總論第四章藥物的鑒別試驗

第四章

藥物的鑒別試驗藥物分析學總論本章要求掌握鑒別試驗的目的和常用的鑒別方法熟悉鑒別試驗的項目和分析方法學驗證了解一般鑒別試驗的方法什么是藥物的鑒別試驗？根據(jù)藥物的分子結構、理化性質，采用化學、物理化學或生物學方法來檢驗藥物，了解所要檢驗的藥物是哪一類、哪一種藥物評價藥品質量的三種分析手段：鑒別（identification）檢查（testforpurity）含量測定（assay）——首項任務藥物的真?zhèn)舞b別真?zhèn)巍C實貯藏在有標簽容器中的藥物是否為其所標示的藥物

★判斷已知藥物的真?zhèn)巫⒁鈪^(qū)分：藥物的鑒別試驗——判斷已知藥物的真?zhèn)?/p>

化學中的定性分析——鑒別未知物、全分析

不足以確證其結構去粗取精、去偽存真確認結構是否正確物理常數(shù)測定法化學鑒別法光譜鑒別法色譜鑒別法顯微鑒別法生物學法常見的鑒別方法鑒別項目性狀(description)<對于原料藥>鑒別(identification)

一般鑒別試驗專屬鑒別試驗

外觀、溶解度、物理常數(shù)包括：相對密度、餾程、熔點、凝點、比旋度、折光率、黏度、酸值、皂化值、羥值、碘值、吸收系數(shù)即判斷真?zhèn)斡址从臣兌鹊谝还?jié)物理常數(shù)測定法性狀----反映了藥物特有的物理性質，包括:（外觀、溶解度、物理常數(shù)）初熔全熔初熔樣品開始局部液化、出現(xiàn)明顯液滴全熔樣品全部液化1熔點固體熔化成液體的溫度熔融同時分解的溫度自初熔至全熔的一段溫度中國藥典收載有三種測定方法第一法：測定易粉碎的固體藥品第二法：測定不易粉碎的固體藥品第三法：測定凡士林或其他類似物質要求報告初熔和全熔

雌二醇熔點：本品的熔點為175～180℃；維生素C熔點測定：本品的熔點為190～192℃，熔融同時分解。例子

[]tD=×100/C×L2比旋度

在一定波長與溫度下，偏振光透過長1dm且每1mL中含有旋光性物質1g的溶液時測得的旋光度。

作用：反映手性藥物特性及其純度的主要指標，用以區(qū)別藥品、檢查純度或測定制劑的含量。例子ChP

葡萄糖＊＊＊＊＊加酸、弱堿或加熱可加速

、

兩種異構體達到旋光平衡ChP采用加氨試液加速平衡的到達2023/10/511摩爾吸收系數(shù)εC=1mol/Ll=1cm百分吸收系數(shù)C=1%(g/100ml)l=1cm在給定波長、溶劑和溫度等條件下，吸光物質在單位濃度、單位液層厚度時的吸收度不僅可以用來考察原料藥的質量，還是UV測定含量的依據(jù)3吸收系數(shù)

維生素B1的吸收系數(shù)測定：246nm波長處測定吸光度，吸收系數(shù)應為406~436。（調整濃度使供試液的吸光度在0.3~0.7之間）例子第二節(jié)化學鑒別法顏色變化沉淀生成氣體生成熒光反應測定生成物熔點特點：操作簡便、快速、現(xiàn)象明顯，實驗成本低，應用廣，但專屬性比儀器分析法差三氯化鐵呈色反應---含有酚羥基或能產生酚羥基；重氮化-偶合顯色反應---具有或水解后有芳伯氨基；黃體酮的專屬反應---甲酮基顯藍紫色特征；維生素C的2，6-二氯靛酚反應---烯二醇具有還原性，氧化劑鹽酸褪去顏色變化----指供試品溶液中加入適當?shù)脑噭┤芤?，在一定條件下進行反應，生成易于觀測的有色產物或顏色褪去與重金屬離子的沉淀反應---在一定條件下，藥物(酰胺、含N雜環(huán)、生物堿、巴比妥)和重金屬離子反應，生成不同形式的沉淀；與氨制硝酸銀的沉淀反應---還原性藥物如具有C17-α醇酮基的腎上腺皮質激素，反應生成黑色銀沉淀沉淀生成----指供試品溶液中加入適當?shù)脑噭┤芤?，在一定條件下進行反應，生成易于觀測的不同顏色的沉淀一般鑒別試驗

依據(jù)某一類

藥物的化學結構或理化性質的特征，通過化學反應來鑒別藥物的真?zhèn)巫⒁鈪^(qū)分專屬鑒別試驗根據(jù)每一種藥物化學結構的特點和性質，選用某些特有的靈敏的定性反應，來鑒別藥物的真?zhèn)我话汨b別試驗專屬鑒別試驗注意：某一項鑒別試驗只能表示藥物的某一特征，絕不能將其作為判斷的唯一依據(jù)強調——區(qū)別不同類別的藥物——區(qū)別各個藥物單體有機藥物----采用典型的官能團反應無機藥物----根據(jù)其組成的陰離子和陽離子的特殊反應一般鑒別試驗有機氟化物類丙二酰脲類芳香第一胺類有機酸鹽托烷生物堿類有機氟化物的鑒別有機破壞：樣品經氧瓶燃燒法破壞，被堿性溶液吸收成為無機氟化物鑒別反應：與茜素氟藍、硝酸亞鈰在pH4.3溶液中形成藍紫色絡合物反應原理：水楊酸鹽三氯化鐵反應在中性或弱酸性條件下，水楊酸和試液生成配位化合物，在中性時呈紅色，弱酸性時呈紫色。加稀HCl，即析出白色沉淀；分離，沉淀溶于醋酸銨溶液。反應原理：酒石酸鹽

銀鏡反應取供試品的中性溶液，置潔凈的試管中，加氨制硝酸銀試液數(shù)滴，置水浴中加熱，銀即游離并附在試管內壁成銀鏡。

反應原理：2023/10/521無機藥物---陰、陽離子的特殊反應

包括：鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽、鋇鹽、銨鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽、氯化物等離子的鑒別

鈉鹽、鉀鹽、鈣鹽的焰色反應取鉑絲，用鹽酸濕潤后，蘸取供試品，在無色火焰中燃燒，火焰即顯各離子的特征顏色

測定原理

鈉火焰光譜：589.0nm、589.6nm——鮮黃色鉀火焰光譜：766.49nm、769.90nm

——紫色鈣火焰光譜：622nm、554nm、442.67nm與602nm——顯磚紅色銨鹽鑒別方法

取供試品，加過量氫氧化鈉試液，加熱，即分解，發(fā)生氨臭；遇濕潤的紅色石蕊試紙，能使之變藍，并能使硝酸亞汞試液濕潤的濾紙顯黑色測定原理：氯化物鑒別——

供試液＋硝酸＋硝酸銀→白色↓白色↓＋氨試液→沉淀溶解＋硝酸→白色↓硫酸鹽鑒別——

供試液＋氯化鋇→白色↓白色↓＋硝酸（鹽酸）→沉淀不溶注：一般鑒別試驗只能證實是某一類藥物，不能證實是某一種藥物。UV鑒別法IR鑒別法NIR鑒別法AAS鑒別法NMR鑒別法MS鑒別法XRD鑒別法紫外近紅外紅外原子吸收核磁共振質譜法X射線衍射第三節(jié)光譜鑒別法紫外光譜鑒別法（UV法）紫外光譜相同的不一定是同一種物質紫外吸收光譜：分子價電子能級躍遷。光譜較簡單、平坦，曲線變化不大。波長范圍：100-800nm.(1)遠紫外光區(qū):

100-200nm(2)近紫外光區(qū):200-400nm(3)可見光區(qū):400-800nm特點：操作簡便、快速、應用廣，但用作鑒別的專屬性不如紅外光譜儀器

紫外-可見分光光度計generalprocess光源單色器樣品室檢測器顯示美法侖

核對吸收光譜的特征參數(shù)

λmax，或同時核對λmin

核對λmax及其A

核對λmax、λmin及肩峰

規(guī)定λ

和比較Aλ1/Aλ2

對照品比較法λ1λ2—常用的測定方法：例ChP（2010）鹽酸布比卡因的鑒別：取本品，精密稱定，按干燥品計算，加0.01ml/L鹽酸溶液溶解并定量稀釋成每mL中約含0.40mg的溶液，照紫外-分光光度法測定，在263與271nm的波長處有最大吸收；其吸收度分別為0.53～0.58與0.43～0.48注意溶劑的種類、溶液pH及濃度等注意儀器的校正和檢定例ChP（2010）維生素B2的鑒別：取含量測定項下的溶液，照分光光度法測定，在267、375與444nm的波長處有最大吸收；在375與267nm處的吸收度比值應為0.31～0.33；在444與267nm處的吸收度比值應為0.36～0.39USP常采用對照品法，將供試品與對照品按同法處理，在200～400nm波長范圍內掃描兩溶液，要求兩者的吸收光譜一致。例西米替丁的鑒別：取供試品和對照品，分別加0.05ml/L硫酸溶液制成每mL中約含12.5μg的溶液，照紫外-分光光度法測定，兩者的紫外吸收光譜圖一致。特征區(qū)指紋區(qū)幾乎沒有兩種化合物具有完全相同的光譜紅外光譜鑒別法(IR)紅外光譜：分子振動和轉動能級躍遷。

每個基團一般都有相應的吸收峰，且特征性強。三個區(qū)域：(1)近紅外光區(qū)(2)中紅外光區(qū)

4000~400cm-1

(3)遠紅外光區(qū)特點：專屬性強、準確度高，應用最廣泛原料藥：幾乎所有的原料藥都采用IR鑒別制劑：一般需前處理（溶劑提取法）后再采用IR鑒別需考慮輔料干擾、晶型變化等影響應用：IR適用于組分單一、結構明確的藥物

標準圖譜對照法

（ChP、BP）要求按指定條件繪制供試品的紅外光吸收圖譜，與《藥品紅外光譜集》中的相應對照圖譜對比，如果關鍵譜帶的峰位、峰型、相對強度都一致時，即為同一種藥物對照品比較法（USP）分別繪制供試品和對照品的紅外光譜圖，進行比對—常用的測定方法：