榆林市某羊場腹瀉病的流行病學調查

榆林市某羊場腹瀉病的流行病學調查

腹瀉一直是陜北乃至全國山羊養(yǎng)殖的一個重要疾病之一。隨著陜北地區(qū)養(yǎng)羊模式由天然放牧到集約化飼養(yǎng)轉變，養(yǎng)殖規(guī)?；潭仍絹碓礁撸嵫蚋篂a在陜北地區(qū)呈現(xiàn)上升趨勢。在產羔季節(jié)，如果飼養(yǎng)管理、產羔護理和疾病防控工作不到位，就可能引起羔羊大批發(fā)病引起羔羊腹瀉的病原包括細菌、病毒和寄生蟲等，最常見的細菌包括致病性大腸埃希氏菌(在養(yǎng)羊業(yè)生產中，由于養(yǎng)殖戶的錯誤認識，一旦發(fā)生腹瀉，就立即使用抗生素進行治療，效果不佳后才會尋求專業(yè)人員幫助，該羊場也是如此，抗生素治療1周沒有效果，懷疑為其他類型病原感染所致。為了明確該羊場腹瀉的主要病原，結合該羊場實際情況，本研究擬采用PCR和飽和鹽水漂浮法對腹瀉樣品分別進行病毒和寄生蟲檢測，以確定本場此次腹瀉的主要病因，為控制該羊場腹瀉提供技術指導，也為榆林市進一步研究、防控陜北絨山羊腹瀉病提供一定的科學依據(jù)。1材料和方法1.1材料表面1.1.1小鼠糞便樣品的制備90份陜北絨山羊腹瀉樣品，其中2月齡～3月齡羔羊糞便樣品15份，6月齡～7月齡羔羊糞便樣品45份，成年羊糞便樣品30份，將樣品密封標號，置4℃保存?zhèn)溆谩?.1.2主試劑PCR預混試劑Ⅱ,天根生化科技(北京)有限公司產品；PrimeScript1.1.3儀器、儀器和儀器倒置相差顯微鏡(TS100-F),蘇州景通儀器有限公司產品；離心機(TDL-5A),上海菲恰爾分析儀器有限公司產品；數(shù)碼顯微鏡(BA400),麥克奧曲實業(yè)集團有限公司產品；離心機(5424)、梯度PCR儀(6325),Eppendorf公司產品；培養(yǎng)箱(HF90),上海力申科學儀器有限公司產品。1.2方法1.2.1引用和設計參照文獻1.2.2病毒rna的提取、rt-pcr的評估按照糞便RNA提取試劑盒說明書提取腹瀉樣本的RNA,然后按照PrimeScript1.2.3球蟲感染率測定利用飽和食鹽水漂浮法分別對2月齡～3月齡、6月齡～7月齡和成年羊的新鮮糞便樣品進行寄生蟲檢查，計算球蟲感染率。利用司陶爾蟲卵計數(shù)法分別對2月齡～3月齡、6月齡～7月齡和成年羊的新鮮糞便樣品進行球蟲感染強度檢測，感染強度是指每克糞便樣品中所感染的球蟲卵囊總數(shù)。1.2.4上清液濃縮法將糞便樣品放入100mL燒杯中，加入1倍體積的蒸餾水攪拌搗碎，再加入4倍體積的蒸餾水攪拌過濾；3000r/min離心10min,棄上清液取沉淀，加入5倍體積的飽和食鹽水，混勻；3000r/min離心10min,取上清液1/3～1/2于潔凈的燒杯中，加入5倍體積的蒸餾水，混勻；3000r/min離心10min,沉淀即為羊球蟲卵囊，將其按照文獻1.2.5球蟲的類型分類參照文獻2結果2.1病毒核酸檢測病毒核酸檢測結果見圖1。利用BVDV、OKoV、CEV、CoVs、Norovirus、Sapovirus和RV特異性引物，并以β-actin作為內參，進行病毒核酸檢測，15g/L瓊脂糖凝膠電泳檢測顯示，BVDV、OKoV、CEV、CoVs、NoV、SV和RV核酸均為陰性。2.2球蟲感染率及感染強度90份樣品糞便樣品只檢測到球蟲卵囊，其中2月齡～3月齡的感染率為100%(15/15),6月齡～7月齡的感染率為95.6%(43/45),成年羊的感染率為63.3%(19/30),綜合感染率為85.6%(77/90)。司陶爾蟲卵計數(shù)法檢測結果顯示，3個不同年齡段山羊球蟲的感染強大差異較大，其中2月齡～3月齡的感染強度為25393OPG,6月齡～7月齡的感染強度為2800OPG;成年羊的感染強度為1200OPG,該羊場陜北白絨山羊球蟲平均感染強度為9798OPG。2.3確定每個蟲種的唾液濃度結果見表2。共檢出13種艾美耳球蟲，分別為約奇艾美耳球蟲(2.4優(yōu)勢種的卵囊形態(tài)本研究共檢出13種艾美耳球蟲，各種類球蟲卵囊孢子化的形態(tài)見圖2,現(xiàn)將優(yōu)勢種的卵囊形態(tài)描述如下。顆粒艾美耳球蟲(家山羊艾美耳球蟲(阿氏艾美耳球蟲(山羊艾美耳球蟲(克氏艾美耳球蟲(3境溫度和飼料、氣候條件對小鼠腹瀉的影響感染性腹瀉是我國動物傳染病中(尤其是幼齡動物)發(fā)病率最高、流行最廣、危害性最大的一類疫病，該病多發(fā)生于飼養(yǎng)管理差、環(huán)境溫度驟變和突然更換飼料等情況下，臨床上細菌性腹瀉早已受到高度重視，但是病毒性腹瀉和寄生蟲性腹瀉往往被忽視。DahmaniH等在畜牧業(yè)生產中，腸道疾病會造