滲透樹脂和粘接劑在早期洪澤縣書中的滲透能力比較

滲透樹脂和粘接劑在早期洪澤縣書中的滲透能力比較

早期苯基鉆的臨床癥狀是白色亞甲基。其典型的病理破壞是，陶瓷表面相對(duì)完整，表面層下的礦質(zhì)明顯脫礦。目前,臨床上對(duì)于這類病損的治療方案是利用氟化物促進(jìn)再礦化、口腔衛(wèi)生宣教和合理的飲食控制等。但是,對(duì)于依從性較差的患者,在齲病進(jìn)展期及鄰面的病損,治療效果不佳。早期釉質(zhì)齲存在著釉質(zhì)結(jié)構(gòu)的破壞,其微觀結(jié)構(gòu)是多孔的,從表到內(nèi)有許多微小通道,它有利于有機(jī)酸的擴(kuò)散和礦物質(zhì)的進(jìn)出。齲損滲透技術(shù)就是利用低黏度的滲透樹脂進(jìn)入這些微孔,堵塞、封閉這些通道,阻止齲損的進(jìn)展。滲透樹脂是一種新型的材料,可永久性地堵塞早期齲表層的微孔。有報(bào)道粘接劑也可部分滲入人工齲損中,減少進(jìn)一步脫礦。但是對(duì)于自然形成的齲損,滲透樹脂和粘接劑進(jìn)入齲損的能力有無差異,哪種材料的滲透力更強(qiáng),目前未見相關(guān)報(bào)道。本研究利用激光掃描共聚焦顯微鏡(confocallaserscanningmicroscopy,CLSM)在雙熒光模式下進(jìn)行觀察,比較滲透樹脂和粘接劑進(jìn)入恒牙鄰面自然形成的早期齲損的能力,以期指導(dǎo)臨床操作。1材料和方法1.1染料、熒光素鈉染料、實(shí)時(shí)熒光定量染料Icon滲透樹脂:包括酸蝕劑Icon-Etch和滲透劑Icon-Infiltrant(DMG公司,德國),樹脂粘接劑AdperSinglebond2(3M公司,美國),羅丹明B染料、熒光素鈉染料(Sigma公司,美國),體視顯微鏡、CLSM(Olympus公司,日本)。1.2非洞早期社會(huì)診斷和評(píng)估系統(tǒng)第二系統(tǒng)中第三支規(guī)定取新鮮拔除的恒磨牙和前磨牙36顆,鄰面顯示有白堊色斑的非洞早期齲,標(biāo)準(zhǔn)符合國際齲病檢測和評(píng)估系統(tǒng)第二類。體視顯微鏡20倍下進(jìn)行觀察,排除有洞的和被損壞的標(biāo)本。仔細(xì)清理軟組織,牙齒保存在0.1%的麝香草酚溶液中備用。1.3滲透樹脂和粘接劑為復(fù)合酸蝕面的試驗(yàn)樣本在釉牙骨質(zhì)界處去除牙根,垂直于齲損表面將牙齒一切為二,提供兩半病損。隨后,在20倍體視顯微鏡下觀察牙切面,并進(jìn)行病損的組織學(xué)分級(jí),具體如下。C1:齲損位于釉質(zhì)的外1/2;C2:齲損延伸至釉質(zhì)的內(nèi)1/2;C3:齲損延伸至牙本質(zhì)的外1/2;C4:齲損延伸至牙本質(zhì)的內(nèi)1/2。C4被排除實(shí)驗(yàn);相應(yīng)的兩半齲損要顯示相同的組織學(xué)分級(jí)水平(C1~C3),如果兩半齲損的分級(jí)不同,則排除。兩半齲損分別用滲透樹脂和粘接劑進(jìn)行如下處理。用耐酸指甲油涂布牙切面后,使用15%的鹽酸凝膠(Icon-Etch)酸蝕兩半病損表面2min,用水槍徹底沖洗30s,無油壓縮空氣吹干。將標(biāo)本放入0.1%的羅丹明B乙醇溶液里染色12h,讓紅色熒光染料充分標(biāo)記齲損的微孔。用壓縮空氣吹干樣本牙10s,把滲透樹脂(IconInfiltrant)和粘接劑分別涂抹到相應(yīng)的兩半病損面,靜置5min,用棉卷擦掉多余的材料后,光固化60s。把試件放入30%的過氧化氫溶液中,靜置于37℃恒溫箱12h,將未被滲透樹脂或粘接劑封閉的羅丹明B染料漂白,隨后用水槍沖洗樣本60s。去除吸附在樣本切面上的指甲油,將樣本牙用慢速砂片平行于牙切面切成約3mm的試件,用不同表面粒度的砂紙由粗到細(xì)依次打磨、拋光,直至試件透光。為了標(biāo)記沒有被樹脂滲透的病損的微孔結(jié)構(gòu),將樣本置于含有100μmol·L-1熒光素鈉的50%乙醇溶液中浸泡3min,用去離子水沖洗10s。隨即進(jìn)行CLSM觀察。1.4圖像病損深度及滲透深度圖像ld圖像羅丹明B激發(fā)波長為568nm,發(fā)射波長為590nm;熒光素鈉激發(fā)波長為488nm,發(fā)射波長為525nm。在6個(gè)CLSM圖像指定點(diǎn)上測量病損深度(LD)和滲透深度(PD)(根據(jù)病損的大小,用100μm的格子做標(biāo)識(shí))。PD和LD為從樣本表面分別到紅色和綠色熒光最深點(diǎn)的距離,并計(jì)算滲透百分?jǐn)?shù)(PP),公式為:PP=PD/LD×100。1.5本秩和檢驗(yàn)kruskalperfirs采用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析。正態(tài)性檢驗(yàn),數(shù)據(jù)非正態(tài),故采用中位數(shù)(四分位數(shù)間距)表示。滲透樹脂和粘接劑在LD、PD及PP的不同,使用配對(duì)符號(hào)秩和檢驗(yàn)(Wilcoxonsignedranktest)進(jìn)行分析。在不同的組織學(xué)病損分級(jí)(C1~C3)中,PD和PP的比較采用多樣本秩和檢驗(yàn)(Kruskal-WallisHtest)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)為0.05。2結(jié)果2.1兩種材料的clsd觀察樹脂滲入的部位顯示為紅色,而病損剩余的微孔被熒光素鈉染成綠色。沒有微孔的健康釉質(zhì)或表層呈現(xiàn)黑色,牙本質(zhì)呈現(xiàn)綠色(圖1)。2.2滲透劑對(duì)pd、pp間關(guān)系的影響在相同的病損組織學(xué)分級(jí)中滲透樹脂組和粘接劑組間LD的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05);PD、PP間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),滲透樹脂組明顯高于粘接劑組(表1)。在不同的組織學(xué)分級(jí)中,滲透樹脂組PD間的差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01),即隨著病損分級(jí)增加,PD增大;但是PP間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)(表1)。3討論3.1滲透樹脂治療樹脂滲透技術(shù)是一種阻止齲病發(fā)展的新技術(shù),它用微創(chuàng)的方法治療早期齲,避免了因手術(shù)治療造成齲損周圍健康硬組織不必要的損失。早期齲形成時(shí),相對(duì)完整的牙齒表層存在著釉質(zhì)結(jié)構(gòu)的破壞,其微觀結(jié)構(gòu)為許多微小孔隙。這種晶體間的小孔隙對(duì)有機(jī)酸的擴(kuò)散、礦物質(zhì)的進(jìn)出提供了通道。齲損滲透的目的就是利用低黏度的光固化樹脂,通過毛細(xì)作用力滲入到病損微孔內(nèi),堵塞和充填微孔,替代因脫礦丟失的硬組織,在齲損內(nèi)形成屏障,阻止釉質(zhì)表面崩解。樹脂滲透技術(shù)產(chǎn)生的屏障在病損內(nèi)部,而傳統(tǒng)的窩溝封閉產(chǎn)生的屏障在釉質(zhì)表面。早期齲相對(duì)完整的釉質(zhì)表層由于礦物質(zhì)的沉積,比表層下病損的微孔孔隙更小,這種屏障阻止了樹脂的有效滲入。利用酸蝕技術(shù)在表層上打孔,甚至完全去除表層,充分暴露病損部,旨在使樹脂盡可能多地滲入病損微孔中。實(shí)驗(yàn)證明:在自然齲損中利用15%的鹽酸酸蝕2min,可以基本去除釉質(zhì)表層,使得樹脂滲透深度更深。有研究表明:粘接劑和窩洞封閉劑能夠滲入到相對(duì)表淺的人工齲損中,堵塞孔隙,阻止齲病的進(jìn)展。而對(duì)于較深的自然齲損只能滲入表層,不能有效阻止齲病的進(jìn)展。這是因?yàn)槿斯x和自然齲的結(jié)構(gòu)有著本質(zhì)不同,自然齲損的表層更厚、礦化程度更高。本實(shí)驗(yàn)在同一病損組織學(xué)分級(jí)中顯示:滲透樹脂的滲透能力明顯高于粘接劑,且隨著病損深度增加,滲透樹脂的滲透深度也在增加。這與MeyerLueckel等的實(shí)驗(yàn)結(jié)果是一致的。本實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn):隨著病損深度的增加,粘接劑的滲透深度也略有增加,這與Meyer-Lueckel等的實(shí)驗(yàn)結(jié)果即粘接劑只能到達(dá)自然齲損的表層有所不同,這可能與粘接劑不同有關(guān)。有實(shí)驗(yàn)將6種粘接劑用于人工齲的滲透,發(fā)現(xiàn)用乙醇做溶劑的粘接劑滲透能力強(qiáng),而用丙酮做溶劑的滲透能力差。本實(shí)驗(yàn)使用的粘接劑是3M公司的AdperSinglebond2,是以乙醇和水做溶劑的。另有研究表明:將滲透樹脂滲入到早期齲損后,再將其置入高致齲環(huán)境中,滲透樹脂能夠有效地阻止齲損脫礦。本實(shí)驗(yàn)也發(fā)現(xiàn)滲透樹脂有時(shí)只是部分滲入病損部,在病損的深部仍存在一些微孔,病損是否進(jìn)一步發(fā)展尚不明確,尚待進(jìn)一步研究。滲透樹脂治療存在諸多優(yōu)點(diǎn):它能永久性地堵塞早期齲表層的微孔和齲洞,有效阻止齲病的進(jìn)展,降低再患齲的風(fēng)險(xiǎn),推遲修復(fù)性治療的時(shí)間;沒有術(shù)后敏感和牙髓炎的患病風(fēng)險(xiǎn);可有效降低牙齦炎和牙周炎的發(fā)生;增強(qiáng)唇面脫礦病損(如正畸后的白堊斑塊)的美觀度;治療簡便、不需麻醉和機(jī)械磨除,患者易于接受。3.2熒光素衍生物在clsm中的釋放和發(fā)射CLSM已被廣泛應(yīng)用于齲病學(xué)、口腔微生物學(xué)等研究中。因不同熒光染料(羅丹明和熒光素的衍生物)有不同的激發(fā)和發(fā)射波長,在CLSM下呈現(xiàn)不同色調(diào)的熒光。本實(shí)驗(yàn)在CLSM的雙熒光模式下,觀察早期齲損的多孔結(jié)構(gòu)和樹脂的滲透深度,滲透樹脂被羅丹明B染成紅色,而剩余的孔隙被熒光素鈉標(biāo)記為綠色。3.3間染色法與直接染色的比較有研究表明:在人工齲損和自然齲損中,用熒光染料直接標(biāo)記樹脂存在一定的局限性。直接染色技術(shù)是將染料溶于樹脂中,由于缺少化學(xué)結(jié)合基團(tuán),不能產(chǎn)生牢固的化學(xué)結(jié)合,易造成樹脂基質(zhì)浸出,導(dǎo)致對(duì)樹脂滲透能力過高的評(píng)估。但是,Pari等應(yīng)用CLSM在雙熒光模式下對(duì)直接染色和間接染色技術(shù)進(jìn)行比較,卻發(fā)現(xiàn)直接染色技