瑞替加濱胃漂浮型緩釋片的制備及體外評價

瑞替加濱胃漂浮型緩釋片的制備及體外評價

瑞利加林是一種新型抗癲癇藥物，由氨基丙烯酸組成。根據(jù)研究，它具有開顱劑和硝基鉀通道開劑的作用，可用作鉀離子通道的擴張劑和氨基酸（gaba）的增強劑。因此，瑞利加林可以從不同的機制中控制癲癇的發(fā)作，緩解疾病。由于瑞替加濱片為薄膜包衣的速釋片,其半衰期相對較短(6~8h),患者用藥頻繁(3次·d從瑞替加濱藥物本身來說,其原料藥在酸中溶解度較高,而在pH>4.0的介質(zhì)中幾乎不溶通過對影響藥物釋放度的因素進行深入研究,我們根據(jù)流體動力學平衡體系設(shè)計的胃內(nèi)漂浮片以親水凝膠為骨架材料,遇胃液后表面凝膠膨脹,形成一層屏障,可延緩骨架的水化速度以維持制劑的密度小于胃液而漂浮于胃液表面,延長制劑的體內(nèi)滯留時間,并使吸收增加1藥品、試劑與儀器旋轉(zhuǎn)壓片機(上海天凡藥機制造廠);ZRS-8G智能溶出儀(上海天大天發(fā));UV-1750紫外分光光度計(日本島津);CH10槽型混合機(江蘇黎明制藥機械有限公司);YK60型顆粒機(江蘇黎明制藥機械有限公司)。瑞替加濱原料藥(安徽萬邦醫(yī)藥科技有限公司,批號:20121201,藥用級);瑞替加濱對照品(ToromtoResearchChemicalsInc,批號:1-MIC-175-1,純度:98%);羥丙基纖維素(HPMC)K100m、K15m和K4m(安徽山河藥用輔料股份有限公司,批號分別為131001、20609、30905);乳糖(ForemostFarms,批號:8511021261);微晶纖維素(MCC)(FmcBiopoilmer,批號:p212824109);碳酸氫鈉(國藥集團化學試劑有限公司,批號:20121102);硬脂酸鎂(MS)(安徽山河藥用輔料股份有限公司,批號:20121203);瑞替加濱市售片(規(guī)格:300mg/片,葛蘭素史克集團有限公司,批號:ERS20130211)。2方法和結(jié)果2.1槽型篩選-藥物處理法在預(yù)試驗基礎(chǔ)上基本確定了處方的輔料種類,分別為HPMCK15m、乳糖、微晶纖維素、碳酸氫鈉、硬脂酸鎂;取處方量的過80目篩的原輔料(除硬脂酸鎂外)按等量遞增法加入CH10槽型混合機,混勻15min,在機器轉(zhuǎn)動過程中加入95%乙醇作為潤濕劑,制得濕顆粒,減壓干燥,待水分在1%~3%時,取出顆粒,折算加入硬脂酸鎂,混勻,壓圓形片(直徑12mm),使片劑硬度保持在3~4kg,每片含主藥300mg。2.2體外釋放度測定2.2.1測定波長的選擇由于瑞替加濱難溶于pH=4.0以上的介質(zhì),而易溶于乙腈,故將瑞替加濱先溶于適量的乙腈,再用相應(yīng)的試劑稀釋至適當?shù)臐舛?精密稱取瑞替加濱對照品約10mg、用乙腈作溶媒,溶解定溶于10mL量瓶中;再分別從中精密移取1mL,用純化水、pH=1.2鹽酸、pH=4.0乙酸鹽緩沖液及pH=6.8磷酸鹽緩沖液稀釋至20mL,搖勻,按紫外-可見分光光度法(中國藥典2010年版二部附錄ⅣA),以相應(yīng)溶劑為空白,在波長200~600nm進行全波長掃描,繪制紫外吸收曲線。獲得最大吸收波長分別為294、293、293、293nm,故選擇293nm作為釋放度的測定波長,同時檢測各波長處輔料幾乎無吸收。2.2.2法定介質(zhì)中標準曲線的制備精密稱取瑞替加濱對照品約10mg、用pH=1.2的鹽酸(模擬人工胃液)稀釋至10mL量瓶中;分別精密量取1、2、3、4、5mL置50mL量瓶中,加pH=1.2的鹽酸稀釋至刻度,搖勻,0.45μm微孔濾膜過濾,按紫外-可見分光光度法(中國藥典2010年版二部附錄ⅣA),以相應(yīng)溶劑為空白,于293nm處測定吸光度,以濃度為橫坐標,吸光度為縱坐標,進行線性回歸。得回歸方程為y=2.669x+0.0164,r2.2.3法定介質(zhì)中穩(wěn)定性的測定取瑞替加濱標準溶液,37℃下,分別放置0、2、4、6、8、12h;測定吸光度。結(jié)果表明,瑞替加濱在37℃下放置12h穩(wěn)定,其吸光度的RSD<2.0%,瑞替加濱穩(wěn)定性良好。2.2.4漂浮性能的測試漂浮制劑的體外漂浮性能測定法最簡單、最直觀的試驗方法是將漂浮制劑置于人工胃液中與普通制劑進行對照,或在進行釋放度試驗時實時觀察制劑的漂浮情況。將制成的片劑成品置于(37±0.5)℃的人工胃液中,觀測片劑起漂時間以及持續(xù)漂浮時間。在釋放度測定時,觀察并記錄起漂時間及持續(xù)漂浮時間。胃內(nèi)漂浮制劑要求起漂時間<5min,持續(xù)漂浮時間>8h。2.3不同藥物的使用配方對瑞替加濱胃漂浮片緩釋片釋放的影響2.3.1制備工藝的考察目前主要的壓片工藝有2種:粉末直接壓片、濕法制粒壓片,有資料顯示胃滯留片的制備工藝以粉末直接壓片為宜,因為親水凝膠制得的溶液作為黏合劑進行濕法制粒不利于片劑的水化漂浮;課題組分別以2種不同壓片工藝制備漂浮緩釋片,漂浮性能均能符合要求,但在粉末直接壓片的過程中,粉末的流動性極差,同時還有黏沖的現(xiàn)象,故選擇濕法制粒。2.3.3HPMC用量的篩選在相同處方中改變HPMC的用量制得的胃漂浮片緩釋曲線見圖2,結(jié)果表明HPMC的用量對瑞替加濱胃漂浮片的釋放和漂浮性能有顯著影響,骨架材料的用量越大,其阻滯釋放的效果越明顯,同時其起漂時間越短,持續(xù)漂浮時間越長,因此將HPMCK15m的用量作為一個重要影響因素來考察。2.3.4乳糖用量篩選在相同的處方中加入不同量的乳糖作為制孔劑來調(diào)節(jié)緩釋片的釋放,但是對藥物的漂浮性能幾乎無影響,結(jié)果見圖3。各曲線間的f2.3.5微晶纖維素用量篩選在相同的處方中加入不同量的微晶纖維素作為填充劑,其釋放曲線見圖4,結(jié)果表明不同微晶纖維素含量的緩釋片釋放幾乎無差異,同時對藥物的漂浮性能幾乎無影響,因此不將微晶纖維素的用量作為影響藥物釋放的一個因素。2.3.6碳酸氫鈉用量的篩選在相同的處方中改變碳酸氫鈉的含量,所制備的漂浮片的釋放曲線見圖5,結(jié)果表明碳酸氫鈉的含量越小,瑞替加濱胃漂浮緩釋片的緩釋效果越好。另一方面,碳酸氫鈉遇胃酸可產(chǎn)生CO2.3.7硬脂酸鎂用量的篩選在相同的處方中改變硬脂酸鎂的比例,來考察所壓制片劑的外觀、顆粒的休止角、卡爾系數(shù);但同時硬脂酸鎂作為疏水性的輔料,可使片劑表面具有一定的疏水性而使藥物的釋放速率明顯減慢,故仍需考察不同硬脂酸鎂用量對藥物釋放的影響,結(jié)果見圖6和表1。結(jié)果表明不同的硬脂酸鎂用量對緩釋片的釋放、漂浮性能及顆粒的流動性幾乎無影響,故不將硬脂酸鎂的用量作為影響藥物釋放的重要因素。2.4數(shù)據(jù)的分析與處理2.4.1正交試驗因素水平的確定通過單因素考察,初步確定了正交試驗設(shè)計的因素及水平范圍。將HPMCK15m、乳糖、碳酸氫鈉按各自處方中的用量分為3個水平。將選定的因素按L2.4.2數(shù)據(jù)的分析與處理本文參照中國藥典2010版二部附錄ⅪⅩD緩釋制劑指導(dǎo)原則的規(guī)定,以2、6、12h的累計釋放度為評價指標,采用綜合分析法由表3直觀分析可知,各因素對藥物的釋放的影響因素順序為:B>A>C;A因素、B因素最佳水平均為3;C因素最佳處方為1和2,由于碳酸氫鈉作為助漂劑,易黏沖,特別在濕度環(huán)境大的情況下,壓制的片劑外觀相對較差,故選擇1水平。從藥物漂浮性能來看,9個處方的起漂時間均<5min,持續(xù)漂浮時間均>8h,故不把漂浮性能作為最主要因素來篩選處方,把藥物的釋放作為最主要的因素來考察;因此最佳處方為A2.5對片劑硬度的研究胃漂浮緩釋片中制備工藝的壓力大小應(yīng)得當,片劑既需要有適宜的硬度,又要使壓成的藥片內(nèi)部保持適當?shù)目障?以便保持密度盡量<1g·cm2.6不同規(guī)格中提取的片重固定片的釋放結(jié)果藥物從親水凝膠骨架片中溶出的主要機制為擴散和溶蝕,所以片劑的表面積大小會對藥物的釋放有一定的影響,故設(shè)計3個直徑(8、10、12mm)來進行考察;所得釋放結(jié)果見圖9;結(jié)果顯示對于處方組成及片重固定的片劑而言,表面積越小則藥物的釋放越緩慢,且片劑的壓力越大,藥物的起漂時間越慢;直徑12mm的片劑起漂時間僅為1.5min左右,而直徑8mm的片劑起漂時間達到了8min左右。綜合胃漂浮緩釋片的起漂時間要求,故選擇12mm的直徑較為適宜。2.7處方與工藝重現(xiàn)性考察按照“2.4”項下確定的最優(yōu)處方與工藝連續(xù)制備3批瑞替加濱胃漂浮緩釋片,按照釋放度測定法分別測定3批樣品的體外釋放度,考察處方與工藝的重現(xiàn)性,結(jié)果見圖10和表5,瑞替加濱胃漂浮片的處方與工藝重現(xiàn)性良好。2.8與普通片的比較選取自制的批號為20131212的瑞替加濱胃漂浮緩釋片與葛蘭素史克公司原研開發(fā)的普通瑞替加濱片(規(guī)格:300mg,薄膜包衣速釋片)進行“2.2.5”項下釋放的比較,結(jié)果見圖11,表明普通片劑在20min左右即釋放出100%,自制的瑞替加濱胃漂浮緩釋片體外持續(xù)釋放時間達到12h。2.9濱胃漂浮片體外釋藥曲線擬合分別用零級、一級和Higuchi方程對最優(yōu)處方制備的瑞替加濱胃漂浮緩釋片體外釋藥曲線進行擬合,用相關(guān)系數(shù)r判斷其擬合度,結(jié)果見表6。由擬合結(jié)果可以看出,以Higuchi方程擬合的相關(guān)系數(shù)最大,可見本制劑體外釋放呈Higuchi擴散特征。3與hpmc規(guī)格的關(guān)系本文測定瑞替加濱胃漂浮片釋放度時采用槳法,而國內(nèi)大多數(shù)文獻在測定胃漂浮緩釋片時采用的是籃法,具體原因為HPMC遇水有很強的黏附作用,采用籃法時,片劑漂浮并黏附在不銹鋼的轉(zhuǎn)籃頂部,阻礙了藥物的釋放,為了更好地模擬該制劑在體內(nèi)的漂浮情況,本研究采用槳法進行測定。有文獻報道瑞替加濱在堿性條件下容易降解,稱取處方量的碳酸氫鈉溶解于溶出介質(zhì)中,溶液的pH沒有變化,在碳酸氫鈉加入前后pH值都為0.94,系統(tǒng)遠沒有達到堿性環(huán)境,可以忽略處方量碳酸氫鈉對溶出介質(zhì)酸堿度的影響,其未影響瑞替加濱的穩(wěn)定性。試驗過程中發(fā)現(xiàn)片劑的硬度對藥物的漂浮性能有重要的影響,當片劑硬度>5kg時,雖然片劑的表面光潔,但是在釋放介質(zhì)中5min內(nèi)很難起漂,而片劑的硬度在3~4kg時,瑞替加濱胃漂浮片具有良好的外觀、漂浮性能和釋放性能。試驗過程中發(fā)現(xiàn)片劑的形狀、直徑均影響藥物的釋放,可能是不同形狀和直徑的片劑遇水形成的凝膠層厚度不同,從而使藥物透過凝膠層的速度受到影響。2.3.2HPMC規(guī)格的影響選擇3種規(guī)格的HPMCK4m、K15m、K100m,分別按“2.1”項下方法制備得瑞替加濱胃內(nèi)漂浮型緩釋片,繪制釋放曲線,比較不同規(guī)格的HPMC對藥物釋放及漂浮性能的影響。不同規(guī)格的HPMC的漂