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臨床一班熊健宇原核生物與真核生物轉(zhuǎn)錄起始調(diào)控的差異(一)什么是基因轉(zhuǎn)錄?遺傳信息從基因轉(zhuǎn)移到RNA的過(guò)程。RNA聚合酶通過(guò)與一系列組分構(gòu)成動(dòng)態(tài)復(fù)合體,并以基因序列為遺傳信息模板,催化合成序列互補(bǔ)的RNA,包括轉(zhuǎn)錄起始、延伸、終止等過(guò)程。1.對(duì)一個(gè)基因組(genome),轉(zhuǎn)錄只發(fā)生在一部分基因。2.RNA的合成方向是:5’→3’3.RNA合成的起始不需要引物4.RNA合成遵循嚴(yán)格的堿基互補(bǔ)配對(duì)原則5.新合成的RNA5’端具有三磷酸結(jié)構(gòu),第一個(gè)常為嘌呤核苷酸(二)轉(zhuǎn)錄的基本特征GeneralFeaturesofTranscription7.不對(duì)稱轉(zhuǎn)錄:DNA雙鏈中僅一股鏈可作為模板而轉(zhuǎn)錄,另一條鏈不轉(zhuǎn)錄;模板鏈并非永遠(yuǎn)在同一單鏈上。6.以NTP為底物;(三)與轉(zhuǎn)錄有關(guān)的DNA結(jié)構(gòu)

DNAStructuresRelatedtoTranscription1.轉(zhuǎn)錄單位與轉(zhuǎn)錄子(Transcriptionunitandtranscript)2.啟動(dòng)子(Promoter)3.轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)

(Terminationsignalsoftranscription)4.轉(zhuǎn)錄因子(Transcriptionfactors)5.增強(qiáng)子(Enhancer)*轉(zhuǎn)錄單位:DNA鏈上從啟動(dòng)子直到終止點(diǎn)之間的DNA序列稱為一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位。*操縱子(operon):原核生物一個(gè)轉(zhuǎn)錄單位,稱為操縱子

,由若干個(gè)結(jié)構(gòu)基因及其上游的調(diào)控序列所組成。*轉(zhuǎn)錄子:由2個(gè)或2個(gè)以上緊密連鎖,并共同轉(zhuǎn)錄形成一種mRNA分子的結(jié)構(gòu)基因組成的復(fù)合單位。1.轉(zhuǎn)錄單位與轉(zhuǎn)錄子

定義:DNA分子上可與RNA聚合酶特異結(jié)合,而使轉(zhuǎn)錄開(kāi)始的一段DNA序列。本身不被轉(zhuǎn)錄。2.啟動(dòng)子(Promoter)3.轉(zhuǎn)錄因子(TranscriptionFactors,TF)主要參與轉(zhuǎn)錄的起始4.增強(qiáng)子(Enhancer)

定義:

是指能使和它連鎖的基因轉(zhuǎn)錄頻率明顯增加的DNA序列。真核基因高效表達(dá)的一種遠(yuǎn)端調(diào)控元件,一般跨度為100-200bp,具有特征性的核苷酸序列組成。5.轉(zhuǎn)錄終止信號(hào)

TerminationSignalsofTranscription原核生物(大腸桿菌):1.依賴ρ因子的終止子(Rho-dependentterminators)2.內(nèi)在的終止子(intrinsicterminators,即不依賴ρ因子的終止信號(hào))

真核:poly(A)加尾信號(hào)AATAAA

(四)基因轉(zhuǎn)錄的過(guò)程一、轉(zhuǎn)錄模板二、DNA指導(dǎo)的RNA聚合酶三、模板與酶的辨認(rèn)結(jié)合四、基因轉(zhuǎn)錄的過(guò)程5’3’5’3’2.方框內(nèi)的DNA區(qū)段為結(jié)構(gòu)基因3.為模板鏈,也稱有意義鏈或Watson鏈1.箭頭示轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物及轉(zhuǎn)錄方向4.為編碼鏈,也稱反義鏈或Crick鏈一、轉(zhuǎn)錄模板5’…GCAGTACATGTC…3’3’…CGTCATGTACAG…5’5’…GCAGUACAUGUC…3’mRNAN…Ala.Val.His.Val…C多肽鏈轉(zhuǎn)錄翻譯編碼鏈模板鏈二、RNA聚合酶(RNApol)RNApol又叫轉(zhuǎn)錄酶抄錄酶DNA指導(dǎo)的RNA聚合酶DDRP(一).原核生物的RNA聚合酶(E.Coli)全酶核心酶σ亞基α2ββ’holoenzymecoreenzymeMw:480KDa五個(gè)亞基(二)真核生物的RNA聚合酶表5-2真核生物RNApol的種類與功能

種類轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物對(duì)鵝膏蕈堿的敏感性

RNApolⅠ

RNApolⅡ

RNApol

Ⅲ45S是5.8S、18S和28SrRNA的前體hnRNA是mRNA的前體45SrRNA耐受hnRNA和snRNA極敏感tRNA和5S-rRNA中度敏感PS1S2S3啟動(dòng)子OPromoter調(diào)控序列結(jié)構(gòu)基因

操縱子(operon)

結(jié)合RNA聚合酶表達(dá)功能蛋白?I三、模板與酶的辨認(rèn)結(jié)合操縱子(operon):原核生物的轉(zhuǎn)錄單位RNA聚合酶保護(hù)區(qū)結(jié)構(gòu)基因終止點(diǎn)10-10TTGACATATAAT轉(zhuǎn)錄開(kāi)始+1翻譯開(kāi)始Purine-35(Pribnowbox)辨認(rèn)結(jié)合區(qū)轉(zhuǎn)錄起始區(qū)

RNApol能否才能知道RNApol的結(jié)合部位的DNA序列?四、轉(zhuǎn)錄過(guò)程起始延長(zhǎng)終止三階段2.DNA雙鏈解開(kāi)1.RNA聚合酶全酶(

2)與模板結(jié)合3.在RNA聚合酶作用下發(fā)生第一次聚合反應(yīng),形成轉(zhuǎn)錄起始復(fù)合物RNApol

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