一種適用于RAPD分析的微量山茶DNA提取方法的建立_第1頁(yè)
一種適用于RAPD分析的微量山茶DNA提取方法的建立_第2頁(yè)
一種適用于RAPD分析的微量山茶DNA提取方法的建立_第3頁(yè)
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一種適用于RAPD分析的微量山茶DNA本研究建立了一種適用于RAPD分析的微量山茶DNA提取方法，該CTAB提取法，結(jié)合了干燥粉碎樣品的研磨和短暫的純化步驟。通過(guò)該方法提取的山茶DNA可用于RAPD分析，并且具有較高的質(zhì)量和純度。這項(xiàng)研究為快速、準(zhǔn)確地提取微量植物DNA，為RAPD分析提供關(guān)鍵詞：微量樣品；山茶；DNA提取；RAPD山茶（Cmelaoe）是一種珍貴的植物物種，具有廣泛的應(yīng)用前途，如栽培、食品、醫(yī)藥和化妝品等。因?yàn)樯讲柙谄洳煌L(zhǎng)階段的物質(zhì)含量和性質(zhì)具有很大變化，因此需要對(duì)山茶進(jìn)行谷脯物質(zhì)和遺傳分RD分析方法的發(fā)展，已經(jīng)成為快速、準(zhǔn)確鑒定山茶遺傳變異和多樣性的有效方法。但是，RD樣品作為輸入，這對(duì)微量山茶樣品的提取和處理提出了挑戰(zhàn)。RAPDDNA提取方法，以解MaterialsandCTABDNACTABDNA1%（v/v）（PEG）0.5%（m/v）DNA的純度和產(chǎn)量。在研磨后添加5mlCTAB提取緩沖液（2%（w/v）CTAB，1.4MNaCl，100mMTris-·HClpH8.0，20mMEDTApH8.0，1%（v/v）β-己內(nèi)酚），溶解后65°C孵育1h。之后加入等體積的氯仿/異戊酮混合溶液（24:1）并混合，離心10min。將上層液體轉(zhuǎn)移到新的離心管中，并加入冰冷的99%乙醇10minDNA70%乙醇洗滌，并在50°C下干燥。純化過(guò)程中施加的各項(xiàng)措施可以減少CTAB對(duì)RAPD反應(yīng)DNA1%DNADNA280nmDNAResultsand10004000DNADNA提GENETICSRAPDDNA的純度（260/280）1.8-2.0DNAPCR反應(yīng)中，對(duì)應(yīng)的DNA充分?jǐn)U增，并且產(chǎn)生了清晰的RAPDRAPDCTAB可能會(huì)對(duì)反應(yīng)產(chǎn)生無(wú)意義的影響，而且高濃度的CTAB也會(huì)降低DNA的純度和產(chǎn)量。因此，該方法可以去除離心液中的CTAB混合物，提高了DNA的純度和產(chǎn)量。其次，我們還增加了一些具體的操作步驟，如使用聚丙烯酰胺凝膠對(duì)DNA進(jìn)行檢

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