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文檔簡介
抗原抗體反應(yīng)的類型
可溶性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合所產(chǎn)生的沉淀反應(yīng)(precipitation);顆粒性抗原與相應(yīng)抗體結(jié)合所發(fā)生的凝集反應(yīng)(agglutination);抗原抗體結(jié)合后激活補(bǔ)體所致的細(xì)胞溶解反應(yīng)(cytolysis);細(xì)菌外毒素或病毒與相應(yīng)抗體結(jié)合所致的中和反應(yīng)(neutralization);標(biāo)記免疫的抗原抗體反應(yīng)。每種反應(yīng)類型都包括若干實(shí)驗(yàn)技術(shù)。第三章
免疫原和抗血清的制備
抗原和抗體是免疫學(xué)檢測的兩個(gè)重要因素;也是整個(gè)免疫反應(yīng)的基本條件。
第一節(jié)免疫原的制備
免疫原是誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生抗體和致敏淋巴細(xì)胞,并能在體內(nèi)外與抗體或致敏淋巴細(xì)胞發(fā)生特異性反應(yīng)的物質(zhì)。
顆粒性抗原包括人和各種動(dòng)物細(xì)胞抗原以及各種細(xì)菌抗原和寄生蟲體抗原。血細(xì)胞抗原制備比較簡單,常用的細(xì)胞抗原為綿羊紅細(xì)胞,采用該細(xì)胞制備溶血素,直接取新鮮綿羊紅細(xì)胞,以無菌生理鹽水洗滌3次(每次離心2000r/min10min),最后配成106/ml濃度的細(xì)胞懸液,即可應(yīng)用。細(xì)菌抗原多用液體或固體純培養(yǎng)物,經(jīng)集菌后處理。一、顆粒性抗原的制備細(xì)菌的鞭毛抗原需用有動(dòng)力的菌株,菌液用0.3%-0.5%甲醛處理,而菌體抗原則需要100℃加溫2-2.5h去掉鞭毛抗原后應(yīng)用。毒素抗原則需要在殺菌后再加0.5%-l%氯化鈣溶液。寄生蟲和真菌抗原除用破碎法加工粗提外,大多要加以適當(dāng)純化。有些細(xì)胞膜亦可制成顆粒性抗原。顆??乖瓚乙撼蕼啙釥罨蛉闈釥?,多采用靜脈內(nèi)免疫法,較少加佐劑作皮內(nèi)注射。(一)組織和細(xì)胞粗抗原的制備
1.組織細(xì)胞抗原的制備所用組織必須是新鮮的或低溫保存的。器官或組織材料取得后應(yīng)立即去除表面的包膜或結(jié)締組織以及一些大血管。臟器應(yīng)用生理鹽水灌注,去除血管內(nèi)殘留的血液及有形成分,再用含0.5g/LNaN3生理鹽水洗去血跡及污染物。將洗凈的組織剪成小塊,然后進(jìn)行粉碎。粉碎的方法有兩類:①高速組織搗碎機(jī)法②研磨法二、可溶性抗原的制備和純化
2.組織細(xì)胞或培養(yǎng)細(xì)胞可溶性抗原的制備
制備抗原的細(xì)胞包括正常細(xì)胞、傳代細(xì)胞或病理細(xì)胞(如腫瘤細(xì)胞)。細(xì)胞抗原一般分為三個(gè)組分:膜蛋白抗
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