梔子金花丸中黃連、黃柏薄層鑒別研究

梔子金花丸中黃連、黃柏薄層鑒別研究

梔子黑李子是一種常見的中藥，于2005年在《中國(guó)藥典》版的第一部分出版。在檢驗(yàn)過程中發(fā)現(xiàn)該品種黃連的鑒別存在問題,檢測(cè)結(jié)果很難判定。通過對(duì)樣品用量和中性氧化鋁的用量進(jìn)行考察,篩選出合理的樣品處理方法,并增加了黃柏對(duì)照藥材。結(jié)果排除了干擾,增強(qiáng)了方法專屬性。結(jié)果滿意。1試劑:復(fù)合藥材,改革目,見表1定量毛細(xì)管(日本島津),預(yù)制硅膠G薄層層析板(規(guī)格10cm×10cm,煙臺(tái)大學(xué)生物科學(xué)與工程研究所,批號(hào):20090324),MERCK薄層層析板(批號(hào):OB678541)。中性氧化鋁(100～200目、200～300目);試劑均為分析純。黃柏對(duì)照藥材(批號(hào):120937-200506,中國(guó)藥品生物制品檢定所),黃連對(duì)照藥材(批號(hào):120913-200407,中國(guó)藥品生物制品檢定所),鹽酸小檗堿對(duì)照品(批號(hào):110713-200609,中國(guó)藥品生物制品檢定所);梔子金花丸(批號(hào):090254、090425、090321,山東孔圣堂有限公司)。陰性樣品:按處方工藝分別制備缺黃連陰性樣品和缺黃連、黃柏陰性樣品。2方法和結(jié)果2.1對(duì)照品溶液的制備供試品溶液的制備取本品20g,研細(xì),加在中性氧化鋁柱(200～300目,5g,內(nèi)徑2cm)上,用無水乙醇50mL洗脫,收集洗脫液,蒸干,殘?jiān)右掖?mL使溶解,作為供試品溶液。對(duì)照藥材溶液的制備分別取黃連、黃柏對(duì)照藥材各0.05g,分別加甲醇5mL,超聲(功率:250W,頻率:33kHz)處理15min,濾過,濾液加甲醇至5mL,作為對(duì)照藥材溶液。對(duì)照品溶液的制備取鹽酸小檗堿對(duì)照品,加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn),吸取供試品溶液4μL,吸取對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液各1μL,分別點(diǎn)于同一預(yù)制硅膠G薄層板上,以甲苯-乙酸乙酯-異丙醇-甲醇-濃氨試液(12∶6∶3∶3∶1)為展開劑,置氨蒸氣預(yù)飽和15min的層析缸內(nèi),展開,取出,晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視,結(jié)果供試品色譜分離效果較差,雖然在與對(duì)照藥材及對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,有斑點(diǎn)出現(xiàn),但因?yàn)殡s質(zhì)干擾嚴(yán)重,結(jié)果不易判斷。見圖1。2.2對(duì)照品溶液的制備供試品溶液的制備取本品5g,研細(xì),加甲醇25mL,超聲處理20min,濾過,濾液加至中性氧化鋁柱(100～200目,5g,內(nèi)徑1cm)上,收集洗脫液,蒸干,殘?jiān)蛹状?mL使溶解,作為供試品溶液。陰性對(duì)照溶液①的制備取處方中除去黃連的陰性對(duì)照樣品約5g,同供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。陰性對(duì)照溶液②的制備取處方中除去黃連、黃柏的陰性對(duì)照樣品約5g,同供試品溶液的制備方法制成陰性對(duì)照溶液。對(duì)照藥材溶液的制備分別取黃連、黃柏對(duì)照藥材各0.05g,分別加甲醇5mL,超聲處理20min,濾過,濾液加甲醇至5mL,作為對(duì)照藥材溶液。對(duì)照品溶液的制備:同原標(biāo)準(zhǔn)。照薄層色譜法(《中國(guó)藥典》2005年版一部附錄ⅥB)試驗(yàn),分別吸取陰性對(duì)照溶液①、陰性對(duì)照溶液②、供試品溶液、對(duì)照藥材溶液和對(duì)照品溶液各1μL,分別點(diǎn)于同一預(yù)制硅膠G薄層板上,以甲苯-乙酸乙酯-異丙醇-甲醇-濃氨試液(12∶6∶3∶3∶1)為展開劑,置氨蒸氣預(yù)飽和15min的層析缸內(nèi),展開,取出,晾干,置紫外光燈(365nm)下檢視,結(jié)果:供試品色譜中,在與對(duì)照藥材和對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上,顯相同顏色的熒光斑點(diǎn),而陰性對(duì)照色譜中則無相應(yīng)的熒光斑點(diǎn),見圖2。3討論3.1黃進(jìn)行吸附法分離原標(biāo)準(zhǔn)取樣量(20g)過大,中性氧化鋁使用量(5g)少,不能將樣品中的干擾成分(主要是大黃)進(jìn)行有效吸附,導(dǎo)致薄層底色中掩蓋了黃連的成分,使得結(jié)果難以判斷。同時(shí),由于原標(biāo)準(zhǔn)中供試品系原粉直接加在氧化鋁柱上,進(jìn)行洗脫,提取時(shí)間長(zhǎng)且提取效果差。因此,可采用增加中型氧化鋁用量或減小取樣量的方法處理樣品,經(jīng)試驗(yàn)比較,采用提取后過氧化鋁柱的方法,簡(jiǎn)便且提取效果好。3.2專業(yè)試驗(yàn)由于處方中有黃柏藥材會(huì)對(duì)鹽酸小檗堿斑點(diǎn)干擾,故增加了黃柏對(duì)照藥材作對(duì)照。3.3試劑的選擇原標(biāo)準(zhǔn)展開劑含有毒性較大的苯,將苯改為