中藥生物技術

考點ADDINCNKISM.UserStyle名詞解釋生物技術：對生物或者生物成分進行改造和利用的技術植物生物技術：植物生物技術是一門研究植物遺傳規(guī)律、探索植物生長發(fā)育機理，應用現(xiàn)代生物技術改良遺傳性狀、培育新品種、創(chuàng)造新種質(zhì)的學科。植物組織培養(yǎng)：植物的離體器官、組織或細胞在人工制備的培養(yǎng)基上進行無菌培養(yǎng)，并在人工控制的環(huán)境條件下，使其發(fā)育成完整植株的科學技術形態(tài)發(fā)生：不同表型的細胞構成組織、器官，建立結構的過程。外植體：植物組織培養(yǎng)過程中從活體植株上切去下來的用于離體培養(yǎng)的一切材料。脫分化：指失去分生能力的細胞回復到分生性狀態(tài)并進行分裂而形成無分化細胞的愈傷組織的現(xiàn)象。再分化：愈傷組織形成不定芽，不定根或胚狀體。愈傷組織：原本指植物在受傷后于其傷口表面形成的一團薄壁細胞。在組培中，則指人工培養(yǎng)基上由外植體形成的一團無序生長的薄壁細胞。胚狀體：在離體的植物細胞，組織，器官培養(yǎng)的過程中，由一個或一些體細胞經(jīng)過胚胎的發(fā)生和發(fā)育過程，形成的與合子胚結構類似的中間繁殖體。試管苗快速繁殖：利用植物組織培養(yǎng)技術，對植物外植體進行離體培養(yǎng)，使其在短時間內(nèi)獲得大量遺傳性一致的再生植物的方法。植物人工種子：指通過組織培養(yǎng)技術，將植物的體細胞誘導在形態(tài)上和生理上均與合子胚相似的體細胞胚，然后將它包埋于有一定營養(yǎng)成分和保護功能的介質(zhì)中，組成便于播種的類似種子的單位。單倍體植物：只含有配子染色體組數(shù)的植株。細胞懸浮培養(yǎng)：將單個游離細胞或小細胞團在液體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)增殖的技術誘導子：一類特殊的觸發(fā)因子，它能夠開啟代謝過程中酶的活性，因而能增加次生代謝物的含量，有時甚至可以誘導出新的化合物。植物原生質(zhì)體：指去掉細胞壁的由質(zhì)膜包裹的有生命活力的裸細胞。植物體細胞雜交：也稱原生質(zhì)體融合，指將不同的種屬科間的原聲質(zhì)體通過人工方法誘導融合，然后進行離體培養(yǎng)，使其再生雜種植株的技術?；蚬こ蹋河址Q基因拼接技術或DNA重組技術。是以分子遺傳學為理論基礎，以分子生物學和微生物學的現(xiàn)代技術為手段，將不同來源的基因按預先設計的藍圖，在體外構建成雜種DNA分子，再導入到活細胞，以改變生物原有的遺傳物特性，獲得新品種，生產(chǎn)新品種。PCR技術：模擬體內(nèi)DNA分子的天然復制過程，在體外擴增DNA分子的一種分子生物學技術?；蚪MDNA文庫：指將某生物的全部基因組DNA切割成一定長度的DNA片段，克隆到某種載體上而形成的集合。cDNA文庫：以mRNA為模板，經(jīng)反轉錄酶催化，在體外反轉錄成cDNA，與適當?shù)妮d體（常用噬菌體或質(zhì)粒載體）連接后轉化受體菌，則每個細菌含有一段cDNA，并能繁殖擴增，這樣包含著細胞全部mRNA信息的cDNA克隆集合稱為該組織細胞的cDNA文庫。核酸分子雜交：來源相同或不同的DNA甚至DNA與RNA分子變性后，在合適的條件下，通過堿基互補配對形成雙鏈雜交體的過程。植物基因轉化：是指將外源基因轉移到植物細胞內(nèi)、并整合到植物基因組中穩(wěn)定遺傳和表達的過程。發(fā)酵工程：又稱為微生物工程，是利用微生物制造工業(yè)原料與工業(yè)產(chǎn)品，并提供服務的技術。藥用植物內(nèi)生菌：指一類在其部分或全部生活史存活于健康植物組織內(nèi)部，不引發(fā)宿主植物表現(xiàn)出明顯感染癥狀的微生物。DNA分子標記：可遺傳并可監(jiān)測的DNA序列或蛋白，包括蛋白質(zhì)標記和DNA標記。RAPD技術：利用一系列單鏈隨機引物(8-10個堿基)，通過PCR反應對基因組的DNA進行非定點擴增，然后用凝膠電泳分離擴增片段來檢測DNA的多態(tài)性。DNA條形碼技術：通過使用一個或幾個具有足夠變異的短標準DNA片段作為物種的條形碼，對物種進行快速、準確的識別和鑒定。填空植物生物技術由(植物基因工程)、(植物組織培養(yǎng))、(植物細胞工程)組成。人工種子由三部分組成，即(人工種皮)、(人工胚乳)、(胚狀體)。細胞懸浮培養(yǎng)中，細胞生長曲線呈S型，經(jīng)歷了以下幾個生長周期，分別為（滯后期）、（對數(shù)生長期）、（直線生長期）、及（減慢期）、（靜止期）。目前使用的基因工程載體主要有：（質(zhì)粒載體）及（噬菌體載體）?；蚬こ痰墓ぞ呙钢饕校海ㄏ拗菩詢?nèi)切酶）、（連接酶）及（DNA聚合酶）。簡答題植物細胞表現(xiàn)出全能性的條件有哪些？必須是活細胞，且是處于代謝旺盛期；

2.有適合的培養(yǎng)基提供所需營養(yǎng)物質(zhì)和代謝調(diào)節(jié)物質(zhì)；

3.適宜的溫度、濕度、光照、氧氣；

4絕對的無菌培養(yǎng)環(huán)境和條件。試管苗快速繁殖中主要存在哪些技術障礙？外植體褐變，微生物污染，組織苗玻璃化，遺傳穩(wěn)定性控制。簡要說明試管苗快速繁殖的優(yōu)點。繁殖效率高，不受季節(jié)和自然災害性氣候影響，生長速度快。2.培養(yǎng)條件可控性強3.占用空間小4.管理方便，利用自動化控制5.便于種質(zhì)保存和交換。簡要說明人工種子的優(yōu)點。通過組織培養(yǎng)的方法可以獲得數(shù)量很多的胚狀體可根據(jù)不同植物對生長的要求配置不同成分的“種皮”；解決了有些作物品種繁殖能力差、結子困難或發(fā)芽率低等問題人工種子與試管苗相比，具有所用培養(yǎng)基量少、體積小、繁殖快、發(fā)芽成苗快、運輸及保存方便的特點人工種子可以克服營養(yǎng)繁殖造成的病毒積累，可以快速繁殖脫毒苗為什么莖尖培養(yǎng)能夠脫除病毒？病毒在植物體內(nèi)的分布是不均的，在受病毒感染的植株中，莖尖頂端的分生組織一般是不含病毒的。原因有三：1.植物本身不主動轉移病毒，病毒自身很難追上活躍生長的莖尖生長點。2.莖尖分生組織細胞分裂旺盛，代謝活性高，病毒無法復制3.莖尖分生組織中內(nèi)源生長素含量高，抑制病毒增值。植物病毒的傳播方式有那些？1非介體傳播（1）機械傳播（汁液傳播）病毒可以通過摩擦所造成的微傷而傳毒。（2）種子、繁殖材料和嫁接傳播（3）土壤傳播2介體傳播介體以昆蟲為主，傳毒昆蟲主要是刺吸式口器的昆蟲。簡述花藥及花粉培養(yǎng)的意義?；ㄋ幣囵B(yǎng)得到的植株，不僅能夠正常生殖，而且每對染色體上成對的基因都是純合的，自交產(chǎn)生的后代不會發(fā)生性裝分離。與常規(guī)雜交育種方法相比，明顯縮短了育種年限。簡述胚培養(yǎng)的意義。1,克服雜種胚的敗育,獲得稀有雜種2,獲\t"/item/%E8%83%9A%E8%83%8E%E5%9F%B9%E5%85%BB/_blank"單倍體和\t"/item/%E8%83%9A%E8%83%8E%E5%9F%B9%E5%85%BB/_blank"多倍體植株3,打破種子休眠,促進胚萌發(fā)4,快速繁殖良種,縮短育種周期5,克服種子生活力低下和自然不育性,提高種子發(fā)芽率6,提高后代抗性,改良品質(zhì)7,種子活力的快速測定8,種質(zhì)資源的搜集和保存9,研究胚胎發(fā)育的過程和控制機制簡述植物細胞懸浮培養(yǎng)的過程。先選擇培養(yǎng)的材料，可來源于愈傷組織、植物器官、無菌苗等。之后將培養(yǎng)的材料用機械法或者酶解法分離單細胞，作為接種材料，再將獲得的單細胞濾液接種于試管或者培養(yǎng)皿瓶中，置于震蕩器上培養(yǎng)。最后可以通過細胞數(shù)目、鮮重、干重三項參數(shù)對懸浮細胞的生長情況進行測定。簡述原生質(zhì)體培養(yǎng)的意義。①植物原生質(zhì)體是細胞無性系變異和突變體篩選的重要來源；②植物原生質(zhì)體是細胞融合工作的基礎；③植物原生質(zhì)體是植物遺傳工程的理想受體和遺傳飾變的理想材料；④在細胞生物學與遺傳理論研究上的應用。簡述體細胞雜種的優(yōu)勢與應用。優(yōu)勢：營養(yǎng)體大小，生長速度和有機物的積累均強于雙親雜交體生活力強，適應性廣、有較強的抗逆力和競爭力應用：1、植物育種中的核質(zhì)替換2、細胞質(zhì)雜種的獲得3、

遠緣雜交創(chuàng)造新物種4、

細胞器的互作研究基因克隆載體應具備哪些條件？1.容易進入宿主細胞，效率越高越好2.能在宿主細胞中復制繁殖，有較高的自主復制能力3.容易插入外源DNA片段4.容易從宿主細胞中分離純化出來5.有容易被識別篩選的標志。培養(yǎng)基的主要成分有哪些？各有何作用？1.無機鹽，包括大量元素和微量元素。包括C、H、O、Fe、I、Cl等。這些元素參與培養(yǎng)物機體的建造，構成植物細胞中的核酸、蛋白質(zhì)、葉綠體、酶系統(tǒng)和生物膜所必需的元素。2.有機營養(yǎng)成分：糖類維生素氨基酸等糖類作為碳源，提供能量和維持培養(yǎng)基滲透壓。維生素常以輔酶形式參與生物催化劑——酶系的活動，以及參與細胞的蛋白質(zhì)代謝、脂肪代謝、糖代謝等重要生命活動。氨基酸作為重要的有機氮源。3

植物生長調(diào)節(jié)物質(zhì)如生長素和細胞分裂素將細胞分裂素和生長素配合使用，即細胞分裂素與生長素的比例大時，促進芽的形成，這時細胞分裂素起到主導作用；比例小時，則有利于根的形成，這時生長素起主導作用。植物材料在進行離體培養(yǎng)前如何進行表面消毒？常用的消毒劑有哪些？一般植物材料首先在消毒前除去泥土或死組織，然后用水沖洗除去外部污染物，然后剝除外層表皮或組織。消毒時可先在70%酒精中浸泡數(shù)秒以除去空氣氣泡，用1.0%次氯酸鈉消毒10~30分鐘，或或用0.1%升汞消毒5~15分鐘，之后用無菌水沖洗3~5次后接種。常用的消毒劑:70%酒精、1.0%次氯酸鈉、0.1%升汞獲取目的基因的方法有哪些？從基因文庫中獲取目的基因PCR擴增目的基因人工合成已知基因序列cDNA文庫、反轉錄法簡述電泳技術的原理。電泳是指帶電的膠體或者大分子在外加直流電場中向帶相反電荷的電極定向移動的現(xiàn)象。電泳技術常用于物質(zhì)的分離、定性。不同的混合物組分所帶的電荷性質(zhì)，數(shù)量不同，在同一電場的作用下，定向泳動的方向和速度也有差異，從而達到分離的目的。簡述根癌農(nóng)桿菌導致植物產(chǎn)生冠癭瘤的機理。根癌農(nóng)桿菌中含有致瘤質(zhì)粒Ti質(zhì)粒，當根癌農(nóng)桿菌感染植物時，Ti質(zhì)粒上的T-DNA的DNA片段進入植物細胞并插入基因組中，T-DNA中的基因利用植物的表達系統(tǒng)進行轉錄配合和翻譯，表達產(chǎn)物可誘導植物產(chǎn)生腫瘤。簡述外源基因導入受體細胞的各種途徑。農(nóng)桿菌TI質(zhì)粒介導基因轉化。將目的基因插入到經(jīng)過改造的T-DNA區(qū)，借助弄農(nóng)桿菌的感染實現(xiàn)外源基因向植物細胞的轉移和整合?；驑尫?。利用高壓氦氣或氮氣將吸附重組DNA的金粉或鎢粉加速，高速轟擊植物細胞化學刺激法。借助細胞融合劑使細胞膜表面電荷發(fā)生繚亂，質(zhì)膜容易發(fā)生短時間的相變，從而使外源DNA導入細胞微注射法。對于具有較大子房或囊胚的植物無需進行細胞固定，可進行微量注射。鑒定轉基因植株的方法有哪些？利用標記基因進行鑒定分子檢測：分子雜交和分子標記免疫技術:酶聯(lián)免疫法、免疫熒光法微生物發(fā)酵的產(chǎn)物有哪幾種類型？根據(jù)微生物發(fā)酵產(chǎn)物的不同分為：微生物菌體發(fā)酵、微生物酶發(fā)酵、微生物代謝產(chǎn)物發(fā)酵、微生物的轉化發(fā)酵、生物工程細胞發(fā)酵。簡要說明發(fā)酵的基本過程。首先是對優(yōu)良菌種的選育和保藏，選育可為生產(chǎn)提供各類型的突變株，大幅提高菌種產(chǎn)生有價值代謝產(chǎn)物的水平，還可以改進產(chǎn)品的質(zhì)量。之后是進行菌種的培養(yǎng)，以此獲得一定數(shù)量和質(zhì)量的純種，再進行發(fā)酵培養(yǎng)。最后是發(fā)酵產(chǎn)品的下游加工，對發(fā)酵產(chǎn)品進行分離純化。論述題試述PCR的原理及其應用。PCR的基本工作原理是以擬擴增的DNA分子為模板，以一對分別與模板互補的寡核苷酸片段為引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留復制的機制沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA合成。不斷重復這一過程，可使目的DNA片段得到擴增。因為新合成的DNA也可以作為模板，因而PCR可使DNA的合成量呈指數(shù)增長。應用：生物學領域中有：基因、DNA片段的克隆，人工基因的構建、DNA序列測定、基因型突變檢測、生物物種鑒定醫(yī)學領域中有：疾病基因檢測，遺傳病的產(chǎn)前診斷、治病病