?shù)，就是控制了微生物數(shù)量?；覊m、微粒具有沉降和粘附在趨勢，所以同一區(qū)域內，地面是微粒相對集中在地方，也是微生物相對較多的地方，墻壁也容易粘附灰塵。第11頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月98版GMP潔凈度級別塵粒最大允許數(shù)/立方米微生物最大允許數(shù)≥0.5μm≥5μm浮游菌/立方米沉降菌/皿100級3,50005110,000級350,0002,0001003100,000級3,500,00020,00050010300,000級10,500,00060,0001,00015第12頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月Airlock兩扇門不能同時打開AirLock倉庫or外包間潔凈區(qū)走廊OrDISP高效過濾器高效過濾器氣流第13頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月Airlock（緩沖間）的作用控制空氣對流，減少外界臟空氣中的微粒、灰塵進入車間。必須保持緩沖間門的關閉，不得同時開啟。第14頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月空氣自凈和微粒的沉降與粘附空氣自凈有死角頂送頂回（潔凈走廊），地面頂送側回（清洗間，操作間），對面的墻角，頂棚。微粒沉降和粘附不能用腳踏在墊倉板和料桶上。不得跑跳、大聲喧嘩。不靠在墻上或其他物體上。第15頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月水－微生物的樂園

水體是微生物廣泛分布的第二個天然環(huán)境。

水中的細菌來自土壤、塵埃、污水、人畜排泄物及垃圾等。

第16頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月《藥品生產質量管理規(guī)范》第四章《設備》第三十四條中明確規(guī)定：純化水、注射用水的制備、儲存和分配應能防止微生物的滋生和污染。儲罐和輸送管道所用材料應無毒、耐腐蝕。管道的設計和安裝應避免死角、盲管。儲罐和管道要規(guī)定清洗、滅菌周期第17頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月制藥工業(yè)對水質的要求藥廠的水源：城市自來水、井水等達到飲用水標準的水源?？诜苿浩瑒?、顆粒劑、糖漿……容器清洗：飲用水容器最終淋洗：純化水小容量注射劑：1～5ml配制容器清洗：純化水容器最終淋洗：注射用水第18頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月人

潔凈室中最大的微生物污染源1、人在代謝過程中會釋放和分泌污染物。2、人體表面、衣服能沾染、攜帶污染物。3、人在潔凈室內的各種動作也會產生微粒和微生物。第19頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月人體內外微生物的分布1、皮膚：表皮葡萄球菌、白色葡萄球菌、八疊球菌屬細菌、類白喉棒桿菌、金黃色葡萄球菌等2、口腔：唾液鏈球菌、溶血鏈球菌、乳酸桿菌、流感桿菌、類白喉棒桿菌等3、上呼吸道：包括喉、鼻道和鼻咽。甲型鏈球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感桿菌、乙型鏈球菌、葡萄球菌、綠膿桿菌、大腸桿菌、變形桿菌等。4、下呼吸道：包括氣管、支氣管和肺。健康人的下呼吸道是無菌的。5、胃腸道：大腸埃希氏菌、產氣桿菌、變形桿菌、糞產堿桿菌、糞鏈球菌、梭桿菌屬、螺旋體屬、乳桿菌屬、梭菌屬、擬桿菌屬中的一些種6、泌尿生殖道：常見的有嗜酸乳桿菌、類白喉棒桿菌、葡萄球菌、鏈球菌和大腸桿菌第20頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月如何阻斷人體污染源《藥品生產質量管理規(guī)范》中明確規(guī)定：進入潔凈室（區(qū)）的人員不得化妝和佩帶飾物，不得裸手直接接觸藥品?！簟端幤飞a質量管理規(guī)范》中明確規(guī)定：無菌工作服必須包蓋全部頭發(fā)、胡須及腳部，并能阻留人體脫落物。第21頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月國外實驗資料，可以認為人員的發(fā)菌量有以下數(shù)據(jù)可供參考。①潔凈室內當工作人員穿無菌服時，靜止時的發(fā)菌量一般為10～300個／(min·人)，軀體一般活動時的發(fā)菌量為150～1000個／(min·人)，快步行走時的發(fā)菌量為900—2500個／(min·人)。②咳嗽一次的發(fā)菌量一般為70～700個／(min·人)，噴嚏一次的發(fā)菌量一般為4000～60000個／(min·人)。③穿平常衣服時發(fā)菌量為3300～62000個／(min·人)。④無口罩發(fā)菌量：有口罩發(fā)菌量為(1：7)～(1：14)。⑤發(fā)菌量：發(fā)塵量為(1：500)～(1：1000)。可知潔凈室內穿無菌衣人員的靜態(tài)發(fā)菌量一般不超過300個／(min·人)，動態(tài)發(fā)菌量一般不超過1000個／(min·人)。第22頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月我們的更衣流程一次更鞋：阻斷外界粘在鞋底的垃圾、顆粒及微生物。相對而言，腳底是最臟的部分。脫去外套：阻斷外界沉降在外套上的顆粒和微生物。一更洗手：規(guī)范的洗手能消除手部皮膚的污垢和大部分的微生物。洗手一定要用洗手液和充足的流水。二更帶口罩：阻斷鼻腔、呼吸道的微生物發(fā)散，潔凈區(qū)內不能脫下口罩帶發(fā)套：阻斷頭發(fā)、頭皮表面的微生物發(fā)散。保證發(fā)套完整的包裹頭發(fā)。穿連體服：阻斷體表皮膚的微生物發(fā)散。潔凈區(qū)內不能解開連體服手消毒：再次消除手部的細菌和微生物。75%的酒精能殺滅99%的微生物。二次更鞋：阻斷一更、二更內沉降在地板上的顆粒和微生物。潔凈區(qū)工作鞋不能穿出二更的鞋箱外。第23頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月平時的衛(wèi)生習慣勤洗澡、洗頭，勤換內衣去除皮屑、頭屑等人體脫落物，保持體表潔凈。勤剪頭發(fā)工作時，頭皮不容易出汗，易被紙發(fā)套全部包裹。勤剪手指甲指甲內能夠藏污納垢，有很多的致病微生物。勤換鞋準備兩雙鞋每天交替穿著，保證鞋內干燥無異味。第24頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月器具清洗：最后淋洗用水:純化水。清洗后按要求包裝并有清潔標簽，注明清潔日期、有效期至和清洗人儲存有效期，混合器，7天；部件，包括不銹鋼桶、Bar、篩網(wǎng)等，30天第25頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月消毒（disinfection）：殺死物體上病原微生物的方法，并不一定殺死含芽胞的細菌或非病原微生物。

滅菌（sterilization）：殺死物體上所有微生物的方法。包括殺滅細菌芽胞在內的全部病原微生物和非病原微生物。

抑菌（bacteriostasis）：抑制體內或體外細菌的生長繁殖。

防腐（antisepsis）：防止或抑制體外細菌生長繁殖的方法。

無菌（asepsis）：不存在活的細菌。第26頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月消毒注意事項消毒劑濃度合適，針對特定范圍內的細菌選擇相應的消毒劑消毒劑在一定周期內輪換使用，以防細菌耐藥。我公司常用消毒劑為：0.2%新潔爾滅、75%酒精溶液紫外燈消毒時記錄使用時間，紫外燈的輸出功率隨使用時間增加而降低。國產紫外燈的平均壽命（點到70%額定功率的時間）一般為2000h，超過平均壽命時，就達不到預期效果，必須更換。我公司規(guī)定紫外燈使用時間為1000h。第27頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月熱原與內毒素許多細菌、病毒和真菌（如酵母菌）都能產生熱原。熱原是微量即可引起恒溫動物體溫異常升高的物質的總稱。主要物質為細菌內毒素、胞壁酰二肽及其他抗原抗體復合物、半抗體原物質和某些藥物（類固醇）等。1、細菌內毒素一般指革蘭陰性細菌細胞壁的結構成分，主要是脂多糖。2、細菌內毒素生物學活性可分為兩類：一是致病作用，一是保護性反應。3、其他理化特性①耐熱性：120℃加熱4h，可破壞98%。180℃加熱2h或250℃加熱30min，才可徹底破壞。②濾過性：其體積小，約在1~5nm之間，故能通過濾器進入濾液中。③具有水溶性及不揮發(fā)性。④能被強酸、強堿和氧化劑破壞第28頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月熱原與內毒素4、熱源引入的途徑從溶劑中帶進從原料中帶進從容器、用具、管道和裝置等帶進制備過程中的污染從輸液器帶入第29頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月熱原與內毒素5、消除細菌內毒素的方法高溫破壞法：可用180℃干烤3~4h或250℃干烤30min。吸附法：一般選用活性炭。蒸餾法：此法僅限于制備蒸餾水。化學酸堿和氧化法。離子交換法。反滲透法。凝膠過濾法。超濾法第30頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月藥品的微生物污染藥品微生物污染：微生物的產生、附著而給藥品及生產環(huán)境帶來不良影響。藥品的微生物污染也稱染菌。污染藥品的細菌：常見污染藥物制劑的細菌是一些生命力較強的細菌，如：葡萄球菌、大腸桿菌、綠膿桿菌、枯草桿菌及一些霉菌，抵抗力弱的細菌一般不易造成污染。藥品的微生物污染源：空氣、水、廠房與設備、藥品生產用原輔料、包裝材料、昆蟲和其它嚙齒動物、生產操作人員第31頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月消毒與滅菌下列術語常用于表示物理或化學方法對微生物的殺滅程度消毒：殺死物體上病源微生物的方法,并不一定能殺死細菌的芽胞。消毒所用的試劑稱為消毒劑。滅菌：殺滅物體上所有微生物的方法。滅菌比消毒要求高，包括殺滅細菌芽孢在內的全部病原微生物和非病原微生物。抑菌：抑制體內或體外細菌的生長繁殖。常用的抑菌劑為各種抗生素，可抑制細菌的繁殖。防腐：防止或抑制體外細菌生長繁殖的方法，細菌一般不死亡。同一種化學藥品在高濃度時為消毒劑，低濃度時常為防腐劑。無菌：不存在活的細菌。防止細菌進入人體或其他物品的操作技術，為無菌操作。第32頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月★芽孢芽孢是細菌的休眠體，在適宜的條件下可以重新轉變成為營養(yǎng)態(tài)細胞；一般的芽孢在普通的條件下可保存幾年至幾十年的生活力；世界上最古老的芽孢：2.5億年；其對熱力、干燥、輻射、化學消毒等理化因素有強大的抵抗力；殺滅芽胞最可靠的方法是高壓蒸汽滅菌。第33頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月消毒與滅菌一、物理滅菌方法熱力滅菌法輻射殺菌法濾過除菌法超聲波殺菌法干燥與低溫抑菌法第34頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月消毒與滅菌熱力滅菌法：使蛋白質、酶及核酸永久性破環(huán)，細胞膜溶解，導致細胞發(fā)生不可逆轉的死亡。1、干熱滅菌法—采用灼燒或干熱空氣滅菌，使用方便，適用于玻璃器皿和瓷器等耐高溫的固體物的滅菌。2、濕熱滅菌法—利用熱蒸汽殺死微生物。

高壓蒸汽滅菌：利用高溫高壓蒸汽進行滅菌的方法，蒸汽的穿透力較熱空氣強可以殺死一切微生物，包括細菌的芽孢，真菌的孢子或休眠體等耐高溫的個體。最可靠最適用最廣泛的滅菌方法。第35頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月消毒與滅菌輻射滅菌法

1、紫外線：波長200-300nm的紫外線具有殺菌作用。穿透物質的能力很差，一般要求紫外燈距離照射物不超過1.0米為宜

2、電離輻射高速電子、X射線、γ射線

3、微波波長1mm~1m第36頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月消毒與滅菌濾過除菌法用物理阻留的方法將液體或空氣中的細菌除去,以達到除菌目的。濾菌器含有微細小孔≤0.22微米,只允許液體或氣體通過,而大于孔徑的細菌等顆粒不能通過。適用范圍：血清、毒素、抗生素以及空氣等的除菌。第37頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月消毒與滅菌二、化學滅菌方法許多化學藥物能影響微生物的化學組成、物理結構和生理活性，從而發(fā)揮防腐、消毒及滅菌的作用。潔凈室(區(qū))應定期消毒，使用的消毒劑不得對設備、物料和成品產生污染。消毒劑品種應定期更換，防止產生耐藥菌株。第38頁，課件共42頁，創(chuàng)作于2023年2月

消毒與滅菌

★常用消毒劑種類和用途類別作用機制常用種類用途酚類蛋白變性，細胞膜損傷石炭酸地面、器具表面、皮膚消毒醇類蛋白變性75％酒精皮膚、體溫計消毒氧化劑氧化、蛋白沉淀二氧化氯地面、器具表面、皮膚消毒重金屬鹽氧化、蛋白酶變性紅汞、硫柳汞皮膚、粘膜、小創(chuàng)傷消毒氧化劑氧化、蛋白沉淀過氧乙酸、碘酒塑料、玻璃器材、皮膚消毒表面活性劑蛋白變性，細胞膜損傷0.1％新潔而滅地面、器具表面、皮膚消毒第